检索结果-内蒙古大学图书馆

中国比较医学杂志 2016年第4期26卷 7-13,23页

作者：吴方余陈欢张欢欢马月俞冰应华忠浙江中医药大学药学院杭州浙江310053 浙江省医学科学院浙江省实验动物与安全性研究重点实验室杭州浙江310013

目的探讨线粒体-细胞色素C途径在兔非酒精性脂肪肝(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)肝细胞凋亡中的作用。方法雄性日本大耳兔40只,随机分为正常对照组(8周)和NAFLD模型组(4、6、8周组),每组各10只。模型组按1.2 m L/kg皮下注... 详细信息

目的探讨线粒体-细胞色素C途径在兔非酒精性脂肪肝(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)肝细胞凋亡中的作用。方法雄性日本大耳兔40只,随机分为正常对照组(8周)和NAFLD模型组(4、6、8周组),每组各10只。模型组按1.2 m L/kg皮下注射花生油,2次/周,建立日本大耳兔NAFLD模型。按各组时间点处死兔子,测定兔血清中生化指标水平;HE染色观察肝组织病理形态改变,流式细胞仪检测肝细胞凋亡率;提取肝脏线粒体,分光光度法检测线粒体通透转换孔(mitochondrial permeability transition pore,MPTP)的状态变化;免疫组织化学法检查Bcl-2、Bax、细胞色素C和caspase-3在肝组织中的表达情况;Western blot检测细胞色素C以及caspase-3含量变化。结果与正常对照组相比,模型组肝脏脂质代谢指标和相关炎症因子表达水平升高,模型组肝细胞凋亡率与对照组比较显著增加(P<0.01)。造模4周时出现肝功能损伤,脂质代谢紊乱,随着NAFLD病程的发展,Bcl-2、Bax、细胞色素C和caspase-3表达量逐渐增加,线粒体通透转换孔开放率随高脂饮食饲养时间延长明显增加(P<0.01)。结论线粒体-细胞色素C途径在NAFLD引起的肝细胞凋亡中起到了一定的调控作用。

关键词：非酒精性脂肪肝凋亡细胞色素C 胱冬肽酶-3 线粒体通透转换孔

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偏苯三酸三辛酯对肝细胞的毒性作用及其机制

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实验动物与比较医学 2016年第3期36卷 212-215页

作者：陈献花方丽李雪来余陈欢应华忠浙江省医疗器械检验院、浙江省医疗器械安全性评价研究重点实验室杭州310018 浙江省医学科学院、浙江省实验动物与安全性评价重点实验室杭州310013

目的研究偏苯三酸三辛酯（TOTM）的肝细胞毒性作用及其毒性机制.方法将TOTM0.062 5～1.0 mg/mL分别与HepG2、LO2、Hep 1-6肝细胞作用48 h.采用MTT法检测细胞存活率并计算半抑制浓度（IC50）值;倒置显微镜观察细胞形态变化;采用试剂盒... 详细信息

目的研究偏苯三酸三辛酯（TOTM）的肝细胞毒性作用及其毒性机制.方法将TOTM0.062 5～1.0 mg/mL分别与HepG2、LO2、Hep 1-6肝细胞作用48 h.采用MTT法检测细胞存活率并计算半抑制浓度（IC50）值;倒置显微镜观察细胞形态变化;采用试剂盒检测细胞培养液中丙氨酸转氨酶（ALT）、天冬氨酸转氨酶（AST）和乳酸脱氢酶（LDH）含量;采用流式细胞技术检测细胞凋亡情况.结果 TOTM对肝细胞增殖有明显的抑制作用,MTT检测显示TOTM对HepG2、LO2、Hep1-6肝细胞的IC50分别为1.74 mg/mL、0.34 mg/mL和0.23 mg/mL.随着TOTM剂量的增加,TOTM能升高肝细胞上清中AST、ALT含量,促进LDH释放和细胞凋亡.结论 TOTM对肝细胞具有一定的毒性作用.

关键词：偏苯三酸三辛酯肝细胞细胞凋亡

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甲型流感病毒感染小鼠肺组织中环状RNA的表达变化及其靶基因功能分析

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国际流行病学传染病学杂志 2016年第6期43卷 382-387页

作者：谢珲张欢欢马月俞文英余陈欢浙江省医学科学院实验动物中心浙江省实验动物与安全性研究重点实验室杭州310013 浙江省医学科学院药物所杭州310013

目的明确参与甲型流感病毒（IAV）感染小鼠肺组织中环状RNA（circRNA）的表达变化，并分析其靶基因生物学功能。方法采用高通量测序的方法，测定并鉴定了IAV感染组和正常对照组小鼠肺组织中circRNA的表达差异及其靶基因。利用GeneOntol... 详细信息

目的明确参与甲型流感病毒（IAV）感染小鼠肺组织中环状RNA（circRNA）的表达变化，并分析其靶基因生物学功能。方法采用高通量测序的方法，测定并鉴定了IAV感染组和正常对照组小鼠肺组织中circRNA的表达差异及其靶基因。利用GeneOntology（GO）和KyotoEncyclopediaofGenesandGenomes（KEGG）软件分析差异表达的circRNA靶基因生物学功能。结果共获得12个显著差异表达的circRNAs（差异倍数〉2），其中circRNA5828表达量显著下调，circRNAl3602和circRNAl3853表达量显著上调。生物信息学软件分析表明，12个circRNA靶基因在生物过程、细胞组成和分子功能三方面均发挥作用，并影响抗原加工提呈、T011样受体、维甲酸诱导基因-I样受体和心肌功能等相关信号通路。结论circRNA可能通过宿主免疫调控参与IAV的感染过程。

关键词：流感病毒A型环状RNA Toll样受体维甲酸诱导基因-I样受体宿主免疫

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地黄药效microRNAs的鉴定及其靶基因功能分析

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中国中医药科技 2016年第4期23卷 416-420页

作者：马月胡毅翔张欢欢俞文英余陈欢应华忠浙江省医学科学院浙江省实验动物与安全性研究重点实验室浙江杭州310013

目的:筛选地黄microRNAs(miRNAs)类药效物质及其靶基因功能分析。方法:采用高通量测序法,测定地黄、空白小鼠和喂食地黄匀浆液小鼠肝组织及血浆中miRNAs的表达丰度,并与Gene Bank上的植物microRNA数据库比对,结合荧光定量PCR验证,鉴定... 详细信息

目的:筛选地黄microRNAs(miRNAs)类药效物质及其靶基因功能分析。方法:采用高通量测序法,测定地黄、空白小鼠和喂食地黄匀浆液小鼠肝组织及血浆中miRNAs的表达丰度,并与Gene Bank上的植物microRNA数据库比对,结合荧光定量PCR验证,鉴定吸收进入体内的地黄miRNAs,以人类mRNA为靶标,采用Target Scan与MiRanda预测地黄miRNAs的靶基因,并通过GO与KEGG分析靶基因的相关功能。结果:共鉴定出2个地黄miRNAs可吸收进入体内,其主要在生化过程、细胞成分和分子功能3大区域发挥作用,并影响肿瘤、代谢、炎症等相关信号通路。结论:miRNAs可能是一类新型的中药药效物质。

关键词：地黄 miRNAs @靶基因功能中药鉴定

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车前草醇提物治疗肾草酸钙结石的作用及其机制

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中国临床药理学与治疗学 2016年第11期21卷 1239-1245页

作者：吕昂范新苏倩余陈欢钟宇森张欢欢杭州市第一人民医院药学部杭州市妇产科医院药学部浙江省医学科学院浙江省实验动物与安全性研究重点实验室

目的:观察车前草醇提物对大鼠肾草酸钙结石形成的影响,并探讨其初步作用机制。方法:采用1%乙二醇联合2%氯化铵诱导大鼠肾草酸钙结石模型。收集各组大鼠尿量;采用化学比色法,检测各组大鼠尿中尿草酸(Ox)、镁离子(Mg^(2+))、肌酐(Cr)含量... 详细信息

目的:观察车前草醇提物对大鼠肾草酸钙结石形成的影响,并探讨其初步作用机制。方法:采用1%乙二醇联合2%氯化铵诱导大鼠肾草酸钙结石模型。收集各组大鼠尿量;采用化学比色法,检测各组大鼠尿中尿草酸(Ox)、镁离子(Mg^(2+))、肌酐(Cr)含量,血清及肾组织中钙离子(Ca^(2+))、BUN、Mg^(2+)、Cr含量;采用荧光实时定量PCR和蛋白印迹法,分别检测各组大鼠肾组织NOX4、bikunin、Nrf2、HO-1、NQO1和γ-GCS mRNA和蛋白表达水平。结果:与模型组相比,车前草醇提物能显著提高大鼠尿量,提高尿液Ox、Mg^(2+)、Ca^(2+)排泄量,降低血清和肾组织中Ca^(2+)、BUN、Mg^(2+)和Cr含量;此外还能降低肾组织NOX4蛋白表达,提高肾组织bikunin、Nrf2、HO-1、NQO1及γ-GCS mRNA和蛋白表达水平。结论:车前草醇提物可通过促进尿液排泄和上调bikunin、Nrf2/ARE通路相关因子表达,抑制大鼠肾草酸钙结石的形成。

关键词：车前草大车前苷肾结石 bikunin 氧化应激

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偏苯三酸三辛酯(TOTM)对肝细胞的毒性作用及其机制

偏苯三酸三辛酯(TOTM)对肝细胞的毒性作用及其机制

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华东地区第十四届实验动物科学学术交流会

作者：陈献花方丽李雪来余陈欢应华忠浙江省医疗器械检验院浙江省医疗器械安全性评价研究重点实验室杭州310018 浙江省医学科学院浙江省实验动物与安全性评价重点实验室杭州310013

目的研究偏苯三酸三辛酯(TOTM)的肝细胞毒性作用及其毒性机制.方法 TOTM 0.0625mg/ml～1.0 mg/ml分别与HepG2、LO2、Hep 1-6肝细胞作用48小时.采用MTT法检测细胞存活率并计算IC50值;倒置显微镜观察细胞形态变化;采用试剂盒检测细胞培... 详细信息

目的研究偏苯三酸三辛酯(TOTM)的肝细胞毒性作用及其毒性机制.方法 TOTM 0.0625mg/ml～1.0 mg/ml分别与HepG2、LO2、Hep 1-6肝细胞作用48小时.采用MTT法检测细胞存活率并计算IC50值;倒置显微镜观察细胞形态变化;采用试剂盒检测细胞培养液中丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)和乳酸脱氢酶(LDH)含量;采用流式细胞技术检测细胞凋亡情况.结果 TOTM对肝细胞增殖有明显的抑制作用,MTT检测显示TOTM对HepG2、LO2、Hep1-6肝细胞的IC50分别为1.74、0.34和0.23 mg/ml.随着TOTM浓度剂量的增加,TOTM能升高肝细胞上清中AST、ALT含量,促进LDH释放和细胞凋亡.结论 TOTM对肝细胞具有一定的毒性作用.

关键词：偏苯三酸三辛酯肝细胞细胞凋亡

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长爪沙鼠肝星状细胞的分离培养与鉴定

长爪沙鼠肝星状细胞的分离培养与鉴定

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华东地区第十四届实验动物科学学术交流会

作者：楼琦李巍石巧娟卢领群郭红刚杜江涛萨晓婴浙江省医学科学院实验动物中心浙江省实验动物与安全性研究重点实验室浙江杭州310010

目的探索长爪沙鼠稳定、经济的肝星状细胞分离和培养方法,为深入探讨长爪沙鼠肝纤维化的细胞机制提供技术支撑.方法取成年雄性长爪沙鼠,用链蛋白酶、胶原酶及DNA酶体内门静脉灌注消化长爪沙鼠肝脏细胞,经Nycodenz密度梯度离心,分离肝... 详细信息

目的探索长爪沙鼠稳定、经济的肝星状细胞分离和培养方法,为深入探讨长爪沙鼠肝纤维化的细胞机制提供技术支撑.方法取成年雄性长爪沙鼠,用链蛋白酶、胶原酶及DNA酶体内门静脉灌注消化长爪沙鼠肝脏细胞,经Nycodenz密度梯度离心,分离肝星状细胞.台盼蓝拒染实验鉴定细胞活力,α-SMA,Desmin免疫细胞化学染色鉴定细胞性质.结果肝星状细胞得率为0.5～1×107/肝.肝星状细胞存活率在90％以上.原代培养3dα-SMA阳性细胞达75％以上,传代培养后,α-SMA,Desmin阳性达100％.结论成功建立了稳定可靠的长爪沙鼠肝星状细胞分离培养方法,为肝脏相关疾病研究和防治药物的开发提供了技术支持.

关键词：长爪沙鼠肝星状细胞细胞分离原代培养

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长爪沙鼠原位肝移植模型的建立

长爪沙鼠原位肝移植模型的建立

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华东地区第十四届实验动物科学学术交流会

作者：楼琦卢领群郭红刚李巍石巧娟杜江涛萨晓婴浙江省医学科学院实验动物中心浙江省实验动物与安全性研究重点实验室浙江杭州310010

目的建立长爪沙鼠原位肝移植模型的方法与技术.方法用改良的双套管法行100对长爪沙鼠原位肝移植手术,门静脉、肝下下腔静脉行套管吻合,而肝上上腔静脉采用缝合法,胆管内支架法完成胆道重建.结果在手术成熟后,供体手术时间为34.56... 详细信息

目的建立长爪沙鼠原位肝移植模型的方法与技术.方法用改良的双套管法行100对长爪沙鼠原位肝移植手术,门静脉、肝下下腔静脉行套管吻合,而肝上上腔静脉采用缝合法,胆管内支架法完成胆道重建.结果在手术成熟后,供体手术时间为34.56±5.12 min,修肝及安置套管时间为15.43±2.75 min,受体手术时间为58.37±8.54 min,其中无肝期为23.66±4.47 min.手术成功率为86.67％(术后存活6h以上).结论改良的双套管法成功建立了长爪沙鼠肝移植模型,通过手术技巧训练可提高手术成功率,延长爪沙鼠存活时间.

关键词：长爪沙鼠肝移植动物模型

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玉麦microRNAs类活性物质的筛选及功能分析

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中国现代应用药学 2016年第1期33卷 12-15页

作者：王丹仙马月方杰胡毅翔俞文英余陈欢应华忠浙江中医药大学药学院杭州310053 浙江省医学科学院浙江省实验动物与安全性研究重点实验室杭州310013

目的鉴定玉麦中可吸收入血的micro RNAs(mi RNAs)类活性物质,并分析其靶基因功能。方法采用二代高通量测序法,以正常小鼠血浆mi RNAs为空白对照,测定喂食玉麦匀浆液小鼠血浆中mi RNAs的总量,并与玉麦mi RNAs比对,鉴定吸收入体内的玉麦mi... 详细信息

目的鉴定玉麦中可吸收入血的micro RNAs(mi RNAs)类活性物质,并分析其靶基因功能。方法采用二代高通量测序法,以正常小鼠血浆mi RNAs为空白对照,测定喂食玉麦匀浆液小鼠血浆中mi RNAs的总量,并与玉麦mi RNAs比对,鉴定吸收入体内的玉麦mi RNAs。采用Target Scan与Mi Randa软件,预测玉麦mi RNAs可能作用于人类m RNA靶基因,并通过Gene Ontology(GO)与Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes(KEGG)分析靶基因的相关功能和信号途径。结果共鉴定出12个可吸收入体内的玉麦mi RNAs。GO与KEGG分析显示这些mi RNAs可能调控的靶基因及其参与的生物学功能包括胰岛素信号通路、癌症通路、MAPK通路等相关信号通路,其中mi R4995、mi R156a、mi R396e为玉麦可能的主要核酸活性物质。结论 mi RNAs可能为玉麦中的一种新的活性物质。

关键词：药效物质高通量测序靶基因

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克白颗粒镇静抗疲劳作用研究

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中国现代应用药学 2016年第3期33卷 297-300页

作者：王薇康斯丹王跃鑫黄巧玲胡毅翔余陈欢杭州市第三人民医院杭州310003 浙江省医学科学院浙江省实验动物与安全性研究重点实验室杭州310013

目的观察克白颗粒的镇静抗疲劳作用。方法小鼠灌胃给予克白颗粒2.26,4.52,9.04 g·kg?1,观察克白颗粒对小鼠神经系统、游泳时间以及缺氧耐受能力的影响。结果不同剂量的克白颗粒对小鼠一般行为学及自主活动没有显著影响,9.04 g·... 详细信息

目的观察克白颗粒的镇静抗疲劳作用。方法小鼠灌胃给予克白颗粒2.26,4.52,9.04 g·kg?1,观察克白颗粒对小鼠神经系统、游泳时间以及缺氧耐受能力的影响。结果不同剂量的克白颗粒对小鼠一般行为学及自主活动没有显著影响,9.04 g·kg?1克白颗粒能显著延长小鼠睡眠潜伏期时间和睡眠时间,并且能延长小鼠的耐缺氧时间(P<0.05),4.52,9.04 g·kg?1的克白颗粒能显著延长小鼠的游泳时间(P<0.01)。结论克白颗粒具有一定的镇静和抗疲劳作用。

关键词：克白颗粒抗疲劳安全性评价

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