检索结果-内蒙古大学图书馆

浙江农业学报 2017年第5期29卷 685-693页

作者：原文霞王栩鸣李冬月周洁严成其陈剑平浙江师范大学化学与生命科学学院浙江金华321004 浙江省农业科学院病毒学与生物技术研究所浙江省有害生物防控国家重点实验室培育基地农业部植保生物技术重点实验室浙江省植物病毒重点实验室浙江杭州310021 云南农业大学植物保护学院云南昆明650201

以现有水稻CRISPR/Cas9载体系统为起点,优化改造了相应的载体及其构建方法,实现了两步法构建基因敲除载体。利用新的载体和方法,针对水稻日本晴(Oryza sativa *** ***)D3基因的3个靶向位点分别构建了相应的CRISPR/Cas9载体,并通过农杆... 详细信息

以现有水稻CRISPR/Cas9载体系统为起点,优化改造了相应的载体及其构建方法,实现了两步法构建基因敲除载体。利用新的载体和方法,针对水稻日本晴(Oryza sativa *** ***)D3基因的3个靶向位点分别构建了相应的CRISPR/Cas9载体,并通过农杆菌介导的遗传转化成功获得一系列转基因植株。T_0代转基因植株靶位点测序结果显示,靶位点DDRC1包括5种突变类型,植株的突变率为35.48%;靶位点DDRC2包括5种突变类型,植株的突变率为25.00%;靶位点DDRC3包括1种突变类型,植株的突变率为20.00%。利用T_1代纯合突变植株,进一步研究了所得纯合突变体的株高、分蘖数表型与CRISPR/Cas9编辑后基因型之间的关系,探讨了CRISPR/Cas9系统的基因编辑效率、位置效应和突变类型等特点,为进一步利用CRISPR/Cas9系统发展具有不同农艺性状的水稻种质材料提供了参考。

关键词：水稻 CRISPR/CaS9 D3基因基因编辑

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利用分子标记辅助选择改良浙恢7954的稻米品质

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浙江农业学报 2017年第8期29卷 1221-1227页

作者：牛凯萌徐俊波钟亮王华朱英浙江师范大学化学与生命科学学院浙江金华321004 浙江省农业科学院病毒学与生物技术研究所浙江省植物有害生物防控重点实验室-省部共建国家重点实验室培育基地浙江杭州310021

浙江省第1个获得国家植物新品种保护的浙恢7954是杂交稻育种中综合性状优异的恢复系,但其直链淀粉含量偏高(约25%),食味品质较差。多年来,通过传统育种手段改良该品种的稻米品质,收效甚微。利用Wx基因第1内含子剪切处的SNP位点,设计分... 详细信息

浙江省第1个获得国家植物新品种保护的浙恢7954是杂交稻育种中综合性状优异的恢复系,但其直链淀粉含量偏高(约25%),食味品质较差。多年来,通过传统育种手段改良该品种的稻米品质,收效甚微。利用Wx基因第1内含子剪切处的SNP位点,设计分子标记,以综合性状优异且直链淀粉含量中低的93-11为供体,借助分子标记辅助选择技术,通过杂交和多代回交,获得了直链淀粉含量中等,食味品质明显提升,而粒型、粒重、精米率等其他综合性状近似于亲本浙恢7954的品系L2和L9,表明成功地改良了浙恢7954的稻米品质。SNP分型结果显示,除Wx位点外,L2和L9在浙恢7954背景下导入的93-11片段均不到7%。这些中间材料的获得,为高产优质的杂交稻亲本及其杂交组合选育提供了良好的基础。

关键词：浙恢7954 直链淀粉含量蜡质基因分子标记辅助育种 SNP

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植物激素在种子休眠与萌发中的调控机制

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植物生理学报 2016年第5期52卷 599-606页

作者：于敏徐恒张华朱英浙江师范大学化学与生命科学学院浙江金华321004 浙江省农业科学院病毒学与生物技术研究所浙江省植物有害生物防控重点实验室-省部共建国家重点实验室培育基地杭州310021

种子休眠是重要的农艺性状,它与农业生产中作物的产量和品质息息相关。低休眠水平作物种子容易穗发芽,高休眠水平作物种子会造成播种季节的低萌发率。因此,种子的最佳休眠水平对农业生产非常重要。影响种子休眠的因素众多,本文重点阐述... 详细信息

种子休眠是重要的农艺性状,它与农业生产中作物的产量和品质息息相关。低休眠水平作物种子容易穗发芽,高休眠水平作物种子会造成播种季节的低萌发率。因此,种子的最佳休眠水平对农业生产非常重要。影响种子休眠的因素众多,本文重点阐述了内源激素调控种子休眠与萌发分子机制的研究进展,以期阐明种子休眠和萌发的分子机理,有效防控作物种子穗发芽。

关键词：种子休眠内源激素调控机理

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水稻类病变突变体中抗病相关基因的研究进展

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浙江农业学报 2015年第7期27卷 1294-1300页

作者：程晨王晶原文霞李冬月杨勇严成其陈剑平浙江师范大学化学与生命科学学院浙江金华321004 浙江省农业科学院病毒学与生物技术研究所浙江省有害生物防控国家重点实验室培育基地农业部植保生物技术重点实验室浙江省植物病毒重点实验室浙江杭州310021

水稻类病变突变体是一类在水稻叶片表面自发形成类病斑表型的水稻突变体,且其中部分突变体会表现出对于水稻病原菌侵染增强的抗性,但控制该表型的类病变基因却似乎分别参与了各不相同的防御途径。文章主要综述了水稻类病变突变体的发现... 详细信息

水稻类病变突变体是一类在水稻叶片表面自发形成类病斑表型的水稻突变体,且其中部分突变体会表现出对于水稻病原菌侵染增强的抗性,但控制该表型的类病变基因却似乎分别参与了各不相同的防御途径。文章主要综述了水稻类病变突变体的发现与挖掘,类病变基因的克隆及功能分析等,并对其在水稻抗病性研究中的应用作了展望。

关键词：水稻类病变突变体基因克隆功能分析

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水稻OsWRKY7基因的表达研究

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中国水稻科学 2015年第6期29卷 559-570页

作者：李茹周洁李冬月王栩鸣杨勇余初浪程晔严成其陈剑平南京农业大学植物保护学院南京210095 浙江省植物有害生物防控重点实验室-省部共建国家重点实验室培育基地/农业部植物保护生物技术重点实验室/浙江省植物病毒学重点实验室/浙江省农业科学院病毒学与生物技术研究所杭州310021 浙江师范大学化学与生命科学学院浙江金华321004

WRKY蛋白是植物中一类重要的转录因子,不仅参与植物生长发育的调控,还参与植物对各种生物和非生物胁迫的响应。本研究从水稻日本晴中分离OsWRKY7基因的编码序列(CDS),并克隆其启动子序列进行表达研究。首先通过实时定量PCR的方法检测不... 详细信息

WRKY蛋白是植物中一类重要的转录因子,不仅参与植物生长发育的调控,还参与植物对各种生物和非生物胁迫的响应。本研究从水稻日本晴中分离OsWRKY7基因的编码序列(CDS),并克隆其启动子序列进行表达研究。首先通过实时定量PCR的方法检测不同组织中OsWRKY7基因的相对表达量,结果表明,OsWRKY7在叶片中的表达水平较高,且开花期的剑叶中表达量高于7d苗龄的幼叶。进一步将OsWRKY7启动子与GUS报告基因融合,构建了植物表达载体pOsWRKY7-GUS,并将此载体转化日本晴。转基因植株不同组织染色分析结果显示,该启动子在植株的主根尖、叶片、颖壳中有GUS活性,其中叶片上可见全叶范围分布的大量蓝色斑点,这些染色结果与实时定量PCR的结果一致。进一步的接菌和激素处理还显示,OsWRKY7启动子在根和叶中的表达均受水稻白叶枯病菌[Xanthomonas oryzae ***(Xoo)]P10生理小种侵染的诱导,同时还受外源施加的细胞分裂素和生长素诱导,而水杨酸则会抑制其在根和叶中的表达。此外,我们还将OsWRKY7基因的CDS序列分别与绿色荧光蛋白和酵母GAL4的DNA结合域融合,对该基因进行水稻茎原生质体亚细胞定位分析和酵母自激活检验,结果显示该基因定位于细胞核中并具有转录自激活活性。上述结果表明OsWRKY7具有明显的转录激活因子特征,其很可能参与了水稻对白叶枯菌的防御反应以及对多种激素信号的转导过程。

关键词： OsWRKY7基因启动子表达特性亚细胞定位转录活性

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茉莉素调控植物生长发育的研究进展

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植物生理学报 2015年第4期51卷 407-412页

作者：冯孟杰徐恒张华朱英浙江师范大学化学与生命科学学院浙江金华321004 浙江省农业科学院病毒学与生物技术研究所、浙江省植物有害生物防控重点实验室、省部共建国家重点实验室培育基地浙江杭州310021

茉莉素(jasmonates,JA)是一类重要的植物内源激素,有着广泛的生物学功能,在植物的生长发育、抵抗逆境胁迫的过程中扮演着重要的角色。本文将对茉莉素调控植物生长发育的功能及相应的分子机制做简要的综述。

关键词：茉莉素生长发育分子机制

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RSV和HiPV在灰飞虱中传播方式的比较与分析

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浙江农业学报 2015年第10期27卷 1768-1772页

作者：周燕茹李林颖李俊敏孙丽英陈剑平浙江师范大学化学与生命科学学院浙江金华321004 浙江省植物有害生物防控国家重点实验室培育基地农业部/浙江省植保生物技术重点实验室浙江省农业科学院病毒学与生物技术研究所浙江杭州310021 南京农业大学植物保护学院江苏南京210095

水稻条纹病毒(Rice stripe virus,RSV)是由介体灰飞虱(Laodelphax striatellus)传播的重要水稻病毒,严重危害我国水稻生产。Himetobi P病毒(Hi PV)是广泛存在于灰飞虱体内的一类昆虫类微小核糖核酸病毒,灰飞虱感染Hi PV后无明显的致病... 详细信息

水稻条纹病毒(Rice stripe virus,RSV)是由介体灰飞虱(Laodelphax striatellus)传播的重要水稻病毒,严重危害我国水稻生产。Himetobi P病毒(Hi PV)是广泛存在于灰飞虱体内的一类昆虫类微小核糖核酸病毒,灰飞虱感染Hi PV后无明显的致病表现。对Hi PV不同分离物及Cripavirus属多个病毒的序列同源性分析表明,Hi PV不同分离物之间相似度非常高,但和同属其他病毒的核苷酸及氨基酸序列均存在明显差异。对两种病毒在水稻中的复制情况进行检测,结果表明,RSV可在水稻中复制,Hi PV可在水稻中稳定存在一段时间(7 d),但无法在水稻中复制。进一步的试验表明,灰飞虱的分泌物中存在Hi PV,但无法检测到RSV。

关键词：灰飞虱水稻条纹病毒 Himetobi P病毒传播

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水稻苗期纹枯病抗性鉴定微室接种技术的改良

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中国水稻科学 2015年第1期29卷 97-105页

作者：徐国娟袁正杰左示敏潘学彪王志龙瞿绍洪浙江师范大学化学与生命科学学院浙江金华321004 浙江省农业科学院病毒学与生物技术研究所杭州310021 扬州大学江苏省作物遗传生理重点实验室/教育部植物功能基因组学重点实验室江苏扬州225009 湖南农业大学湖南省作物种质创新与资源利用重点实验室长沙410128

水稻对纹枯病的抗性属于典型的数量性状,多数栽培品种的抗病水平较低,并且抗性差异较小.水稻纹枯病接种和抗性评价体系是培育抗病品种的重要基础.利用植物生长箱的控温、控光和控湿条件以及生长势相对一致的水稻秧苗,对苗期纹枯病微室... 详细信息

水稻对纹枯病的抗性属于典型的数量性状,多数栽培品种的抗病水平较低,并且抗性差异较小.水稻纹枯病接种和抗性评价体系是培育抗病品种的重要基础.利用植物生长箱的控温、控光和控湿条件以及生长势相对一致的水稻秧苗,对苗期纹枯病微室接种技术进行了改进.试验品种苗期的纹枯病抗性从高到低依次为 YSBR1、特青、泰粳394、日本晴和 Lem-ont,并且与大田成株期接种鉴定的结果一致.RT-PCR 分析显示,苗期和成株期接种纹枯病菌均诱导4个水稻抗病相关基因的表达.通过“叶枕高”和“苗挺高”计算的各品种苗期病级变幅分别为2．82～8．54级和1．20～3．39级.前者与大田成株期的病级变幅一致,因而“叶枕高”病级计算方法更适用于微室接种鉴定体系.

关键词：水稻纹枯病微室法抗病相关基因

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应用质谱技术检测农作物病害

应用质谱技术检测农作物病害

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第十届全国青年植保科技创新学术研讨会

作者：陈卓浙江省农业科学院病毒学与生物技术研究所杭州 310021 贵州大学绿色农药与农业生物工程教育部重点实验室贵阳550025

质谱技术广泛应用于蛋白质的研究中,特别是基质辅助激光解析离子化质谱和液相色谱—质谱联用.与PCR和ELISA相比,该技术的优势是不依赖于病原特异的诊断试剂,如病原特异引物或抗体等.随着质谱技术以及与质谱配套的分离技术、多反应监控... 详细信息

质谱技术广泛应用于蛋白质的研究中,特别是基质辅助激光解析离子化质谱和液相色谱—质谱联用.与PCR和ELISA相比,该技术的优势是不依赖于病原特异的诊断试剂,如病原特异引物或抗体等.随着质谱技术以及与质谱配套的分离技术、多反应监控、免标记、iTraq以及后端的质谱数据的生物信息学分析技术的完善，可利用质谱对植物病毒、真菌、细菌等多种病原同时检测，具有检测覆盖面广、检测效率高优点，并可进行生理小种、耐受菌种株系的进一步区分。

关键词：农作物病害病原检测质谱技术生物信息学

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与RBSDV外壳蛋白P10互作植物因子的筛选与验证

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核农学报 2014年第5期28卷 784-789页

作者：孙宗涛魏佳李俊敏王旭沈国新陈剑平浙江省农业科学院病毒学与生物技术研究所/浙江省植物有害生物防控国家重点实验室培育基地/农业部植物保护与生物技术重点开放实验室/浙江省植物病毒重点开放实验室浙江省农业科学院蚕桑所

目前,我们对水稻黑条矮缩病毒(RBSDV)编码的外壳蛋白P10在该病毒侵染过程中的作用了解甚少。本研究利用酵母双杂交技术,以P10为诱饵钓取拟南芥cDNA文库,得到与P10互作的真核翻译起始因子eIF5A-2。通过分别构建猎物和诱饵载体共转化酵母... 详细信息

目前,我们对水稻黑条矮缩病毒(RBSDV)编码的外壳蛋白P10在该病毒侵染过程中的作用了解甚少。本研究利用酵母双杂交技术,以P10为诱饵钓取拟南芥cDNA文库,得到与P10互作的真核翻译起始因子eIF5A-2。通过分别构建猎物和诱饵载体共转化酵母,结果表明P10与AteIF5A-2在酵母中互作。利用农杆菌转染烟草表皮细胞瞬时表达体系发现,P10和AteIF5A-2形成融合荧光蛋白后,荧光主要形成囊泡状的结构。通过荧光共定位实验分析发现,P10与AteIF5A-2能够共定位。本研究结果进一步揭示了水稻黑条矮缩病毒的致病机制。

关键词：水稻黑条矮缩病毒外壳蛋白 P10 真核翻译起始因子5A

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