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第二十一届国际络病学大会

作者：邓龙夏伟刘学武谢文静邹晓青姜德建张妙红湖南省药物安全评价研究中心/新药药效与安全性评价湖南省重点实验室湘潭大学化学学院

目的研究连花清咳片对细菌合并烟熏所致的大鼠急性支气管炎的保护作用及机制。方法建立混合烟熏法同时经鼻滴入卡他莫拉菌复制大鼠急性支气管炎模型。实验分为正常对照组,模型对照组,银黄清肺胶囊对照药组(0.18 g·kg)及连花清咳片... 详细信息

目的研究连花清咳片对细菌合并烟熏所致的大鼠急性支气管炎的保护作用及机制。方法建立混合烟熏法同时经鼻滴入卡他莫拉菌复制大鼠急性支气管炎模型。实验分为正常对照组,模型对照组,银黄清肺胶囊对照药组(0.18 g·kg)及连花清咳片低、中、高剂量组(1.47、2.93和5.86 g生药·kg)。给药组按10 mL·kg灌胃给予相应药液,1次·天,连续14 d。观察各组大鼠的一般状态;ELISA检测肺泡灌洗液中IL-6、IL-8、IL-10、TNF-α;比色法检测NO、SOD、MDA;流式细胞仪检测肺泡灌洗液中CD4/CD3、CD8/CD3细胞的比例,计算CD4/CD8细胞的比例;HE染色观察支气管及肺组织病理学改变。结果与正常对照组比较,模型对照组大鼠肺脏中炎症因子IL-6、IL-8、TNF-α水平增加,IL-10水平降低,MDA含量增加,NO、SOD含量降低,CD4/CD8细胞比值降低;与模型对照组比较,连花清咳片各剂量组大鼠肺脏中炎症因子IL-6、IL-8、TNF-α的表达减少,IL-10的表达增加,MDA含量减少,NO、SOD的含量升高,CD4/CD3、CD8/CD3细胞的比例以及CD4/CD8细胞的比值增加。连花清咳片中、高剂量组和银黄清肺胶囊对照药组动物支气管及肺脏病理改变均有明显改善。结论连花清咳片对细菌合并烟熏所致的大鼠急性支气管炎具有显著的保护作用,其机制与降低肺脏组织中炎性因子,抗氧化和提高细胞免疫功能有关。

关键词：连花清咳片急性支气管炎炎症因子抗氧化细胞免疫

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急性胰腺炎以铁死亡、焦亡、坏死性凋亡为靶点的治疗研究进展

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山东医药 2025年第4期65卷 150-154页

作者：郑华群姚广涛上海中医药大学上海中医健康服务协同创新中心上海201203 上海中医药大学药物安全评价研究中心上海201203

急性胰腺炎(AP)是由胰酶异常激活导致的胰腺组织自身消化疾病,主要症状为突然发作的持续性上腹部疼痛,可能伴随恶心、呕吐、腹胀、发热等症状,重症患者可能出现低血压或休克,且会合并多脏器功能障碍。AP病理机制不够明确,同时缺乏针对... 详细信息

急性胰腺炎(AP)是由胰酶异常激活导致的胰腺组织自身消化疾病,主要症状为突然发作的持续性上腹部疼痛,可能伴随恶心、呕吐、腹胀、发热等症状,重症患者可能出现低血压或休克,且会合并多脏器功能障碍。AP病理机制不够明确,同时缺乏针对性的靶向治疗,因此导致AP的高发病率和病死率。近年来,铁死亡、焦亡和坏死性凋亡等新型细胞程序性死亡机制的深入研究为解析AP发病机制提供了新视角,并推动了靶向治疗的研发。铁死亡是一种铁依赖的脂质过氧化驱动的细胞死亡形式,其核心机制涉及GPX4活性抑制、活性氧积累及含多不饱和脂肪酸链的磷脂的氧化。在AP中,铁死亡通过促进胰腺腺泡细胞膜损伤和炎症反应加剧病情,靶向铁死亡通路可能成为AP治疗的潜在策略。焦亡是由消皮素D介导的炎性细胞死亡,依赖于NLRP3炎症小体激活。尽管焦亡抑制在AP中显示出保护作用,但其与其他死亡通路的交互机制仍需进一步探索。坏死性凋亡由RIPK1/RIPK3/MLKL通路驱动,其激活导致细胞膜破裂及DAMPs释放,加剧AP的炎症级联反应。坏死性凋亡对AP的进展是促进还是抑制尚不明确,靶向调控坏死性凋亡对AP的防治有着积极意义,需进一步明确坏死性凋亡在AP中的时空特异性作用,以优化靶向治疗策略。

关键词：急性胰腺炎细胞程序性死亡铁死亡焦亡坏死性凋亡

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HPLC法分析复方异丙托溴铵溶液雾化气溶胶成分

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分析试验室 2021年第2期40卷 174-179页

作者：朱狄峰石萌洪雅雯钱仁云赵剑岚平丽浙江大学药学院药物安全评价研究中心杭州310058

建立HPLC法同时测定吸入用复方异丙托溴铵溶液雾化气溶胶中硫酸沙丁胺醇和异丙托溴铵两组分的含量。采用C_(18)(4.6mm×250 mm,5μm)色谱柱,流动相为1.2 g/L的1-庚烷磺酸钠溶液(磷酸调节pH 3.2左右)(A)-乙腈(B),等度洗脱,流速为1.0 ... 详细信息

建立HPLC法同时测定吸入用复方异丙托溴铵溶液雾化气溶胶中硫酸沙丁胺醇和异丙托溴铵两组分的含量。采用C_(18)(4.6mm×250 mm,5μm)色谱柱,流动相为1.2 g/L的1-庚烷磺酸钠溶液(磷酸调节pH 3.2左右)(A)-乙腈(B),等度洗脱,流速为1.0 mL/min,进样量为50μL,分析时间15 min,柱温40℃,检测波长为210 nm。结果表明,硫酸沙丁胺醇和异丙托溴铵分别在0.1~2.0 mg/L和0.075~2.4 mg/L浓度范围线性良好(r值均大于0.999)。复方异丙托溴铵溶液雾化气溶胶中硫酸沙丁胺醇和异丙托溴铵加样回收率分别为97.8%和102.3%。雾化气溶胶中硫酸沙丁胺醇和异丙托溴铵提取方法的回收率分别为96.1%和97.1%。在吸入暴露装置中经雾化5 min和35 min后,气溶胶中硫酸沙丁胺醇含量分别为22.39和3.21 mg/m^(3),异丙托溴铵含量分别为22.34和3.23 mg/m^(3),回收率均不低于99.5%,RSD不大于1.9%,表明雾化5 min即达到稳定。本方法适用于吸入用复方异丙托溴铵溶液雾化气溶胶的药物含量测定,也可为吸入制剂雾化气溶胶供试品分析提供参考。

关键词：高效液相色谱法吸入用复方异丙托溴铵溶液异丙托溴铵硫酸沙丁胺醇雾化气溶胶

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酒石酸阿福特罗大鼠肺内药动学研究

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中国药学杂志 2020年第17期55卷 1456-1459页

作者：平丽洪雅雯朱狄峰浙江大学药物安全评价研究中心杭州310058

目的建立测定大鼠肺脏中酒石酸阿福特罗含量的LC-MS/MS方法,研究酒石酸阿福特罗在大鼠肺脏内的药动学特征。方法SD大鼠雾化给予酒石酸阿福特罗吸入溶液,不同时间点取大鼠肺脏组织并以LC-MS/MS测定肺脏内药物含量,采用DAS3.0软件处理,计... 详细信息

目的建立测定大鼠肺脏中酒石酸阿福特罗含量的LC-MS/MS方法,研究酒石酸阿福特罗在大鼠肺脏内的药动学特征。方法SD大鼠雾化给予酒石酸阿福特罗吸入溶液,不同时间点取大鼠肺脏组织并以LC-MS/MS测定肺脏内药物含量,采用DAS3.0软件处理,计算药动学参数并进行统计学分析。结果大鼠肺脏中酒石酸阿福特罗的主要药动学参数t1/2为15.55 h,cmax为16.48 ng·g-1,AUC0-t为48.41 ng·h·g-1,MRT0-t为5.45 h。结论大鼠雾化给予酒石酸阿福特罗吸入溶液后,在肺脏内分布快,半衰期较长,并能维持一段时间,提示酒石酸阿福特罗雾化给药能有效用于治疗慢性阻塞性肺疾病。

关键词：酒石酸阿福特罗肺脏组织药动学

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氯吡脲连续灌胃给药4周对大鼠的毒性作用

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农药学学报 2018年第3期20卷 323-332页

作者：平丽钱仁云洪雅雯陈超朱狄峰浙江大学药物安全评价研究中心

为明确氯吡脲对大鼠的毒性作用,采用150、300和600 mg/kg剂量分别向SD大鼠灌胃（ig）给予氯吡脲,每日1次,连续给药4周。每日观察大鼠的中毒状况和死亡情况,每周记录体质量和摄食量;于停药后第1天和第15天分别处死SD大鼠,检测血常规、血... 详细信息

为明确氯吡脲对大鼠的毒性作用,采用150、300和600 mg/kg剂量分别向SD大鼠灌胃（ig）给予氯吡脲,每日1次,连续给药4周。每日观察大鼠的中毒状况和死亡情况,每周记录体质量和摄食量;于停药后第1天和第15天分别处死SD大鼠,检测血常规、血清生化和凝血功能;取主要脏器进行称量,计算其脏器系数并进行常规病理组织学检查。结果发现：连续给药4周,氯吡脲对大鼠体质量、摄食量、血常规和凝血均无明显影响。停药后第1天,与溶剂对照组比较,氯吡脲300 mg/kg及以上剂量处理组雄性大鼠的尿素氮和肌酐含量明显升高（P〈0.05）,600 mg/kg剂量组血糖显著升高（P〈0.05）,其中,600 mg/kg处理组雄性大鼠的尿素氮、肌酐和血糖分别是对照的1.9、1.6和1.3倍。氯吡脲300 mg/kg及以上剂量组雌、雄性大鼠的肾脏系数均明显升高（P〈0.05）,其中300 mg/kg剂量组雌、雄性大鼠的肾脏系数分别是对照的1.2和1.1倍,600 mg/kg剂量组雌、雄性大鼠的肾脏系数分别是对照的1.4和1.1倍;300和600 mg/kg剂量组雌性大鼠的肝脏系数明显升高（P〈0.01）,分别是对照的1.3和1.9倍。病理切片检查可见肾脏病理组织学改变,主要表现为轻度肾管萎缩,明显的白细胞管型、透明管型、间质炎性细胞浸润及肾小管扩张。停药后第15天,上述毒性反应症状有所恢复。研究表明,SD大鼠经连续灌胃给予氯吡脲4周,在600 mg/kg剂量下表现为明显肾脏毒性反应,在300 mg/kg剂量下表现为较轻微的肾脏毒性反应,推测氯吡脲的主要毒性靶器官可能是肾脏;其未见明显毒性反应剂量为150 mg/kg。

关键词：氯吡脲毒性试验 SD大鼠灌胃给药病理改变肾脏毒性

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超高效液相色谱-串联质谱法测定大鼠血浆中托品酸浓度

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分析试验室 2021年第4期40卷 444-448页

作者：朱狄峰童振轩平丽浙江大学药学院药物安全评价研究中心杭州310058

建立测定大鼠血浆中托品酸浓度的超高效液相色谱-串联质谱法。以双氯芬酸钠作为内标,采用Phenomenex Luna C18色谱柱,流动相为0.1%甲酸水-乙腈溶液,运行时间为4.5 min,梯度洗脱,流速为0.3 mL/min,进样量为5μL,柱温40℃。样品经大气压... 详细信息

建立测定大鼠血浆中托品酸浓度的超高效液相色谱-串联质谱法。以双氯芬酸钠作为内标,采用Phenomenex Luna C18色谱柱,流动相为0.1%甲酸水-乙腈溶液,运行时间为4.5 min,梯度洗脱,流速为0.3 mL/min,进样量为5μL,柱温40℃。样品经大气压力化学离子源负离子化后,通过三重四极杆串联质谱仪,在多反应监测模式下测定托品酸(m/z 164.93→102.93)和内标双氯芬酸钠(m/z 293.97→214.01)的浓度。血浆样品前处理采用甲醇沉淀蛋白。结果表明,托品酸的血浆浓度在40~25000 ng/mL内线性良好,定量下限为40 ng/mL,批内、批间精密度(RSDs)均在1.2%~6.7%以内,准确度(RE)在96.4%~113.8%以内。血浆样品室温放置6 h,样本处理后室温放置8 h,反复冻融3次及冰冻(-20℃)保存7 d的情况下均稳定。本方法适用于大鼠血浆中托品酸浓度的测定,也可为临床浓度监测提供依据。

关键词：超高效液相色谱-串联质谱法托品酸大鼠血浆浓度方法学验证

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高效液相色谱-串联质谱法分析硫酸特布他林雾化气溶胶含量及空气动力学粒径分布

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分析试验室 2023年第4期42卷 521-527页

作者：朱狄峰石萌洪雅雯赵剑岚钱仁云浙江大学药学院药物安全评价研究中心杭州310058

建立了一种高效液相色谱-三重四极杆串联质谱法测定雾化吸入装置中硫酸特布他林雾化液气溶胶含量和分析空气动力学粒径分布情况的方法。确定50%甲醇水为最优提取溶剂。采用BEH C18色谱柱分离,0.1%甲酸水和乙腈为流动相进行等度洗脱,分... 详细信息

建立了一种高效液相色谱-三重四极杆串联质谱法测定雾化吸入装置中硫酸特布他林雾化液气溶胶含量和分析空气动力学粒径分布情况的方法。确定50%甲醇水为最优提取溶剂。采用BEH C18色谱柱分离,0.1%甲酸水和乙腈为流动相进行等度洗脱,分析时间为2 min,正离子模式下多反应监测模式测定。采用该方法对雾化5 min和25 min气溶胶的平均药物浓度和空气动力学粒径分布进行了分析。结果显示,硫酸特布他林在0.5~600 ng/mL范围内线性关系良好(r>0.999),定量限为0.5 ng/mL;硫酸特布他林日内及日间相对标准偏差(RSD)分别为0.3%~4.5%和0.8%~4.8%。雾化气溶胶的平均提取回收率为98.5%,RSD为2.6%。抽气采集法下雾化5 min和25 min气溶胶的平均药物含量分别为15.8和15.9 mg/m^(3),总体RSD为2.5%,撞击器采集法下雾化5 min和25 min时的平均药物含量分别为16.2和16.8 mg/m^(3),平均质量中值空气动力学粒径(MMAD)分别为2.32和2.28μm。本方法用于硫酸特布他林雾化气溶胶的浓度测定和空气动力学粒径分布分析,在吸入装置中雾化5 min后药物浓度即达到均一。随着雾化时间延长,雾化装置内硫酸特布他林雾化气溶胶的空气动力学粒径分布相对稳定。

关键词：高效液相色谱-串联质谱法硫酸特布他林吸入溶液撞击器空气动力学粒径分布气溶胶

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吡哆醇缓解顺铂诱导急性肾毒性的作用及机制

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中国现代应用药学 2024年第1期41卷 1-8页

作者：唐冰冰王海畅洪玲王佳佳翁勤洁浙江大学药学院药物安全评价研究中心杭州310058

目的探究吡哆醇是否能够缓解顺铂诱导的急性肾损伤并分析其具体作用机制。方法建立顺铂诱导的HK-2细胞损伤的体外模型后,给予不同浓度的吡哆醇,利用SRB检测细胞存活率,Western blotting检测细胞凋亡和抗氧化蛋白表达,试剂盒检测活性氧分... 详细信息

目的探究吡哆醇是否能够缓解顺铂诱导的急性肾损伤并分析其具体作用机制。方法建立顺铂诱导的HK-2细胞损伤的体外模型后,给予不同浓度的吡哆醇,利用SRB检测细胞存活率,Western blotting检测细胞凋亡和抗氧化蛋白表达,试剂盒检测活性氧分子(reactive oxygen species,ROS)和超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)的含量。进一步建立顺铂诱导的体内肾损伤小鼠模型,给予40 mg·kg^(–1)吡哆醇治疗后检测血清尿素氮水平,分析肾组织的苏木素-伊红染色结果,通过Western blotting检测NRF2的表达。结果吡哆醇在HK-2细胞和小鼠体内均具有保护顺铂诱导的急性肾损伤的作用,在HK-2细胞中吡哆醇下调了ROS水平、上调了SOD酶活力、促进了NRF2及其下游抗氧化相关基因HO-1的表达;在肾损伤小鼠体内,吡哆醇显著降低血清尿素氮水平、修复肾脏组织损伤、上调NRF2表达。结论吡哆醇通过抗氧化应激作用保护了顺铂诱导的急性肾损伤。

关键词：吡哆醇顺铂急性肾脏损伤氧化应激

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盐酸溴己新雾化气溶胶浓度测定及空气动力学粒径分布分析

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中国药学杂志 2022年第21期57卷 1834-1841页

作者：朱狄峰石萌洪雅雯赵剑岚钱仁云浙江大学药学院药物安全评价研究中心杭州310058

目的建立液相色谱-三重四极杆串联质谱法(LC-MS/MS)测定盐酸溴己新雾化气溶胶浓度和分析其粒径分布,并比较注射器采样法及撞击器采样法的差异。方法采用BEH C_(18)色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.7μm)分离,流动相为体积分数0.1%甲酸水和... 详细信息

目的建立液相色谱-三重四极杆串联质谱法(LC-MS/MS)测定盐酸溴己新雾化气溶胶浓度和分析其粒径分布,并比较注射器采样法及撞击器采样法的差异。方法采用BEH C_(18)色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.7μm)分离,流动相为体积分数0.1%甲酸水和乙腈,分析时长为2 min,正离子模式下多反应监测测定。同时,对液质联用方法进行了方法学验证,采用该方法对注射器采样法及撞击器采样法采样获得的雾化气溶胶样本进行浓度测定,并基于撞击器采样法计算气溶胶的空气动力学粒径分布。结果建立的方法专属性、线性、定量限、精密度、准确度、提取回收率和稳定性良好。注射器采样法下总体气溶胶平均药物浓度为17.2 mg·m^(-3),撞击器采样法下则为16.8 mg·m^(-3)。基于撞击器采样法分析得到雾化时间在5和45 min的气溶胶平均质量中值空气动力学粒径(MMAD)分别为2.21和2.24μm,几何标准偏差(GSD)分别为2.76和2.75。结论本测定方法灵敏度高,精密度好,适用于盐酸溴己新雾化气溶胶浓度测定和粒径分布分析。两种样本采集方式的浓度测定结果基本一致,结果可为吸入制剂雾化气溶胶分析提供参考。

关键词：液相色谱-串联质谱法盐酸溴己新撞击器采样法注射器采样法空气动力学粒径分布雾化气溶胶

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UHPLC-MS/MS法分析氯化乙酰甲胆碱雾化气溶胶浓度

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分析测试学报 2021年第8期40卷 1145-1150页

作者：朱狄峰赵剑岚洪雅雯钱仁云陈超平丽浙江大学药学院药物安全评价研究中心浙江杭州310058

建立了超高效液相色谱-三重四极杆质谱(UHPLC-MS/MS)测定吸入雾化装置中氯化乙酰甲胆碱气溶胶药物浓度的方法。采用ACQUITY BEH C_(18)(2.1 mm×100 mm,1.7μm)色谱柱,以0.1%甲酸水和乙腈作为流动相梯度洗脱,流速为0.3 mL/min,进样... 详细信息

建立了超高效液相色谱-三重四极杆质谱(UHPLC-MS/MS)测定吸入雾化装置中氯化乙酰甲胆碱气溶胶药物浓度的方法。采用ACQUITY BEH C_(18)(2.1 mm×100 mm,1.7μm)色谱柱,以0.1%甲酸水和乙腈作为流动相梯度洗脱,流速为0.3 mL/min,进样量为5μL,分析时间为5 min,柱温为40℃,多反应监测(MRM)正离子模式测定。同时,对专属性、线性、仪器精密度、加标回收率、提取回收率和稳定性分别进行了考察。结果表明,氯化乙酰甲胆碱在10~100 ng/mL质量浓度范围内线性良好(r> 0.999),定量下限为10 ng/mL;氯化乙酰甲胆碱雾化气溶胶的平均加标回收率为99.2%,平均相对标准偏差(RSD)为0.80%;雾化气溶胶的平均提取回收率为95.7%。在吸入暴露装置中雾化1 min后,气溶胶的平均药物浓度为608.1 mg/m^(3),上、中、下位置的RSD为1.2%,表明雾化1 min氯化乙酰甲胆碱气溶胶浓度即达到均一。该方法灵敏度高,精密度好,适用于氯化乙酰甲胆碱雾化气溶胶的浓度测定,也可为吸入制剂雾化气溶胶供试品分析提供参考。

关键词：超高效液相色谱-串联质谱法氯化乙酰甲胆碱雾化气溶胶吸入制剂

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