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2005年浙江省感染病、肝病学术会议

作者：贾红宇陈智浙江大学医学院附属第一医院传染病研究所卫生部传染病重点实验室浙江大学医学院附属第一医院传染病研究所卫生部传染病重点实验室

一、树突状细胞树突状细胞(dendriticcell,DC)是起源于骨髓的专职抗原递呈细胞,具有启动T细胞介导的免疫应答功能,因其表面具有众多树突状突起而得名。DC是由美国学者Steinman及Cohn于1973年发

关键词： HBV HBsAg HBeAg

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HIV感染的免疫异常与HAART介导的免疫重建

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国际病毒学杂志 2007年第6期14卷 173-177页

作者：靳昌忠吴南屏浙江大学医学院附属第一医院传染病研究所杭州310003 卫生部传染病重点实验室

HIV感染造成CD4^＋T细胞数量的下降和功能的改变及机体的异常免疫激活。有效的HAART治疗除抑制HIV病毒复制外，还可以部分地恢复CD4^＋T细胞的数量和功能，起到免疫重建的作用。但HAART治疗免疫重建的机制及机体免疫力恢复的程度等一系... 详细信息

HIV感染造成CD4^＋T细胞数量的下降和功能的改变及机体的异常免疫激活。有效的HAART治疗除抑制HIV病毒复制外，还可以部分地恢复CD4^＋T细胞的数量和功能，起到免疫重建的作用。但HAART治疗免疫重建的机制及机体免疫力恢复的程度等一系列问题尚需进一步研究。本文就HAART治疗对HIV感染引起诸方面的免疫异常的重建作用作一综述。

关键词： HIV HAART 免疫重建

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凋亡与肝纤维化

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国际流行病学传染病学杂志 2006年第2期33卷 118-120,128页

作者：黄海军盛吉芳浙江大学医学院附属第一医院传染病研究所卫生部传染病重点实验室杭州310003

肝细胞和肝星形细胞(hepatic stellate cell,HSC)的凋亡与肝纤维化的形成、发展和减退有关。肝细胞凋亡产生的凋亡小体被吞噬细胞吞噬,且肝细胞凋亡本身可引起或加重炎症,均导致肝纤维化发生;HCS则通过细胞凋亡来减退肝纤维化。因此,肝... 详细信息

肝细胞和肝星形细胞(hepatic stellate cell,HSC)的凋亡与肝纤维化的形成、发展和减退有关。肝细胞凋亡产生的凋亡小体被吞噬细胞吞噬,且肝细胞凋亡本身可引起或加重炎症,均导致肝纤维化发生;HCS则通过细胞凋亡来减退肝纤维化。因此,肝细胞和肝星形细胞凋亡对肝纤维化有重要作用。

关键词：细胞凋亡肝纤维化肝细胞肝星形细胞

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亚胺培南耐药鲍曼不动杆菌同源性及碳青霉烯酶研究

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中国感染与化疗杂志 2006年第4期6卷 231-235页

作者：杜小幸张幸国周华俞云松陈亚岗李兰娟卫生部传染病重点实验室浙江大学医学院附属第一医院传染病研究所杭州310003

目的明确我院临床分离亚胺培南耐药鲍曼不动杆菌的耐药性、同源性及碳青霉烯酶基因型。方法收集我院2003年8月-2004年12月分离的95株亚胺培南耐药鲍曼不动杆菌。琼脂稀释法和E试验法测定15种抗菌药物的MIC值；脉冲场凝胶电泳(PFGE)分析... 详细信息

目的明确我院临床分离亚胺培南耐药鲍曼不动杆菌的耐药性、同源性及碳青霉烯酶基因型。方法收集我院2003年8月-2004年12月分离的95株亚胺培南耐药鲍曼不动杆菌。琼脂稀释法和E试验法测定15种抗菌药物的MIC值；脉冲场凝胶电泳(PFGE)分析菌株的同源性；PCR扩增及克隆测序分析碳青霉烯酶基因型；接合试验、质粒抽提及Southern杂交完成亚胺培南耐药基因定位。结果95株鲍曼不动杆菌对氨苄西林-舒巴坦、头孢哌酮-舒巴坦两个含舒巴坦制剂耐药率分别为67．9%、30．2%,对多黏菌素E耐药率最低,为17%,对其他抗菌药物的耐药率均在90%以上。95株鲍曼不动杆菌分离自10个临床科室,均产OXA-23碳青霉烯酶,PFGE分型共分为6型,以A、B型为主。碱裂解法反复抽提均未得到质粒,多次接合试验未成功。Southern杂交证实A、B克隆的oxa-23耐药基因位于细菌染色体约220 kb、200 kb大小的Apal酶切片段上。结论产OXA-23型碳青霉烯酶鲍曼不动杆菌已成为我院医院感染的重要病原菌,在我院多个科室播散,且以A、B克隆为主。oxa-23耐药基因位于染色体上。

关键词：鲍曼不动杆菌碳青霉烯酶脉冲场凝胶电泳

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人端粒酶逆转录酶诱导的猪肝细胞初步鉴定

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浙江医学 2006年第2期28卷 103-105,109页

作者：潘小平李兰娟曹红翠杜维波章益民盛国平陈瑜李君浙江大学医学院附属第一医院传染病研究所卫生部传染病重点实验室杭州310003

目的观察应用四步灌流法分离后原代猪肝细胞的数量和活力,初步鉴定人端粒酶逆转录酶(hTERT)诱导的猪肝细胞的生物学特性。方法四步灌流法分离12只猪肝脏组织中的猪肝细胞,采用锥虫蓝拒染法测定其肝实质细胞数量和活力;将含hTERT真核表... 详细信息

目的观察应用四步灌流法分离后原代猪肝细胞的数量和活力,初步鉴定人端粒酶逆转录酶(hTERT)诱导的猪肝细胞的生物学特性。方法四步灌流法分离12只猪肝脏组织中的猪肝细胞,采用锥虫蓝拒染法测定其肝实质细胞数量和活力;将含hTERT真核表达的载体转染到原代猪肝细胞,经G418硫酸盐筛选,获得耐药性的猪肝细胞克隆并传代3代。观察原代猪肝细胞和hTERT诱导后的猪肝细胞的形态,检测两种猪肝细胞不同时期培养上清液中白蛋白、尿素氮的浓度。结果每只肝脏的肝细胞产量约为2.0×1010个,具有活力的肝细胞所占百分比为(95.5±3.2)%。原代猪肝细胞和hTERT诱导的猪肝细胞培养上清中分泌白蛋白和尿素氮在前3天无统计学差异(P>0.05),第4、5天差异有统计学意义(P<0.05)。结论四步灌流法分离获取的猪肝细胞产量高、功能活性好。hTERT诱导的猪肝细胞具有正常肝细胞的基本功能,可作为生物人工肝及细胞移植等的理想的细胞源。

关键词：人端粒酶逆转录酶猪肝细胞生物人工肝支持系统永生化

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树突细胞、DC-SIGN与艾滋病病毒感染的关系

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国际流行病学传染病学杂志 2006年第4期33卷 261-264页

作者：常秀春吴南屏浙江大学医学院附属第一医院传染病研究所卫生部传染病重点实验室杭州310003

树突细胞(dendriticcell,DC)识别上皮细胞或黏膜表面的抗原,通过其细胞内受体或吞噬细胞受体捕获它们,经加工处理后转移至淋巴组织。在淋巴结内,它们把免疫源性肽提呈给T细胞,从而引发特异性的免疫应答。DC_SIGN是表达于DC表面的蛋白质... 详细信息

树突细胞(dendriticcell,DC)识别上皮细胞或黏膜表面的抗原,通过其细胞内受体或吞噬细胞受体捕获它们,经加工处理后转移至淋巴组织。在淋巴结内,它们把免疫源性肽提呈给T细胞,从而引发特异性的免疫应答。DC_SIGN是表达于DC表面的蛋白质,它在病毒由DC向T细胞的传递过程中发挥了重要作用。HIV_1反过来也利用DC之间的自然交通来感染原初靶细胞CD4+T细胞。这篇综述主要讨论了DC、DC_SIGN与HIV感染的相互作用。

关键词：树突细胞 DC-SIGN HIV 附着内在化感染

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HBV核心抗原EGFP融合蛋白表达质粒的构建及在Hep G_2细胞中的表达

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浙江预防医学 2005年第1期17卷 3-5页

作者：徐宁陈智姚航平羊正纲浙江大学医学院附属第一医院传染病研究所卫生部传染病重点实验室浙江杭州310003

目的　探讨采用构建的质粒pHBc -EGFP转染HepG2 细胞 ,瞬时表达HBV核心抗原和增强型绿荧光蛋白的可行性。方法　克隆HBV核心抗原基因进入真核表达载体pEGFP -N1 中 ,脂质体法转染HepG2 细胞后在荧光显微镜下观察增强型绿荧光蛋白表达 ,... 详细信息

目的　探讨采用构建的质粒pHBc -EGFP转染HepG2 细胞 ,瞬时表达HBV核心抗原和增强型绿荧光蛋白的可行性。方法　克隆HBV核心抗原基因进入真核表达载体pEGFP -N1 中 ,脂质体法转染HepG2 细胞后在荧光显微镜下观察增强型绿荧光蛋白表达 ,并行RT -PCR及细胞免疫组化分析融合蛋白的表达。结果　重组pHBc -EGFP质粒可在HepG2 细胞内瞬时表达HBV核心抗原和增强型绿荧光蛋白融合蛋白。结论　pHBc -EGFP质粒构建成功 ,增强型绿荧光蛋白的表达可报告HBV核心抗原表达。

关键词： HBV核心抗原增强型绿荧光蛋白瞬时表达细胞免疫组化分析乙型肝炎病毒

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原发性肝癌组织中Kruppel样因子6(KLF6)的表达及其对肝癌细胞增殖的抑制作用

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实用肿瘤杂志 2007年第2期22卷 125-129页

作者：潘修成陈智陈峰陈晓红周承羊正纲浙江大学医学院附属第一医院传染病研究所卫生部传染病重点实验室浙江杭州310003

目的了解Kruppel样因子6（KLF6）基因在原发性肝癌组织中的表达水平及其对肝癌细胞增殖的抑制作用。方法分别以逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）和Wstern blot检测原发性肝癌及其癌旁组织KLF6 mRNA及蛋白质的表达水平。构建KLF6真核表达质... 详细信息

目的了解Kruppel样因子6（KLF6）基因在原发性肝癌组织中的表达水平及其对肝癌细胞增殖的抑制作用。方法分别以逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）和Wstern blot检测原发性肝癌及其癌旁组织KLF6 mRNA及蛋白质的表达水平。构建KLF6真核表达质粒并转染肝癌细胞SMMC-7721,流式细胞仪及MTT试验观察KLF6基因对细胞周期及细胞增殖活性的影响。以Western blot技术检测外源KLF6基因对p21WAF1表达的影响。结果与对应的癌周组织比较,23例原发性肝癌组织中8例（34.8%）KLF6 mRNA,9例（39.1%）KLF6蛋白质水平明显下降。与对照组比较,转染KLF6基因的SMMC-7721细胞G0~G1期所占细胞的比例明显增高,转染KLF6基因SMMC-7721的增殖率明显下降。外源KLF6基因能上调肝癌细胞p21WAF1表达。结论KLF6基因表达水平的下降可能在原发性肝癌发病机制中起到一定作用。上调p21WAF1表达是KLF6基因抑制肝癌细胞增殖的重要途径.

关键词：癌,肝细胞/病理学基因,肿瘤抑制基因表达转染增殖细胞核抗原基因蛋白质p21

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大鼠肝缺血再灌注损伤中肝细胞凋亡的研究

大鼠肝缺血再灌注损伤中肝细胞凋亡的研究

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第十次浙江省中西医结合肝病学术会议

作者：徐凯进李兰娟邢卉春沈恬盛吉芳郑树森浙江大学医学院附属第一医院传染科、传染病研究所卫生部传染病重点实验室

肝脏是一个血供丰富的器官,正常生理条件下其血供占人体总循环血量的20-35%,在肝脏手术时为减少术中出血常采用阻断门脉、肝动脉的方法止血,这样肝脏不可避免的要经受缺血再灌注损伤(ischemia/reperfusion injury I/R)。这种损伤是术后... 详细信息

肝脏是一个血供丰富的器官,正常生理条件下其血供占人体总循环血量的20-35%,在肝脏手术时为减少术中出血常采用阻断门脉、肝动脉的方法止血,这样肝脏不可避免的要经受缺血再灌注损伤(ischemia/reperfusion injury I/R)。这种损伤是术后肝功能异常、原发性移植肝无功能、多器官功能衰竭的重要原因。要寻找有效的措施来减轻肝脏的缺血再灌注损伤,提高手术的安全性,就必须

关键词：肝细胞凋亡中央静脉缺血再灌注损伤凋亡细胞手术组肝组织汇管区 ETX 显著性差异

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质粒介导的RNA干扰对人类细胞中HBcAg表达的抑制作用

质粒介导的RNA干扰对人类细胞中HBcAg表达的抑制作用

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浙江省免疫学会第五次学术研讨会

作者：徐宁陈智羊正纲姚航平侯晓丽吴炜蔡为民浙江大学医学院附属第一医院传染病研究所卫生部传染病重点实验室

近年来,基于质粒载体的RNAi的方法因DNA合成便宜且稳定,能完整地进入宿主细胞的基因组产生长期的效应等优点。逐渐被认同为是一种较理想、经济的,产生RNAi的可替代途径。本研究设计并构建了针对HBcAg基因的shRNA表达载体,与表达HBcAg-E... 详细信息

近年来,基于质粒载体的RNAi的方法因DNA合成便宜且稳定,能完整地进入宿主细胞的基因组产生长期的效应等优点。逐渐被认同为是一种较理想、经济的,产生RNAi的可替代途径。本研究设计并构建了针对HBcAg基因的shRNA表达载体,与表达HBcAg-EGFP融合蛋白的质粒共转染AD293细胞株,观察其阻断HBcAg基因表达的效果与规律,以期为利用RNAi效应进行抗HBV复制的研究以及今后潜在的临床治疗应用奠定基础。

关键词：基因组共转染 HBcAg RNA 抑制作用

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