检索结果-内蒙古大学图书馆

中华医学杂志 2006年第9期86卷 596-599页

作者：瞿婷婷张樱俞云松陈亚岗魏泽庆李兰娟浙江大学医学院附属第一医院传染病研究所卫生部传染病重点实验室杭州310003

目的明确庆大霉素高水平耐药肠球菌(HLGR)新氨基糖苷类耐药基因及其传播机制。方法采用琼脂筛选法筛选获得HLGR,用琼脂稀释法及K-B纸片法进行抗菌药物的药敏试验,并通过聚合酶链反应(PCR)、质粒提取、Southern杂交、酶切克隆测序对耐药... 详细信息

目的明确庆大霉素高水平耐药肠球菌(HLGR)新氨基糖苷类耐药基因及其传播机制。方法采用琼脂筛选法筛选获得HLGR,用琼脂稀释法及K-B纸片法进行抗菌药物的药敏试验,并通过聚合酶链反应(PCR)、质粒提取、Southern杂交、酶切克隆测序对耐药基因及其传播机制进行研究。结果肠球菌可通过产新的质粒介导的氨基糖苷类耐药基因aph(2”)-Ie编码的修饰酶APH(2”)-Ie引起HLGR。酶切克隆测序显示aph(2”)-Ie与染色体介导的aph(2”)-Id有较高的氨基酸同源性,其上游存在编码转座酶TnpA的插入序列,下游存在编码链霉素腺苷转移酶(str)基因。Southern杂交证实该耐药基因位于16kb左右的质粒上。结论HLGR可由一种新的质粒介导的APH(2”)-Ie的氨基糖苷类修饰酶引起,并可通过转座酶与其他耐药基因一起在质粒或染色体之间进行传播。

关键词：肠球菌属抗药性质粒抗生素类氨基糖苷

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中国儿童与成人艾滋病患者的免疫活化水平比较

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中国医学科学院学报 2006年第5期28卷 647-650页

作者：吴南屏张福杰靳昌忠赵燕姚航平赵红心吴灵娇魏红山李在村浙江大学医学院附属第一医院传染病研究所卫生部传染病重点实验室杭州310003

目的比较中国儿童及成人艾滋病(AIDS)患者的免疫活化水平。方法以103例儿童AIDS患者、38例成人AIDS患者、88名健康儿童和72名健康成人为研究对象,取抗凝血进行流式细胞计数检测CD4+T细胞数,荧光定量RT-PCR测定血清HIV-RNA滴度,采用ELIS... 详细信息

目的比较中国儿童及成人艾滋病(AIDS)患者的免疫活化水平。方法以103例儿童AIDS患者、38例成人AIDS患者、88名健康儿童和72名健康成人为研究对象,取抗凝血进行流式细胞计数检测CD4+T细胞数,荧光定量RT-PCR测定血清HIV-RNA滴度,采用ELISA法检测血清中Th1/Th2免疫因子(IL-10、IL-16、IL-18)、趋化因子[包括调节活化正常T细胞表达与分泌的趋化因子(RANTES)、单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)、基质细胞衍生因子1(SDF-1)]及巨噬细胞刺激蛋白(MSP)的水平,并以β2微球蛋白(β2-MG)和可溶性Fas(sFas)的表达水平作为机体免疫活化指标。结果儿童AIDS患者组的CD4+T细胞数显著低于儿童正常对照组(P<0.01),各细胞因子水平较儿童正常对照组显著升高(P均<0.01)。成人AIDS患者组的CD4+T细胞数显著低于成人正常对照组(P<0.01),除MSP水平显著低于成人对照组(P<0.01)外,其余各细胞因子均显著高于成人对照组(P<0.01)。儿童AIDS患者组各因子水平除SDF-1α和β2-MG与成人AIDS患者组差异无显著性(P>0.05)外,其余均显著高于成人AIDS患者组(P<0.01)。结论儿童和成人AIDS患者的免疫系统均表现为明显的异常活化,儿童患者的免疫活化水平高于成人患者。

关键词：获得性免疫缺陷综合征趋化因子白细胞介素巨噬细胞刺激蛋白免疫活化

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甲氧西林耐药葡萄球菌SCCmec研究

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中华微生物学和免疫学杂志 2006年第12期26卷 1108-1111页

作者：皮博睿陈亚岗俞云松俞美红须欣李兰娟浙江大学医学院附属第一医院卫生部传染病重点实验室传染病研究所杭州310003

目的明确甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌(MRSA)和溶血性葡萄球菌(MRSH)所包含的葡萄球菌染色体mec盒(staphylococcal cassette chromosome meg,SCCmec)类型,并比较两者的差异。方法分别收集本院住院患者临床标本中分离的60株MRSA和88株MRS... 详细信息

目的明确甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌(MRSA)和溶血性葡萄球菌(MRSH)所包含的葡萄球菌染色体mec盒(staphylococcal cassette chromosome meg,SCCmec)类型,并比较两者的差异。方法分别收集本院住院患者临床标本中分离的60株MRSA和88株MRSH。共设计10对引物,采用PCR法分别扩增mec复合体和ccr复合体的各个特征序列,分析其SCCmec类型。结果60株MR- SA均为Ⅲ型SCCmec;88株MRSH中7株为V型SCCmec,1株为Ⅲ型SCCmec,其余均为新的组合或是无法分型。结论SCCmec在MRSA和MRSH中分布特点差别较大,MRSH中可能存在较多新的型别。

关键词：甲氧西林细菌耐药葡萄球菌葡萄球菌染色体mec盒

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庆大霉素高水平耐药肠球菌的修饰酶基因检测与临床研究

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浙江大学学报（医学版） 2006年第1期35卷 76-82页

作者：瞿婷婷张樱俞云松陈亚岗魏泽庆李兰娟浙江大学医学院附属第一医院传染科卫生部传染病重点实验室浙江杭州310003

目的:了解庆大霉素高水平耐药肠球菌(HLGR)的耐药性、修饰酶类型和同源性,以指导临床合理用药。方法:用琼脂筛选法筛选出HLGR,采用K-B法测定其对14种抗菌药物的耐药性;用脉冲场凝胶电泳(PFGE)分析住院患者HLGR的同源性;PCR法检测HLGR的... 详细信息

目的:了解庆大霉素高水平耐药肠球菌(HLGR)的耐药性、修饰酶类型和同源性,以指导临床合理用药。方法:用琼脂筛选法筛选出HLGR,采用K-B法测定其对14种抗菌药物的耐药性;用脉冲场凝胶电泳(PFGE)分析住院患者HLGR的同源性;PCR法检测HLGR的主要修饰酶基因。结果:64.2%的肠球菌为HLGR。HLGR对利奈唑胺、万古霉素和替考拉宁无耐药性。在HLGR中屎肠球菌合并β-内酰胺类抗生素和喹诺酮类药物耐药的分离率明显高于粪肠球菌。68株HLGR中63株aac(6’)-Ie-aph(2’)-Ia基因阳性(92.6%);3株与aph(2’)-Id基因有高同源性。在51株住院患者分离的HLGR中,屎肠球菌的PFGE图谱有8型(A^H),以A型为主;粪肠球菌的PFGE图谱有4型(A^D),呈多克隆散发。结论:HLGR已成为医院感染的重要耐药菌,其主要通过aac(6’)-Ie-aph(2’)-Ia基因编码的修饰酶造成对庆大霉素高度耐药。

关键词：微生物敏感性试验庆大霉素类/药理学药物耐受性电泳,凝胶,脉冲场肠球菌属/药物作用基因

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10-23 DNAzyme对乙型肝炎病毒X基因表达的抑制作用

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中华微生物学和免疫学杂志 2006年第9期26卷 841-845页

作者：侯伟倪勤沃健儿李敏伟刘克洲浙江大学医学院附属第一医院传染病研究所卫生部传染病重点实验室杭州310003 浙江大学医学院附属第一医院感染科

目的以增强绿色荧光蛋白(EGFP)作为报告分子,探讨10-23 DNAzyme对乙型肝炎病毒(HBV)X基因表达的抑制作用。方法设计并合成3种能针对HBV X基因的特异性10-23 DNAzymes,分别命名为DrzHBVX-7、DrzHBVX-8和DrzHBVX-9,能分别特异地识别HBV X... 详细信息

目的以增强绿色荧光蛋白(EGFP)作为报告分子,探讨10-23 DNAzyme对乙型肝炎病毒(HBV)X基因表达的抑制作用。方法设计并合成3种能针对HBV X基因的特异性10-23 DNAzymes,分别命名为DrzHBVX-7、DrzHBVX-8和DrzHBVX-9,能分别特异地识别HBV X基因开放阅读框(ORF)的A1376UG。将内有HBV X全基因片段(不含终止密码)的融合表达质粒pHBx-EGFP与10-23 DNAzyme共转染AD293细胞作为共转染组,用pHBx-EGFP单独转染AD293细胞作为对照组,分别用荧光显微镜观察并用流式细胞仪检测细胞荧光强度,同时用半定量一步法RT-PCR分析融合荧光蛋白HBx-EGFP mRNA的相对表达量。结果各共转染组细胞荧光蛋白HBx-EGFP的表达均明显弱于对照组(P<0．05);各试验组HBx-EGFP mRNA的相对表达量与对照组比较也均明显减少(P<0．05);各共转染组细胞之间HBx-EGFP的表达及HBx-EGFP mRNA的相对表达量差异无统计学意义(P>0．05)。结论10-23 DNAzyme对HBV X基因的表达有特异抑制作用,在HBV感染的基因治疗中会有潜在的应用价值。

关键词： 10-23 DNAzyme 乙型肝炎病毒(HBV) X基因增强绿色荧光蛋白(EGFP)

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抗生素应用与胃肠微生态

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中国实用内科杂志 2006年第7期26卷 968-970页

作者：盛吉芳浙江大学医学院附属第一医院传染病科卫生部传染病重点实验室浙江杭州310003

人类生活在一个充满微生物的环境中,消化道作为开放式腔道,其内部定植有大量微生物.这些微生物与人体经过长期相互选择和共同进化,彼此间形成了互利共生的关系,人体为它们提供合适的生存环境,它们也参与宿主的物质代谢和免疫防御,形成... 详细信息

人类生活在一个充满微生物的环境中,消化道作为开放式腔道,其内部定植有大量微生物.这些微生物与人体经过长期相互选择和共同进化,彼此间形成了互利共生的关系,人体为它们提供合适的生存环境,它们也参与宿主的物质代谢和免疫防御,形成了一个相对稳定的系统,即消化道微生态。[第一段]

关键词：微生态抗生素应用胃肠微生物免疫防御物质代谢消化道开放式环境

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IFN-γ与HIV-1gp120融合蛋白的表达及其免疫调节作用

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浙江大学学报（医学版） 2006年第6期35卷 610-614页

作者：赵刚吴南屏姚航平浙江大学医学院附属第一医院传染病研究所卫生部传染病重点实验室

目的:研究gamm a干扰素(IFN-γ)对人类免疫缺陷病毒(H IV-1)gp120蛋白免疫小鼠后效果的调节作用。方法:利用分子生物学技术,构建表达中国流行株H IV-1gp 120 N端片段基因的原核质粒p et44b-gp 120,及共表达H IV-1gp 120 N端片段基因与I... 详细信息

目的:研究gamm a干扰素(IFN-γ)对人类免疫缺陷病毒(H IV-1)gp120蛋白免疫小鼠后效果的调节作用。方法:利用分子生物学技术,构建表达中国流行株H IV-1gp 120 N端片段基因的原核质粒p et44b-gp 120,及共表达H IV-1gp 120 N端片段基因与IFN-γ基因的原核质粒p et44b-gp 120/IFN-γ,在*** BL 21(DE 3)细胞中进行低温诱导蛋白表达,然后经纯化后免疫BALB/c小鼠。实验设皮下注射gp120/IFN-γ组、gp120组和PBS三组,以检测H IV-1gp120诱导的T细胞增殖能力,CTL杀伤作用以及Th1型细胞因子(IL-2,IFN-γ)和Th2型细胞因子(IL-4,IL-10)的表达情况。结果:通过PAGE和W estern b lot检测,证实上述两种蛋白在DE 3细胞中得到表达。免疫学实验表明,针对H IV-1 gp120的特异性T淋巴细胞增殖作用、特异性CTL杀伤作用,以及Th1型细胞因子IL-2和IFN-γ表达在三组之间均有显著性差异(P<0.05),gp120/IFN-γ组高于gp120组,gp120组高于PBS组(P<0.05)。反映体液免疫反应的Th2型细胞因子IL-4和IL-10的表达在三组之间没有显著性差异(P>0.05)。结论:协同应用IFN-γ基因可明显加强H IV-1gp 120基因的细胞免疫反应。

关键词：干扰素Ⅱ型 HIV包膜蛋白质gp120/代谢佐剂,免疫 HIV gp120 IFN-γ 融合表达

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以无纺布编织型生物反应器为基础的生物型人工肝治疗暴发性肝功能衰竭

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中华传染病杂志 2006年第1期24卷 24-28页

作者：杜维波李兰娟章益民李君陈佳佳潘小平曹红翠陈瑜陈月美俞海英盛国平浙江大学医学院第一附属医院传染内科卫生部传染病重点实验室杭州310003

目的设计一种新型生物型人工肝,评价其治疗暴发性肝功能衰竭的疗效。方法采用无纺布编织型生物反应器接种原代猪肝细胞构建生物型人工肝,对D-氨基半乳糖胺诱导的猪暴发性肝功能衰竭模型进行治疗。结果生物型人工肝治疗可显著降低受试动... 详细信息

目的设计一种新型生物型人工肝,评价其治疗暴发性肝功能衰竭的疗效。方法采用无纺布编织型生物反应器接种原代猪肝细胞构建生物型人工肝,对D-氨基半乳糖胺诱导的猪暴发性肝功能衰竭模型进行治疗。结果生物型人工肝治疗可显著降低受试动物血氨和血清L-乳酸浓度,稳定血糖水平,改善Fischer指数,并延长动物存活时间。结论以无纺布编制型生物反应器为基础构建的生物型人工肝对暴发性肝功能衰竭具有明显的肝支持作用,具有临床应用可行性。

关键词：肝,人工肝功能衰竭,急性生物反应器半乳糖胺猪

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氨基苷类高水平耐药肠球菌的耐药性及修饰酶基因分布

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中国感染与化疗杂志 2006年第3期6卷 163-167页

作者：瞿婷婷杜小幸陈亚岗俞云松李兰娟浙江大学医学院附属第一医院传染病研究所卫生部传染病重点实验室杭州310003

目的明确临床分离的氨基苷类高水平耐药肠球菌(HLAR)耐药性及修饰酶基因类型。方法用琼脂筛选法筛选出HLAR、庆大霉素高水平耐药肠球菌(HLGR)及链霉素高水平耐药肠球菌(HLSR);采用K-B法测定粪肠球菌及屎肠球菌对12种抗菌药物的耐药性;PC... 详细信息

目的明确临床分离的氨基苷类高水平耐药肠球菌(HLAR)耐药性及修饰酶基因类型。方法用琼脂筛选法筛选出HLAR、庆大霉素高水平耐药肠球菌(HLGR)及链霉素高水平耐药肠球菌(HLSR);采用K-B法测定粪肠球菌及屎肠球菌对12种抗菌药物的耐药性;PCR及序列分析法检测7种氨基苷类修饰酶基因。结果肠球菌中HLAR为73.6%。利奈唑胺、万古霉素和替考拉宁对HLAR的抗菌作用最好,未检出耐药株。屎肠球菌中β内酰胺类抗生素耐药株以及喹诺酮类药物耐药株明显高于粪肠球菌。所有的屎肠球菌氨基苷类高耐株对氨苄西林、氨苄西林-舒巴坦及环丙沙星均耐药。aac(6')-Ie-aph(2")-Ia基因是HLGR的主要耐药基因,占HLGR的92.6%;3株HLGR存在与aph(2")-Id高同源性的基因。而6-'ant、3"-ant及str基因在HLSR中的检出率低。结论HLAR已成为医院感染的重要耐药菌。HLGR主要通过aac(6')-Ie-aph(2")-Ia基因编码的修饰酶造成对庆大霉素高度耐药。

关键词：肠球菌氨基苷类高水平耐药氨基苷类修饰酶

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10-23 DNA enzyme对乙型肝炎病毒C基因体外转录产物的切割活性

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浙江大学学报（医学版） 2006年第5期35卷 507-511页

作者：侯伟沃健儿刘克洲李敏伟浙江大学医学院附属第一医院传染病研究所卫生部传染病重点实验室浙江杭州310003

目的:探讨10-23 DNA enzym e对乙型肝炎病毒C基因体外转录产物的特异切割活性。方法:设计并合成3种能针对乙型肝炎病毒C基因开放阅读框A1816UG的特异性脱氧核酶,分别命名为D rzBC-7、D rzBC-8和D rzBC-9。应用体外转录的方法获得相应的... 详细信息

目的:探讨10-23 DNA enzym e对乙型肝炎病毒C基因体外转录产物的特异切割活性。方法:设计并合成3种能针对乙型肝炎病毒C基因开放阅读框A1816UG的特异性脱氧核酶,分别命名为D rzBC-7、D rzBC-8和D rzBC-9。应用体外转录的方法获得相应的底物RNA,观察D rzBC-7、D rzBC-8和D rzBC-9对其的体外切割效应。以D rzBC-9为例,观察不同浓度的M gC l2对体外切割效率的影响,根据L inew eaver Burk作图法,计算相关的酶动力学参数Km、K cat和K cat/Km。结果:通过体外转录获得用于切割反应的底物RNA,其大小为300 nt。在特定的切割条件下,D rzBC-7、D rzBC-8和D rzBC-9均能对相应的底物RNA进行有效的切割,切割产物分别为109 nt和191 n。t以D rzBC-9为例,在切割反应体系中缺乏M gC l2时,未见有切割反应。M gC l2浓度在150 mm ***-1时达到最高切割效率,再提高M gC l2的浓度,切割效率未见明显增大。酶动力学参数Km、K cat和K cat/Km分别为1.4×10-9m ***-1,1.6 m in-1和1.1×109m ***-1.m in-1。结论:针对乙型肝炎病毒C基因的10-23 DNA enzym e在体外对相应的转录产物有特异切割作用。

关键词： DNA催化性 DNA,单es,链肝炎病毒,乙型/遗传学基因组,病毒/遗传学重组,遗传转染

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