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2006年浙江省医学会传染病肝病会议

作者：徐凯进李兰娟浙江大学医学院附属第一医院传染科、卫生部传染病重点实验室（310009）

随着医疗技术的发展，新型免疫抑制剂的不断问世，人们在同种异体器官移植领域取得了巨大成绩，为许多终末期病人带来了重新获得生命的机会。移植后排斥反应是决定术后移植器官能否长期存活的关键。目前主要通过术前配型、术后长期服用... 详细信息

随着医疗技术的发展，新型免疫抑制剂的不断问世，人们在同种异体器官移植领域取得了巨大成绩，为许多终末期病人带来了重新获得生命的机会。移植后排斥反应是决定术后移植器官能否长期存活的关键。目前主要通过术前配型、术后长期服用免疫抑制剂来控制这种排斥反应。但免疫抑制剂会使机体整个免疫系统功能下降，长期应用会使病人发生感染、肿瘤的几率增加。寻找一种不伤及整个免疫系统，只诱导机体产生针对移植器官的特异性免疫耐受方法是人们一直致力研究的课题。基因工程技术的飞速发展和对口服免疫耐受机制的深入研究，为这一难题的解决提供了一个全新的思路。利用肠道正常细菌能在肠道定植，并且诱导机体对其产生免疫耐受的特性，设计一种转基因细菌，使其表达我们需要诱导免疫耐受的目的抗原(移植物抗原)，而后经口服定植于病人肠道内，通过肠道免疫系统诱导机体对特定抗原的耐受。本文对相关领域的文献做一综述，对这一策略的可行性及实施过程中的困难做一评述。

关键词：转基因细菌器官移植排斥反应免疫抑制剂

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不同结合臂长10-23 DNAzymes对乙型肝炎病毒S基因和C基因表达的抑制作用

不同结合臂长10-23 DNAzymes对乙型肝炎病毒S基因和C基因表达的抑...

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第五届全国肝脏疾病临床暨中华肝脏病杂志成立十周年学术会议

目的:探讨不同结合臂长10-23 DNAzyrues在2．2．15细胞内对乙型肝炎病毒S基因和C基因表达的抑制作用。方法:设计并合成不同结合臂长的10-23 DNAzymes,能分别针对乙型肝炎病毒S基因和C基因开放读码框A157UG和A1816UG。不同的10-23 DNAzy... 详细信息

目的:探讨不同结合臂长10-23 DNAzyrues在2．2．15细胞内对乙型肝炎病毒S基因和C基因表达的抑制作用。方法:设计并合成不同结合臂长的10-23 DNAzymes,能分别针对乙型肝炎病毒S基因和C基因开放读码框A157UG和A1816UG。不同的10-23 DNAzymes分别转染2．2．15细胞,放射免疫分析法测定2．2．15细胞培养上清液中HBsAg和HBeAg水平,实时荧光定量PCR法测定2．2．15细胞培养上清液中HBV DNA水平。 MTT法检测细胞毒性。结果:不同结合臂长的10-23 DNAzymes在0．1-2．5 μmol／L浓度范围内均能有效抑制HBsAg和HBeAg的表达,抑制效应可长达72 h。在同一剂量相同转染时间的条件下,不同结合臂长的10-

关键词：抑制作用 HBeAg HBsAg 基因表达乙型肝炎病毒 DNAzymes

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环境控制对于隔离器内保持无菌时间的影响

环境控制对于隔离器内保持无菌时间的影响

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2006年浙江省感染病、肝病学术会议

作者：王建国李兰娟浙江大学医学院附属第一医院卫生部传染病重点实验室浙江大学医学院附属第一医院卫生部传染病重点实验室

无菌大鼠的生存环境包括内部环境和外部环境。勿庸置疑,无菌大鼠的内部生存环境-隔离器内必须达到无菌．隔离器内部与外部环境是完全隔绝的,因此对于放置隔离器的空间没有提出明确具体的要求。但是作为与外界阻隔的重要物质是空气滤膜pp... 详细信息

无菌大鼠的生存环境包括内部环境和外部环境。勿庸置疑,无菌大鼠的内部生存环境-隔离器内必须达到无菌．隔离器内部与外部环境是完全隔绝的,因此对于放置隔离器的空间没有提出明确具体的要求。但是作为与外界阻隔的重要物质是空气滤膜pp-k2,其过滤效率(对0．3μm的微粒)过滤是99．9％,五层的过滤效率可大于99．97％。假定每升空气中含有浮游细菌0．05-0．1个,隔离器内每日通过6000L空气,除菌率为99．994％,则28日内可有一个细菌穿过滤器,进入隔离器。仍然存在由

关键词：隔离器外部环境屏障系统无菌大鼠涤纶薄膜人工喂养环境控制

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凋亡与肝纤维化

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国际流行病学传染病学杂志 2006年第2期33卷 118-120,128页

作者：黄海军盛吉芳浙江大学医学院附属第一医院传染病研究所卫生部传染病重点实验室杭州310003

肝细胞和肝星形细胞(hepatic stellate cell,HSC)的凋亡与肝纤维化的形成、发展和减退有关。肝细胞凋亡产生的凋亡小体被吞噬细胞吞噬,且肝细胞凋亡本身可引起或加重炎症,均导致肝纤维化发生;HCS则通过细胞凋亡来减退肝纤维化。因此,肝... 详细信息

肝细胞和肝星形细胞(hepatic stellate cell,HSC)的凋亡与肝纤维化的形成、发展和减退有关。肝细胞凋亡产生的凋亡小体被吞噬细胞吞噬,且肝细胞凋亡本身可引起或加重炎症,均导致肝纤维化发生;HCS则通过细胞凋亡来减退肝纤维化。因此,肝细胞和肝星形细胞凋亡对肝纤维化有重要作用。

关键词：细胞凋亡肝纤维化肝细胞肝星形细胞

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亚胺培南耐药鲍曼不动杆菌同源性及碳青霉烯酶研究

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中国感染与化疗杂志 2006年第4期6卷 231-235页

作者：杜小幸张幸国周华俞云松陈亚岗李兰娟卫生部传染病重点实验室浙江大学医学院附属第一医院传染病研究所杭州310003

目的明确我院临床分离亚胺培南耐药鲍曼不动杆菌的耐药性、同源性及碳青霉烯酶基因型。方法收集我院2003年8月-2004年12月分离的95株亚胺培南耐药鲍曼不动杆菌。琼脂稀释法和E试验法测定15种抗菌药物的MIC值；脉冲场凝胶电泳(PFGE)分析... 详细信息

目的明确我院临床分离亚胺培南耐药鲍曼不动杆菌的耐药性、同源性及碳青霉烯酶基因型。方法收集我院2003年8月-2004年12月分离的95株亚胺培南耐药鲍曼不动杆菌。琼脂稀释法和E试验法测定15种抗菌药物的MIC值；脉冲场凝胶电泳(PFGE)分析菌株的同源性；PCR扩增及克隆测序分析碳青霉烯酶基因型；接合试验、质粒抽提及Southern杂交完成亚胺培南耐药基因定位。结果95株鲍曼不动杆菌对氨苄西林-舒巴坦、头孢哌酮-舒巴坦两个含舒巴坦制剂耐药率分别为67．9%、30．2%,对多黏菌素E耐药率最低,为17%,对其他抗菌药物的耐药率均在90%以上。95株鲍曼不动杆菌分离自10个临床科室,均产OXA-23碳青霉烯酶,PFGE分型共分为6型,以A、B型为主。碱裂解法反复抽提均未得到质粒,多次接合试验未成功。Southern杂交证实A、B克隆的oxa-23耐药基因位于细菌染色体约220 kb、200 kb大小的Apal酶切片段上。结论产OXA-23型碳青霉烯酶鲍曼不动杆菌已成为我院医院感染的重要病原菌,在我院多个科室播散,且以A、B克隆为主。oxa-23耐药基因位于染色体上。

关键词：鲍曼不动杆菌碳青霉烯酶脉冲场凝胶电泳

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人端粒酶逆转录酶诱导的猪肝细胞初步鉴定

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浙江医学 2006年第2期28卷 103-105,109页

作者：潘小平李兰娟曹红翠杜维波章益民盛国平陈瑜李君浙江大学医学院附属第一医院传染病研究所卫生部传染病重点实验室杭州310003

目的观察应用四步灌流法分离后原代猪肝细胞的数量和活力,初步鉴定人端粒酶逆转录酶(hTERT)诱导的猪肝细胞的生物学特性。方法四步灌流法分离12只猪肝脏组织中的猪肝细胞,采用锥虫蓝拒染法测定其肝实质细胞数量和活力;将含hTERT真核表... 详细信息

目的观察应用四步灌流法分离后原代猪肝细胞的数量和活力,初步鉴定人端粒酶逆转录酶(hTERT)诱导的猪肝细胞的生物学特性。方法四步灌流法分离12只猪肝脏组织中的猪肝细胞,采用锥虫蓝拒染法测定其肝实质细胞数量和活力;将含hTERT真核表达的载体转染到原代猪肝细胞,经G418硫酸盐筛选,获得耐药性的猪肝细胞克隆并传代3代。观察原代猪肝细胞和hTERT诱导后的猪肝细胞的形态,检测两种猪肝细胞不同时期培养上清液中白蛋白、尿素氮的浓度。结果每只肝脏的肝细胞产量约为2.0×1010个,具有活力的肝细胞所占百分比为(95.5±3.2)%。原代猪肝细胞和hTERT诱导的猪肝细胞培养上清中分泌白蛋白和尿素氮在前3天无统计学差异(P>0.05),第4、5天差异有统计学意义(P<0.05)。结论四步灌流法分离获取的猪肝细胞产量高、功能活性好。hTERT诱导的猪肝细胞具有正常肝细胞的基本功能,可作为生物人工肝及细胞移植等的理想的细胞源。

关键词：人端粒酶逆转录酶猪肝细胞生物人工肝支持系统永生化

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树突细胞、DC-SIGN与艾滋病病毒感染的关系

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国际流行病学传染病学杂志 2006年第4期33卷 261-264页

作者：常秀春吴南屏浙江大学医学院附属第一医院传染病研究所卫生部传染病重点实验室杭州310003

树突细胞(dendriticcell,DC)识别上皮细胞或黏膜表面的抗原,通过其细胞内受体或吞噬细胞受体捕获它们,经加工处理后转移至淋巴组织。在淋巴结内,它们把免疫源性肽提呈给T细胞,从而引发特异性的免疫应答。DC_SIGN是表达于DC表面的蛋白质... 详细信息

树突细胞(dendriticcell,DC)识别上皮细胞或黏膜表面的抗原,通过其细胞内受体或吞噬细胞受体捕获它们,经加工处理后转移至淋巴组织。在淋巴结内,它们把免疫源性肽提呈给T细胞,从而引发特异性的免疫应答。DC_SIGN是表达于DC表面的蛋白质,它在病毒由DC向T细胞的传递过程中发挥了重要作用。HIV_1反过来也利用DC之间的自然交通来感染原初靶细胞CD4+T细胞。这篇综述主要讨论了DC、DC_SIGN与HIV感染的相互作用。

关键词：树突细胞 DC-SIGN HIV 附着内在化感染

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肝病微生态学的研究进展

肝病微生态学的研究进展

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第五届全国肝脏疾病临床暨中华肝脏病杂志成立十周年学术会议

作者：李兰娟浙江大学医学院附属第一医院卫生部传染病重点实验室传染病研究所

我国是世界上病毒性肝炎的高发区,乙型肝炎病毒携带者高达1．3亿。虽然一些抗病毒药物在临床得到广泛应用,但是慢性肝炎进展为肝硬化、重型肝炎的势头仍未得到有效地遏制。目前随着人工肝和肝移植技术的不断发展,使得终末期肝病的病死... 详细信息

我国是世界上病毒性肝炎的高发区,乙型肝炎病毒携带者高达1．3亿。虽然一些抗病毒药物在临床得到广泛应用,但是慢性肝炎进展为肝硬化、重型肝炎的势头仍未得到有效地遏制。目前随着人工肝和肝移植技术的不断发展,使得终末期肝病的病死率有所下降,但由于经济、技术等各种条件的限制,慢性肝病总体病死率仍居高不下。慢性肝病的防治仍然是21世纪的重大课题,我们仍然任重道远。大量临床研究显示肝病的发生发展与人体微生态的变化密切相关。其中肠道微生态与肝脏不但在解剖结构上,而且在功能上都有着密切的联系。正常情况下,肝脏可清除来自肠道的包括内毒素、氨、吲哚、酚类、短

关键词：双歧杆菌乳杆菌库普弗细胞内毒素血症肝硬化患者肝性脑病重型肝炎肝性昏迷肝肾综合征肠道微生态肝脏功能细菌移位微生态调节剂微生态学

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环境控制对于隔离器内保持无菌时间的影响

环境控制对于隔离器内保持无菌时间的影响

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2006年浙江省医学会传染病肝病会议

作者：王建国李兰娟浙江大学医学院附属第一医院，卫生部传染病重点实验室（310003）

无菌大鼠的内部生存环境－隔离器内必须达到无菌。隔离器内部与外部环境是完全隔绝，本文研究了环境控制对于隔离器内保持无菌时间的影响。

关键词：隔离器无菌时间环境控制动物模型

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乙型重型肝炎患者HBV 特异性CTL 应答功能研究

乙型重型肝炎患者HBV 特异性CTL 应答功能研究

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2006年浙江省医学会传染病肝病会议

作者：陈瑜吴炜李兰娟浙江大学医学院附属第一医院，卫生部传染病重点实验室（310003）

本课题以乙型重型肝炎患者为主要研究对象，围绕 HBV特异性CTL应答机制，采用国际上新近出现的HLA-抗原肽四聚体(Tetramer)流式细胞技术测定HBV 特异性CD8+CTL 细胞、斑点免疫吸附试验(ELISPOT)以及非放射性靶细胞裂解试验等新技术，测... 详细信息

本课题以乙型重型肝炎患者为主要研究对象，围绕 HBV特异性CTL应答机制，采用国际上新近出现的HLA-抗原肽四聚体(Tetramer)流式细胞技术测定HBV 特异性CD8+CTL 细胞、斑点免疫吸附试验(ELISPOT)以及非放射性靶细胞裂解试验等新技术，测定乙肝重型肝炎患者中针对乙肝病毒三个重要表位肽的特异性CTL 数量、其表达细胞因子及杀伤靶细胞的功能等，初步探讨乙型重型肝炎中特异性CTL 细胞免疫应答的特征性表现以及在乙肝病毒清除和肝细胞损伤两种不同效应中的内在机理，从特异性CTL 细胞免疫应答的角度揭示乙型重型肝炎的发病机理。

关键词：重型肝炎乙型肝炎发病机理细胞免疫免疫反应 L应答机制流式细胞术

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