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2016年浙江省结核病学学术年会

作者：吴炜传染病诊治国家重点实验室感染性疾病诊治协同创新中心浙江大学医学院附属第一医院感染科

＜正＞～～

关键词：结核病实体器官移植

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我国细菌耐药现状与特征

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中华临床感染病杂志 2016年第2期9卷 118-128页

作者：张静喻玮赵丽娜肖永红浙江大学医学院附属第一医院传染病诊治国家重点实验室感染性疾病诊治协同创新中心杭州310003 苏州大学附属第一医院检验科 215006

目前，我国临床细菌耐药状况十分严峻，各种常见多重耐药菌和泛耐药菌的检出率比较高。就革兰阳性菌而言，主要的耐药细菌包括甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌（ MRSA）、大环内酯耐药链球菌；对糖肽类耐药肠球菌尚处于较低水平。我国MRSA... 详细信息

目前，我国临床细菌耐药状况十分严峻，各种常见多重耐药菌和泛耐药菌的检出率比较高。就革兰阳性菌而言，主要的耐药细菌包括甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌（ MRSA）、大环内酯耐药链球菌；对糖肽类耐药肠球菌尚处于较低水平。我国MRSA分子型别和链球菌的耐药机制与欧美国家有所不同。肠杆菌科细菌主要对头孢菌素和喹诺酮类耐药突出，耐药率超过60％，且近年来对碳青霉烯类耐药的肺炎克雷伯菌呈较快上升态势，耐药的主要机制是细菌产生KPC-2型碳青霉烯酶，给临床治疗带来了重大挑战。铜绿假单胞菌的耐药情况相对比较稳定，耐药率大多在20％～30％；多重耐药鲍曼不动杆菌是临床面临的重大难题，该菌对碳青霉烯类、头孢菌素等的耐药率超过50％，对替加环素耐药的菌株也日益多见。该文结合细菌耐药监测数据和细菌耐药机制研究结果，系统阐述了近五年我国细菌耐药的现状与特征。

关键词：耐甲氧西林金黄色葡萄球菌肺炎链球菌肠球菌属耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌铜绿假单胞菌不动杆菌属流行病学分子特征

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传代培养对基于肽质量指纹谱的细菌识别稳定性的影响分析

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疾病监测 2016年第9期31卷 734-739页

作者：张慧芳陶晓霞何利华闫笑梅王忱诚张建中肖迪中国疾病预防控制中心传染病预防控制所北京102206 浙江大学医学院附属第一医院传染病诊治国家重点实验室感染性疾病诊治协同创新中心浙江杭州310003

目的应用肽质量指纹谱技术对多次传代细菌进行识别,分析细菌传代对细菌识别能力的影响。方法将幽门螺杆菌、大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌分别连续传57、50、100代,金黄色葡萄球菌留取抗原。每一代新鲜培养菌和冻存抗原通过乙醇/甲酸法提... 详细信息

目的应用肽质量指纹谱技术对多次传代细菌进行识别,分析细菌传代对细菌识别能力的影响。方法将幽门螺杆菌、大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌分别连续传57、50、100代,金黄色葡萄球菌留取抗原。每一代新鲜培养菌和冻存抗原通过乙醇/甲酸法提取蛋白,采用肽质量指纹谱技术进行谱图采集和菌株鉴定。进一步采用Nano LC-MS/MS对幽门螺杆菌基于肽质量指纹谱识别的蛋白进行批量鉴定。结果幽门螺杆菌、大肠埃希菌分别连续传57代和50代,采用肽质量指纹谱每代均能正确识别到种水平;金黄色葡萄球菌连续传100代,采用肽质量指纹谱每代新鲜菌株及冻存抗原均能正确识别到种水平,各代冻存抗原和新鲜菌株的肽质量指纹谱具有很好的一致性。幽门螺杆菌蛋白扫描分析,鉴定出206个蛋白,包括各种酶类(29.6%)、核糖体蛋白(15.5%)、外膜蛋白(10.7%)、假想蛋白(19.0%)、转运相关蛋白(2.0%)、其他蛋白(22.0%)。结论细菌连续传代和抗原冻存不影响肽质量指纹谱对菌株的正确识别,细菌的肽质量指纹谱具有传代稳定性。

关键词：肽质量指纹谱细菌鉴定传代稳定性

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H5N6禽流感病毒在哺乳动物适应过程中的氨基酸变异

H5N6禽流感病毒在哺乳动物适应过程中的氨基酸变异

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全国寄生虫病高峰论坛暨2016年浙江省热带病与寄生虫病学术年会

作者：彭秀明吴海波彭晓荣吴晓鑫程林芳刘福民季淑静吴南屏浙江大学医学院附属第一医院传染病诊治国家重点实验室感染性疾病诊治协同创新中心

目的:禽流感病毒通常在禽类间传播,但有一定概率突破物种间屏障而发生跨种间传播的特点已经较明确。H5N6高致病性禽流感病毒对人类健康和家禽业造成了重大威胁。本文通过H5N6在小鼠中传代,找到H5N6在适应小鼠过程中发生的位点变异,这些... 详细信息

目的:禽流感病毒通常在禽类间传播,但有一定概率突破物种间屏障而发生跨种间传播的特点已经较明确。H5N6高致病性禽流感病毒对人类健康和家禽业造成了重大威胁。本文通过H5N6在小鼠中传代,找到H5N6在适应小鼠过程中发生的位点变异,这些位点可能对哺乳动物适应起到重要作用。方法:对一株H5N6禽流感病毒(6D2)在BALB/c小鼠中进行了10代连续传代,对野生株(WT-6D2)和小鼠适应株(MA-6D2)进行了一代测序,找出变异位点,并且比较了WT-6D2和MA-6D2的致病力,复制力等特性。结果:我们发现,在MA-6D2组中,小鼠的死亡率和多个器官的病毒滴度都显著高于WT-6D2组。通过序列比对,我们找到了HA A150V,NA(R143K;G147E),PB2 E627K和PA A343T这5个在小鼠适应过程中发生的位点变化。结论:HA A150V影响了H5N6的受体结合特性,NA(R143K;G147E)分别改变了神经氨酸酶的催化效率和亚基间的相互作用,PB2E627K是在多篇文献报道中提到的位点,能明显改变病毒的致病力和复制力,PA A343T可能改变了核糖核蛋白复合物(RNP)的空间结构从而改变了病毒的复制和转录特性。

关键词：禽流感病毒哺乳动物

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莫西沙星和利奈唑胺对非结核分枝杆菌体外抑菌作用的研究

莫西沙星和利奈唑胺对非结核分枝杆菌体外抑菌作用的研究

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2016年浙江省结核病学学术年会

作者：方兰芳杨青稽仲康徐凯进陈晓浙江大学医学院附属第一医院感染科浙江大学传染病诊治国家重点实验室协同创新中心

目的评价莫西沙星和利奈唑胺对临床常见非结核分枝杆菌(NTM)的体外抑菌作用,为治疗NTM疾病提供科学依据。方法选取2012.1-2014.6月期间分离自本院临床患者的NTM为研究对象。采用微量肉汤稀释法分别测定莫西沙星和利奈唑胺对98株NTM的最... 详细信息

目的评价莫西沙星和利奈唑胺对临床常见非结核分枝杆菌(NTM)的体外抑菌作用,为治疗NTM疾病提供科学依据。方法选取2012.1-2014.6月期间分离自本院临床患者的NTM为研究对象。采用微量肉汤稀释法分别测定莫西沙星和利奈唑胺对98株NTM的最低抑菌浓度(MIC)。结果莫西沙星对鸟分枝杆菌复合群的敏感率为84.5%(49/58),显著高于脓肿分枝杆菌11.5%(3/26)(χ2=40.505,P=0.000)。利奈唑胺对鸟分枝杆菌复合群的敏感率为65.5%(38/58),低于脓肿分枝杆菌的88.5%(23/26),两者差异有统计学意义(χ2=4.753,P=0.029)。鸟分枝杆菌复合群中,莫西沙星对鸟分枝杆菌的敏感性(96.2%,25/26)高于胞内分枝杆菌(75%,24/32),两者比较差异有统计学意义(Fisher检验,P=0.033);利奈唑胺对鸟分枝杆菌和胞内分枝杆菌的敏感率分别为69.2%(18/26)和62.5%(20/32),两者差异无统计学意义(χ2=0.288,P=0.592)。结论不同种NTM的耐药谱有差异,在NTM疾病的诊治中NTM的菌种鉴定和药物敏感性的筛查是很有必要的。

关键词：非结核分枝杆菌莫西沙星利奈唑胺

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人体微生态与疾病的研究现状和展望

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传染病信息 2016年第5期29卷 257-263页

作者：蒋建文李兰娟浙江大学医学院附属第一医院肝胆胰外科杭州310003 浙江大学感染性疾病诊治协同创新中心浙江大学国际保健中心浙江大学传染病诊治国家重点实验室

人体定植着数目庞大、结构复杂的微生物群落,其基因总和称之为人体微生物组。人体微生物在与宿主共进化过程中形成共生关系,在调节宿主的消化吸收、代谢和免疫反应等各方面发挥重要作用。人体微生物与多种疾病如感染性疾病、肥胖症、糖... 详细信息

人体定植着数目庞大、结构复杂的微生物群落,其基因总和称之为人体微生物组。人体微生物在与宿主共进化过程中形成共生关系,在调节宿主的消化吸收、代谢和免疫反应等各方面发挥重要作用。人体微生物与多种疾病如感染性疾病、肥胖症、糖尿病、肝病、冠心病以及肿瘤等存在密切关系。目前人体微生物在多种疾病的发生发展中的作用机制研究尚处于初级阶段,虽然国际上人体微生态与疾病关系的研究日趋白热化,但是人体微生态研究领域中有很多关键技术和问题尚须要深入探索。

关键词：人体微生态人体微生物组肠道微生态元基因组

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不同血管通路进行人工肝治疗肝衰竭临床疗效比较

不同血管通路进行人工肝治疗肝衰竭临床疗效比较

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全国寄生虫病高峰论坛暨2016年浙江省热带病与寄生虫病学术年会

作者：周健黄建荣宁波市李惠利东部医院感染科浙江大学医学院附属第一医院传染病诊治国家重点实验室

目的:探讨不同血管通路对人工肝治疗肝衰竭的影响。方法回顾性收集诊断为乙型肝炎肝衰竭进行人工肝治疗患者,随机分为A、B两组,人工肝方法均选用选择性血浆置换。A组为内瘘针穿刺建立临时外周血管通路组,共62例,行人工肝治疗120次,平均... 详细信息

目的:探讨不同血管通路对人工肝治疗肝衰竭的影响。方法回顾性收集诊断为乙型肝炎肝衰竭进行人工肝治疗患者,随机分为A、B两组,人工肝方法均选用选择性血浆置换。A组为内瘘针穿刺建立临时外周血管通路组,共62例,行人工肝治疗120次,平均每例患者治疗1.97次。B组为用股静脉双腔管插管长时置管组(留置管时间1～4周),共66例:行人工肝治疗130次,平均每例患者治疗2.02次。比较两组患者在人工肝治疗后肝脏功能改善情况及相关并发症发生情况。结果:两组患者在人工肝治疗后总胆红素明显下降,胆碱酯酶、白蛋白、凝血酶原时间上升,但两组之间无明显统计学差异。在置管相出血、感染、管腔阻塞等并发症及费用方面,B组高于A组;在血液流量上,A组低于B组,且有动脉瘤发生。结论:良好的血管通路对人工肝治疗有关键作用,病情较轻只进行血浆置换可选择外周血管通路,尤其是外周浅表静脉—股静脉通路。但肝衰竭病情重,需长时间多种人工肝治疗方法则需建立中心静脉置管通路。

关键词：血管通路人工肝肝衰竭

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原发性胆汁性胆管炎患者唾液Th1/Th2细胞因子的水平变化及意义

原发性胆汁性胆管炎患者唾液Th1/Th2细胞因子的水平变化及意义

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第十一届全国免疫学学术大会

作者：卢翀陈佳宁王琳魏应凤丁玉龙侯显良刁宏燕浙江大学医学院附属第一医院传染病诊治国家重点实验室感染性疾病诊治协同创新中心

目的:原发性胆汁性胆管炎(PBC)是一种以肝内小胆管进行性损伤为特征的自身免疫性肝病,其发病机制尚不明确。有研究表明,Th1/Th2平衡失调是引起该病的原因之一。PBC发病过程中常引起口腔方面的并发症状,提示PBC患者口腔免疫功能也出现了... 详细信息

目的:原发性胆汁性胆管炎(PBC)是一种以肝内小胆管进行性损伤为特征的自身免疫性肝病,其发病机制尚不明确。有研究表明,Th1/Th2平衡失调是引起该病的原因之一。PBC发病过程中常引起口腔方面的并发症状,提示PBC患者口腔免疫功能也出现了损害。本研究的目的是通过检测PBC患者血清和唾液中Th1/Th2型细胞因子γ干扰素(IFN-γ)/白介素6(IL-6)的水平,探究PBC患者口腔中免疫环境的变化情况。方法:本研究中,实验组选取25例来自浙江大学附属第一医院的PBC患者,所有PBC患者均已临床确诊且尚未接受治疗。对照组选取32例年龄,性别相匹配的体检合格的健康成人,另选取14例年龄、性别相匹配的口腔扁平苔藓(OLP)患者作为阳性对照组。分别收集了PBC患者、健康成人的血清、唾液以及OLP患者的唾液,利用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测了PBC患者和健康成人血清、唾液和OLP患者唾液中IFN-γ、IL-6表达水平。利用t检验、单因素方差分析(one-way ANOVA)比较分析各组唾液中IFN-γ、IL-6表达水平之间的统计学差异。结果:和健康成人组相比,PBC患者血清中的IFN-γ、IL-6表达水平明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。PBC、OLP患者唾液中IFN-γ和IL-6表达水平均明显高于健康成人组,差异有统计学意义(P<0.05)。与OLP患者组相比,PBC患者唾液中IFN-γ和IL-6表达水平相对较低,差异有统计学意义(P<0.05)。通过相关性分析发现,PBC患者的IFN-γ、IL-6表达水平,在血清和唾液之间存在明显的正相关性。结论:PBC患者血液、唾液中均出现了IFN-γ、IL-6的高表达,反映出PBC患者免疫环境中存在Th1/Th2细胞因子平衡失调,口腔的免疫环境受到损伤,此外,患者唾液中IFN-γ、IL-6的表达水平在一定程度上反映了患者体内的免疫环境。PBC患者唾液IFN-γ、IL-6表达水平和OLP患者组相比相对较低,提示PBC患者口腔免疫功能损害相对较轻,临床上应加强PBC患者的口腔护理,做好早期预防以减少PBC患者口腔疾病的发生。

关键词：原发性胆汁性胆管炎(PBC) 唾液 IFN-γ IL-6

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高通量测序揭示T细胞受体的保守特性

高通量测序揭示T细胞受体的保守特性

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浙江省免疫学会第十次学术大会

作者：侯显良刁宏燕浙江大学医学院附属第一医院传染病诊治国家重点实验室感染性疾病诊治协同创新中心

目的:T细胞受体(T cell receptor,TCR)是T细胞表面的特异性受体,负责识别由主要组织相容性复合体(MHC)所呈递的抗原。T细胞受体的抗原结合位极为多样化,主要源于TCR基因的V(D)J重组和N区核苷酸插入。该研究利用高通量测序技术研究10个... 详细信息

目的:T细胞受体(T cell receptor,TCR)是T细胞表面的特异性受体,负责识别由主要组织相容性复合体(MHC)所呈递的抗原。T细胞受体的抗原结合位极为多样化,主要源于TCR基因的V(D)J重组和N区核苷酸插入。该研究利用高通量测序技术研究10个健康人的TCRβ链CDR3区域的图谱特征。方法:采集10个人的外周血,Ficoll分层液法分离单个核细胞;磁珠分选T淋巴细胞;多重PCR技术扩增TCR CDR3区段后进行高通量测序。参照IMGT/High V-QUEST分析TCR CDR3区段的图谱特征和多样性。结果:绝大部分的TCR CDR3序列丰度很低,表明没有经历克隆性扩增。但每个个体都会有一些丰度很高的序列,可能是由生活中接触的病原体或刺激物所引起的。在不考虑序列丰度的情况下研究个体水平的TCR CDR3序列特征,发现不同个体间的TRBV、TRBJ和TRBD基因亚家族的使用频率都相似。另外,不同个体间CDR3区段的4种核苷酸(G,C,A,T)和20种氨基酸的使用频率几乎一致。我们还发现末端脱氧核苷酸转移酶(Tdt)在N区插入的核苷酸有偏向性,插入4种核苷酸的频率依次为:G(31.92%),C(27.14%),A(21.82%)和T(19.12%)。在考虑序列丰度的情况下,以上这些特征也会存在,只是个体水平间的偏差增大。结论:TCRβ链CDR3区域具有极大的多样性,该研究发现其存在一些保守的特性,其机理有待进一步阐明。

关键词： T细胞受体高通量测序图谱特征

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骨桥蛋白促进流感病毒感染引起的肺损伤

骨桥蛋白促进流感病毒感染引起的肺损伤

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浙江省免疫学会第十次学术大会

作者：卢翀陈佳宁王琳魏应凤丁玉龙侯显良刁宏燕浙江大学医学院附属第一医院传染病诊治国家重点实验室感染性疾病诊治协同创新中心

研究目的:已有研究表明,在细菌引起的肺部感染患者中,血浆中骨桥蛋白(0PN)的含量明显增加。但在病毒引起的肺损伤患者中,OPN的表达水平还不是很清楚,同时,升高的OPN水平与肺损伤的相关性以及肺损伤中OPN升高的机制尚有待深入研究。本研... 详细信息

研究目的:已有研究表明,在细菌引起的肺部感染患者中,血浆中骨桥蛋白(0PN)的含量明显增加。但在病毒引起的肺损伤患者中,OPN的表达水平还不是很清楚,同时,升高的OPN水平与肺损伤的相关性以及肺损伤中OPN升高的机制尚有待深入研究。本研究的主要目的是探究血浆中OPN水平与肺损伤,特别是与肺水肿和肺部结构的破坏之间的关系及相互作用的机制。材料和方法:通过APACHE-Ⅱ评分标准筛选入组患者:H1N1患者组(n=12),H7N9患者组(n=13),健康人对照组(n=1O),评估各组肺损伤情况并检测血浆中OPN、TNF-α、IL-6水平,再通过小鼠肺上皮细胞(MLE-12)和人肺上皮细胞(A549)进行细胞实验进一步探究其中的作用机制。结果:研究发现OPN水平在肺损伤患者的血浆中显著升高,在流感病毒引起的肺损伤病人中,血浆中OPN水平和肺损伤的严重程度呈正相关。通过进一步研究发现,在肺泡上皮细胞中,OPN可以通过与整合素β3和CD44(OPN受体)作用而下调上皮细胞钠离子通道(ENaC)的mRNAα亚基的表达,除此之外,OPN通过与整合素β1和CD44的相互作用则可以提升基质金属蛋白酶7(MMP7)的表达,这些指标的改变均促进了肺损伤的加重。我们还发现,血浆中OPN的升高还上调了患者血浆中炎症因子TNF-α和IL-6的表达水平。结论:OPN可能是通过促进肺上皮细胞的凋亡,损害上皮细胞钠离子通道和破坏细胞外基质来促进流感病毒引起的肺损伤的。

关键词：骨桥蛋白(OPN) 肺损伤 TNF-α IL-6

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