检索结果-内蒙古大学图书馆

园艺学报 2011年第6期38卷 1071-1080页

作者：徐红霞陈俊伟杨勇孙骏威严成其浙江省农业科学院园艺研究所杭州310021 浙江省农业科学院病毒学与生物技术研究所杭州310021 中国计量学院生命科学学院杭州310018

以白沙枇杷(Eriobotrya japonica Lindl.)‘宁海白’幼果为试材,通过RT-PCR与RACE扩增,获得两个具有脱水素基因典型结构域特征的cDNA序列。其中DHN1(GenBank登录号:FJ472835)全长639bp,编码188个氨基酸,属于Y2SK3类型;DHN2(GenBank登录号:FJ472836)全长858bp,编码273个氨基酸,属于SK3类型。用低温胁迫处理枇杷幼果,-3℃处理24h后电导率明显升高,表明细胞膜开始受到破坏,-6℃处理24h后电导率显著高于-3℃处理。半定量RT-PCR和Western-blotting分析结果表明这两个DHN基因在低温胁迫下的枇杷幼果中都上调表达,表明其与枇杷抗低温胁迫有一定关系。

关键词：枇杷 DHN 基因克隆低温胁迫表达分析

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水稻斑点叶突变体spl^(Z97)的生理特性及其基因定位

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作物学报 2017年第5期43卷 648-657页

作者：韦荔全罗延敏王文强池长程黄福灯向珣程方民潘刚浙江大学农业与生物技术学院浙江杭州310058 浙江省农业科学院作物与核技术利用研究所浙江杭州310021

通过EMS诱变籼稻恢复系珍97获得一个稳定遗传的褐色斑点叶突变体spl^(Z97)(spotted leaf Z97,spl^(Z97))。大田条件下,突变体spl^(Z97)的斑点叶性状始于分蘖期,此后由叶缘向叶中下部迅速扩散,直至整个叶片,严重时叶片部分或整体枯死,从... 详细信息

通过EMS诱变籼稻恢复系珍97获得一个稳定遗传的褐色斑点叶突变体spl^(Z97)(spotted leaf Z97,spl^(Z97))。大田条件下,突变体spl^(Z97)的斑点叶性状始于分蘖期,此后由叶缘向叶中下部迅速扩散,直至整个叶片,严重时叶片部分或整体枯死,从而致使突变体株高、每穗粒数及结实率极显著低于野生型对照。生理分析表明,与野生型珍97相比,孕穗期突变体spl^(Z97)剑叶、倒二叶和倒三叶的叶绿素含量极显著降低,而POD(peroxidase,POD)活性、O_2?~含量及MDA(malondialdehyde,MDA)含量升高;突变体spl^(Z97)倒二叶和倒三叶的CAT(catalase,CAT)活性和可溶性蛋白含量极显著降低,而SOD(superoxide dismutase,SOD)活性则极显著增加。组织化学分析进一步证实,突变体spl^(Z97)的叶片明显累积O_2?~。此外,突变体spl^(Z97)苗期经盐胁迫处理后,其株高及根长明显受到抑制。遗传分析表明,突变体spl^(Z97)的斑点叶性状受一对隐性核基因控制,借助图位克隆技术将该基因定位于第12染色体长臂的RM28466与RM28485两个SSR标记之间,物理距离为189 kb,该结果为进一步克隆SPL^(Z97)基因并研究其功能奠定了基础。

关键词：水稻 splZ97 斑点叶生理特性基因定位

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兔出血症病毒在体外诱导细胞凋亡

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病毒学报 2009年第4期25卷 316-317页

作者：倪征魏威刘光清陈柳余斌云涛华炯钢李双茂浙江省农业科学院病毒学与生物技术研究所浙江杭州310021 甘肃农业大学动物医学院甘肃兰州730070

The apoptosis of RK13 cells induced by RHDV was investigated with DAPI staining,DNA ladder,Caspase 3 activity and flow cytometry,*** results showed that nuclear staining of infected cells with DAPI showed gradually morphological changes of the *** shown in the paper,a canonic oligonucleosome-sized DNA ladder was observed in cells harvested at 24h,48h and 72h post-infection,confirming that DNA fragmentation was induced by RHDV *** results of flow cytometry showed that about 63 % of cells were in apoptosis at 48h ***,we also demonstrated that the activation of Caspase 3 occurred during the infection *** conclusion,our results showed that apoptosis in RHD might be determinant in the development of the pathogenesis of RHD.

关键词：兔出血症病毒 RK13细胞凋亡 Caspase-3

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水稻叶片早衰突变体ospls7的生理特性及其基因定位

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作物学报 2022年第7期48卷 1832-1842页

作者：黄福灯黄妍金泽艳贺焕焕李春寿程方民潘刚浙江省农业科学院作物与核技术利用研究所浙江杭州310021 浙江大学农业与生物技术学院浙江杭州310058

衰老是叶片发育的最后阶段,但叶片,尤其是功能叶,早衰将影响作物的产量与品质,因此,研究叶片早衰的分子生理机制对培育耐早衰优良品种具有重要意义。通过60Co-γ辐射诱变旱稻Monolaya获得一个稳定遗传的叶片早衰突变体ospls7,本文对其... 详细信息

衰老是叶片发育的最后阶段,但叶片,尤其是功能叶,早衰将影响作物的产量与品质,因此,研究叶片早衰的分子生理机制对培育耐早衰优良品种具有重要意义。通过60Co-γ辐射诱变旱稻Monolaya获得一个稳定遗传的叶片早衰突变体ospls7,本文对其形态、叶片衰老生理特征、茎节细胞特性以及衰老性状遗传与基因定位等方面进行了研究。大田条件下,突变体ospls7叶片早衰性状始于三至四叶期幼苗,主要表现为:叶尖及中上部叶边缘黄色褐化并最终枯萎,成熟期穗长和各茎节长度均极显著短于野生型对照,最终导致植株矮化。究其原因,可能是由于突变体茎节细胞变短。叶片衰老生理结果表明,与野生型对照相比,孕穗期突变体ospls7倒二叶和倒三叶的叶绿素总含量、净光合速率、可溶性蛋白、过氧化氢酶活性均极显著降低,致使其叶片中H2O2大量累积并引起丙二醛含量急剧增加。同时,孕穗期突变体ospls7剑叶、倒二叶和倒三叶的内源ABA含量均极显著高于野生型对照,qRT-PCR结果证实ABA大量累积的原因在于ABA合成基因OsNCED3和OsAAO3显著上调,而其代谢基因OsABA8ox2和OsABA8ox3则显著下调。遗传分析结果表明,突变体ospls7的叶片早衰性状受单隐性核基因调控,进一步利用图位克隆技术将该基因定位于10号染色体的InDel标记ID74-33/34和SSR标记RM25040之间,物理距离为207 kb,这些结果为最终克隆OsPLS7基因并研究其功能奠定了基础。

关键词：水稻 ospls7 叶片早衰生理分析基因定位

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水稻黄矮病毒基因2的核苷酸序列

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病毒学报 1997年第4期13卷 369-375页

作者：祝海涛陈晓英罗宗礼方荣祥高东明中国科学院微生物研究所植物生物技术开放实验室浙江省农业科学院病毒室

从水稻黄矮病毒（ＲＹＳＶ）基因组的ｃＤＮＡ文库中，获得了包含邻接核衣壳蛋白基因的基因２的克隆，并测定了其核苷酸序列。ＲＹＳＶ基因２的５′端起始序列推测为５′－ＡＡＣＡＣ－３′，该起始序列与ＲＹＳＶ其他基因及其他弹状病... 详细信息

从水稻黄矮病毒（ＲＹＳＶ）基因组的ｃＤＮＡ文库中，获得了包含邻接核衣壳蛋白基因的基因２的克隆，并测定了其核苷酸序列。ＲＹＳＶ基因２的５′端起始序列推测为５′－ＡＡＣＡＣ－３′，该起始序列与ＲＹＳＶ其他基因及其他弹状病毒基因的５′端起始序列高度同源。通过测定感病水稻体内ＲＹＳＶ基因２的转录物的３′端序列，精确地定位了ＲＹＳＶ基因２的３′端终止位点。由此确定ＲＹＳＶ基因２全长１２１１个核苷酸，它含有４２个核苷酸的５′端非翻译区，９６９个核苷酸的蛋白质编码区（包括一个终止密码子）及２００个核苷酸的３′端非翻译区。ＲＹＳＶ基因２编码的蛋白质的氨基酸序列与其它弹状病毒基因２编码的磷酸化蛋白（ＶＳＶ的Ｐ蛋白，ＲＶ的Ｍ１蛋白和ＳＹＮＶ的Ｍ２蛋白）相比，缺乏广泛的同源性，但尚存在一个长约３０个氨基酸的序列保守区域。而且ＲＹＳＶ基因２编码的蛋白中含有７个可被ＣａｓｅｉｎｋｉｎａｓｅⅡ磷酸化的位点（Ｓ／Ｔ－Ｘ－Ｘ－Ｄ／Ｅ），有可能它也是一个磷酸化蛋白。因此推测ＲＹＳＶ基因２编码ＲＹＳＶＮＳ蛋白。

关键词：水稻病毒水稻黄矮病毒基因2 核苷酸序列

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兔出血症病毒复制子的构建及其在RK-13细胞中的复制

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病毒学报 2007年第6期23卷 481-484页

作者：刘光清倪征云涛余斌朱金梅华炯钢陈剑平浙江省农业科学院病毒学与生物技术研究所杭州310021 西北农林科技大学动物科技学院杨凌712100

为研究兔出血症病毒(RHDV)的复制机制、病毒与宿主之间的相互作用以及致病机制等,创建一个安全、有效的技术平台,在前期构建的RHDV侵染性克隆基础上,将病毒的衣壳蛋白编码区删除,保留了RHDV复制必需的所有蛋白酶基因和两端的非编码区,... 详细信息

为研究兔出血症病毒(RHDV)的复制机制、病毒与宿主之间的相互作用以及致病机制等,创建一个安全、有效的技术平台,在前期构建的RHDV侵染性克隆基础上,将病毒的衣壳蛋白编码区删除,保留了RHDV复制必需的所有蛋白酶基因和两端的非编码区,构建了RHDV复制子。试验结果证明,将该复制子RNA导入RK13细胞中后,能够进行高水平的复制和表达。

关键词：兔出血症病毒复制子衣壳蛋白 RK-13细胞

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高羊茅CBF转录激活因子基因片段的克隆

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核农学报 2004年第5期18卷 353-356页

作者：吴关庭胡张华郎春秀陈笑芸陈锦清夏英武浙江大学原子核农业科学研究所浙江杭州310029 浙江省农业科学院病毒学与生物技术研究所浙江杭州310021

根据拟南芥CBF基因序列的保守区设计 1对特异引物 ,采用PCR方法从高羊茅基因组中扩增出 1个DNA片段并克隆到pUCm T载体中。经序列测定和分析 ,该片段长 60 8bp ,与 3个拟南芥CBF基因的核苷酸及其推导氨基酸序列分别具有 81～ 84%和 75～... 详细信息

根据拟南芥CBF基因序列的保守区设计 1对特异引物 ,采用PCR方法从高羊茅基因组中扩增出 1个DNA片段并克隆到pUCm T载体中。经序列测定和分析 ,该片段长 60 8bp ,与 3个拟南芥CBF基因的核苷酸及其推导氨基酸序列分别具有 81～ 84%和 75～ 79%的同源性 ,而且推导氨基酸序列中包含有同源性更高的AP2DNA结合域以及CBF蛋白的两段特征序列PKK RPAGRxKFxETRHP和DSAWR。这些结果表明。

关键词：转录激活因子基因片段克隆 UC 扩增蛋白 AP 高羊茅特异引物同源性

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云南番茄曲叶病是由烟草曲茎病毒引起的

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病毒学报 2002年第4期18卷 355-361页

作者：李正和李桂新谢艳张仲凯周雪平浙江大学生物技术研究所杭州310029 云南省农业科学院生物技术研究所昆明650201

从云南省德宏田间表现曲叶症状的番茄植株上分离到病毒分离物Y41,采集的带病植株在实验室可经烟粉虱(Bemisiatabaci)传播到健康的番茄。用针对非洲木薯花叶病毒(ACMV)、印度木薯花叶病毒(ICMV)及秋葵曲叶病毒(OLCV)的15种单抗对病样进行... 详细信息

从云南省德宏田间表现曲叶症状的番茄植株上分离到病毒分离物Y41,采集的带病植株在实验室可经烟粉虱(Bemisiatabaci)传播到健康的番茄。用针对非洲木薯花叶病毒(ACMV)、印度木薯花叶病毒(ICMV)及秋葵曲叶病毒(OLCV)的15种单抗对病样进行TAS-ELISA检测,结果表明,番茄曲叶病是由菜豆金色花叶病毒属(Be gomovirus)病毒引起的,但其抗原表位型与我国广西报道的中国番茄黄化曲叶病毒(TYLCCV)不同。对Y41进行DNA-A全序列测定和分析表明,Y41DNA-A全长2743个核苷酸,共编码6个ORF,其中病毒链编码AV1和AV2两个ORF,互补链编码AC1、AC2、AC3和AC44个ORF。对Y41及其它双生病毒CP进行同源性比较及系统进化关系分析表明,Y41属于"旧世界"的粉虱传双生病毒,与我国报道的烟草曲茎病毒(TCSV)及印度报道的番茄曲叶Karnataka病毒(ToLCKV)同源性最高,达到98 8%。进一步比较基因组发现,Y41与TCSVAV1、AV2、AC1、AC2、AC3、AC4各ORF同源性分别为98 8%、96 6%、86 4%、93 3%、89 6%和89 7%,基因间隔区(IR)、DNA-A同源性分别为92 1%和93 4%,且在基因间隔区内含有相似的重复子序列及排列方式。这些结果表明:Y41是TCSV在自然条件下侵染番茄的一个分离物。

关键词：云南番茄曲叶病烟草曲茎病毒粉虱传双生病毒病原分离

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植物富含半胱氨酸类受体激酶家族研究进展

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浙江农业学报 2020年第12期32卷 2303-2312页

作者：耿艳飞吕明芳浙江农林大学农业与食品科学学院浙江杭州311300 浙江省农业科学院病毒学与生物技术研究所浙江杭州310021

在植物生长发育过程中,富含半胱氨酸类受体激酶(cysteine-rich receptor-like kinases,CRKs)作为上游信号分子,在感知胁迫信号和诱发免疫应答中起着重要作用。CRK主要由信号肽、DUF26(PF01657)、跨膜结构域和胞内激酶结构域组成,其中DU... 详细信息

在植物生长发育过程中,富含半胱氨酸类受体激酶(cysteine-rich receptor-like kinases,CRKs)作为上游信号分子,在感知胁迫信号和诱发免疫应答中起着重要作用。CRK主要由信号肽、DUF26(PF01657)、跨膜结构域和胞内激酶结构域组成,其中DUF26和激酶结构域在不同植物中高度保守。生物信息学分析发现,在单子叶和双子叶植物中含有37~170个CRK成员,它们在植物生长发育和胁迫应答中发挥不同的功能。文章综述了近年来国内外植物CRK基因结构及其在生长发育、胁迫应答中的功能研究进展,对于提高农作物抗逆境能力具有重要意义。

关键词：富含半胱氨酸类受体激酶植物逆境生长发育

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柑橘黑斑病菌与柚黑斑病菌对苯并咪唑类杀菌剂的抗性及其分子机制

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浙江大学学报（农业与生命科学版） 2019年第6期45卷 699-706页

作者：曾一冰蒋立强李国华刘蕊李红叶浙江大学农业与生物技术学院生物技术研究所杭州310058 广东省梅州市农业科学院果树研究所广东梅州514071

为了对柑橘黑斑病和柚黑斑病提出更科学的化学防治方法,该文研究了柑橘黑斑病菌和柚黑斑病菌对杀菌剂多菌灵的抗性频率、抗性水平及其抗性分子机制。结果表明:在江西114个柑橘黑斑病菌株中发现了2个多菌灵抗性菌株,抗性频率为1.75%,抗... 详细信息

为了对柑橘黑斑病和柚黑斑病提出更科学的化学防治方法,该文研究了柑橘黑斑病菌和柚黑斑病菌对杀菌剂多菌灵的抗性频率、抗性水平及其抗性分子机制。结果表明:在江西114个柑橘黑斑病菌株中发现了2个多菌灵抗性菌株,抗性频率为1.75%,抗性系数分别为5333.6和379.2;在四川32个柑橘黑斑病菌株中发现了1个多菌灵抗性菌株,抗性频率为3.13%,抗性系数为303.3;在浙江23个菌株和重庆3个菌株中没有出现抗性菌株。在广东收集的54个柚黑斑病菌株中发现了1个抗性菌株,抗性频率为1.85%,抗性系数为13719.5;在广西和福建分别收集的34个柚黑斑病菌株中没有发现抗性菌株。柑橘黑斑病菌和柚黑斑病菌对甲基硫菌灵和多菌灵存在正交互抗性,对嘧菌酯和多菌灵无交互抗性。因此,建议多菌灵可继续在柑橘黑斑病和柚黑斑病防治中使用,鉴于高抗菌株已出现,使用时应与其他作用机制的杀菌剂轮换使用。本实验还发现,柑橘黑斑病菌存在2种抗苯并咪唑类的分子机制,即β-微管蛋白基因上第198位氨基酸位点由谷氨酸突变为赖氨酸(抗性系数为5333.6的菌株)和第200位氨基酸位点由苯丙氨酸突变为酪氨酸(抗性系数为379.2的菌株);而柚黑斑病菌抗苯并咪唑类的分子机制则与β-微管蛋白基因第198位氨基酸由谷氨酸突变为丙氨酸有关。

关键词：柑橘黑斑病菌柚黑斑病菌苯并咪唑类杀菌剂抗药性分子机制

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