检索结果-内蒙古大学图书馆

家蚕杆状病毒基因Bm122位于BmNPV(T3株)基因组116325-116928nt,读码框全长606bp,编码201个氨基酸.有研究表明Bm122的转录起始于转染后3h,并且由宿主的RNA聚合酶Ⅱ所转录,由此推测Bm122是一个早期基因.Bm122起始密码子上游240nt和189nt... 详细信息

家蚕杆状病毒基因Bm122位于BmNPV(T3株)基因组116325-116928nt,读码框全长606bp,编码201个氨基酸.有研究表明Bm122的转录起始于转染后3h,并且由宿主的RNA聚合酶Ⅱ所转录,由此推测Bm122是一个早期基因.Bm122起始密码子上游240nt和189nt处分别有CAGT和TATA盒结构,编码的蛋白大小为23KDa左右,Bm122编码的蛋白定位于细胞核内.

关键词： BmNPV Bm122 Red重组病毒复制病毒转录

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一种葡聚糖活性检测的新方法

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浙江理工大学学报（自然科学版） 2013年第5期30卷 738-741页

作者：张晓菲严珍珍谢辛慈吴佳宋如鋆舒建洪吕正兵浙江理工大学生命科学学院生物化学研究所杭州310018 浙江理工大学浙江省家蚕生物反应器和生物医药重点实验室杭州310018

大多具有分支的β-(1-3)-D-葡聚糖具有免疫调节及抗肿瘤活性。文章利用人单核白血病THP-1细胞株建立细胞水平上葡聚糖生物活性的检测方法,实现高通量筛选活性多糖。THP-1细胞在不同浓度的葡聚糖刺激48h后离心收集上清,ELISA法检测其释... 详细信息

大多具有分支的β-(1-3)-D-葡聚糖具有免疫调节及抗肿瘤活性。文章利用人单核白血病THP-1细胞株建立细胞水平上葡聚糖生物活性的检测方法,实现高通量筛选活性多糖。THP-1细胞在不同浓度的葡聚糖刺激48h后离心收集上清,ELISA法检测其释放细胞因子浓度,以筛选有效的评价指标。结果显示:THP-1细胞在不同葡聚糖刺激下,细胞培养液中IFN-α含量变化明显。IFN-α可作为在细胞水平上评价葡聚糖活性的标准检测指标。该方法既克服了动物实验工作量大、成本高,又克服了原代细胞不稳定等因素,为高通量筛选活性多糖提供了新途径。

关键词： THP-1 葡聚糖活性检测高通量筛选

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HIV病毒结构蛋白Gag在家蚕中的表达

HIV病毒结构蛋白Gag在家蚕中的表达

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华东六省一市生物化学与分子生物学学会2014年学术交流大会暨浙江省第十一届学会会员代表大会

作者：李司陈贝妮何丹枫章杰黄梦园邹日泽麦丽丽浙江理工大学生命科学学院生物化学研究所浙江省家蚕生物反应器和生物医药重点实验室

人类免疫缺陷病毒HIV-1（human immunodeficiency virus,HIV）是艾滋病（AIDS）的主要病原之一。Gag基因编码HIV病毒的核心蛋白,Gag蛋白有自我装配功能,并能激发体液免疫和细胞免疫。本实验将Gag基因克隆到家蚕杆状病毒中,得到重组家蚕... 详细信息

人类免疫缺陷病毒HIV-1（human immunodeficiency virus,HIV）是艾滋病（AIDS）的主要病原之一。Gag基因编码HIV病毒的核心蛋白,Gag蛋白有自我装配功能,并能激发体液免疫和细胞免疫。本实验将Gag基因克隆到家蚕杆状病毒中,得到重组家蚕杆状病毒,命名为BmNPV-Gag,并用该重组病毒感染家蚕BmN细胞和5龄幼虫。SDS-PAGE、Western blotting检测显示在与Gag蛋白大小相符的55kD处,重组病毒感染的细胞和家蚕五龄幼虫血淋巴均有特异性条带出现,证明Gag蛋白在家蚕中成功表达。我们用ELISA法测定目的蛋白的表达量以及蛋白表达量与感染时间（感染后2-7天）的关系。检测结果表明,家蚕BmN细胞中的Gag蛋白含量在感染后的第4天达到最大值6.995μg/1*10～6个细胞。然而在第5天后,出现下降趋势。五龄幼虫血淋巴中的Gag蛋白含量在感染后的第7天达到最高,0.7901μg/mL。Gag基因成功在家蚕杆状病毒中的成功表达为艾滋病基因工程疫苗的研究提供了一个新的可用材料。

关键词： Gag蛋白家蚕反应器 HIV

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马传染性贫血病毒gp90蛋白的表达及其在诊断中的潜在应用

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科技通报 2009年第3期25卷 300-304页

作者：陈新江毛洁孟庆来张晓燕张耀洲浙江理工大学生命科学学院生物化学研究所杭州310018 浙江省家蚕生物反应器和生物医药重点实验室杭州310018 中国疾病预防控制中心性病艾滋病预防与控制中心病毒与免疫研究室北京100050

以质粒pVRCSV1.0-syn-gp90为模板,利用PCR扩增马传染性贫血病毒外膜蛋白基因(gp90),构建了原核表达质粒pET-28a(+)-gp90,然后转化大肠杆菌Rosetta(DE3),诱导表达并纯化该重组蛋白,ELISA和Western blot证明马的阳性血清可以识别该重组蛋... 详细信息

以质粒pVRCSV1.0-syn-gp90为模板,利用PCR扩增马传染性贫血病毒外膜蛋白基因(gp90),构建了原核表达质粒pET-28a(+)-gp90,然后转化大肠杆菌Rosetta(DE3),诱导表达并纯化该重组蛋白,ELISA和Western blot证明马的阳性血清可以识别该重组蛋白。以纯化的融合蛋白免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体,测定的效价为1∶13,000。

关键词： gp90基因原核表达纯化 EIAV 诊断

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家蚕表达人促红细胞生成素口服急性毒性和初步药效学研究

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浙江理工大学学报（自然科学版） 2014年第6期31卷 728-733页

作者：李杰谭淑敏王小飞舒特俊于威张耀洲陈剑清浙江理工大学生物化学研究所杭州310018 浙江理工大学浙江省家蚕生物反应器和生物医药重点实验室杭州310018 天津国际生物医药联合研究院天津300457 天津大学药物科学与技术学院天津300457

为了研究家蚕表达的重组人促红细胞生成素(BmrhEPO)口服治疗肾性贫血的疗效并评价安全性,进行了小鼠口服BmrhEPO急性毒性实验,结果显示其对小鼠基本无毒或毒性极低,小鼠口服BmrhEPO最大耐受剂量大于147 882IU/kg。肾性贫血小鼠以剂量为6... 详细信息

为了研究家蚕表达的重组人促红细胞生成素(BmrhEPO)口服治疗肾性贫血的疗效并评价安全性,进行了小鼠口服BmrhEPO急性毒性实验,结果显示其对小鼠基本无毒或毒性极低,小鼠口服BmrhEPO最大耐受剂量大于147 882IU/kg。肾性贫血小鼠以剂量为62 865IU/kg和20 955IU/kg的两个剂量组连续口服BmrhEPO一周,以小鼠血液网织红细胞数及百分率为药效指标,结果显示口服有药效,并且药效与剂量呈正相关。本实验为开发重组人促红细胞生成素口服药物提供了理论指导和实验基础。

关键词：家蚕 EPO 口服急性毒性肾性贫血

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