检索结果-内蒙古大学图书馆

中国兽医学报 2005年第3期25卷 238-241页

作者：何永强洪健吴旧生杜青云倪征浙江省农业科学院病毒学与生物技术研究所浙江杭州310021 浙江大学浙江杭州310029

从浙江省某麻鸭养殖基地产蛋锐减的病鸭生殖器官分离到1株致产蛋下降、不致鸭死亡的病毒株(YH99V)。该病毒易感蛋鸭,经SPF鸡胚传至第9代时致病性突然增强,第11代出现对鸡红细胞的血凝特性,通常在42～80h致死SPF鸡胚,EF15EID50为10-4.8... 详细信息

从浙江省某麻鸭养殖基地产蛋锐减的病鸭生殖器官分离到1株致产蛋下降、不致鸭死亡的病毒株(YH99V)。该病毒易感蛋鸭,经SPF鸡胚传至第9代时致病性突然增强,第11代出现对鸡红细胞的血凝特性,通常在42～80h致死SPF鸡胚,EF15EID50为10-4.8。经磷钨酸负染电镜观察,YH99V粒子呈现圆形、杆状形、葫芦状形等多形态,直径70～400nm不等,病毒外表有囊膜,囊膜外层有排列整齐的纤突。病毒粒子和包涵体位于细胞浆内。病毒抵抗力由弱到强依次为0.2%甲醛、24h→56℃、45min→紫外线、1h→乙醚≈氯仿≈37℃、16h→pH9→pH5→1%Try。对人眼结膜易感,鸭眼结膜不易感。接种传代细胞BHK-21、IBRS-2均能引起细胞病变。YH99V株与同样引起鸭产蛋下降的AIV、鸭源EDSV无抗原相关性,而能被禽副粘病毒型阳性血清中和。根据试验结果,初步将YH99V判定为鸭副粘病毒。

关键词：产蛋下降分离麻鸭禽副粘病毒Ⅰ型 SPF鸡胚鉴定生殖器官养殖基地血凝特性鸡红细胞电镜观察病毒粒子传代细胞细胞病变 EDSV 阳性血清试验结果眼结膜浙江省病毒株致病性磷钨酸包涵体抵抗力紫外线 AIV

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一个水稻小热休克蛋白的异源表达及寡聚特性分析

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中国水稻科学 2017年第5期31卷 483-488页

作者：蔡年俊郭留明李静项聪英羊健陈剑平张恒木浙江师范大学化学与生命科学学院浙江金华321004 浙江省农业科学院病毒学与生物技术研究所杭州310021

【目的】在前期研究中,本实验室已克隆了一个水稻小热休克蛋白基因(OsSHSP17.6),并发现该基因的表达明显受到热激和病毒侵染调控,表明该蛋白可能在逆境胁迫过程中起重要作用。本研究的目的在于进一步明确OsSHSP17.6的特性。【方法】在... 详细信息

【目的】在前期研究中,本实验室已克隆了一个水稻小热休克蛋白基因(OsSHSP17.6),并发现该基因的表达明显受到热激和病毒侵染调控,表明该蛋白可能在逆境胁迫过程中起重要作用。本研究的目的在于进一步明确OsSHSP17.6的特性。【方法】在本研究中,进一步将该基因亚克隆至原核表达载体p ET-32a并导入大肠杆菌*** BL21(DE3)pLysS诱导表达,通过亲和层析的方法纯化了该重组蛋白,进一步用于非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳和Western blotting分析。【结果】异源表达的重组OsSHSP17.6能减轻IPTG对宿主菌的毒害。非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳和Western blotting分析显示纯化的重组OsSHSP17.6蛋白在体外能形成同源二聚体和寡聚体。【结论】这些结果支持OsSHSP17.6是一个有功能的分子伴侣蛋白并表明该蛋白可能通过形成同源寡聚体的方式参与逆境胁迫反应,这为进一步明确OsSHSP17.6的功能机制奠定基础。

关键词：小热休克蛋白异源表达寡聚化作用

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一个水稻小热休克蛋白基因的克隆和鉴定

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中国水稻科学 2016年第6期30卷 587-592页

作者：项聪英蔡年俊李静羊健陈剑平张恒木浙江师范大学化学与生命科学学院浙江金华321004 浙江省农业科学院病毒学与生物技术研究所杭州310021

小分子热休克蛋白(SHSP)广泛存在于各类生物体中且在生物发育和逆境响应过程中发挥重要作用。我们克隆了一个水稻小热休克蛋白基因(OsSHSP17.6),序列分析表明该基因编码区为477bp,可编码一个含158个氨基酸的多肽,分子量约17.6kD。序列... 详细信息

小分子热休克蛋白(SHSP)广泛存在于各类生物体中且在生物发育和逆境响应过程中发挥重要作用。我们克隆了一个水稻小热休克蛋白基因(OsSHSP17.6),序列分析表明该基因编码区为477bp,可编码一个含158个氨基酸的多肽,分子量约17.6kD。序列分析显示该类SHSP在不同的植物中是保守的,在分类上隶属于CI类。实时定量RT-PCR分析显示热激处理可显著增强该基因的转录;Western blotting分析显示该蛋白大小与预期一致,且其含量在热激处理时大幅度增加。这些结果一致表明OsSHSP17.6可能参与了水稻热应激反应,这为进一步鉴定OsSHSP17.6的功能提供了基础。

关键词：小热休克蛋白热激处理表达模式

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基于组合模拟波段的油菜菌核病早期诊断方法研究

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光谱学与光谱分析 2010年第7期30卷 1934-1938页

作者：刘飞冯雷楼兵干孙光明王连平何勇浙江大学生物系统工程与食品科学学院浙江杭州310029 浙江大学生物技术研究所浙江杭州310029 浙江省农业科学院植物保护与微生物研究所浙江杭州310021

应用组合模拟波段建立的线性和非线性判别模型实现了油菜菌核病的早期诊断。采集油菜健康叶片80个,菌核病染病叶片100个,采用预处理算法与连续投影算法(SPA)相结合提取组合模拟波段,分别建立偏最小二乘法(PLS)、多元线性回归(MLR)和最... 详细信息

应用组合模拟波段建立的线性和非线性判别模型实现了油菜菌核病的早期诊断。采集油菜健康叶片80个,菌核病染病叶片100个,采用预处理算法与连续投影算法(SPA)相结合提取组合模拟波段,分别建立偏最小二乘法(PLS)、多元线性回归(MLR)和最小二乘-支持向量机(LS-SVM)模型。通过比较,最优PLS判别的预处理分别为直接正交信号校正(DOSC)、De-trending和原始反射光谱(Raw),准确率分别为100%,95.7%和95.7%。应用组合模拟波段的最优线性模型为SPA-MLR(DOSC)和SPA-PLS(DOSC)模型,准确率均为100%,基于DOSC、De-trending和Raw组合模拟波段的SPA-LS-SVM模型的判别准确率均为100%。结果表明,基于组合模拟波段进行油菜菌核病早期诊断是可行的,为油菜菌核病的早期诊断及病害监测仪器的开发提供了方法和依据。

关键词：可见/近红外光谱油菜菌核病直接正交信号校正连续投影算法最小二乘-支持向量机

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利用反向遗传学技术获得适应RK13细胞的兔出血症病毒

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科学通报 2006年第13期51卷 1541-1544页

作者：刘光清倪征云涛张玉颖杜青云盛祖恬梁华丽华炯刚李双茂陈剑平浙江省农业科学院病毒学与生物技术研究所农业部病毒学与生物技术重点实验室杭州310021

在前期构建的兔出血症病毒(rabbithemorrhagicdiseasevirus,RHDV)全长cDNA分子的基础上,利用SP6RNA聚合酶系统,在体外转录合成了病毒RNA.用转染试剂将病毒RNA导入RK13细胞,12h后可见明显致细胞病变(CPE),用间接免疫荧光方法在RK13细胞... 详细信息

在前期构建的兔出血症病毒(rabbithemorrhagicdiseasevirus,RHDV)全长cDNA分子的基础上,利用SP6RNA聚合酶系统,在体外转录合成了病毒RNA.用转染试剂将病毒RNA导入RK13细胞,12h后可见明显致细胞病变(CPE),用间接免疫荧光方法在RK13细胞中检测到了病毒抗原的产生.将收获的细胞培养物再次接种RK13细胞,仍然能产生明显病变.大量收取细胞培养物,经差速离心法纯化病毒后,在电子显微镜下可观察到RHD病毒粒子.结果表明,利用反向遗传学技术获得了可适应于RK13培养的RHDV,为将来研究RHDV的分子致病机理和新型疫苗等提供了有利的工具.

关键词：兔出血症病毒反向遗传学全长cDNA RK13细胞

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基于多光谱成像技术的水稻叶瘟检测分级方法研究

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光谱学与光谱分析 2009年第10期29卷 2730-2733页

作者：冯雷柴荣耀孙光明吴迪楼兵干何勇浙江大学生物系统工程与食品科学学院浙江杭州310029 浙江省农业科学院植物保护研究所浙江杭州310021 浙江大学生物技术研究所浙江杭州310029

实时、可靠的植物病害检测是进行科学的植物喷药作业的基础,也是精确农作的关键技术之一。目前水稻稻瘟病害检测鉴定方法存在着专业知识要求高、花费大、效率低等缺点。文章提出了利用包含绿、红、近红外三波段通道的多光谱成像技术对... 详细信息

实时、可靠的植物病害检测是进行科学的植物喷药作业的基础,也是精确农作的关键技术之一。目前水稻稻瘟病害检测鉴定方法存在着专业知识要求高、花费大、效率低等缺点。文章提出了利用包含绿、红、近红外三波段通道的多光谱成像技术对水稻叶瘟病进行检测。研究目的是建立能够快速、准确分析稻叶瘟病情的检测模型,实时过滤掉背景噪声、自然枯叶等干扰因素,实现对水稻生长状况进行及时、有效、非破坏性检测。研究表明,利用多光谱成像技术提取水稻叶面及冠层图像信息,可以快速有效地检测稻叶瘟病情。通过实验建立的稻叶瘟病情检测分级模型,对于营养生长期的水稻苗瘟的识别准确率为98%,叶瘟的识别准确率为90%,为实施科学的稻叶瘟防治提供了决策支持。

关键词：水稻稻瘟病多光谱图像植物保护

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转基因油菜超油2号外源基因流散的生态风险

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农业生物技术学报 2008年第3期16卷 541-542页

作者：郝中娜陶荣祥胡张华朗春秀张红志王连平陈锦清浙江省农业科学院植物保护与微生物研究所浙江省农业科学院病毒学与生物技术研究所

目前,在油菜上培育出的转基因品种主要是抗除草剂的。转基因油菜的基因漂移受许多因素影响,如释放面积、传粉方式和花期同步率等(浦惠明等,2005;Rieger et al.,2002)。

关键词：转基因油菜外源基因流散生态风险

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转基因甘蓝型油菜中bar基因的表达分析

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分子植物育种 2022年

作者：王柯郑滔郎春秀吴关庭刘仁虎危文亮长江大学农学院浙江省农业科学院病毒学与生物技术研究所

通过转草铵膦乙酰转移酶(bialaphos resistance gene， bar)基因获得具有除草剂耐受性的甘蓝型油菜(Brassica napus)，是解决甘蓝型油菜生产上草害问题的重要途径；而转化油菜植株中目标基因的表达水平及其对除草剂的耐受性是转基因作...

通过转草铵膦乙酰转移酶(bialaphos resistance gene， bar)基因获得具有除草剂耐受性的甘蓝型油菜(Brassica napus)，是解决甘蓝型油菜生产上草害问题的重要途径；而转化油菜植株中目标基因的表达水平及其对除草剂的耐受性是转基因作物安全评价的重要内容。为探讨甘露碱合成酶(mannopine synthase， mas)基因启动子驱动的bar基因在转基因甘蓝型油菜中的表达水平及其与除草剂耐受性的关系，对40个不同的转基因甘蓝型油菜株系进行了草铵膦(Glufosinate ammonium)耐受性鉴定和bar基因表达水平研究。结果表明，40个甘蓝型油菜转基因株系对草铵膦耐受性差异很大，9个株系药害级别为0级，达最高抗性水平，药害级别1～5级的株系数分别为6、3、3、8、11个。在转录水平，bar基因在不同转基因株系的表达丰度是内参基因BnAct2的0.16～0.46倍，同一抗性水平的不同株系bar基因转录水平差异很大，不同抗性水平的株系间bar基因转录水平差异也没有达到极显著水平，说明bar基因在转录水平的表达对除草剂抗性影响不大。在蛋白表达水平，不同转基因株系苗期叶片bar蛋白含量在0.84～89.12 ng/g，各个药害级别之间蛋白表达差异在大约在10～20 ng/g，且5级药害与对照之间的蛋白表达量没有明显差异。本研究结果说明，bar基因转录后水平的调控是决定转基因甘蓝型油菜除草剂耐受性的关键因素。

关键词：

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植物组培产业化生产中污染防控技术研究

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浙江农业学报 2012年第6期24卷 1074-1078页

作者：方丽汪一婷吕永平 Kumar 陈剑平王汉荣浙江省农业科学院植物保护与微生物研究所浙江杭州310021 浙江省农业科学院病毒学与生物技术研究所浙江杭州310021

对浙江省植物组培产业生产中心的主要污染微生物的防控技术进行了研究,从11个杀菌剂和消毒剂中筛选出了对污染细菌德氏假单胞菌(Pseudomonas delafieldii)、丁香假单胞菌(Pseudomonas syringae)、蜡状芽胞菌(Bacillus cereus)和污染真... 详细信息

对浙江省植物组培产业生产中心的主要污染微生物的防控技术进行了研究,从11个杀菌剂和消毒剂中筛选出了对污染细菌德氏假单胞菌(Pseudomonas delafieldii)、丁香假单胞菌(Pseudomonas syringae)、蜡状芽胞菌(Bacillus cereus)和污染真菌指状青霉(Penicillum digitatum)、黑曲霉(Aspergillus niger)预防效果好,且对组培植物安全的药剂为乙蒜素和链.土霉素。乙蒜素可以在培养基分装前加入,与培养基同时灭菌使用;而链.土霉素在培养基使用前加入可有效预防污染物生长,该药剂对组培器皿和环境也有较好的消毒效果。

关键词：植物组织培养污染防控技术乙蒜素链·土霉素

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小麦TaeEF1β基因的克隆、同源性及表达分析

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浙江农业学报 2019年第1期31卷 98-103页

作者：陈炫张天烨羊健张恒木陈剑平浙江农林大学林业与生物技术学院浙江杭州311300 浙江省农业科学院病毒学与生物技术研究所浙江杭州310021

真核翻译延伸因子(eukaryotic translation elongation factor,e EFs)是一种重要的多功能调控蛋白,eEF1β是eEF1的组成部分,在蛋白质生物合成过程中发挥着重要的作用。本文通过RT-PCR扩增克隆小麦(Triticum aestivum L.)的e EF1β基因,... 详细信息

真核翻译延伸因子(eukaryotic translation elongation factor,e EFs)是一种重要的多功能调控蛋白,eEF1β是eEF1的组成部分,在蛋白质生物合成过程中发挥着重要的作用。本文通过RT-PCR扩增克隆小麦(Triticum aestivum L.)的e EF1β基因,并命名为TaeEF1β。氨基酸同源性分析发现,TaeEF1β具有高度保守性,且其保守结构域位于137～226 aa处。q RT-PCR结果表明,中国小麦花叶病毒(Chinese wheat mosaic virus,CWMV)侵染小麦植株后,可以诱导TaeEF1β基因转录水平的上调表达。另外,本文也进一步分析了TaeEF1β基因在小麦根、茎、叶的表达水平和CWMV侵染不同时间点的表达情况。

关键词：真核翻译延伸因子中国小麦花叶病毒同源性分析

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