检索结果-内蒙古大学图书馆

中国药理学通报 2019年第4期35卷 514-518页

作者：张欢欢方杰毛诗莹杨扬谢珲余陈欢浙江省医学科学院浙江省实验动物中心浙江省实验动物与安全性研究重点实验室浙江杭州310013

目的筛选能抑制BRAF^(V600E) CT26细胞株增殖的中药单体化合物。方法通过慢病毒载体感染,构建BRAF^(V600E)稳定表达的CT26细胞稳转株。MTT检测细胞增殖,划痕实验检测细胞迁移,蛋白印迹检测MEK/ERK信号通路蛋白表达。Discovery Studio筛... 详细信息

目的筛选能抑制BRAF^(V600E) CT26细胞株增殖的中药单体化合物。方法通过慢病毒载体感染,构建BRAF^(V600E)稳定表达的CT26细胞稳转株。MTT检测细胞增殖,划痕实验检测细胞迁移,蛋白印迹检测MEK/ERK信号通路蛋白表达。Discovery Studio筛选BRAF^(V600E)高亲和中药单体化合物,并用MTT验证化合物抑制细胞增殖效果。结果与野生型CT26细胞相比,BRAF^(V600E) CT26细胞的增殖和迁移能力明显增强,MEK/ERK通路被进一步激活。芦荟素(aloin)、安格洛苷C(angoroside C)、杯苋甾酮(cyasterone)对BRAFV600E CT26细胞的抑制效果优于野生型CT26细胞(P <0. 05),并能明显降低BRAFV600E的蛋白表达。结论芦荟素、安格洛苷C、杯苋甾酮可能是结肠癌BRAFV600E突变的天然抑制剂。

关键词： BRAF^V600E CT26细胞系细胞增殖 MEK/ERK信号通路中药单体化合物抑制剂

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Anti-miR34c树状纳米颗粒对裸鼠肝纤维化的治疗作用

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中国实验动物学报 2018年第5期26卷 587-591页

作者：张欢欢方杰俞文英杨扬余陈欢应华忠浙江省医学科学院浙江省实验动物中心浙江省实验动物与安全性研究重点实验室杭州310013

目的探索anti-miR34c树状纳米颗粒对裸鼠肝纤维化的治疗效果。方法将清洁级(20±2)g裸鼠随机分为正常组、模型组、anti-miR34c树状纳米颗粒治疗组,每组5只,腹腔注射四氯化碳诱导肝纤维化模型。HE染色观察肝组织病理变化,Masson染色... 详细信息

目的探索anti-miR34c树状纳米颗粒对裸鼠肝纤维化的治疗效果。方法将清洁级(20±2)g裸鼠随机分为正常组、模型组、anti-miR34c树状纳米颗粒治疗组,每组5只,腹腔注射四氯化碳诱导肝纤维化模型。HE染色观察肝组织病理变化,Masson染色评价胶原沉积情况,ELISA检测血清生化指标,免疫组化检测TGF-β和α-SAM在肝组织中的表达变化。结果 anti-miR34c树状纳米颗粒治疗组的肝组织炎症细胞浸润减少,胶原沉积降低,肝纤维化指标TGFβ和α-SAM表达降低,血清生化指标好转。结论 anti-miR34c的树状纳米颗粒能够有效改善裸鼠肝纤维化肝损伤,有望成为治疗肝纤维化的新策略。

关键词：肝纤维化 anti-miR34c 树状纳米颗粒

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半胱氨酰白三烯受体拮抗剂通过下调自噬减轻长爪沙鼠的全脑缺血再灌注损伤

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中国实验动物学报 2018年第1期26卷 57-64页

作者：石巧娟郭红刚楼琦卢领群潘若真应华忠周文伟褚晓峰浙江省医学科学院实验动物中心浙江省实验动物与安全性研究重点实验室浙江杭州310013 浙江省医学科学院浙江省实验动物公共服务平台杭州310013

目的探讨半胱氨酰白三烯受体拮抗剂(普鲁司特、HAMI 3379)对长爪沙鼠全脑缺血再灌注损伤的保护作用及其作用机制。方法采用结扎双侧颈总动脉缺血10 min再灌注24 h,建立长爪沙鼠全脑缺血再灌注损伤模型,随机分为假手术组、模型组、普鲁... 详细信息

目的探讨半胱氨酰白三烯受体拮抗剂(普鲁司特、HAMI 3379)对长爪沙鼠全脑缺血再灌注损伤的保护作用及其作用机制。方法采用结扎双侧颈总动脉缺血10 min再灌注24 h,建立长爪沙鼠全脑缺血再灌注损伤模型,随机分为假手术组、模型组、普鲁司特、HAMI 3379组,每组20只,术前3 d开始腹腔注射给药,1次/日,术前30 min给药1次。观察再灌注24 h神经症状及功能;尼氏染色法观察皮层及海马区神经元;免疫印迹法检测皮层、海马中自噬相关蛋白beclin-1及LC3的表达情况;电镜观察海马区自噬小体。结果与模型组比较,普鲁司特、HAMI 3379组可提高神经症状评分,减少神经功能损伤,减轻皮层及海马区神经元损伤及丢失,减少自噬相关蛋白beclin-1及LC3的表达及海马区自噬小体的数量。结论半胱氨酰白三烯受体拮抗剂通过下调大脑皮层、海马区的自噬减轻长爪沙鼠全脑缺血再灌注损伤。

关键词：长爪沙鼠全脑缺血普鲁司特 HAMI 3379 自噬

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石荠苧黄酮提取物的指纹图谱与含量测定分析

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中国现代应用药学 2018年第2期35卷 199-203页

作者：王露晨张欢欢余陈欢俞文英莫丽俞冰浙江中医药大学药学院杭州310053 浙江省医学科学院浙江省实验动物与安全性研究重点实验室杭州310013

目的建立石荠苧黄酮提取物的指纹图谱,并测定5个指标成分的含量。方法采用Hypersil BDS C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以甲醇-0.1%磷酸水溶液为流动相,梯度洗脱,流速设为1.0 mL·min^(-1),柱温为30℃,检测波长270 nm。结... 详细信息

目的建立石荠苧黄酮提取物的指纹图谱,并测定5个指标成分的含量。方法采用Hypersil BDS C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以甲醇-0.1%磷酸水溶液为流动相,梯度洗脱,流速设为1.0 mL·min^(-1),柱温为30℃,检测波长270 nm。结果得到9批次的石荠苧黄酮提取物HPLC指纹图谱,共标识了13个共有峰,其中5个为黄酮类化合物。各样品色谱图与对照色谱图的相似度均>0.96。木犀草苷、木犀草素、芹菜素、山奈酚和7-甲氧基汉黄芩素分别在19.42~194.2μg·mL^(-1)、0.520 0~5.200μg·mL^(-1)、0.214 0~2.140μg·mL^(-1)、0.134 4~1.344μg·mL^(-1)和0.013 60~0.136 0μg·mL^(-1)内线性关系良好,平均加样回收率分别为100.31%,98.94%,99.15%,100.95%和98.57%,RSD<3%(n=5)。结论该方法稳定、可靠,可为石荠苧的质量评价提供参考依据。

关键词：石荠苧黄酮指纹图谱含量测定

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基于miRNAs的知母水提物体外抑制胃癌细胞SGC7901增殖作用机制

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中国现代应用药学 2018年第5期35卷 678-683页

作者：莫丽方晴霞余陈欢张欢欢严洁萍吕良忠浙江中医药大学药学院杭州310053 浙江省人民医院药学部杭州310014 浙江省医学科学院浙江省实验动物与安全性研究重点实验室杭州310013

目的从微小核苷酸(mi RNAs)的角度研究知母水提物(aqueous extract from Anemarrhenae Rhizoma,ARAE)体外抑制SGC7901细胞增殖的作用机制。方法采用MTT法检测ARAE对SGC7901细胞增殖的影响;采用流式细胞术检测ARAE对SGC7901细胞凋亡的影... 详细信息

目的从微小核苷酸(mi RNAs)的角度研究知母水提物(aqueous extract from Anemarrhenae Rhizoma,ARAE)体外抑制SGC7901细胞增殖的作用机制。方法采用MTT法检测ARAE对SGC7901细胞增殖的影响;采用流式细胞术检测ARAE对SGC7901细胞凋亡的影响;采用高通量测序法检测细胞中mi RNAs的表达丰度差异;采用miranda、mirbase和targetscan 3个数据库信息比对,预测差异mi RNAs的靶基因,并通过KEGG分析靶基因的相关功能;采用实时荧光定量PCR法验证主要靶基因的表达变化。结果 ARAE能明显抑制SGC7901细胞的增殖并诱导其凋亡,调节细胞mi R-16-5p、mi R-20a-5p、mi R-26b-5p和mi R-15b-5p的表达水平;并提示这些mi RNAs所调控的靶基因主要富集于PI3K-Akt、JAK-STAT和MAPK等信号通路。结论 ARAE可能通过调节SGC7901细胞内mi RNAs的表达从而抑制SGC7901细胞增殖,并诱导其凋亡。

关键词：知母水提物 SGC7901 微小核苷酸靶基因

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长爪沙鼠全脑缺血再灌注损伤后半胱氨酰白三烯受体表达变化的研究

长爪沙鼠全脑缺血再灌注损伤后半胱氨酰白三烯受体表达变化的研究

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华东地区第15届实验动物科学学术交流会

作者：石巧娟王浩褚晓峰卢领群楼琦郭红刚周文伟应华忠浙江省医学科学院实验动物中心浙江省实验动物与安全性研究重点实验室杭州 310013

目的研究半胱氨酰白三烯受体(Cysteinyl Leukotriene receptor,CysLTR)在长爪沙鼠全脑缺血再灌注损伤后表达情况,并初步探讨半胱氨酰白三烯受体拮抗剂在脑缺血损伤中的意义。方法采用结扎双侧颈总动脉结扎再灌注法制作长爪沙鼠全脑缺... 详细信息

目的研究半胱氨酰白三烯受体(Cysteinyl Leukotriene receptor,CysLTR)在长爪沙鼠全脑缺血再灌注损伤后表达情况,并初步探讨半胱氨酰白三烯受体拮抗剂在脑缺血损伤中的意义。方法采用结扎双侧颈总动脉结扎再灌注法制作长爪沙鼠全脑缺血再灌注损伤模型。全脑缺血10min后,分别再灌注3、6、12、24h、3、7、14d,使用Western blotting的方法检测各个时间点CysLT1R、CysLT2R的蛋白表达情况,使用免疫组化的方法检测再灌注24 h、14 d这两个时间点CysLT1R、CysLT2R在皮层及海马中表达情况。

关键词：长爪沙鼠全脑缺血半胱氨酰白三烯受体表达

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半胱氨酰白三烯受体拮抗剂通过下调自噬减轻长爪沙鼠的全脑缺血再灌注损伤

半胱氨酰白三烯受体拮抗剂通过下调自噬减轻长爪沙鼠的全脑缺血再...

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华东地区第15届实验动物科学学术交流会

作者：石巧娟郭红刚楼琦卢领群潘若真应华忠周文伟褚晓峰浙江省医学科学院实验动物中心浙江省实验动物与安全性研究重点实验室杭州 310013 浙江省实验动物公共服务平台杭州 310031

目的探讨半胱氨酰白三烯受体拮抗剂(普鲁司特、HAMI3379)对长爪沙鼠全脑缺血再灌注损伤的保护作用及其作用机制。方法采用结扎双侧颈总动脉缺血10 min再灌注24h,建立长爪沙鼠全脑缺血再灌注损伤模型,随机分为假手术组、模型组、普鲁... 详细信息

关键词：长爪沙鼠全脑缺血普鲁司特 HAMI 3379 自噬

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石荠苧二酮哌嗪类化合物通过抑制病毒复制和血小板聚集改善流感病毒诱导的肺部炎症

石荠苧二酮哌嗪类化合物通过抑制病毒复制和血小板聚集改善流感病...

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第十五届世界中医药大会暨“一带一路”中医药文化周

作者：俞文英张欢欢杨扬吴方余陈欢浙江省实验动物与安全性研究重点实验室浙江省医学科学院310013中国杭州

与民族药相关性：石荠苧具有抗病毒、解热、抗凝功效，被广泛用于治疗咳嗽、哮喘、咽炎、感冒和流感等呼吸道疾病。目的：甲型流感严重感染的基本病理特征是肺部过度炎症，而血小板聚集及继发的微血管血栓会加速流感病毒诱导的肺损伤。... 详细信息

与民族药相关性：石荠苧具有抗病毒、解热、抗凝功效，被广泛用于治疗咳嗽、哮喘、咽炎、感冒和流感等呼吸道疾病。目的：甲型流感严重感染的基本病理特征是肺部过度炎症，而血小板聚集及继发的微血管血栓会加速流感病毒诱导的肺损伤。因此，抑制血小板凝聚可能成为流感病毒治疗的潜在靶点。以往的研究主要集中在石荠苧中的黄酮类化合物及其抗炎活性，而石荠苧中的抗凝化合物及潜在分子机制尚不清楚。本研究旨在从石荠苧中分离和表征二酮哌嗪类化合物(DKPs)，并探讨其抗凝机制。方法：采用乙醇提取、乙酸乙酯萃取、硅胶柱色谱法等分离得到6 个化合物;并通过光谱、质谱等方法对化合物的结构进行鉴定。通过体内外实验评价6 个DKPs 的抗病毒活性;此外，借助5'-二磷酸腺苷(ADP)诱导的急性肺栓塞和流感病毒诱导的肺损伤小鼠体内模型考察DKPs 的抗凝效果，并进一步通过体外实验考察DKPs 对血小板活化因子、花生四烯酸以及对ADP 诱导的血小板凝聚的抑制作用;采用酶联免疫法测定血清中血栓烷素B2 和6-酮-前列腺素F1α的含量;采用免疫印迹法测定CD41 介导的PI3K/AKT 通路中关键蛋白的表达。结果：首次从石荠苧中分离得到6 个二酮哌嗪类化合物，并鉴定为：(1)环-(酪氨酸-亮氨酸)、(2)环-(苯丙氨酸-苯丙氨酸)、(3)环-(苯丙氨酸-酪氨酸)、(4)环-(丙氨酸-异亮氨酸)、(5)环-(丙氨酸-亮氨酸)、(6)橙黄胡椒酰胺酯。这6 个化合物中，化合物4 和6 对MDCK 细胞具有较低的细胞毒性，并能显著抑制流感病毒(H1N1 和H3N2)诱导的细胞病变作用。此外，化合物4 和6 还能通过抑制CD41/PI3K/AKT 信号通路显著改善流感病毒诱导的血小板活化和肺部炎症。结论：体内外研究结果表明，从石荠苧中分离得到的化合物4 和6 具有显著的抗病毒和抗凝作用，可作为流感病毒治疗的潜在药物。

关键词：石荠苧流感病毒抗病毒和抗凝作用

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柠檬苦素对脂多糖致小鼠急性肺损伤的作用

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中国临床药理学与治疗学 2018年第1期23卷 8-12,28页

作者：王棣张欢欢方杰钟宇森余陈欢杭州市江干区人民医院内科浙江杭州310016 浙江省医学科学院浙江省实验动物与安全性研究重点实验室浙江杭州310013

目的:探讨柠檬苦素(LM)对脂多糖(LPS)致小鼠急性肺损伤的影响。方法:40只ICR雄性小鼠,按体质量随机分为4组:正常组、模型组、地塞米松(Dex)给药组和LM给药组,每组10只。Dex和LM均在滴注LPS前2 h分别小鼠腹腔注射10 mg/kg给药,之后除正... 详细信息

目的:探讨柠檬苦素(LM)对脂多糖(LPS)致小鼠急性肺损伤的影响。方法:40只ICR雄性小鼠,按体质量随机分为4组:正常组、模型组、地塞米松(Dex)给药组和LM给药组,每组10只。Dex和LM均在滴注LPS前2 h分别小鼠腹腔注射10 mg/kg给药,之后除正常组小鼠只给予腹腔注射等体积的生理盐水外,其余小鼠气管滴注致死量的5 mg/kg LPS。LPS注射6 h后,处死小鼠,解剖小鼠取肺脏,计算小鼠肺指数、湿干比值。采用苏木素-伊红(HE)染色观察肺组织形态。采用ELISA法检测小鼠血清中TNF-α、IL-1β和IL-6含量;比色法检测血清髓过氧化物酶(MPO)含量。实时定量PCR检测TNF-α、IL-1β和IL-6mRNA表达情况。Western blot检测TLR4和NF-κB p65蛋白表达。结果:与正常组比较,模型组小鼠肺指数和湿干比值明显升高,肺组织间质炎性细胞浸润,伴明显的肺泡充血、水肿,血清MPO、TNF-α、IL-1β和IL-6含量及其肺组织mRNA表达量均明显升高(P<0.01);与模型组比较,LM给药组小鼠肺指数和湿干比值明显降低,肺组织病理状态明显改善,血清TNF-α、IL-1β和IL-6水平及肺组织TNF-αmRNA、IL-1βmRNA、IL-6 mRNA、TLR4和NF-κB p65蛋白表达量均明显降低(P<0.01)。结论:LM可通过调控TLR4/NF-κB通路抑制炎症因子的表达从而改善LPS诱导的小鼠肺组织损伤。

关键词：柠檬苦素抗炎作用脂多糖急性肺损伤

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水杨梅根黄酮类成分抑制血小板聚集和血栓形成的作用及机制研究

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中国临床药理学与治疗学 2018年第6期23卷 640-645页

作者：方晴霞邹小舟俞文英方杰莫丽余陈欢浙江省人民医院药学部杭州医学院附属人民医院浙江省医学科学院浙江省实验动物与安全性研究重点实验室

目的:研究水杨梅根黄酮类(adina rubella flavonoids,ARF)成分对血小板活化聚集及血栓形成的影响并对其机制进行初步研究。方法:利用不同的聚合剂5'-二磷酸腺苷(adenosine 5'-diphosphate,ADP)、花生四烯酸(arachidonic acid,AA... 详细信息

目的:研究水杨梅根黄酮类(adina rubella flavonoids,ARF)成分对血小板活化聚集及血栓形成的影响并对其机制进行初步研究。方法:利用不同的聚合剂5'-二磷酸腺苷(adenosine 5'-diphosphate,ADP)、花生四烯酸(arachidonic acid,AA)、血小板活化因子(platelet activating factor,PAF)诱导体外血小板聚集;分别建立ADP诱导的大鼠急性肺栓塞模型、小鼠尾部出血模型、大鼠动静脉旁路血栓模型,检测ARF对血小板聚集及血栓形成的抑制作用。Western blot检测CD41的蛋白表达及PI3K/Akt信号通路的活化情况。结果:ARF低、中、高剂量组能够显著提高急性肺栓塞大鼠存活率、延长小鼠尾部凝血时间、抑制动静脉旁路血栓模型大鼠血栓形成。ARF还能显著抑制ADP所诱导的血小板聚集及血小板标记蛋白CD41的上调及PI3K/Akt信号通路的活化。结论:ARF能够显著抑制血小板聚集及血栓形成,其机制可能与CD41/PI3K/Akt信号通路调控相关。

关键词：水杨梅根黄酮类血小板聚集血栓信号通路

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