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第七届全国动物生理生态学学术会议暨孙儒泳院士学术思想研讨会

作者：陈学群马志强杨甲芳石艳军边疆晖于鸿浩杜继曾浙江大学基础医学院神经生物学和生理学研究室杭州浙江中国 310058 浙江大学基础医学院卫生部医学神经生物学重点实验室杭州浙江中国 310058 浙江大学基础医学院神经生物学和生理学研究室杭州浙江中国 310058 中国科学院西北高原生物所生态研究室西宁青海中国 810001 桂林医学院生物技术学院桂林中国 541004

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高原小哺乳动物应激激素CRF家族的克隆和功能比较

高原小哺乳动物应激激素CRF家族的克隆和功能比较

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中国生理学会内分泌代谢、比较生理与应激生理学术会议

作者：陈学群杨甲芳石艳军马志强陈晓澄边疆晖于鸿浩杜继曾浙江大学基础医学院神经生物学和生理学研究室浙江大学基础医学院卫生部医学神经生物学重点实验室中国科学院西北高原生物所生态研究室中国科学院西北高原生物所标本馆

研究以高原小哺乳动物——高原鼢鼠(Myospalax Baileyi)和甘肃鼢鼠(Myospalax Cansus)及根田鼠为对象,克隆了其的CRF、Ucn和CRFR1基因编码区CDS,比较其序列差异,以及大脑皮层mRNA表达水平及HPA轴反应性,进一步研究了垂体CRFR1受体的低... 详细信息

研究以高原小哺乳动物——高原鼢鼠(Myospalax Baileyi)和甘肃鼢鼠(Myospalax Cansus)及根田鼠为对象,克隆了其的CRF、Ucn和CRFR1基因编码区CDS,比较其序列差异,以及大脑皮层mRNA表达水平及HPA轴反应性,进一步研究了垂体CRFR1受体的低氧应激转录机制。这两种鼢鼠的CRF成熟肽与大鼠、小鼠、高原鼠兔和人的氨基酸序列完全一致;Ucn成熟肽与大鼠和小鼠的完全一致,与人类相比,两种鼢鼠都有第2位和第4位的2个氨基酸变异(N-D,S-P),但高原动物——根田鼠和这两个动物相比较,根田鼠在第1位、第37位和第38位有3个氨基酸不同(D-N,F-L,D-H)。关于CRFR.1型受体,他的前体蛋白在已知序列的哺乳动物中同源性大于92%,和与人类相比,这两种鼢鼠分别有10和12个氨基酸位点的不同;而这两种动物相比,在第71位和第379位有2个氨基酸不同(F-L,H-R)。由于这两种动物CRF和UCN的氨基酸序列完全一致,所以CRFR1序列的变异可能是导致配体和受体亲和力,受体其他特性改变及HPA轴功能差异的基础,其HPA轴反应性从低到高依次为高原鼠兔,根田鼠,高原鼢鼠及实验室SD大鼠。高原鼢鼠大脑前额叶皮层CRF和CRFR1基因表达水平都高于甘肃鼢鼠;同时低氧(7000 m,8h)应激显著上调实验室SD大鼠大脑前额叶皮层的CRF、Ucn及CRFR1 mRNA表达。在表达CRFR1的AtT-20垂体细胞中,常氧下CRF显著降低CRFR1 mRNA的表达,AP-1拮抗剂可以阻断CRF诱导的CRFR1 mRNA表达的下降,NF-kB拮抗剂不能阻断CRF诱导的CRFR1 mRNA表达的下降;低氧(1%O2,24h)暴露后,CRF进一步升高CRFR1mRNA的表达,AP-1拮抗剂不能阻断CRF诱导的CRFR1 mRNA表达的上升,但NF-kB拮抗剂可以阻断CRF诱导的CRFR1 mRNA表达的上升,提示转录因子N1F-kB和AP-1参与低氧对CRFR1受体的转录。ChIP-PCR证明小鼠CRFR1受体启动子上分别存在5个AP-1和8个NF-kB结合位点。另外,利用定点突变和双荧光素酶报告技术证明转录因子HIF-1alph也参与低氧下垂体CRFR1型受体的转录调节。

关键词：高原鼢鼠前额叶皮层小哺乳动物根田鼠高原鼠兔 CRF 应激激素功能比较

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低氧调节大鼠前额叶皮层IGFs家族基因的表达

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中国应用生理学杂志 2014年第1期30卷 30-32页

作者：祖胡月瞿专任纪龙陈学群杜继曾浙江大学基础医学系神经生物学和生理学研究室杭州310058

目的：探讨急性和慢性低氧对胰岛素样生长因子（IGFs）家族中IGF-I，IGF一Ⅱ，IGF-1R和IGFBPlmRNA表达变化的调节。方法：我们利用低压低氧舱模拟5km低氧环境，研究大鼠暴露于急性和慢性低氧后的前额叶皮层IGF家族基因的表达变化。结果... 详细信息

目的：探讨急性和慢性低氧对胰岛素样生长因子（IGFs）家族中IGF-I，IGF一Ⅱ，IGF-1R和IGFBPlmRNA表达变化的调节。方法：我们利用低压低氧舱模拟5km低氧环境，研究大鼠暴露于急性和慢性低氧后的前额叶皮层IGF家族基因的表达变化。结果：急性和慢性连续低氧暴露后，大鼠前额叶皮层中IGF-I，IGF-II，IGF-1R和IGFBPlmRNA对低氧应激表现出明显不同的变化模式。急性低氧时，IGF-I和IGFBPlmRNA表达显著升高。而在慢性连续低氧暴露5～15d后，IGF-I和IGFBPlmRNA表达量逐渐回复到对照水平。但IGF-1R的表达仍然保持较高水平。结论：急性低氧上调IGF基因表达可能参与皮层神经元的保护，而慢性低氧升高的IGF-1R基因表达可能参与慢性低氧损伤的适应过程。

关键词：低氧 IGFs IGFBP1 前额叶皮层

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CRFR1介导低氧诱导肝细胞IGFs和IGFBPs表达的调节

CRFR1介导低氧诱导肝细胞IGFs和IGFBPs表达的调节

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中国生理学会消化内分泌生殖代谢生理专业委员会2014年消化内分泌生殖代谢学术会议

作者：胡晓凤瞿专任纪龙郝珂陈学群杜继曾浙江大学基础医学系神经生物学和生理学研究室浙江杭州310058

类胰岛素样生长因子(Insulin-like growth factor,IGF)家族包括两种配体(IGF-Ⅰ和IGF-Ⅱ ),相应的细胞表面受体(IGF-IR和IGF-11R)及六种结合蛋白(IGFBP1～6).IGF家族在凋节细胞增殖、存活、分化利迁移等方面具有重要的生物学功能.研究...

类胰岛素样生长因子(Insulin-like growth factor,IGF)家族包括两种配体(IGF-Ⅰ和IGF-Ⅱ ),相应的细胞表面受体(IGF-IR和IGF-11R)及六种结合蛋白(IGFBP1～6).IGF家族在凋节细胞增殖、存活、分化利迁移等方面具有重要的生物学功能.研究低氧应激条件下CRF是否可以调节IGF家族基因表达具有重要意义.本研究利用低气压舱模拟高原低氧,检测大鼠肝脏组织IGF家族基因表达的变化;利用大鼠正常肝细胞(BRL-3A),给与细胞CRF刺激,检测大鼠正常肝细胞系IGF家族基因表达的变化.

关键词：

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β-Arrestin1介导低氧诱导的大鼠皮层CRFR1内在化

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中国应用生理学杂志 2013年第3期29卷 202-204,208页

作者：元媛孔繁平郝珂孟凡森陈学群杜继曾浙江大学基础医学系神经生物学和生理学研究室杭州310058

目的:探讨β-Arrestin1在低氧后诱导大鼠皮层促肾上腺皮质激素释放激素1型受体(CRFR1)内在化的机制。方法:利用低压低氧舱模拟高原低氧,将SD大鼠分别暴露于急性低氧7 km(8.2%O2,41.02 kPa)8 h和24 h,连续慢性低氧5 km(10.8%O2,54.02 kPa... 详细信息

目的:探讨β-Arrestin1在低氧后诱导大鼠皮层促肾上腺皮质激素释放激素1型受体(CRFR1)内在化的机制。方法:利用低压低氧舱模拟高原低氧,将SD大鼠分别暴露于急性低氧7 km(8.2%O2,41.02 kPa)8 h和24 h,连续慢性低氧5 km(10.8%O2,54.02 kPa)5 d和15 d,采用实时定量PCR研究低氧对大鼠大脑前额叶皮层促肾上腺皮质激素释放激素(CRF)、CRFR1、G蛋白偶联受体激酶(GRK3)和β-Arrestin1基因表达的影响。结果:急性低氧7 km 8 h上调CRF、GRK3基因表达,而7 km 24 h严重低氧抑制CRFR1和GRK3基因表达;慢性连续低氧促进β-Arrestin1 mRNA增加,下调CRFR1基因表达。结论:皮层CRF分泌和基因表达的减少以及β-Arrestin1 mRNA的增加可能使CRFR1脱敏,这可能是机体对慢性连续低氧反应性降低的机制之一。

关键词：低氧 β-Arrestin1 CRF CRFR1

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神经肽CRH对原代大鼠皮层小胶质细胞NO、TNF-α和IL-6释放的影响

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中国应用生理学杂志 2013年第4期29卷 323-325页

作者：毕燕华宋婷婷陈学群杜继曾浙江大学基础医学系神经生物学和生理学研究室杭州310058

目的:探讨神经肽促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)参与调节原代大鼠皮层小胶质细胞的激活。方法:取原代大鼠皮层细胞,体外培养10 d,纯化24 h后得小胶质细胞,采用ELISA和NO测试盒检测小胶质细胞激活后促炎症介质一氧化氮(NO)、肿瘤坏死因子... 详细信息

目的:探讨神经肽促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)参与调节原代大鼠皮层小胶质细胞的激活。方法:取原代大鼠皮层细胞,体外培养10 d,纯化24 h后得小胶质细胞,采用ELISA和NO测试盒检测小胶质细胞激活后促炎症介质一氧化氮(NO)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白介素6(IL-6)的释放。结果:10-15mol/L CRH明显促进原代大鼠小胶质细胞的促炎症介质NO,TNF-α和IL-6的释放。CRHR1特异性拮抗剂CP154,526可以阻断CRH诱导的小胶质细胞促炎症反应。结论:神经肽CRH通过CRHR1调节原代大鼠小胶质细胞的促炎症反应,CRH联合细菌脂多糖(Lipopolysaccharides,LPS)可以增强LPS诱导的小胶质细胞NO,TNF-α和IL-6的释放。

关键词：促肾上腺皮质激素释放激素(CRH) 小胶质细胞促炎症反应

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模拟高原低氧对p53及其靶基因表达的调节

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中国应用生理学杂志 2013年第2期29卷 136-138页

作者：王铭洋赵阳张圣婷陈学群杜继曾浙江大学基础医学系神经生物学和生理学研究室浙江杭州310058

目的:初步探讨模拟高原低氧对高原动物和平原动物p53及其靶基因的调节。方法:高原鼢鼠和根田鼠暴露于7 km(8.0%O2,41.02 kPa)低氧6 h,SD大鼠分别暴露于2 km(16.0%O2,79.97 kPa),5 km(10.8%O2,54.02 kPa)和7 km(8.0%O2,41.02 kPa)低氧8 h,采用实时荧光定量PCR和Western blot研究低氧对三种动物肝脏p53及其靶基因的调节。结果:低氧下调高原动物肝脏p53mRNA和蛋白的表达,但上调平原动物p53mRNA和蛋白的表达;中度和严重低氧对平原动物肝细胞凋亡靶基因bax和IGFBP3有抑制作用,而对细胞周期停滞靶基因p21有激活作用。结论:高原动物和平原动物肝细胞p53及其靶基因在低氧应激时具有不同的表达模式。

关键词：低氧高原鼢鼠根田鼠 p53

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36.低氧对促性腺激素抑制激素在脑内表达的作用

36.低氧对促性腺激素抑制激素在脑内表达的作用

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中国生理学会2012年消化内分泌生殖代谢生理学术会议暨第八届比较生理学学术会议

作者：孟凡森王曦孔繁平陈学群杜继曾浙江大学基础医学系神经生物学和生理学实验室浙江杭州310058

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