检索结果-内蒙古大学图书馆

肿瘤 2009年第1期29卷 31-34页

作者：李长龙刘建文萨晓婴邓皖利许建华范忠泽华东理工大学药学院药物科学系上海200237 浙江省医学科学院实验动物中心实验动物与安全性研究重点实验室杭州310013 上海中医药大学附属普陀医院中医肿瘤科上海200062

目的:建立长春新碱(vincristine,VCR)耐药结肠癌细胞株,初步探讨该细胞株的多药耐药机制。方法:通过逐步增加药物浓度的方法建立VCR耐药结肠癌细胞株。细胞毒实验采用MTT法,细胞周期测定采用碘化丙啶荧光染色法,P-糖蛋白(P-gp)测定采用... 详细信息

目的:建立长春新碱(vincristine,VCR)耐药结肠癌细胞株,初步探讨该细胞株的多药耐药机制。方法:通过逐步增加药物浓度的方法建立VCR耐药结肠癌细胞株。细胞毒实验采用MTT法,细胞周期测定采用碘化丙啶荧光染色法,P-糖蛋白(P-gp)测定采用FCM方法,细胞内VCR浓度测定采用高效液相色谱(high performance liquid chromatography,HPLC)法,多药耐药相关基因(MDR1、MRP1)的表达采用RT-PCR方法检测。结果:HCT-8/VCR的细胞倍增时间和细胞周期与敏感细胞株HCT-8相似。HCT-8/VCR对VCR的耐药倍数分别为19.7,对其他4种化疗药物也表现出不同的抗性。HCT-8/VCR细胞内VCR和DOX的累积量降低(P<0.01),且其细胞表面P-gp表达增加(P<0.01),MDR1 mRNA增加,但MRP1 mRNA没有变化。结论:建立了对VCR产生耐药的结肠癌细胞株HCT-8/VCR,其耐药机制可能为P-gp过量表达导致细胞外排活性增强,预期该细胞株可用于以P-gp为靶点的多药耐药逆转剂的研究。

关键词：结肠肿瘤长春新碱抗药性,肿瘤细胞系,肿瘤

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雌性SD大鼠主要脏器重量及其脏器系数观测

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实验动物与比较医学 2009年第4期29卷 259-261页

作者：陈文文毛栋森戴方伟施张奎萨晓婴浙江省医学科学院实验动物中心浙江省实验动物与安全性研究重点实验室杭州310013

目的测定雌性SD大鼠主要脏器重量及其脏器系数的变化。方法选用15、25、40、60和150日龄的雌性SD大鼠各30只，分别测定体重，安乐处死后取脑、颌下腺、心、肺、肝、脾、肾、肾上腺、胸腺、卵巢和子宫11个脏器称重，并计算脏器系数。结... 详细信息

目的测定雌性SD大鼠主要脏器重量及其脏器系数的变化。方法选用15、25、40、60和150日龄的雌性SD大鼠各30只，分别测定体重，安乐处死后取脑、颌下腺、心、肺、肝、脾、肾、肾上腺、胸腺、卵巢和子宫11个脏器称重，并计算脏器系数。结果各主要脏器及性器官重量随着体重的增加而增加，各脏器重量在不同日龄段大部分都有显著性差异（P〈0．05或P〈0．01）。随着日龄的增加，脑、肺、肾、心等器官的脏器系数则逐步下降，子宫和卵巢的脏器系数在40日龄内呈增长趋势，并达到高峰，随之下降。结论雌性SD大鼠在15～150日龄内机体处于快速生长阶段，以体重增加最为显著，雌性SD大鼠体重和脏器重量除个别外差异均比较显著，而脏器系数则表现不一，性器官的增长速度明显大于体重的增长。

关键词： SD大鼠性器官脏器重量脏器系数

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多种检测方法在雌性SD大鼠真性性早熟模型中的应用及其临床意义

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中国儿童保健杂志 2009年第5期17卷 566-568页

作者：戴方伟陈文文毛栋森萨晓婴浙江省医学科学院浙江省实验动物与安全性研究重点实验室浙江杭州310013

儿童性早熟是一种儿童生长发育异常的疾病,该病已成为最常见的小儿内分泌疾病之一。下丘脑-垂体-性腺轴功能的提前激活导致了真性性早熟的发生。目前,大鼠已经成为性发育研究的主要实验动物,本文就雌性大鼠性成熟过程中各种性发育指标... 详细信息

儿童性早熟是一种儿童生长发育异常的疾病,该病已成为最常见的小儿内分泌疾病之一。下丘脑-垂体-性腺轴功能的提前激活导致了真性性早熟的发生。目前,大鼠已经成为性发育研究的主要实验动物,本文就雌性大鼠性成熟过程中各种性发育指标判断方法进行系统介绍,并比较这些方法与临床儿童性早熟的关联,初步探讨雌性大鼠建立真性性早熟模型的应用价值和临床意义。

关键词： SD大鼠性早熟疾病模型诊断

来源：评论

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高纯度大豆卵磷脂对中国仓鼠肺细胞染色体畸变作用

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中国比较医学杂志 2009年第8期19卷 35-38,I0003页

作者：郭红刚周莎桑戴方伟石巧娟萨晓婴浙江省医学科学院浙江省实验动物中心浙江省实验动物与安全性研究重点实验室杭州310013

目的研究高纯度大豆卵磷脂对中国仓鼠肺细胞(CHL)染色体畸变作用。方法测定高纯度大豆卵磷脂对CHL细胞的半数抑制浓度(IC50),根据IC50设立不同剂量组,进行正式试验,分别观察高纯度大豆卵磷脂接触CHL 6 h,24 h及加S9后6 h染色体的畸变情... 详细信息

目的研究高纯度大豆卵磷脂对中国仓鼠肺细胞(CHL)染色体畸变作用。方法测定高纯度大豆卵磷脂对CHL细胞的半数抑制浓度(IC50),根据IC50设立不同剂量组,进行正式试验,分别观察高纯度大豆卵磷脂接触CHL 6 h,24 h及加S9后6 h染色体的畸变情况,根据标准进行结果判定。结果染毒6 h,24 h及加S9后染毒6h染色体畸变为阴性。结论高纯度大豆卵磷脂不能引起CHL细胞染色体产生畸变作用。

关键词：高纯度大豆卵磷脂中国仓鼠肺细胞染色体畸变

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SD雌性大鼠性发育早期性器官等脏器和性激素的动态变化

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中国比较医学杂志 2009年第7期19卷 33-37,I0008页

作者：戴方伟陈文文毛栋森楼琦卢领群郭红刚萨晓婴浙江大学动物科学学院动物医学系杭州310029 浙江省医学科学院实验动物中心浙江省实验动物与安全性研究重点实验室杭州310013

目的探讨正常SD雌性大鼠性成熟前不同日龄段的脏器与促黄体生成素(LH)、促卵泡素(FSH)、雌二醇(E2)等性激素的变化及其关系。方法从生产群中取出60窝密度状态一致的SD大鼠,在不同日龄随机选取雌性大鼠,检测152、5、32、40日龄时大鼠体... 详细信息

目的探讨正常SD雌性大鼠性成熟前不同日龄段的脏器与促黄体生成素(LH)、促卵泡素(FSH)、雌二醇(E2)等性激素的变化及其关系。方法从生产群中取出60窝密度状态一致的SD大鼠,在不同日龄随机选取雌性大鼠,检测152、5、32、40日龄时大鼠体重、主要脏器指数,子宫、卵巢组织变化和15、253、2、40、60日龄大鼠血清LH、FSH、E2水平。结果记录了SD雌性大鼠性成熟前各脏器指数和卵巢、子宫组织变化,结果显示大鼠卵巢、子宫的增长速度大于体重的增长,而其他脏器增速大都小于体重的增长。本研究还记录了血清LH、FSH、E2水平在不同日龄段的变化规律,表明血清LH、E2浓度在32日龄时出现较为明显升高。结论不同日龄大鼠脏器指数的动态变化提示大鼠性器官在性发育早期得到机体的优先发育。血清LH、E2水平在32日龄时有了明显升高,提示性腺轴功能已经激活。60日龄大鼠血清性激素水平的波动类似于动情周期的规律性变化,推测大鼠在60日龄前即已进入性成熟,这些结果将为大鼠性发育的相关研究提供重要的参考数据。

关键词： SD大鼠性发育器官指数促黄体生成素促卵泡素雌二醇

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重组人内抑素诱导佐剂性关节炎大鼠滑膜细胞凋亡的研究

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中国药理学通报 2008年第8期24卷 1027-1031页

作者：夏丽娟陈飞虎阮晶晶刘永靖袁凤来宣尧仙安徽医科大学药学院安徽合肥230032 浙江省医学科学院国家新药安全性评价研究重点实验室浙江杭州310013

目的以弗氏完全佐剂诱导的佐剂性关节炎(AA)大鼠为动物模型,观察重组人内抑素诱导AA大鼠滑膜细胞凋亡的作用。方法分离、培养滑膜细胞,噻唑蓝(MTT)比色法检测重组人内抑素体内用药对滑膜细胞增殖的影响;用缺口末端标记法(TUNEL)及流式... 详细信息

目的以弗氏完全佐剂诱导的佐剂性关节炎(AA)大鼠为动物模型,观察重组人内抑素诱导AA大鼠滑膜细胞凋亡的作用。方法分离、培养滑膜细胞,噻唑蓝(MTT)比色法检测重组人内抑素体内用药对滑膜细胞增殖的影响;用缺口末端标记法(TUNEL)及流式细胞仪检测重组人内抑素对AA滑膜细胞凋亡的影响。结果AA大鼠表现为滑膜细胞异常增殖,rh-End(1.25、2.5、5.0mg·kg-1)体内治疗给药及rh-End6.25～50mg·L-1浓度范围体外给药可抑制AA大鼠成纤维样滑膜细胞的增殖反应。rh-End体内用药可诱导AA大鼠滑膜组织及细胞的凋亡,rh-End体外用药作用48h,AnnexinV/PI双染色法观察到大鼠AAFLS凋亡率为1.77%,rh-End(25mg·L-1)可诱导AA大鼠FLS的凋亡,其凋亡率为6.67%。结论rh-End可不同程度抑制FLS的增殖反应,并诱导其凋亡的发生,减轻AA大鼠增生性滑膜炎。上述结果提示炎症增生的滑膜细胞可能是rh-End的另一个作用靶点。

关键词：重组人内抑素佐剂性关节炎滑膜细胞凋亡

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MDR1基因单靶点双荧光素酶报告基因系统的建立

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中国比较医学杂志 2008年第9期18卷 28-31页

作者：李长龙萨晓婴浙江省医学科学院浙江省实验动物中心浙江省实验动物与安全性研究重点实验室杭州310013

目的通过构建以MDR1启动子为启动序列的双荧光素酶报告基因系统并进行活性分析,为MDR1基因表达的单靶点调控研究和逆转剂的筛选提供一种有效的方法。方法从HCT-8细胞中提取DNA并克隆含有MDR1基因启动子中Y-box序列。将该序列重组到萤光... 详细信息

目的通过构建以MDR1启动子为启动序列的双荧光素酶报告基因系统并进行活性分析,为MDR1基因表达的单靶点调控研究和逆转剂的筛选提供一种有效的方法。方法从HCT-8细胞中提取DNA并克隆含有MDR1基因启动子中Y-box序列。将该序列重组到萤光素酶报告基因载体pGL-3-Basic的启动区域中,从而构建报告基因载体pGL-MDR1。将pGL-MDR1和pRL-TK载体共转染到HCT-8和HCT-8/VCR细胞中。通过调节不同载体的比例来优化转染效率。利用MDR1基因激活剂(热诱导)和抑制剂(EGCG)等处理来分析其启动转录活性受外界因素的影响。结果通过直接测序法验证了pGL-MDR1含有MDR1基因启动子Y-box序列且没有出现碱基突变。在pGL-MDR1和pRL-TK的转染比例为5:5时,转染效率最高并具有最高的萤光素酶活性。通过MDR1基因激活处理后表现为时间依赖性地激活MDR1基因的表达,而MDR1基因抑制剂的作用则相反。结论MDR1启动子为启动序列的双荧光素酶报告基因系统建立成功。该系统不但可以用于研究活体生物发光成像和MDR1基因表达的机理,而且可用于单靶点的多药耐药抑制剂的筛选。

关键词： MDR1 启动子荧光素酶报告基因活性鉴定

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高纯度大豆卵磷脂对中国仓鼠肺细胞染色体畸变作用

高纯度大豆卵磷脂对中国仓鼠肺细胞染色体畸变作用

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亚洲实验动物学会联合会（AFLAS）第三次会议暨中国实验动物学会（CALAS）第八届学术年会

作者：郭红刚周莎桑戴方伟石巧娟萨晓婴浙江省医学科学院浙江省实验动物中心浙江省实验动物与安全性研究重点实验室

目的研究高纯度大豆卵磷脂对中国仓鼠肺细胞(CHL)染色体畸变作用。方法测定高纯度大豆卵磷脂对CHL细胞的半数抑制浓度(IC50),根据IC50设立不同剂量组,进行正式试验,分别观察高纯度大豆卵磷脂接触CHL6h,24h及加S9后6h染色体的畸变情况,... 详细信息

目的研究高纯度大豆卵磷脂对中国仓鼠肺细胞(CHL)染色体畸变作用。方法测定高纯度大豆卵磷脂对CHL细胞的半数抑制浓度(IC50),根据IC50设立不同剂量组,进行正式试验,分别观察高纯度大豆卵磷脂接触CHL6h,24h及加S9后6h染色体的畸变情况,根据标准进行结果判定。结果染毒6h,24h及加S9后染毒6h染色体畸变为阴性。结论高纯度大豆卵磷脂不能引起CHL细胞染色体产生畸变作用。

关键词：高纯度大豆卵磷脂中国仓鼠肺细胞染色体畸变

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MDR1基因单靶点双荧光素酶报告基因系统的建立

MDR1基因单靶点双荧光素酶报告基因系统的建立

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亚洲实验动物学会联合会（AFLAS）第三次会议暨中国实验动物学会（CALAS）第八届学术年会

作者：李长龙萨晓婴浙江省医学科学院浙江省实验动物中心浙江省实验动物与安全性研究重点实验室

目的通过构建以MDR1启动子为启动序列的双荧光素酶报告基因系统并进行活性分析,为MDR1基因表达的单靶点调控研究和逆转剂的筛选提供一种有效的方法。方法从HCT-8细胞中提取DNA并克隆含有MDR1基因启动子中Y-box序列。将该序列重组到萤光素酶报告基因载体pGL-3-Basic的启动区域中,从而构建报告基因载体pGL-MDR1。将pGL-MDR1和pRL-TK载体共转染到HCT-8和HCT-8/VCR细胞中。通过调节不同载体的比例来优化转染效率。利用MDR1基因激活剂(热诱导)和抑制剂(EGCG)等处理来分析其启动转录活性受外界因素的影响。结果通过直接测序法验证了pGL-MDR1含有MDR1基因启动子Y-box序列且没有出现碱基突变。在pGL-MDR1和pRL-TK的转染比例为5:5时,转染效率最高并具有最高的萤光素酶活性。通过MDR1基因激活处理后表现为时间依赖性地激活MDR1基因的表达,而MDR1基因抑制剂的作用则相反。结论 MDR1启动子为启动序列的双荧光素酶报告基因系统建立成功。该系统不但可以用于研究活体生物发光成像和MDR1基因表达的机理,而且可用于单靶点的多药耐药抑制剂的筛选。

关键词： MDR1 启动子荧光素酶报告基因活性鉴定

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无菌大鼠培育中无菌检测影响因素分析

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中国比较医学杂志 2008年第9期18卷 65-69页

作者：戴方伟萨晓婴周莎桑柯贤福楼琦卢领群王建国李兰娟浙江省医学科学院实验动物中心浙江省实验动物与安全性研究重点实验室杭州310013 浙江大学医学院附属第一医院传染病诊治国家重点实验室杭州310003

目的对无菌大鼠进行无菌检测,分析其微生物污染的多种影响因素。方法通过采集无菌隔离器内环境、无菌大鼠及其粪便等标本,选用合适的培养基在不同的条件下对其进行培养,并于第7天和第14天转种于血平皿,以此来判断无菌动物的无菌状态,并... 详细信息

目的对无菌大鼠进行无菌检测,分析其微生物污染的多种影响因素。方法通过采集无菌隔离器内环境、无菌大鼠及其粪便等标本,选用合适的培养基在不同的条件下对其进行培养,并于第7天和第14天转种于血平皿,以此来判断无菌动物的无菌状态,并分析出现微生物污染的影响因素。结果在被检的163例标本中,检出阳性13例,且各平行样检测结果一致。经复检确认,阳性结果中有10例是动物自身带菌,3例是培养基污染。结论本检测中所采用的培养基和方法准确可靠。检查用培养基质量、培养时间、标本处理等因素都可能影响无菌检测结果。

关键词：无菌大鼠无菌检测塑料隔离器

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