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第三届国际暨全国肝衰竭与人工肝学术会议

作者：李兰娟吴炜陈瑜浙江大学医学院附属第一医院传染科卫生部传染病重点实验室浙江大学医学院附属第一医院传染科卫生部传染病重点实验室浙江大学医学院附属第一医院传染科卫生部传染病重点实验室

目的建立重型乙型肝炎病人血清HBV DNA克隆并测序,从全基因水平分析HBV基因变异与重型乙型肝炎发病的关系。方法收集10例重型乙型肝炎病人血清,提取HBV DNA,PCR扩增HBV全基因。PCR产物构建到pUCm-T载体上,转化至大肠杆菌感受态DH-5α细... 详细信息

目的建立重型乙型肝炎病人血清HBV DNA克隆并测序,从全基因水平分析HBV基因变异与重型乙型肝炎发病的关系。方法收集10例重型乙型肝炎病人血清,提取HBV DNA,PCR扩增HBV全基因。PCR产物构建到pUCm-T载体上,转化至大肠杆菌感受态DH-5α细胞中,经酶切鉴定,获得含3.2Kb HBV DNA的重组克隆菌,全基因测序,分析各读码框核苷酸和氨基酸变化。结果4例成功构建HBV DNA克隆,并完成全基因测序。其中3例在前C区发生G1896A变异,产生一个终止密码子,阻止了HBeAg的翻译;1例在X区1762、1764双位点出现突变;有多处点突变及缺失变异分布于PreS2区及C区已知CTL、B和T细胞的细胞表位。结论该法可用于临床研究HBV病毒基因结构与重症乙型肝炎发病的关系,并为进一步研究其HBV基因功能奠定基础。

关键词：乙型病毒性肝炎重型肝炎病毒基因

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外周血单核细胞CD83表达在慢性病毒性肝炎中的临床意义

外周血单核细胞CD83表达在慢性病毒性肝炎中的临床意义

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2005年浙江省感染病、肝病学术会议

作者：裘云庆汤灵玲张立煌刘克洲浙江大学医学院附属第一医院卫生部传染病重点实验室浙江大学医学院附属第一医院卫生部传染病重点实验室浙江大学医学院附属第一医院卫生部传染病重点实验室浙江大学医学院附属第一医院卫生部传染病重点实验室

免疫机制在病毒性肝炎尤其是慢性病毒性乙型肝炎的发病中起有举足轻重的作用。DC是启动机体免疫应答功能最为强大的抗原提呈细胞,并对机体免疫反应有重要的调节作用。因此有理由推测 DC在乙型肝炎尤其是乙型重症肝炎的发病机制中有重要... 详细信息

免疫机制在病毒性肝炎尤其是慢性病毒性乙型肝炎的发病中起有举足轻重的作用。DC是启动机体免疫应答功能最为强大的抗原提呈细胞,并对机体免疫反应有重要的调节作用。因此有理由推测 DC在乙型肝炎尤其是乙型重症肝炎的发病机制中有重要作用。外周血单核细胞作为其前体细胞,经

关键词：慢性病毒性肝炎病情变化外周血单核细胞慢性肝炎患者临床意义

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重型乙型肝炎血清HBV特异性循环免疫复合物的检测及其意义

引用

浙江医学 2005年第2期27卷 81-83,89页

作者：吴炜陈瑜李兰娟浙江大学医学院附属第一医院传染科卫生部传染病重点实验室杭州310003 浙江大学医学院附属第一医院传染科卫生部传检验科杭州310003

目的通过检测重型乙型肝炎(乙肝)病人血清HBV特异性循环免疫复合物的含量,探讨HBV特异性循环免疫复合物与重型乙肝的关系。方法采用聚乙二醇穴PEG雪沉淀法制备HBV特异性免疫复合物阳性对照品,并对80例重型乙肝患者血清HBV特异性循环免... 详细信息

目的通过检测重型乙型肝炎(乙肝)病人血清HBV特异性循环免疫复合物的含量,探讨HBV特异性循环免疫复合物与重型乙肝的关系。方法采用聚乙二醇穴PEG雪沉淀法制备HBV特异性免疫复合物阳性对照品,并对80例重型乙肝患者血清HBV特异性循环免疫复合物含量进行检测。结果80例重型乙肝患者血清解离前后HBsAg-IC阳性率最高穴56.25%雪。HBsAg-IC阳性与阴性者的年龄、HBsAg阳性率、ALT、TB水平等之间差别无显著性意义穴P>0.05雪,而HBVDNA、HBeAg阳性率之间差别有显著性意义(P<0.05)。结论PEG沉淀法检测HBV特异性循环免疫复合物简便、可靠,可用于临床检测;HBsAg-IC是重型乙肝患者循环免疫复合物的主要形式鸦HBsAg-IC阳性可能与病毒复制能力有关。

关键词：循环免疫复合物血清HBV 重型乙肝特异性重型乙型肝炎患者阳性显著性法制平等

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人工肝支持系统治疗慢性重型肝炎疗效和预后因素分析

人工肝支持系统治疗慢性重型肝炎疗效和预后因素分析

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中华医学会第十二次全国病毒性肝炎及肝病学术会议

目的观察人工肝支持系统治疗慢性重型肝炎的疗效,探讨与患者死亡率相关的危险因素。方法选取1986～2003年间经人工肝支持系统治疗的338例慢性重型肝炎病例及同期采用内科综合治疗的311 例患者作为研究对象进行回顾性分析。结果经过1～8... 详细信息

目的观察人工肝支持系统治疗慢性重型肝炎的疗效,探讨与患者死亡率相关的危险因素。方法选取1986～2003年间经人工肝支持系统治疗的338例慢性重型肝炎病例及同期采用内科综合治疗的311 例患者作为研究对象进行回顾性分析。结果经过1～8次的人工肝治疗后,338例患者均呈现临床症状好转及肝功能改善,患者30日生存率达47．93％,明显高于内科综合治疗的患者(34．73％)(P= 0．01)。多因素回归分析显示,肝性脑病程度、凝血酶原活动度、血清胆红素及肌酐水平与患者死亡率

关键词：人工肝支持系统慢性重型肝炎预后因素分析

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重组人肝再生增强因子的克隆、表达及纯化

重组人肝再生增强因子的克隆、表达及纯化

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首届国际中西医结合肝病学术会议

作者：盛吉芳俞海英李君浙江大学医学院附属第一医院卫生部传染病重点实验室浙江大学医学院附属第一医院卫生部传染病重点实验室浙江大学医学院附属第一医院卫生部传染病重点实验室

目的:通过构建原核表达系统,在大肠杆菌中表达重组人肝再生增强因子(hALR)蛋白,为各种急慢性肝损伤及肝衰竭的治疗提供新的治疗方法奠定基础。方法:利用正常人肝组织提取总RNA,经一步法RT-PCR获取hALR cDNA全序列,构建原核表达载体hALR-... 详细信息

目的:通过构建原核表达系统,在大肠杆菌中表达重组人肝再生增强因子(hALR)蛋白,为各种急慢性肝损伤及肝衰竭的治疗提供新的治疗方法奠定基础。方法:利用正常人肝组织提取总RNA,经一步法RT-PCR获取hALR cDNA全序列,构建原核表达载体hALR-PET28a(+)转化大肠杆菌(BL21),诱导表达重组hALR蛋白,以组氨酸为标签进行蛋白纯化。SDS-PAGE和Western-blot鉴定重组蛋白。结果:经双酶切和DNA测序证实hALR cDNA正确插入表达载体PET28a(+),成功表达并纯化得分子量为23KD的重组蛋白,低温诱导表达使可溶蛋白明显增加,与预期结果相符。结论:成功表达和纯化获重组hALR蛋白,为进一步蛋白质生物学功能鉴定和抗肝损伤新药研制奠定基础。

关键词：重组人肝再生增强因子重组蛋白

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HBcAg重组腺病毒载体的构建及鉴定

HBcAg重组腺病毒载体的构建及鉴定

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2005年浙江省感染病、肝病学术会议

作者：贾红宇陈智黄茵周林福吴炜陈峰朱海红浙江大学医学院附属第一医院传染病研究所卫生部传染病重点实验室浙江大学医学院附属第一医院传染病研究所卫生部传染病重点实验室浙江大学医学院附属第一医院传染病研究所卫生部传染病重点实验室浙江大学医学院附属第一医院传染病研究所卫生部传染病重点实验室浙江大学医学院附属第一医院传染病研究所卫生部传染病重点实验室浙江大学医学院附属第一医院传染病研究所卫生部传染病重点实验室浙江大学医学院附属第一医院传染病研究所卫生部传染病重点实验室

研究目的构建能高效转导HBcAg基因的重组腺病毒,进行病毒扩增和滴度测定,并检测转导率和HBcAg 抗原表达,以用于基因治疗的实验研究。方法应用AdEasyTM XL腺病毒载体系统构建表达HBcAg的重组腺病毒(Ad-C)。所用载体为删除 E1和E3基因的... 详细信息

研究目的构建能高效转导HBcAg基因的重组腺病毒,进行病毒扩增和滴度测定,并检测转导率和HBcAg 抗原表达,以用于基因治疗的实验研究。方法应用AdEasyTM XL腺病毒载体系统构建表达HBcAg的重组腺病毒(Ad-C)。所用载体为删除 E1和E3基因的复制缺陷5型腺病毒。目的基因首先克隆到p-shuttle-CMV形成穿梭载体,用Pme I

关键词：重组腺病毒载体 HBcAg 穿梭载体

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肝细胞微囊化技术及其在生物型人工肝中的应用进展

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国外医学（流行病学．传染病学分册） 2005年第4期32卷 208-210页

作者：杜维波李兰娟浙江大学医学院附属第一医院传染内科卫生部传染病重点实验室杭州310003

生物型人工肝的推广应用受限于缺乏足够数量的具有高度活性和良好功能的肝细胞。肝细胞微囊化为肝细胞大规模、高活性体外培养及长期冻存提供了一种可靠方法。微囊具有良好的生物相容性和合适的半透性,能保证肝细胞在微囊内长期存活,并... 详细信息

生物型人工肝的推广应用受限于缺乏足够数量的具有高度活性和良好功能的肝细胞。肝细胞微囊化为肝细胞大规模、高活性体外培养及长期冻存提供了一种可靠方法。微囊具有良好的生物相容性和合适的半透性,能保证肝细胞在微囊内长期存活,并维持正常的生理功能。本文就肝细胞微囊化技术及其在生物型人工肝的应用进展进行综述。

关键词：肝衰竭生物型人工肝肝细胞微囊微囊化技术细胞微囊化生物相容性推广应用长期冻存体外培养

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树突状细胞在抗HBV治疗中的应用

树突状细胞在抗HBV治疗中的应用

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2005年浙江省感染病、肝病学术会议

作者：贾红宇陈智浙江大学医学院附属第一医院传染病研究所卫生部传染病重点实验室浙江大学医学院附属第一医院传染病研究所卫生部传染病重点实验室

一、树突状细胞树突状细胞(dendriticcell,DC)是起源于骨髓的专职抗原递呈细胞,具有启动T细胞介导的免疫应答功能,因其表面具有众多树突状突起而得名。DC是由美国学者Steinman及Cohn于1973年发

关键词： HBV HBsAg HBeAg

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感染微生态

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中国感染控制杂志 2005年第1期4卷 1-3页

作者：李兰娟浙江大学医学院附属第一医院卫生部传染病重点实验室浙江杭州310003

1 感染微生态学产生的背景和历史必然性在人类发展的历史长河中,不同时期、不同地域,曾大小不等地流行过各种各样的传染病,而且均严重地威胁人类的生存和发展.为了人类自身的健康,自有史以来,人们一直艰苦不懈地探讨各种感染性疾病的发... 详细信息

1 感染微生态学产生的背景和历史必然性在人类发展的历史长河中,不同时期、不同地域,曾大小不等地流行过各种各样的传染病,而且均严重地威胁人类的生存和发展.为了人类自身的健康,自有史以来,人们一直艰苦不懈地探讨各种感染性疾病的发生发展规律.随着人类文明的进步和各种先进医疗手段的广泛应用,使得一些经典的传染病被控制,各种危重病人的生命得以延长,但同时疾病的感染谱却发生了重大的变化,并具有如下特点:(1)相当一部分感染病患者为免疫容忍性宿主;(2)引起感染的微生物大部分来自患者自身或周围人群的正常菌群;(3)多重耐药菌株感染的增多.据国内外统计显示[1],快速形成、流行的多重耐药菌株和对健康人不致病的人体正常菌群在免疫容忍性宿主中往往会引起严重的甚至致命的感染.在美国,每年约有30万患者死于脓毒血症.据我国数据显示,我国医院内合理使用的抗生素仅占50%～60%,每年有8万人死于抗生素滥用,每年滥用抗生素引起的耐药菌感染造成的经济损失达百亿元以上.一味应用抗生素仍未能有效控制感染,相反,感染的病死率更高.感染病的防治已成为21世纪的重大课题,急需新的理论给予指导、研究.

关键词：微生态抗感染益生菌

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HBV核心抗原EGFP融合蛋白表达质粒的构建及在Hep G_2细胞中的表达

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浙江预防医学 2005年第1期17卷 3-5页

作者：徐宁陈智姚航平羊正纲浙江大学医学院附属第一医院传染病研究所卫生部传染病重点实验室浙江杭州310003

目的　探讨采用构建的质粒pHBc -EGFP转染HepG2 细胞 ,瞬时表达HBV核心抗原和增强型绿荧光蛋白的可行性。方法　克隆HBV核心抗原基因进入真核表达载体pEGFP -N1 中 ,脂质体法转染HepG2 细胞后在荧光显微镜下观察增强型绿荧光蛋白表达 ,... 详细信息

目的　探讨采用构建的质粒pHBc -EGFP转染HepG2 细胞 ,瞬时表达HBV核心抗原和增强型绿荧光蛋白的可行性。方法　克隆HBV核心抗原基因进入真核表达载体pEGFP -N1 中 ,脂质体法转染HepG2 细胞后在荧光显微镜下观察增强型绿荧光蛋白表达 ,并行RT -PCR及细胞免疫组化分析融合蛋白的表达。结果　重组pHBc -EGFP质粒可在HepG2 细胞内瞬时表达HBV核心抗原和增强型绿荧光蛋白融合蛋白。结论　pHBc -EGFP质粒构建成功 ,增强型绿荧光蛋白的表达可报告HBV核心抗原表达。

关键词： HBV核心抗原增强型绿荧光蛋白瞬时表达细胞免疫组化分析乙型肝炎病毒

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