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第十届全国免疫学学术大会

作者：侯显良戴勇浙江大学医学院附属第一医院传染病诊治国家重点实验室感染性疾病诊治协同创新中心暨南大学第二临床医学院

研究背景:系统性红斑狼疮(Systemic lupus erythematosus,SLE)是一种典型的自身免疫性疾病。其发病机制尚未明确,但多认为与遗传、环境诱发因素及免疫系统紊乱有关。随着测序技术的发展,免疫组库测序应运而生。该技术研究T细胞受体(T ce... 详细信息

研究背景:系统性红斑狼疮(Systemic lupus erythematosus,SLE)是一种典型的自身免疫性疾病。其发病机制尚未明确,但多认为与遗传、环境诱发因素及免疫系统紊乱有关。随着测序技术的发展,免疫组库测序应运而生。该技术研究T细胞受体(T cell receptor,TCR)α、β、γ和δ链和B细胞受体(BCR)重链和轻链可变区的多样性,可深入挖掘免疫组库与疾病的关系。目的 :通过免疫组库测序技术研究SLE患者TCRβ链互补决定区3(CDR3)的图谱多样性,进一步阐明SLE的发病机制,为SLE疾病的早期诊断提供新的依据。方法 :空腹状态下,抽取10例SLE患者和10名健康者的静脉血5ml(EDTA 1mg:5ml抗凝)。采用磁珠分选法分离T细胞,DNA的提取按试剂盒操作步骤进行。设计45个Vβ引物作为上游引物,13个Jβ引物作为下游引物,扩增出TCRβ链所有的CDR3区。结合高通量测序平台,分析SLE组和正常对照组(NC)T细胞TCRβ链的各基因亚家族的表达频率、V-J配对和碱基插入、缺失情况以及CDR3区多样性等。结果 :SLE组和NC组的CDR3,VD indel和DJ indel的长度分布频率相似,无显著性差异;SLE患者组的TCRβ链CDR3的克隆性扩增程度高于NC组,图谱多样性明显低于NC组;SLE患者组中10个TRβV和6个TRβJ基因亚家族的表达水平,及73个V-J组合的使用频率明显异于NC组(p<0.05);SLE组和NC组都存在共有序列(Public sequence),3条DNA序列和4条氨基酸序列能在所有SLE患者的图谱中找到,15条DNA序列和30条氨基酸序列被所有健康者共有。结论 :与正常对照组相比,SLE患者组的T细胞克隆性扩增程度增加,图谱多样性降低;SLE患者中TCR Vβ和Jβ亚家族呈现优势利用的现象。

关键词：系统性红斑狼疮 T细胞抗原受体免疫组库测序

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恶性血液病患者医院侵袭性真菌感染的危险因素分析

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中国微生态学杂志 2015年第4期27卷 417-420页

作者：陈丽张伟丽叶先飞葛超荣陈瑜浙江大学医学院附属第一医院检验科浙江杭州310003 浙江大学传染病诊治国家重点实验室浙江杭州310003 温州医科大学浙江温州325035 感染性疾病诊治协同创新中心浙江杭州310003

目的了解恶性血液病患者袭性真菌感染的发生率及危险因素,为重症患者的真菌感染防治提供依据。方法回顾性调查2013年1月至12月期间的495例恶性血液病住院患者资料,用卡方检验及多因素Logistic回归分析等统计方法分析侵袭性真菌感染的危... 详细信息

目的了解恶性血液病患者袭性真菌感染的发生率及危险因素,为重症患者的真菌感染防治提供依据。方法回顾性调查2013年1月至12月期间的495例恶性血液病住院患者资料,用卡方检验及多因素Logistic回归分析等统计方法分析侵袭性真菌感染的危险因素。结果 16.4%(81/495)的患者发生侵袭性真菌感染,其中急性白血病、慢性白血病、骨髓增生异常综合征、淋巴瘤和多发性骨髓瘤患者的真菌感染发生率分别为31.1%(66/212)、0.0%(0/19)、31.2%(5/16)、4.8%(10/207)和0.0%(0/41)。外周血白细胞计数低值≤1.0E+9/L、粒细胞缺少时间≥8天、使用糖皮质激素及抗生素使用种类≥3种是恶性血液病患者侵袭性真菌感染的独立危险因素,预防性使用抗真菌药物是独立保护因素(OR值分别为15.830、41.667、3.745、8.264及39.085,P值分别为0.000、0.011、0.035、0.007及0.000)。结论合理使用抗生素和糖皮质激素、在粒细胞缺少时间较长病例中及时使用集落刺激因子、抗真菌药或重建微生态是防治恶性血液病患者真菌感染的必要措施。

关键词：恶性血液病侵袭性真菌感染危险因素

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系统性红斑狼疮T细胞抗原受体(TCR)β链CDR3的多样性分析

系统性红斑狼疮T细胞抗原受体(TCR)β链CDR3的多样性分析

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中国免疫学会第十届全国免疫学学术大会

作者：侯显良戴勇浙江大学医学院附属第一医院传染病诊治国家重点实验室感染性疾病诊治协同创新中心暨南大学第二临床医学院深圳市人民医院

研究背景：系统性红斑狼疮(Systemic lupus erythematosus,SLE)是一种典型的自身免疫性疾病。其发病机制尚未明确,但多认为与遗传、环境诱发因素及免疫系统紊乱有关。随着测序技术的发展,免疫组库测序应运而生。

关键词：系统性红斑狼疮 T细胞抗原受体免疫组库测序

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山东临沂地区下呼吸道感染患者卡他布兰汉菌耐药性分析及bro基因分型检测

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中华临床感染病杂志 2015年第3期8卷 253-257页

作者：孙淑红张伟胡晓峰凌宗欣朱德全山东省临沂市人民医院检验科 276003 山东省临沂市人民医院康复科 276003 浙江大学医学院附属第一医院传染病诊治国家重点实验室感染性疾病诊治协同创新中心

目的：分析山东临沂地区下呼吸道感染患者痰液样本中分离的卡他布兰汉菌对常用抗菌药物的耐药性及bro基因分型对耐药性的影响。方法连续收集2010年1月至2014年12月山东省临沂市人民医院镜检合格的下呼吸道感染患者痰液样本，将其分别划... 详细信息

目的：分析山东临沂地区下呼吸道感染患者痰液样本中分离的卡他布兰汉菌对常用抗菌药物的耐药性及bro基因分型对耐药性的影响。方法连续收集2010年1月至2014年12月山东省临沂市人民医院镜检合格的下呼吸道感染患者痰液样本，将其分别划线接种于4块不同琼脂培养基进行细菌分离培养及鉴定。对分离出的卡他布兰汉菌进行药敏试验和β-内酰胺酶检测，同时采用PCR扩增结合限制性内切酶分析法对分离株进行bro基因分型。采用χ^2检验比较不同bro基因型菌株对抗菌药物的耐药率。结果5年来共分离出497株卡他布兰汉菌，以冬季检出最多（共221株）。所有菌株对厄他培南和氯霉素完全敏感，对阿莫西林／克拉维酸和头孢呋辛耐药率较低（≤2.8％），对复方磺胺甲噁唑、红霉素和氨苄西林的耐药率较高，为47．6％-89．8％，且呈逐年增加趋势，但差异无统计学意义（P＞0．05）。共检出产β-内酰胺酶卡他布兰汉菌412株（412／497，82．9％），均为bro基因阳性菌株，bro基因阳性菌株对红霉素、复方磺胺甲噁唑、左氧氟沙星和氨苄西林的耐药率均高于bro阴性菌株（χ^2＝12．16、16．18、8．41和200．00，P＜0．05）。经bro基因分型发现，bro-1型菌株占94．9％（391／412），bro-2型菌株占5.1％（21／412），bro-1型与bro-2型菌株对常用抗菌药物的耐药率差异无统计学意义（P＞0．05）。结论临床分离卡他布兰汉菌产β-内酰胺酶阳性率较高，且多为bro-1型阳性株。菌株对碳青霉烯类抗菌药物、头孢菌素及β-内酰胺酶抑制剂敏感率较高，可作为治疗呼吸道卡他布兰汉菌感染的首选。

关键词：呼吸道感染卡他布兰汉菌 β-内酰胺酶类微生物敏感性试验 bro基因

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数字聚合酶链反应在传染病病原体诊断中的应用展望

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中华传染病杂志 2014年第5期32卷 318-320页

作者：李敏伟沃健儿李兰娟浙江大学医学院附属第一医院传染病诊治国家重点实验室、感染性疾病诊治协同创新中心杭州310003

传染病病原体的核酸定量检测在疾病诊断和治疗中至关重要.目前主要采用实时荧光定量PCR（real-time quantitation PCR,qPCR）,其依赖的定量基础循环阈值（cycle threshold,Ct）受扩增效率的影响很大,故qPCR只能相对定量.数字PCR （digit... 详细信息

传染病病原体的核酸定量检测在疾病诊断和治疗中至关重要.目前主要采用实时荧光定量PCR（real-time quantitation PCR,qPCR）,其依赖的定量基础循环阈值（cycle threshold,Ct）受扩增效率的影响很大,故qPCR只能相对定量.数字PCR （digital polymerase chain reaction,dPCR）是一种核酸检测和绝对定量的新方法[1-2],其创新之处在于“样品分液”,通过通道、微流体芯片或液滴技术将待检DNA样品一次性平均分成大量微小液滴,每个液滴中含有不超过一个DNA分子,每个DNA分子均作为单独的PCR反应体,经PCR扩增后与荧光标记探针杂交,逐个对每个反应进行检测,用泊松分布公式可直接计算出阳性靶核酸分子的个数和比例,实现对单分子核酸的绝对定量[3-4].

关键词：聚合酶链反应疾病诊断病原体传染病 DNA分子 PCR反应核酸分子应用

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对乙型肝炎疫苗事件的建议

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中国科学：生命科学 2014年第5期44卷 511-512页

作者：李兰娟浙江大学医学院附属第一医院、传染病诊治国家重点实验室、感染性疾病诊治协同创新中心杭州310003

最近媒体报道的多起新生儿死亡事件，疑似与不当疫苗接种有关，令人痛惜．针对当前局面，建议由国家有关主管部门主导，组织临床医学、流行病学、疾控、法医、药学、生物制品研发、质检等相关领域专家成立联合调查组，迅速地、独立地展... 详细信息

最近媒体报道的多起新生儿死亡事件，疑似与不当疫苗接种有关，令人痛惜．针对当前局面，建议由国家有关主管部门主导，组织临床医学、流行病学、疾控、法医、药学、生物制品研发、质检等相关领域专家成立联合调查组，迅速地、独立地展开调查，尽快弄清真相，消除公众疑虑．

关键词：死亡事件乙型肝炎疫苗疫苗接种主管部门临床医学流行病学生物制品领域专家

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埃博拉出血热诊治过程中医务人员的防护

埃博拉出血热诊治过程中医务人员的防护

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2015年浙江省医学会热带病与寄生虫病学分会学术会议

作者：汤灵玲黄建荣徐小微张勇毛青连建奇李成忠浙江大学医学院附属第一医院传染病诊治国家重点实验室感染性疾病染病诊治协同创新中心浙江杭州 310003 成都军区总医院四川成都610083 第三军医大学附属西南医院重庆400038 第四军医大学附属唐都医院陕西西安710038 第二军医大学附属长海医院上海200433

目的埃博拉出血热诊治过程中医务人员的防护措施。方法在利比利亚中国援建的"埃博拉出血热诊治中心，通过构建突特结构的诊治中心建筑群，加强医务人员的个人防护，严密的消杀措施，制订、落实一系列相关制度和坚强的后勤保障等... 详细信息

目的埃博拉出血热诊治过程中医务人员的防护措施。方法在利比利亚中国援建的"埃博拉出血热诊治中心，通过构建突特结构的诊治中心建筑群，加强医务人员的个人防护，严密的消杀措施，制订、落实一系列相关制度和坚强的后勤保障等方法。结果在诊治疑似和确诊埃博拉出血热患者中无医务人员感染埃博拉出血热，无院内交叉感染埃博拉出血热。副作用小。结论：在贫困地区诊治埃博拉出血热过程中。上述防预措施是有效、安全的。

关键词：埃博拉出血热医务人员的防护防预措施

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埃博拉病毒病研究的现状和思考

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中华临床感染病杂志 2014年第6期7卷 481-485页

作者：高海女李兰娟浙江大学医学院附属第一医院传染病诊治国家重点实验室感染性疾病诊治协同创新中心杭州310003

埃博拉病毒病（ Ebola virus disease）是一种急性出血性传染病，主要通过接触传播，临床表现为突起发热、肌肉酸痛、腹泻、出血和多脏器损害，伴随外周血白细胞、血小板计数降低等。埃博拉病毒是人类历史上最致命的病毒之一，人感染后... 详细信息

埃博拉病毒病（ Ebola virus disease）是一种急性出血性传染病，主要通过接触传播，临床表现为突起发热、肌肉酸痛、腹泻、出血和多脏器损害，伴随外周血白细胞、血小板计数降低等。埃博拉病毒是人类历史上最致命的病毒之一，人感染后病死率在50％～90％，被世界卫生组织（ WHO）列为生物安全第四级（ Biosafety level 4， BSL-4）病毒，同时也被视为生物恐怖工具之一。

关键词：埃博拉出血热翼手目疾病传播伦理学,医学

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骨桥蛋白促进树突状细胞的成熟和功能有助于其对乙肝病毒识别

骨桥蛋白促进树突状细胞的成熟和功能有助于其对乙肝病毒识别

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中国免疫学会第九届全国免疫学学术大会

作者：崔光莹陈佳宁魏应凤朱玉楠卢翀丁玉龙刁宏燕浙江大学医学院附属第一医院传染病诊治国家重点实验室感染性疾病诊治协同创新中心

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骨桥蛋白促进树突状细胞的成熟和功能有助于其对乙肝病毒识别

骨桥蛋白促进树突状细胞的成熟和功能有助于其对乙肝病毒识别

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第九届全国免疫学学术大会

作者：崔光莹陈佳宁魏应凤朱玉楠卢翀丁玉龙刁宏燕浙江大学医学院附属第一医院传染病诊治国家重点实验室感染性疾病诊治协同创新中心

背景:树突状细胞（DC）作为主要的抗原呈递细胞,通过调节先天性免疫和适应性免疫在微生物感染中发挥重要作用。在慢性乙型肝炎（CHB）患者中,DC功能受损伤可能介导了抑制性的病毒特异性T细胞反应。骨桥蛋白（osteopontin,OPN）参与了一... 详细信息

背景:树突状细胞（DC）作为主要的抗原呈递细胞,通过调节先天性免疫和适应性免疫在微生物感染中发挥重要作用。在慢性乙型肝炎（CHB）患者中,DC功能受损伤可能介导了抑制性的病毒特异性T细胞反应。骨桥蛋白（osteopontin,OPN）参与了一系列疾病的发生发展,包括自身免疫性疾病,迟发型超敏反应以及感染性疾病。但是,在HBV感染过程中OPN对DC功能的影响还不清楚。目的:研究在HBV感染过程中OPN对DC功能的影响。方法:通过分离人外周血中DC并给于HBV抗原刺激,研究慢乙肝患者DC分泌OPN的能力,并通过给予小鼠肝内注射和高压脉冲注射HepG2-2.15细胞培养上清,观察炎症反应,研究在慢乙肝患者中DC分泌OPN能力减低和低效应的T细胞反应之间的关系。同时我们从小鼠骨髓中诱导DC并与T细胞进行共培养,比较OPN基因敲出小鼠来源DC与野生型小鼠来源DC的成熟和功能差异。结果:与健康对照相比,慢乙肝患者外周血DC分泌OPN的能力减低。在给予小鼠肝内注射和高压脉冲注射HepG2.2.15细胞培养上清,发现与野生型小鼠相比,OPN基因敲出小鼠肝内炎症细胞浸润减少,并且产IFN-γT细胞减少。更为重要的是当给予野生型小鼠脾脏分离出的CD11c细胞过继转移后,这种降低得到一定程度的恢复。同时从小鼠骨髓中诱导DC进行体外培养,发现与野生型小鼠来源DC相比,OPN基因敲出小鼠来源DC在HBV抗原刺激后表面的CD80,CD86水平减少,并且分泌IL-12和IFN-a的水平降低。不同小鼠来源的DC与不同来源的T进行共培养发现与野生型小鼠来源DC相比,OPN基因敲出小鼠来源DC在HBV抗原刺激后诱导T细胞分泌IFN-g,TNF-a的水平减少,而分泌IL-4,IL-6,IL-10的水平升高。通过分离人PBMC,给予OPN中和性抗体和HBV抗原刺激后发现相似结果。在人PBMC中给予OPN中和性抗体阻断OPN的功能可以得到相类似的结果。而给予骨桥蛋白和HBV抗原联合刺激,慢乙肝患者DC表面的CD80,CD86表达水平升高。结论:这些结果表明在HBV抗原刺激下,OPN能够促进DC的成熟和功能,OPN缺陷能够导致DC的成熟和功能受损,进而诱导低的Th1反应。这提示OPN可能能够增强DC疫苗的效能。

关键词：树突状细胞骨桥蛋白 HBV

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