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中华医学会第十次全国临床微生物学术年会暨第九届全球华人临床微生物与感染症学术论坛暨2013年浙江省医学微生物与免疫学及医学病毒学学术年会

作者：杨劲吕杭军杨宗兴王娟吴南屏浙江省血液中心浙江大学医学院附属第一医院传染病诊治国家重点实验室

目的:临床长期不进展(LTNP)患者表现出自发性抑制病毒及低残余病毒血症特征。这种表型与HIV-1潜伏类似。以LTNP为背景与HIV-1体外模型比较,发掘更特异性的分子分歧。方法:在高通量芯片数据库内发掘所有的HIV-1潜伏(25例)及LTNP(22例)表... 详细信息

目的:临床长期不进展(LTNP)患者表现出自发性抑制病毒及低残余病毒血症特征。这种表型与HIV-1潜伏类似。以LTNP为背景与HIV-1体外模型比较,发掘更特异性的分子分歧。方法:在高通量芯片数据库内发掘所有的HIV-1潜伏(25例)及LTNP(22例)表达谱,并整合所有表达谱数据经主方差成分分析与启发式聚类评估。结果发现潜伏与LTNP出现456条差异基因。以贝叶斯推断法建立各感染状态下差异基因的调控网络并鉴定关键基因。结果:跨芯片平台整合后,批效应完全去除。分析显示潜伏组与LTNP组比较有456差异基因。潜伏感染中212基因上调,244基因下调,表现出LTNP状态下细胞活性略高。潜伏细胞上调基因更多出现于RNA代谢过程,如核输出、RNA剪接及剪接体。一些上调基因亦涉及细胞分化及周期调节,如有丝分裂间期、纺锤体调节,以及AKT信号通路,Wnt受体信号通路。LTNP上调基因出现于T细胞分化、过氧化物酶体,以及凋亡caspase级联。研究显示不同感染状态下,基因调节网络出现重构。通过中心参数为特征的结构分析,证明HIV-1感染相关基因的高连接特征。以之为基础鉴定出,HIV-1潜伏中KPNA2与ATP5G3是关键基因,介导RNA代谢与核运输。体外细胞中验证出KPNA2、ATP5G3的差异表达及在潜伏细胞中的高表达特性。结论:建立HIV-1潜伏感染等转录组整合数据集,通过HIV-1潜伏与LTNP的基因调控网络,揭示调控结构与功能定位。并建立关键基因识别方法,核运输因子KPNA2等是HIV-1潜伏的关键基因之一。

关键词： HIV-1 关键基因细胞分化上调基因长期不进展者比较研究

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异位血吸虫病(脑型、肺型)误诊为转移性肿瘤一例

异位血吸虫病(脑型、肺型)误诊为转移性肿瘤一例

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第四届国际人体微生态大会、第十三届中华预防医学会微生态学学术会议、第五届中国医师协会感染科医师大会暨传染病诊治高峰论坛、2013医学前沿论坛暨我国感染病学发展战略研究研讨会

作者：郝绍瑞连江山陈佳佳陶然黄建荣浙江省杭州市浙江大学医学院附属第一医院传染病诊治国家重点实验室传染病诊治协同创新中心

急性日本血吸虫病是一种地方性寄生虫病,早期诊断较困难,异型血吸虫病临床较少见,常易误诊。我们发现一例以脑部及肺部症状为主要表现的患者,现报道如下并文献复习,以供参考。患者,女,34岁,浙江省丽水市景宁畲族自治县人,于2012年10月0... 详细信息

急性日本血吸虫病是一种地方性寄生虫病,早期诊断较困难,异型血吸虫病临床较少见,常易误诊。我们发现一例以脑部及肺部症状为主要表现的患者,现报道如下并文献复习,以供参考。患者,女,34岁,浙江省丽水市景宁畲族自治县人,于2012年10月09日因"反复头痛4月"至我院就诊。4月前无明显诱因下出现头痛,呈持续性紧箍感,以两颞侧为主,较剧,无恶心呕吐,无发热畏寒,无肢体活动障碍及感知觉异常,无视物旋转及模糊,疼痛反复发作,程度逐渐加剧。1月前再次出现头

关键词：异位血吸虫病肺型血吸虫病日本血吸虫病

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HBV编码蛋白调节炎性体激活途径的实验研究

HBV编码蛋白调节炎性体激活途径的实验研究

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中华医学会第十六次全国病毒性肝炎及肝病学术会议

作者：沈国栋陈建忠朱海红浙江大学免疫学研究所浙江大学医学院附属第一医院传染病诊治国家重点实验室

目的慢性乙型肝炎病毒(HBV)感染是世界上一个重要的健康难题。最近研究发现以固有免疫受体如NLR为主的炎性体在抗病毒感染及其炎症反应中起着重要的作用。炎性体是由NLR、ASC和半胱天冬氨酸酶组成的大分子复合物,炎性体能够激活半胱天... 详细信息

目的慢性乙型肝炎病毒(HBV)感染是世界上一个重要的健康难题。最近研究发现以固有免疫受体如NLR为主的炎性体在抗病毒感染及其炎症反应中起着重要的作用。炎性体是由NLR、ASC和半胱天冬氨酸酶组成的大分子复合物,炎性体能够激活半胱天冬氨酸酶,活化的半胱天冬氨酸酶能够酶切IL-1β和IL-18前体分子而生成具有生物学活性的IL-1β和IL-18,参与炎症反应等生物学效应。乙型肝炎病毒(HBV)能促进患者体内IL-1β上调,所引起的慢性肝脏疾病也与IL-1β有密切关系,但还不清

关键词：炎性体研究发现 HBV HBcAg 编码蛋白

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耐药鲍氏不动杆菌获得性耐药基因与可移动遗传元件检测及指标聚类分析

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中华医院感染学杂志 2013年第4期23卷 728-730页

作者：申屠桥民黄东标陈江平孔海深浙江省磐安县人民医院儿科浙江磐安县322300 浙江省磐安县人民医院检验科浙江磐安县322300 浙江省磐安县人民医院内科浙江磐安县322300 浙江大学医学院附属第一医院传染病诊治国家重点实验室浙江杭州310003

目的调查一组耐药鲍氏不动杆菌获得性耐药相关基因和可移动遗传元件的关系。方法收集2010年1月-2010年12月医院ICU患者痰液标本中分离的耐药鲍氏不动杆菌共20株,采用聚合酶链反应(PCR)方法检测获得性耐药基因和可移动遗传元件遗传标记,... 详细信息

目的调查一组耐药鲍氏不动杆菌获得性耐药相关基因和可移动遗传元件的关系。方法收集2010年1月-2010年12月医院ICU患者痰液标本中分离的耐药鲍氏不动杆菌共20株,采用聚合酶链反应(PCR)方法检测获得性耐药基因和可移动遗传元件遗传标记,插入序列与β-内酰胺酶基因(ISaba1与ADC、ISaba1与OXA-23),再对检测结果作指标聚类分析(UPGMA法)。结果 20株耐药鲍氏不动杆菌各种基因检测,其中β-内酰胺酶基因TEM和ADC,氨基糖苷类修饰酶基因aac(3)-Ⅰ、ant(3″)-Ⅰ,16SrRNA甲基化酶armA基因,抗菌制剂外排泵adeB、qacE△1基因,可移动遗传元件intⅠ1、tnpU、tnp513、IS26、ISaba1及连锁检测ISaba1-ADC基因20株均为阳性;β-内酰胺酶基因OXA-23群,氨基糖苷类修饰酶基因aac(6′)-Ⅰb、aph(3′)-Ⅰ及连锁检测ISaba1-OXA-23基因各有10株阳性,阳性率均为50.0%;亚胺培南、美罗培南耐药与敏感菌株各10株,耐药率和敏感率均为50.0%,对其他抗菌药物均耐药;指标聚类分析提示,获得性耐药基因TEM、qacE△1、armA、adeB、aac(3)-Ⅰ、ant(3″)-Ⅰ、ADC与可移动遗传元件IS26、ISaba1、tnpU、tnp513、intⅠ1高度相关,获得性耐药基因aac(6′)-Ⅰb、ant(3″)-Ⅰ、OXA-23与之也相关联,插入序列与β-内酰胺酶基因(ISaba1与ADC、ISa-ba1与OXA-23)连锁检测均呈阳性。结论该组耐药鲍氏不动杆菌获得性耐药基因与可移动遗传元件一定的关联度,菌株携带的获得性耐药基因可能由可移动遗传元件介导,指标聚类分析显示的ISaba1与ADC-60,ISaba1与OXA-23相关联得到了测序验证。

关键词：鲍氏不动杆菌 β-内酰胺类氨基糖苷类喹诺酮类可移动遗传元件指标聚类分析耐药

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从耐药鲍曼不动杆菌中发现β-内酰胺酶ADC基因和膜孔蛋白carO基因新的变异型

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中国微生态学杂志 2013年第5期25卷 534-538页

作者：黄东标周茂亮申屠桥民孔海深浙江省磐安县人民医院检验科浙江磐安322300 浙江大学医学院附属第一医院传染病诊治国家重点实验室浙江杭州310003

目的调查一组耐药鲍曼不动杆菌中β-内酰胺酶基因和膜孔蛋白基因的存在和变异情况。方法收集2010年1月至2010年12月浙江某医院ICU患者痰液标本中分离的多耐药和泛耐药鲍曼不动杆菌各10株,用分子鉴定法鉴定菌种,再用聚合酶链反应(PCR)及... 详细信息

目的调查一组耐药鲍曼不动杆菌中β-内酰胺酶基因和膜孔蛋白基因的存在和变异情况。方法收集2010年1月至2010年12月浙江某医院ICU患者痰液标本中分离的多耐药和泛耐药鲍曼不动杆菌各10株,用分子鉴定法鉴定菌种,再用聚合酶链反应(PCR)及序列分析的方法分析34种β-内酰胺酶基因与膜孔蛋白carO基因。结果本组20株耐药鲍曼不动杆菌共检出TEM-1型20株(100%)、OXA-23型10株(50.0%)、ADC-30型12株(60.0%)、ADC基因新的变异型ADC-60型8株(40.0%)(GenBank登录号:JQ692087)。10株PDR菌均检出OXA-23型β-内酰胺酶基因,而10株MDR菌则均未检出OXA-23型β-内酰胺酶基因。20株耐药鲍曼不动杆菌膜孔蛋白carO基因均存在有义突变,19株测得序列相同,翻译成氨基酸序列后与鲍曼不动杆菌敏感株(SDF)比较,一致率为76.0%。8号株carO基因序列与其他19株测得DNA序列不同,第351位缺失了12个碱基并导致过早出现终止密码子。结论本组鲍曼不动杆菌对β-内酰胺类药物耐药主要与产TEM、ADC、OXA-23和carO基因存在有义突变相关。OXA-23型β-内酰胺酶基因阳性是PDR菌耐碳青霉烯类药物的原因。ADC基因存在新变异型:ADC-60是国内外首次报道。

关键词：鲍曼不动杆菌 β-内酰胺类 β-内酰胺酶基因 ADC 膜孔蛋白 carO 耐药新变异型

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耐多药鲍曼不动杆菌耐药基因检测结果的样本聚类分析

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中国微生态学杂志 2013年第6期25卷 647-651页

作者：陈江平黄东标申屠桥民孔海深浙江省磐安县人民医院检验科浙江磐安322300 浙江大学医学院附属第一医院传染病诊治国家重点实验室浙江杭州310003

目的调查一组耐药鲍曼不动杆菌菌株间的亲缘关系。方法收集2010年1月至2010年12月浙江某医院ICU患者痰液标本中分离的耐药鲍曼不动杆菌共20株,采用聚合酶链反应(PCR)的方法分析3种与耐药相关的看家基因(carO、gyrA、parC)和55种水平转... 详细信息

目的调查一组耐药鲍曼不动杆菌菌株间的亲缘关系。方法收集2010年1月至2010年12月浙江某医院ICU患者痰液标本中分离的耐药鲍曼不动杆菌共20株,采用聚合酶链反应(PCR)的方法分析3种与耐药相关的看家基因(carO、gyrA、parC)和55种水平转移获得与β-内酰胺类、氨基糖苷类、喹诺酮类耐药相关基因以及12种接合性质粒、转座子、插入序列、整合子等可移动遗传元件遗传标记,再对检测结果作样本聚类分析。结果 20株耐药鲍曼不动杆菌共检出3种与耐药相关的看家基因carO、gyrA、parC,4种获得性β-内酰胺类耐药基因(TEM-1、ADC-30、ADC-60、OXA-23),5种获得性氨基糖苷类耐药基因[aac(3)-Ⅰ、aac(6')-Ⅰb、ant(3'')-Ⅰ、aph(3')-Ⅰ、armA],2种抗菌制剂外排泵基因(adeB、qacE△1),5种可移动遗传元件的遗传标记(intⅠ1、tnpU、tnp513、IS26、ISaba1)。样本聚类分析提示,20株耐药鲍曼不动杆菌可分为A与B二个簇,A簇群均为多耐药(MDR)株;A簇群又可分为A1(ADC-60阳性)与A2簇群(ADC-30阳性),均为克隆传播。B簇群均为泛耐药(PDR)株,除8号株外为克隆传播。结论 MDR和PDR菌株中均存在克隆传播。获得菌株之间的亲缘关系对院内感染实时监测和控制院内感染意义重大。

关键词：鲍曼不动杆菌 β-内酰胺类氨基糖苷类喹诺酮类可移动遗传元件样本聚类分析耐药

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RON蛋白在正常胚胎食管组织发育成熟过程及肿瘤组织中的表达特征

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浙江中西医结合杂志 2013年第3期23卷 163-166页

作者：陆意黄闽杰张占春沈玲姚航平浙江省宁波市医疗中心李惠利肿瘤放化疗科宁波315000 浙江大学医学院附属第一医院传染病诊治国家重点实验室

目的:探讨原癌基因RON在正常胚胎食管组织发育成熟及肿瘤组织中的表达特征及临床意义。方法:采用高密度组织芯片和免疫组化染色方法,检测RON在正常胚胎食管组织、成人食管组织和食管肿瘤组织中的表达及分布,半定量方法计算RON表达水平,... 详细信息

目的:探讨原癌基因RON在正常胚胎食管组织发育成熟及肿瘤组织中的表达特征及临床意义。方法:采用高密度组织芯片和免疫组化染色方法,检测RON在正常胚胎食管组织、成人食管组织和食管肿瘤组织中的表达及分布,半定量方法计算RON表达水平,分析比较差异。通过免疫印迹Western-blot法和RT-PCR法检测食管癌与正常食管组织中RON蛋白和基因的表达水平。结果:RON在正常胚胎食管与成人食管组织中的表达和分布差异无统计学意义(P>0.05)。RON在食道癌组织中呈高表达(P<0.05),其中12.5%食管癌组织中RON呈过度表达,且主要表达在食管癌细胞膜,而正常胚胎食管组织呈极弱或低表达。结论:RON在胚胎食管组织发育和成熟过程中稳定表达;RON的异常表达与食管癌的发生、进展密切相关。

关键词：食管癌酪氨酸激酶受体RON 病理机制组织芯片

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《肝衰竭诊治指南(2012年版)》治疗进展解读与探讨

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中华临床感染病杂志 2013年第2期6卷 77-80页

作者：王宇明李兰娟第三军医大学附属西南医院感染病研究所重庆400038 浙江大学医学院附属第一医院传染病诊治国家重点实验室

众所周知,在整个肝衰竭的研究中,治疗是其核心内容.例如,2005年美国肝病学会(AASLD)发布了《急性肝衰竭处理》的意见书[1],2011年又发布了《急性肝衰竭指南更新》[2].2006年我国出台了第一部《肝衰竭诊疗指南》[3],在治疗等方面对肝衰... 详细信息

众所周知,在整个肝衰竭的研究中,治疗是其核心内容.例如,2005年美国肝病学会(AASLD)发布了《急性肝衰竭处理》的意见书[1],2011年又发布了《急性肝衰竭指南更新》[2].2006年我国出台了第一部《肝衰竭诊疗指南》[3],在治疗等方面对肝衰竭进行了系统而精要地阐述,既与国际接轨,又具中国特色,突出了实用性,指导和规范了我国肝衰竭的临床诊疗工作.我国'十一·五'重大专项课题对肝衰竭的治疗进行了全面系统地研究,而'十二·五'重大专项课题基金也几乎全部集中于治疗研究.我国《肝衰竭诊治指南(2012年版)》[4]已正式出台.鉴于2012年10月27日新版《指南》发布会重点解读报告分成了诊断及治疗2个部分,现将有关其治疗处理进展的新特色进行如下解读与探讨.

关键词：肝功能衰竭治疗指南

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比格犬肝炎性损伤miRNA靶基因的预测和分析

比格犬肝炎性损伤miRNA靶基因的预测和分析

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中国毒理学会第六届全国毒理学大会

作者：苏锟楷朱夏青项春生楼宜嘉李兰娟浙江大学医学院附属第一医院传染病诊治国家重点实验室浙江大学药学院心脑血管与肝药理研究室

目的取马兜铃酸-Ⅰ(AA-Ⅰ)致比格犬亚急性肝炎性损伤组织,经microRNAs芯片,qRT-PCR分析。对所获6个显著差异表达miRNAs进一步进行邻近靶基因预测,以获取基于microRNA簇的转录后网络调控生物信息,指导进一步分子生物学深入研究。方法 (1... 详细信息

目的取马兜铃酸-Ⅰ(AA-Ⅰ)致比格犬亚急性肝炎性损伤组织,经microRNAs芯片,qRT-PCR分析。对所获6个显著差异表达miRNAs进一步进行邻近靶基因预测,以获取基于microRNA簇的转录后网络调控生物信息,指导进一步分子生物学深入研究。方法 (1)通过对miRBase数据库(http://***/)的检索,找出所有跨度小于40 kb的microRNA簇,以与microRNA芯片结果进行比铰。除了簇中表达发生变化的microRNAs,其他邻近的microRNAs也经挑选进行qRT-PCR,以验证其差异表达谱。qRT-PCR结果使用不配对Mann Whitney检验法进行统计分析,P<0.05代表差异显著。(2)采用TargetScan(***)和miRDB(***)预测不同microRNAs的靶基因,两种软件预测结果相互交叉的部分被导入DAVID(http://***),以分析其可能影响的KEGG代谢通路(***/kegg)。代谢通路的预测结果由Fisher精确检验进行统计分析,通过对落在代谢通路中的靶基因数目和该代谢通路中已知的基因数目进行检验实现。结果 (1)qRT-PCR结果表明,miRBase数据库所获包含cfa-let-7a-1/cfa-let-7b,cfa-miR-362/cfa-miR-502/cfa-miR-660这两个microRNA簇分别出现表达一致变化。而在另一个microRNA簇中,cfa-miR-27a-cfa-miR-24表达呈上调,但cfa-miR-181d的表达却呈下调,这可能是由于后者位于染色体的另一条链上。(2)预测发现3个microRNA簇与细胞凋亡、免疫信号转导等生物学过程相关。其中MAPK信号通路同时受到cfa-miR-27a和cfamiR-200c两个microRNA的潜在调控,提示AA-Ⅰ致肝炎症时,参与细胞凋亡、免疫信号转导的重要的途径。结论经TargetScan和miRDB预测及qRT-PCR论证,确定AA-Ⅰ对比格犬肝炎性损伤靶基因的3个microRNA簇,分别与细胞凋亡及免疫信号转导相关。

关键词： microRNAs 炎性损伤比格犬靶基因 miRNA 预测和分析

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乙型肝炎疫苗成人免疫策略的研究进展

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中华临床感染病杂志 2013年第5期6卷 312-315页

作者：任菁菁姚军李兰娟浙江大学医学院附属第一医院全科医学科 310003 浙江省疾病预防控制中心免疫预防所浙江大学医学院附属第一医院传染病诊治国家重点实验室 310003

乙型肝炎是影响人类健康的重要公共卫生问题,根据世界卫生组织(WHO)统计,全世界大约有20亿人感染或曾经感染过HBV,主要来自亚洲、非洲及拉丁美洲等发展中国家,其中约3.5亿为HBV慢性感染者,每年死于乙型肝炎的患者约有100万人[1]。我国... 详细信息

乙型肝炎是影响人类健康的重要公共卫生问题,根据世界卫生组织(WHO)统计,全世界大约有20亿人感染或曾经感染过HBV,主要来自亚洲、非洲及拉丁美洲等发展中国家,其中约3.5亿为HBV慢性感染者,每年死于乙型肝炎的患者约有100万人[1]。我国乙型肝炎流行率较高,据调查显示[2],我国每年因治疗HBV感染所花费的金额高达6000亿元,这给国家和人民带来沉重的负担,而注射乙型肝炎疫苗是预防乙型肝炎最实用也是最有效的方法。2002年我国开始实施新生儿免费接种乙型肝炎疫苗,经过数十年的不懈努力,我国适龄儿童乙型肝炎表面抗原(HBsAg)携带者减少了约2000万[3],这也说明了儿童乙型肝炎疫苗接种的必要性和重要性,但考虑到我国具体国情,普遍让成人接种乙型肝炎疫苗还不能实现。因此,研究乙型肝炎疫苗成人的免疫策略,提高免疫接种成功率,是今后乙型肝炎预防工作的热点。本文就近年来乙型肝炎疫苗成人免疫策略的研究进展作一综述,希望能为成人乙型肝炎预防研究提供参考。

关键词：肝炎,乙型病毒性肝炎疫苗免疫策略

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