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中国作物学会油料作物专业委员会第七次会员代表大会暨学术年会

作者：吴学龙黄锐之刘智宏张国平浙江大学农业生物技术学院浙江杭州310058 浙江省农业科学院病毒学与生物技术研究所浙江省植物代谢基因工程重点实验室浙江杭州310021 浙江省农业科学院病毒学与生物技术研究所浙江省植物代谢基因工程重点实验室浙江杭州310021 浙江大学农业生物技术学院浙江杭州310058

本研究首先分离克隆了拟南芥编码酰胺酶At4g34880基因编码区上游1.5 kb的启动子区域,设定为AmidP,将AmidP与Gus报告基因融合并转入拟南芥,系统分析该启动子的时空表达模式.GUS染色结果显示1.5 kb的AmidP启动子具有叶脉特异表达特性,将... 详细信息

本研究首先分离克隆了拟南芥编码酰胺酶At4g34880基因编码区上游1.5 kb的启动子区域,设定为AmidP,将AmidP与Gus报告基因融合并转入拟南芥,系统分析该启动子的时空表达模式.GUS染色结果显示1.5 kb的AmidP启动子具有叶脉特异表达特性,将该启动子分成不同区段构建与Gus报告基因融合的表达载体,导入拟南芥,分析表明一段长为176bp(-1500 ～-1324)的区域是导致AmidP启动子在转基因拟南芥中叶脉特异表达的关键所在,将该区域定义为VASCULAR VEIN ELEMENT(VVE)域,该功能域拷贝数的增加能增强叶脉表达强度.进而,在详细分析VVE功能域顺式作用原件的基础上,依次构建VVE功能域5 '端和3′端缺失与-65 CaMV 35S融合驱动Gus报告基因表达载体,导入拟南芥中,结果显示该区域中一11bp的DOF2顺式作用原件起最主要作用,其它一些原件也与叶脉特异表达的特异性或表达强度相关.

关键词：拟南芥酰胺酶 At4g34880基因启动子叶脉特异表达 VVE

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D3基因在抗病防卫反应中的转录调控研究

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浙江农业学报 2023年第12期35卷 2763-2774页

作者：徐悦汪少敏谭晓菁罗英杰常婧一邓会刘秀丽崔维军周洁吴月燕严成其王栩鸣浙江万里学院生物与环境学院浙江宁波315100 浙江省农业科学院病毒学与生物技术研究所农产品质量安全危害因子与风险防控国家重点实验室浙江杭州310021 余姚市农业技术推广服务总站浙江余姚315400 宁波市农业科学研究院浙江宁波315100

水稻白叶枯病(bacterial leaf blight,BLB)是由水稻黄单胞菌属水稻致病变种(Xanthomonas oryzae ***,Xoo)引起的细菌性病害,严重影响水稻产量。随着基因技术的发展,编辑抗病基因是提高水稻抗病性降低该病害的发生的一种行之有效的方法... 详细信息

水稻白叶枯病(bacterial leaf blight,BLB)是由水稻黄单胞菌属水稻致病变种(Xanthomonas oryzae ***,Xoo)引起的细菌性病害,严重影响水稻产量。随着基因技术的发展,编辑抗病基因是提高水稻抗病性降低该病害的发生的一种行之有效的方法。本研究首先对D3基因编辑株系和野生型进行白叶枯病菌接种实验来确定D3基因对于白叶枯病菌的抗性,其次利用高通量测序技术对已筛选出的遗传纯合D3基因编辑株系进行转录组分析,同时结合基因差异表达分析、基因家族分析和富集分析挖掘其在抗病相关通路上的潜在作用,并通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术对部分差异表达基因(differential expressed genes,DEGs)进行验证。结果表明:接种白叶枯病菌后D3基因被显著诱导,同时D3基因编辑株系均表现出不同程度的白叶枯病抗性。转录组数据显示,与野生型相比,在转录组水平共鉴定到8184个差异表达基因,包含4201个上调基因和3983个下调基因,3组均呈现差异表达的相关基因共有359个。GO功能富集分析表明,D3基因编辑株系与野生型在生物学途径、细胞组分和分子功能上的相关基因均呈显著差异表达。KEGG代谢途径富集分析发现,DEGs显著富集于植物与病原菌互作、植物激素信号转导以及苯丙烷生物合成途径。本研究丰富了水稻D3基因在抗病相关基因转录调控方面的信息,为D3基因抗病功能研究拓展了思路。

关键词：水稻白叶枯病 D 3基因转录组分析差异表达基因

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利用深度蛋白质组学解析植物激素参与果实成熟调控的机理

利用深度蛋白质组学解析植物激素参与果实成熟调控的机理

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中国园艺学会采后科学技术分会暨中国植物病理学会产后病理学专业委员会2017年学术年会

作者：周忠静谭金娟孙林啸邓志平浙江省植物有害生物防控国家重点实验室培育基地浙江省农业科学院病毒学与生物技术研究所浙江杭州310021

激素通过改变信号蛋白含量或者翻译后修饰状态(如磷酸化、泛素化等)来传递信号，调控植物生长和发育，包括果实成熟和衰老。我们认为研究信号蛋白的含量以及修饰状态能更深入揭示激素在果实成熟中的功能。基于此假设，我们利用果实成熟...

激素通过改变信号蛋白含量或者翻译后修饰状态(如磷酸化、泛素化等)来传递信号，调控植物生长和发育，包括果实成熟和衰老。我们认为研究信号蛋白的含量以及修饰状态能更深入揭示激素在果实成熟中的功能。基于此假设，我们利用果实成熟研究模式植物番茄，在蛋白质组学水平研究果实成熟中蛋白及其磷酸化、泛素化状态的动态变化。在番茄果实中，我们鉴定到1万多种蛋白质、3万多种磷酸化肽段以及3千多种泛素化肽段。定量结果表明，在番茄果实成熟中，乙烯、ABA以及油菜素甾醇等激素的某些信号蛋白发生磷酸化或者去磷酸化，和这些激素作用引起的结果一致：如乙烯信号传递中ETR4以及EIN2的去磷酸化，油菜素甾醇信号因子BIN2和BZR1的去磷酸化。此外，一些信号蛋白在成熟过程中的含量及翻译后修饰状态的改变，在乙烯受体突变体Nr中受到抑制，表明乙烯调控其他激素在果实成熟中的功能。另外，结果表明，番茄成熟主要调控因子，如RIN、NOR、CNR等为磷酸化蛋白。除了番茄，我们在草莓果实成熟中也鉴定到多种激素信号蛋白含量或者翻译后修饰状态的改变。因此，研究果实中信号蛋白的含量及修饰状态变化，将和研究激素的含量或者激素应答基因表达水平等方法一样，是研究激素在果实成熟中功能的有效手段。

关键词：

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水稻抗白叶枯病主效QTL的定位与候选基因的筛选

水稻抗白叶枯病主效QTL的定位与候选基因的筛选

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中国植物病理学会2012年学术年会

作者：杨勇王栩鸣余初浪陈利娜周洁程晔严成其陈剑平浙江省植物有害生物防控重点实验室/省部共建国家重点实验室培育基地/浙江省农业科学院/病毒学与生物技术研究所

疣粒野生稻（Oryza meyeriana）高抗水稻白叶枯病,其抗病基因在水稻新品种的培育中具有广阔的应用前景。我们曾经利用不对称体细胞杂交的方法将疣粒野生稻高抗白叶枯病特性导入到了栽培稻中,获得了以栽培稻为遗传背景的高抗白叶枯病的... 详细信息

疣粒野生稻（Oryza meyeriana）高抗水稻白叶枯病,其抗病基因在水稻新品种的培育中具有广阔的应用前景。我们曾经利用不对称体细胞杂交的方法将疣粒野生稻高抗白叶枯病特性导入到了栽培稻中,获得了以栽培稻为遗传背景的高抗白叶枯病的水稻新种质Y73。并对Y73进行了抗病数量性状位点（quantitative trait loci,QTLs）的定位,从中鉴定到一个主效QTL（qR5）对Y73抗性的贡献率较大。基于以上的研究基础,我们进一步对qR5进行了精细定位和候选基因的筛选,结果如下:1.利用来自水稻12条染色体上的分子标记,分析Y73/IR24高代回交群体BCF,获得了遗传背景纯化为感病亲本IR24的具有单个抗性位点的单染色体片段替换系（chromosome segmentsubstitution lines,CSSLs）单株2CK6-5。2.以2CK6-5和感病品种IR24为亲本构建定位分离群体,对qR5进行了精细定位,最终将qR5定位于物理距离约为220kb的染色体区间内。3.利用Solexa技术对Y73进行了全基因组重测序分析,在定位区间内获得了38个单核苷酸多态性（single nucleotide polymorphisms,SNP）突变位点和38个插入/缺失（Insert/Deletion,InDel）突变位点。基于水稻基因组数据库网站（http://***和http://***/）,对获得的76个突变位点进行基因注释,共得到24个相关基因。4.对重测序所预测的突变进行序列克隆和测序验证,结果显示3个相关基因的突变真实存在,推测3个基因中可能存在qR5的候选基因。本研究的结果为qR5候选基因的克隆、抗性机理的研究以及该基因在分子标记辅助育种中的应用提供了重要的基础。

关键词：白叶枯病分子标记单染色体片段替换系精细定位预测基因

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RuBP羧化酶活化酶参与疣粒野生稻对白叶枯病的抗性

RuBP羧化酶活化酶参与疣粒野生稻对白叶枯病的抗性

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中国植物病理学会2011年学术年会

作者：杨勇王栩鸣余初浪周洁程晔陈利娜严成其陈剑平浙江省植物有害生物防控重点实验室/省部共建国家重点实验室培育基地浙江省农业科学院病毒学与生物技术研究所

＜正＞疣粒野生稻是我国现存的三种野生稻之一,其对水稻白叶枯病具有高度的抗性,接近免疫。本研究发现,接种白叶枯病菌后10d,感病水稻品种"大粒香"的实际光化学效率（φⅡ）显著降低,而疣粒野生稻的φⅡ则无明显变化。但是在... 详细信息

＜正＞疣粒野生稻是我国现存的三种野生稻之一,其对水稻白叶枯病具有高度的抗性,接近免疫。本研究发现,接种白叶枯病菌后10d,感病水稻品种"大粒香"的实际光化学效率（φⅡ）显著降低,而疣粒野生稻的φⅡ则无明显变化。但是在接种病菌早期（约10h）疣粒野生稻的ΦⅡ存在一个先快速下降后恢复的过程。测定此时的疣粒野生稻光合电子传递链的电子传递速率,对照和接种病菌的植株并没有明显的变化,而RuBP

关键词：疣粒野生稻白叶枯病 RuBP羧化酶 Rubisco活化酶抗病性

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应用质谱技术检测农作物病害

应用质谱技术检测农作物病害

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第十届全国青年植保科技创新学术研讨会

作者：陈卓浙江省农业科学院病毒学与生物技术研究所杭州 310021 贵州大学绿色农药与农业生物工程教育部重点实验室贵阳550025

质谱技术广泛应用于蛋白质的研究中,特别是基质辅助激光解析离子化质谱和液相色谱—质谱联用.与PCR和ELISA相比,该技术的优势是不依赖于病原特异的诊断试剂,如病原特异引物或抗体等.随着质谱技术以及与质谱配套的分离技术、多反应监控... 详细信息

质谱技术广泛应用于蛋白质的研究中,特别是基质辅助激光解析离子化质谱和液相色谱—质谱联用.与PCR和ELISA相比,该技术的优势是不依赖于病原特异的诊断试剂,如病原特异引物或抗体等.随着质谱技术以及与质谱配套的分离技术、多反应监控、免标记、iTraq以及后端的质谱数据的生物信息学分析技术的完善，可利用质谱对植物病毒、真菌、细菌等多种病原同时检测，具有检测覆盖面广、检测效率高优点，并可进行生理小种、耐受菌种株系的进一步区分。

关键词：农作物病害病原检测质谱技术生物信息学

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灌浆期高温对稻米品质影响的品种类型间差异

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浙江农业学报 2024年第12期36卷 2657-2665页

作者：谭宇虹周敏张华张恒王伏林宋涛朱英徐恒浙江师范大学生命科学学院浙江金华321004 浙江省农业科学院病毒学与生物技术研究所省部共建农产品质量安全危害因子与风险防控国家重点实验室浙江杭州310021 云南大学农学院云南昆明650504

为了探讨灌浆期高温对不同水稻品种(粳稻和籼稻)稻米外观和食味品质的影响,利用人工气候室设置高温(日温35℃/夜温28℃)和常温(日温28℃/夜温22℃) 2个温度,在灌浆结实期对3个粳稻品种和3个籼稻品种进行处理。结果显示,灌浆结实期高温... 详细信息

为了探讨灌浆期高温对不同水稻品种(粳稻和籼稻)稻米外观和食味品质的影响,利用人工气候室设置高温(日温35℃/夜温28℃)和常温(日温28℃/夜温22℃) 2个温度,在灌浆结实期对3个粳稻品种和3个籼稻品种进行处理。结果显示,灌浆结实期高温会造成所有品种稻米外观变差、千粒重下降,但籼稻品种高温下种子垩白的产生和千粒重下降幅度明显少于粳稻品种。另外,直链淀粉合成酶基因(Wx)的单倍型不同的品种对高温的敏感度也是不同的,Wxa类型的品种高温下直链淀粉含量的变化幅度较Wxb和Wxmq类型的品种小,而同样是Wxb类型的品种,在籼型背景下直链淀粉含量下降幅度又明显低于粳型品种,表明籼稻品种对灌浆结实期高温的耐受性要高于粳稻品种,且除Wx外,籼粳之间还存在一些差异位点与高温下稻米外观和食味品质的调控相关。该研究结果有助于了解不同水稻品种(粳稻和籼稻)以及不同Wx等位基因类型的品种在响应灌浆结实期高温的差异,为后续耐高温品种选育提供帮助。

关键词：高温水稻直链淀粉含量品种类型

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茉莉酸信号关键转录因子OsMYC2影响水稻愈伤诱导和分化的功能初探

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浙江农业学报 2023年第5期35卷 973-982页

作者：蒋莹莹张华雷志伟徐恒张恒朱英浙江师范大学化学与生命科学学院浙江金华321004 浙江省农业科学院病毒学与生物技术研究所农产品质量安全危害因子与风险防控省部共建国家重点实验室浙江省作物分子育种工程技术研究中心浙江杭州310021 浙江农林大学现代农学院浙江杭州311300

为了了解茉莉酸(jasmonic acid,JA)信号途径基因在水稻愈伤组织诱导和分化过程中的作用,本研究对转录因子基因OsMYC 2在水稻再生过程中的功能进行了研究。利用qRT-PCR技术对OsMYC 2基因在水稻愈伤诱导和分化过程中的表达进行动态分析,... 详细信息

为了了解茉莉酸(jasmonic acid,JA)信号途径基因在水稻愈伤组织诱导和分化过程中的作用,本研究对转录因子基因OsMYC 2在水稻再生过程中的功能进行了研究。利用qRT-PCR技术对OsMYC 2基因在水稻愈伤诱导和分化过程中的表达进行动态分析,同时对osmyc 2基因编辑突变体在水稻组织培养再生过程中的表型进行鉴定,并对osmyc 2突变体愈伤中的一些重要标记基因的表达进行调查和分析。qRT-PCR基因表达鉴定结果显示,OsMYC 2基因在水稻成熟胚愈伤组织诱导和分化过程中均存在一定量的表达,且在分化期的表达量相对较高。而osmyc2突变体的愈伤诱导效率和分化效率均显著低于野生型对照日本晴。同时,基因表达分析发现,OsERF 101、OsBBM 2和OsWUS等与再生相关的重要基因在osmyc 2突变体愈伤中的表达与野生型对照相比均显著下降。由此表明,OsMYC 2基因可能通过茉莉酸信号途径影响水稻成熟胚愈伤组织的诱导形成和胚性愈伤的分化。该研究对OsMYC 2在水稻再生过程中的作用进行了探索性研究,为未来深入研究茉莉酸信号途径影响水稻组织培养的分子机制提供了一定的理论基础。

关键词： OsMYC2 水稻再生基因编辑愈伤分化茉莉酸信号途径

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水稻黑条矮缩病发生流行规律、监测预警与防控关键技术

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浙江农业学报 2007年第3期19卷 141-146页

作者：王华弟祝增荣陈剑平汪恩国李宝福浙江省植物保护检疫局浙江杭州310020 浙江大学农业与生物技术学院水稻生物学国家重点实验室浙江杭州310029 浙江省农业科学院病毒学与生物技术研究所浙江杭州310021 浙江省临海市植保站浙江临海317000 浙江省台州市农业局浙江椒江318000

黑条矮缩病为灰飞虱传播的一种毁灭性的水稻病毒病。经2000—2005年协作攻关研究,初步探明了该病害发生流行规律、再猖獗原因与危害损失,提出了合理的防治指标、预测方法与测报调查规范;开发了“3S”监测预警技术,组建带毒率估测模型,... 详细信息

黑条矮缩病为灰飞虱传播的一种毁灭性的水稻病毒病。经2000—2005年协作攻关研究,初步探明了该病害发生流行规律、再猖獗原因与危害损失,提出了合理的防治指标、预测方法与测报调查规范;开发了“3S”监测预警技术,组建带毒率估测模型,应用于中长期预测预报;提出了以推广抗病良种、改进育秧方式、扒蘖补丛等保健栽培为基础,治秧田保大田、治虫防病的药剂防治为重点的防治新策略;初步形成适合于长江下游稻区特点的水稻黑条矮缩病综合防治的技术体系,生产上大面积推广应用,有效地控制了水稻黑条矮缩病发生危害,取得了显著的社会经济效益。

关键词：黑条矮缩病流行规律防治指标监测预警综合防治

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植物褪黑素的研究进展

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江苏农业科学 2020年第24期48卷 17-24页

作者：陈贤杨勇刘凤权江苏省农业科学院植物保护研究所江苏南京210014 浙江省农业科学院病毒学与生物技术研究所浙江杭州310021 江苏省食品质量安全重点实验室-省部共建国家重点实验室培育基地江苏南京210014

褪黑素(melatonin,简称MT)是生物进化中一种保守的胺类激素,广泛存在于动物、植物及微生物体内。在植物中,褪黑素在调控植物生长和提高植物响应环境胁迫等方面发挥重要的作用。本文从植物褪黑素的发现、分子结构及化学性质、植物褪黑素... 详细信息

褪黑素(melatonin,简称MT)是生物进化中一种保守的胺类激素,广泛存在于动物、植物及微生物体内。在植物中,褪黑素在调控植物生长和提高植物响应环境胁迫等方面发挥重要的作用。本文从植物褪黑素的发现、分子结构及化学性质、植物褪黑素的合成与分解代谢等方面进行了归纳与总结,重点阐述了褪黑素在植物生长与发育中的生理功能及在植物抗逆抗病中的调控作用,并对未来植物褪黑素的研究方向进行了展望。

关键词：植物褪黑素分子结构化学性质生理功能环境胁迫

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