检索结果-内蒙古大学图书馆

绍兴文理学院学报 2023年第2期43卷 32-40页

作者：伍诗路沈颖陆剑飞王成雨杨勇陈剑平安徽农业大学农学院安徽合肥230000 浙江省农业科学院病毒学与生物技术研究所农产品质量安全危害因子与风险防控国家重点实验室浙江杭州310021 浙江省植保检疫与农药管理总站浙江杭州310000

水稻白叶枯病是一种严重的细菌性病害,对浙江省乃至全国的水稻生产造成了严重影响,其病原菌为水稻黄单胞菌水稻致病变种(Xanthomonas oryzae ***,Xoo),因此分析稻黄单胞菌的基因组信息有利于该病菌致病机制的研究和水稻白叶枯病的防控.2... 详细信息

水稻白叶枯病是一种严重的细菌性病害,对浙江省乃至全国的水稻生产造成了严重影响,其病原菌为水稻黄单胞菌水稻致病变种(Xanthomonas oryzae ***,Xoo),因此分析稻黄单胞菌的基因组信息有利于该病菌致病机制的研究和水稻白叶枯病的防控.2020年从浙江省温州市水稻白叶枯重病区采集的发病叶片中分离到一株稻黄单胞菌,并将其命名为ZX002.采用高通量测序技术对ZX002菌株进行全基因组测序,并利用生物信息学方法对其进行基因组组分和功能分析,结果表明该菌株的全基因组总长度为4749798 bp,预测到4440个编码基因,编码基因总长度为4031775 bp,同时还包括253个非编码RNA,分别为:53个tRNA,194个sRNA,2个5s rRNA,2个16s rRNA和2个23s rRNA.全基因组共检测到23个基因岛,并检测到1个非核糖体肽合成酶(non-ribosomal peptide synthetase,NRPS)基因簇.全基因组功能注释表明,ZX002菌株的预测基因主要富集在氨基酸、碳水化合物、辅助因子及维生素代谢和能量代谢等途径中.

关键词：水稻白叶枯病稻黄单胞菌全基因组测序基因组完成图功能分析

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小麦黄花叶病毒P3蛋白致病功能域的鉴定和分析

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浙江农业学报 2019年第5期31卷 777-783页

作者：张岩亓玉华鲁燕华杨乾坤何雨娟李俊敏陈剑平福建农林大学植物保护学院福建福州350002 浙江省植物有害生物防控国家重点实验室培育基地农业农村部/浙江省植保生物技术重点实验室浙江省农业科学院病毒学与生物技术研究所浙江杭州310021 宁波大学植物病毒学研究所浙江宁波315211

小麦黄花叶病毒(Wheat yellow mosaic virus,WYMV)隶属于马铃薯Y病毒科(Potyviridae)大麦黄花叶病毒属(Bymovirus),其基因组由两条正义单链RNA组成,共编码10个蛋白。先前的研究表明,马铃薯Y病毒组多种病毒编码的保守蛋白P3具有多种功能... 详细信息

小麦黄花叶病毒(Wheat yellow mosaic virus,WYMV)隶属于马铃薯Y病毒科(Potyviridae)大麦黄花叶病毒属(Bymovirus),其基因组由两条正义单链RNA组成,共编码10个蛋白。先前的研究表明,马铃薯Y病毒组多种病毒编码的保守蛋白P3具有多种功能,在病毒复制、致病性、克服宿主抗性、细胞间移动等方面均具有重要作用,而P3在大麦黄花叶病毒属中是否有类似功能目前还未见报道。本研究利用烟草脆裂病毒(Tobacco rattle virus,TRV)介导的本氏烟基因沉默系统,明确了WYMV的P3碳端在本氏烟上具有致病功能域P3-C,但完整的P3则不具有致病能力。进一步移码突变研究表明,P3-C的致病性是由其编码的多肽引起的,而非病毒来源的小干扰RNA介导的宿主基因沉默。同时P3-C的两个跨膜结构域对致病性具有重要作用,单独表达任何一个跨膜结构域P3-C均不能在本氏烟上引起明显症状。

关键词：小麦黄花叶病毒 P3蛋白致病性

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五个抗稻瘟病基因在浙江省水稻品种中的分布和抗性评价

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浙江农业学报 2019年第6期31卷 922-929页

作者：何海燕柴荣耀邱海萍毛雪琴王艳丽孙国仓中国农业科学院研究生院北京100080 浙江省农业科学院病毒学与生物技术研究所浙江杭州310021 浙江省植物有害生物防控重点实验室-省部共建国家重点实验室培育基地浙江杭州310021

为了明确浙江省部分水稻主栽品种和中国稻瘟菌生理小种鉴别品种中稻瘟病抗性基因分布情况,本研究采用5个基于稻瘟病抗感等位基因序列设计的功能性分子标记,对40份浙江省水稻主栽品种和6份稻瘟菌鉴别品种中Pit、Pib、Pii/Pi3/Pi5、Pia、... 详细信息

为了明确浙江省部分水稻主栽品种和中国稻瘟菌生理小种鉴别品种中稻瘟病抗性基因分布情况,本研究采用5个基于稻瘟病抗感等位基因序列设计的功能性分子标记,对40份浙江省水稻主栽品种和6份稻瘟菌鉴别品种中Pit、Pib、Pii/Pi3/Pi5、Pia、Pi1等5个稻瘟病抗性基因进行了分子检测。结果发现,这5个抗性基因在浙江省栽培品种中分布频率不同,其中Pib基因分布最广,占63.04%;其次是Pia,占58.70%;携带Pii/Pi3/Pi5和Pit抗性基因的材料较少,分别为21.74%和10.87%。同时用2015—2017年田间采集到的141个稻瘟菌菌株检测46个水稻品种苗瘟抗性水平,结果显示,其中仅15个品种的抗性频率在70%以上,大部分品种携带其中1~2个抗性基因。聚合了多个抗性基因的品种抗性水平相对较高。

关键词：水稻稻瘟病抗病基因分子标记

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水稻小热休克蛋白OsHSP20抗体特性鉴定及应用

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中国水稻科学 2019年第3期33卷 235-240页

作者：何婧刘寒郭留明李静张恒木浙江师范大学化学与生命科学学院浙江金华321004 浙江省农业科学院病毒学与生物技术研究所/省部共建植物有害生物国家重点实验室培育基地杭州310021

【目的】在前期克隆了一个水稻小热休克蛋白(OsHSP20)的基础上,进一步分析该蛋白多克隆抗体的免疫反应特性和应用范围,为深入鉴定该类基因的功能奠定基础。【方法】利用合成多肽和其原核表达产物分别免疫家兔制备了相应的多克隆抗体;ACP... 详细信息

【目的】在前期克隆了一个水稻小热休克蛋白(OsHSP20)的基础上,进一步分析该蛋白多克隆抗体的免疫反应特性和应用范围,为深入鉴定该类基因的功能奠定基础。【方法】利用合成多肽和其原核表达产物分别免疫家兔制备了相应的多克隆抗体;ACP(Antigen-coated plate)-ELISA和dot-ELISA用于分析比较多克隆抗体效价和灵敏度;Western blot用于鉴定多克隆抗体的特异性和应用范围。【结果】Western blot分析显示,利用重组OsHSP20蛋白及其合成多肽所制备的多克隆抗体均可以在原核表达OsSHSP样品中特异性检测到1条大小与预期一致(37kD)的条带,表明两种方法获得的多克隆抗体都具有高度的特异性;ACP(Antigen-coated plate)-ELISA和dot-ELISA分析表明,利用重组蛋白制备的多克隆抗体效价和灵敏度均高于利用多肽制备的抗体。进一步的Westernblot分析显示该抗体可用于多种植物小热休克蛋白(SHSP)的检测。【结论】制备了OsHSP20蛋白质抗体,且具有高度的特异性和较高的效价和灵敏度,可广泛地用于多种单、双子叶植物HSP20蛋白的表达分析,有助于OsHSP20及其他植物同源蛋白的功能鉴定。

关键词：小热休克蛋白多克隆抗体蛋白质印迹法

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植物褪黑素的研究进展

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江苏农业科学 2020年第24期48卷 17-24页

作者：陈贤杨勇刘凤权江苏省农业科学院植物保护研究所江苏南京210014 浙江省农业科学院病毒学与生物技术研究所浙江杭州310021 江苏省食品质量安全重点实验室-省部共建国家重点实验室培育基地江苏南京210014

褪黑素(melatonin,简称MT)是生物进化中一种保守的胺类激素,广泛存在于动物、植物及微生物体内。在植物中,褪黑素在调控植物生长和提高植物响应环境胁迫等方面发挥重要的作用。本文从植物褪黑素的发现、分子结构及化学性质、植物褪黑素... 详细信息

褪黑素(melatonin,简称MT)是生物进化中一种保守的胺类激素,广泛存在于动物、植物及微生物体内。在植物中,褪黑素在调控植物生长和提高植物响应环境胁迫等方面发挥重要的作用。本文从植物褪黑素的发现、分子结构及化学性质、植物褪黑素的合成与分解代谢等方面进行了归纳与总结,重点阐述了褪黑素在植物生长与发育中的生理功能及在植物抗逆抗病中的调控作用,并对未来植物褪黑素的研究方向进行了展望。

关键词：植物褪黑素分子结构化学性质生理功能环境胁迫

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复合侵染的马铃薯花叶病病原诊断

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浙江农业学报 2018年第1期30卷 99-105页

作者：宋西娇谢礼宣裕吉王芳严成其陈剑平浙江省植物有害生物防控重点实验室-省部共建国家重点实验室培育基地农业部植保生物技术重点实验室浙江省农业科学院病毒与生物技术研究所浙江杭州310021 浙江省农业科学院公共实验平台浙江杭州310021 宁波市鄞州区种子推广管理站浙江宁波315100 宁波市农业科学院生物技术研究所浙江宁波315101

2015年在浙江宁波发现感病马铃薯植株具有马铃薯花叶病的典型症状,即植株矮化,叶片花叶、皱缩。透射电镜负染色发现,其叶片中含有长度约600~900和400 nm的线状病毒粒子。超薄切片发现,病毒主要集中在叶肉细胞,产生的内含体包括病毒样粒... 详细信息

2015年在浙江宁波发现感病马铃薯植株具有马铃薯花叶病的典型症状,即植株矮化,叶片花叶、皱缩。透射电镜负染色发现,其叶片中含有长度约600~900和400 nm的线状病毒粒子。超薄切片发现,病毒主要集中在叶肉细胞,产生的内含体包括病毒样粒子聚集体、串珠-片层内含体和柱状内含体。串珠-片层内含体代表马铃薯X属特征,柱状内含体代表马铃薯Y属特征,表明可能存在复合侵染,并且2种不同病毒引起的内含体被发现于同一细胞。使用马铃薯Y属病毒通用引物以及针对马铃薯X病毒设计的特异性引物进行RT-PCR扩增及测序,明确其为马铃薯Y病毒(Potato virus Y,PVY)和马铃薯X病毒(Potato virus X,PVX)复合侵染。

关键词：马铃薯花叶病马铃薯X病毒马铃薯Y病毒复合侵染病原诊断

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本氏烟DnaJ-like蛋白在芜菁花叶病毒侵染过程中的作用

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浙江农业学报 2018年第12期30卷 2056-2064页

作者：孙超尘燕飞陈剑平云南农业大学植物保护学院云南昆明650201 浙江省植物有害生物防控国家重点实验室培育基地农业农村部植保生物技术重点实验室浙江省植保生物技术重点实验室浙江省农业科学院病毒学与生物技术研究所浙江杭州310021

热休克蛋白40(HSP40)因其蛋白家族含有保守的J结构域又被称为DnaJ蛋白,其同源蛋白被称为DnaJ-like蛋白。研究表明,DnaJ蛋白家族响应了多种病毒的侵染,但发挥作用的方式各不相同。芜菁花叶病毒(TuMV)是一类重要的蔬菜病毒,给蔬菜生产造... 详细信息

热休克蛋白40(HSP40)因其蛋白家族含有保守的J结构域又被称为DnaJ蛋白,其同源蛋白被称为DnaJ-like蛋白。研究表明,DnaJ蛋白家族响应了多种病毒的侵染,但发挥作用的方式各不相同。芜菁花叶病毒(TuMV)是一类重要的蔬菜病毒,给蔬菜生产造成严重经济损失。DnaJ-like蛋白是否响应TuMV侵染,是否在TuMV侵染过程中发挥作用目前尚不清楚。本实验在本氏烟中克隆了分属DnaJ蛋白A类亚家族和B类亚家族的16条基因; qRT-PCR分析表明,DnaJ-like蛋白家族基因在TuMV侵染后表达上调。分别沉默2个亚家族的典型基因NbJ1和NbJ5后,TuMV在沉默植株上的病毒积累量显著较少。结果表明,DnaJ-like蛋白可能在TuMV侵染过程中发挥作用,这为深入了解TuMV的致病机制提供了新思路。

关键词：热休克蛋白40 芜菁花叶病毒同源性分析

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水稻温敏转绿突变体osv15的鉴定和遗传分析

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中国水稻科学 2018年第4期32卷 349-356页

作者：齐岳翰李瑞莉王芳刘洪家易可可朱诚中国计量大学生命科学学院杭州310018 浙江省农业科学院病毒学与生物技术研究所/省部共建国家重点实验室培育基地―浙江省植物有害生物防控重点实验室杭州310021 浙江师范大学化学与生命科学学院浙江金华321000 中国农业科学院农业资源与农业区划研究所北京100081

【目的】本研究旨在鉴定和克隆水稻温敏转绿新基因,揭示其参与叶绿体发生发育和光合作用的分子机制,为高光效育种提供理论支撑。【方法】利用辐射诱变的方法,从粳稻品种日本晴中筛选获得叶片黄化突变体osv15,并对其表型、农艺性状和遗... 详细信息

【目的】本研究旨在鉴定和克隆水稻温敏转绿新基因,揭示其参与叶绿体发生发育和光合作用的分子机制,为高光效育种提供理论支撑。【方法】利用辐射诱变的方法,从粳稻品种日本晴中筛选获得叶片黄化突变体osv15,并对其表型、农艺性状和遗传方式进行详细分析。构建了突变体与Kasalath的F2群体,利用多态性分子标记对目的基因进行定位和测序分析。【结果】osv15幼苗期在22℃低温下叶片黄化,叶绿素含量仅为野生型的10%,光化学效率下降,叶绿体结构异常;随着温度的升高,osv15的叶色由黄转绿,30℃时叶绿素含量恢复到野生型的68%,光化学效率和叶绿体发育与野生型相近。在自然环境下,osv15突变体从苗期至成熟期均表现为叶片黄化,且株高、分蘖数和产量等农艺性状与野生型相比差异显著。遗传分析表明osv15突变体的表型由一对隐性核基因控制。将Os V15基因定位到第6染色体多态性标记S4和S5之间84 kb的区间内,定位区间测序发现突变体中编码分子伴侣蛋白的基因Cpn60β1(LOC_Os06g02380)发生单碱基缺失。【结论】osv15是一个新的水稻温敏转绿突变体,Cpn60β1可能为突变基因。

关键词：水稻温敏叶绿体基因定位

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低磷条件下过表达OsPHF1基因对粳稻农艺性状的影响

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中国水稻科学 2018年第6期32卷 557-564页

作者：胡张华刘秀艳王玉锋彭瑜史晓亮滕胜浙江省农业科学院病毒学与生物技术研究所浙江省植物有害生物防控重点实验室-省部共建国际重点实验室培育中心杭州310021 杭州电子科技大学材料与环境工程学院杭州310018 中国科学院上海植物生理生态研究所/分子植物卓越中心光合作用与环境生物学实验室上海200032

【目的】磷酸盐转运体运输协助因子(PHF1)通过转录后调节特定磷转运蛋白,影响磷酸盐的利用效率。本研究通过培育过表达OsPHF1的无选择标记转基因粳稻空育131,研究在不同磷浓度环境中OsPHF1的过表达对粳稻空育131产量的影响,为培育可商... 详细信息

【目的】磷酸盐转运体运输协助因子(PHF1)通过转录后调节特定磷转运蛋白,影响磷酸盐的利用效率。本研究通过培育过表达OsPHF1的无选择标记转基因粳稻空育131,研究在不同磷浓度环境中OsPHF1的过表达对粳稻空育131产量的影响,为培育可商品化的磷高效转基因水稻品种提供依据。【方法】利用双T-DNA方法构建OsPHF1的过表达载体,通过农杆菌侵染法和后续筛选获得了无选择标记的转基因空育131纯合株系,通过对T_3和T_4代转基因植株的田间试验,研究转基因品系在低磷浓度(75或112.5 kg/hm^2过磷酸钙)、中低磷浓度(225或300 kg/hm^2过磷酸钙)和正常磷浓度(450 kg/hm^2过磷酸钙)下的农艺性状。【结果】获得了3个无筛选标记的纯合OsPHF1过表达转基因空育131株系F18-18、F22-32和F25-6。其中,F22-32和F25-6的OsPHF1的表达量远高于野生型。大田试验显示,F22-32和F25-6株系的T_3代在中低磷(300kg/hm^2过磷酸钙)环境中,分蘖数比对照分别增加了55%和25%,增产幅度分别为38%和34%;F22-32和F25-6株系T_4代在低磷条件下(112.5kg/hm^2过磷酸钙)产量的增幅最大,增产了30%～35%;在中低磷条件下(225 kg/hm^2过磷酸钙)分蘖数和产量也有明显增加。【结论】双T-DNA法能用于培育过表达OsPHF1的无筛选标记转基因水稻。田间试验显示,高表达OsPHF1的转基因株系在中低磷条件下(112.5、225或300 kg/hm^2过磷酸钙)分蘖数和产量稳定增加。

关键词： OsPHF1 过表达无选择标记的转基因水稻低磷浓度产量

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侵染蚕豆ClYVV的鉴定及其衍生的小干扰RNA的深度测序鉴定研究

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浙江农业学报 2018年第3期30卷 406-412页

作者：张趁华郑红英严丹侃韩科雷彭杰军鲁宇文林林章东方陈剑平燕飞福建农林大学生命科学学院福建福州350002 浙江省农业科学院病毒学与生物技术研究所浙江省和农业部植保生物技术重点实验室省部共建浙江省植物有害生物防控国家重点实验室培育基地浙江杭州310021 安徽省农业科学院植物保护与农产品质量安全所安徽合肥230031 南京农业大学植物保护学院江苏南京210095

对安徽省合肥市采集到的具有明显典型花叶症状的蚕豆叶片进行深度测序,鉴定到样品中存在三叶草黄脉病毒(Clover yellow vein virus,Cl YVV),并获得了Cl YVV的完整基因组序列,随后通过直接测序扩增基因组区域获得完整的基因组Cl YVV-HF... 详细信息

对安徽省合肥市采集到的具有明显典型花叶症状的蚕豆叶片进行深度测序,鉴定到样品中存在三叶草黄脉病毒(Clover yellow vein virus,Cl YVV),并获得了Cl YVV的完整基因组序列,随后通过直接测序扩增基因组区域获得完整的基因组Cl YVV-HF。获得的Cl YVV-HF基因组由9 585个核苷酸组成,不包括poly(A)尾巴。Cl YVV-HF的全部核苷酸序列与之前报道的来自日本的分离株(AB011819、NC_003536)和来自韩国的分离株(KF975894)分别具有95.45%和95.10%的核苷酸同源性。进一步分析了Cl YVV-HF衍生的小干扰RNA的表征。vsiRNAs的大小为21~22 nt,vsiRNAs的5'末端碱基偏向于A/U。Cl YVV-HF来源的小干扰RNA大多来源于其基因组链中的7个热点,其中5个热点以21 nt vsiRNAs为主。生物学实验表明,Cl YVV可通过汁液摩擦接种多种豆科作物。这是有关中国Cl YVV分离株全部核苷酸序列的首次报道。

关键词：蚕豆 ClYVV 小干扰RNA

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