检索结果-内蒙古大学图书馆

中国生物化学与分子生物学会2016年全国学术会议

作者：严婷婷陈健浙江理工大学生命科学学院浙江省家蚕生物反应器和生物医药重点实验室

猪繁殖与呼吸综合征(Porcine reproductive and respiratory syndrome,PRRS)也称猪蓝耳病,是由猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)引起的一种严重的病毒性传染病,该病以引起母猪的繁殖障碍、仔猪和育成猪呼吸道症状及高死亡率为主要特征。该病传播速度极快,是危害我国养猪业的一个重要

关键词： PRRSV 杆状病毒表达系统免疫

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芽孢杆菌GBacillus-9的分离及功能研究

芽孢杆菌GBacillus-9的分离及功能研究

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华东地区生物化学与分子生物学学会联合会2017年学术交流会暨安徽省生物化学与分子生物学学会理事会议

作者：许国强林国栋靳洋洋吴佳杜瑶费辉韩兵男吕正兵浙江理工大学生命科学学院浙江省家蚕生物反应器和生物医药重点实验室

条纹斑竹鲨(Chiloscyllium plagiosum)属于软骨鱼纲(Chondrichthyes)、须鲨目(Orectolformes)、须鲨科(Orectolebidea)、斑竹鲨属(Chiloscyllium),是一种小型底栖种类,卵生,主要生活在浅海层多藻类生长的岩礁环境中,在我国的东海、南海均有分布。鲨鱼机体的免疫功能令人瞩目,目前的研究主要集中在肝脏功能、养殖生物学、核型染色体研究等方面,鲨鱼胃肠道内是一个精彩的微生物世界,但是目前未见有与其胃肠道微生物相关的基础研究报道。本实验主要是提供一种从条纹斑竹鲨肠道内分离得到一株具有抑菌效果的芽孢杆菌GBacillus-9的技术,该技术包括对条纹斑竹鲨肠道的处理、原菌液的获取、菌群的分离固体培养基。经抑菌实验及重复抑菌实验证明该菌株具有明显抑制枯草芽孢杆菌及大肠杆菌生长的作用。通过16s rDNA鉴定,确定了GBacillus-9菌株的分类地位。构建系统发育树,分析确定了该菌株为甲基营养型芽孢杆菌(Bacillus methylotrophicus)(该菌种已经于2016年12月28日在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)进行了保藏,登记入册编号CGMCC No:13337)。以芽孢杆菌GBacillus-9菌株为研究材料,从其发酵液中初步分离分泌蛋白,研究该枯草芽孢杆菌制剂的抑菌作用,对将其开发为饲料添加剂具有积极的意义。

关键词：条纹斑竹鲨芽孢杆菌GBacillus-9 分泌蛋白抗菌活性

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利用家蚕杆状病毒表达系统表达虎杖白藜芦醇芪合酶基因

利用家蚕杆状病毒表达系统表达虎杖白藜芦醇芪合酶基因

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华东六省一市生物化学与分子生物学学会-2011年学术交流会

作者：潘晶晶潘华晔严珍珍张耀洲吴祥甫吕正兵浙江理工大学生命科学学院浙江省家蚕生物反应器和生物医药重点实验室

临床实验表明白藜芦醇对退化病有较好的预防和治疗作用,可改善内皮细胞功能,也是发挥其非酒精依赖性的心血管保护效应的机制之一。目前生产的白藜芦醇在其化学结构专一性、可食用安全度、生产周期长和原料合理利用开发及环境保护问题上... 详细信息

临床实验表明白藜芦醇对退化病有较好的预防和治疗作用,可改善内皮细胞功能,也是发挥其非酒精依赖性的心血管保护效应的机制之一。目前生产的白藜芦醇在其化学结构专一性、可食用安全度、生产周期长和原料合理利用开发及环境保护问题上都存在不利因素,故利用现代分子生物学手段生产天然药物以适应社会需求已成为当前制药行业的大势所趋。本研究利用Bac-to-Bac系统,设计一对引物通过位点特异转座,将虎杖白藜芦醇芪合酶基因的

关键词：白藜芦醇酶基因家蚕杆状病毒表达系统

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条纹斑竹鲨TBC1D15的Rab-GAP活性及其进化性研究

条纹斑竹鲨TBC1D15的Rab-GAP活性及其进化性研究

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中国生物化学与分子生物学会2016年全国学术会议

作者：葛英花陈燕娜程丹丹吕正兵浙江理工大学生命科学学院浙江省家蚕生物反应器和生物医药重点实验室

TBC(Tre-2/Bub2/Cdc16)域家族都是高度保守的蛋白,具有很高的同源性,TBC1D15是TBC家族的成员,具有特定的Rab-GAP活性,已在鼠,人等五种中有所报道,但是其在鲨鱼中的报道至今较少。本实验主要研究条纹斑竹鲨中TBC1D15的对Rab蛋白的底物专... 详细信息

TBC(Tre-2/Bub2/Cdc16)域家族都是高度保守的蛋白,具有很高的同源性,TBC1D15是TBC家族的成员,具有特定的Rab-GAP活性,已在鼠,人等五种中有所报道,但是其在鲨鱼中的报道至今较少。本实验主要研究条纹斑竹鲨中TBC1D15的对Rab蛋白的底物专一性及某些保守氨基酸位点突变后对其Rab-GAP活性功能的影响;并与

关键词：条纹斑竹鲨 TBC1D15 Rab-GAP活性底物专一性进化性

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TBC1D15基因敲除细胞系的构建及其功能研究

TBC1D15基因敲除细胞系的构建及其功能研究

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中国生物化学与分子生物学会2016年全国学术会议

作者：程丹丹陈燕娜葛英花吕正兵浙江理工大学生命科学学院浙江省家蚕生物反应器和生物医药重点实验室

目的:构建TBC1D15基因敲除细胞系并进一步研究其功能。方法:(1)Sg RNA序列设计:应用http://***/设计针对TBC1D15第五个外显子的一对最优g RNA,标记为a、b,根据获得的g RNA序列设计互补引物,并在两端增加Bpi I的酶切位点。(2)重组质粒p X... 详细信息

目的:构建TBC1D15基因敲除细胞系并进一步研究其功能。方法:(1)Sg RNA序列设计:应用http://***/设计针对TBC1D15第五个外显子的一对最优g RNA,标记为a、b,根据获得的g RNA序列设计互补引物,并在两端增加Bpi I的酶切位点。(2)重组质粒p X462-TBC1D15-1a和p X462-TBC1D15-1b的构建与鉴定:用Fast Digest BpiⅠ对p X462进行酶

关键词： CRISPR-cas9 TBC1D15 单克隆

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利用家蚕杆状病毒表达系统表达虎杖白藜芦醇芪合酶基因

利用家蚕杆状病毒表达系统表达虎杖白藜芦醇芪合酶基因

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华东六省一市生物化学与分子生物学学会2011年学术交流会

作者：潘晶晶潘华晔严珍珍张耀洲吴祥甫吕正兵浙江理工大学生命科学学院浙江省家蚕生物反应器和生物医药重点实验室

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小鼠BDNF(mBDNF)基因的原核表达及重组Bacmid的构建

小鼠BDNF(mBDNF)基因的原核表达及重组Bacmid的构建

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华东六省一市生物化学与分子生物学学会-2011年学术交流会

作者：朱世平叶丽君朱胜超许静洁孙恺陈剑清张耀洲浙江理工大学生命科学学院浙江省家蚕生物反应器和生物医药重点实验室

脑源性神经营养因子(brain derived neurorophie factor,BDNF)是具有促进神经生长活性的一种蛋白质。它作为神经生长因子家族成员,与神经系统发育有着密切关系,不仅对中枢神经元的发育、增殖分化、存活起重要作用,而且对损伤后神经元的... 详细信息

脑源性神经营养因子(brain derived neurorophie factor,BDNF)是具有促进神经生长活性的一种蛋白质。它作为神经生长因子家族成员,与神经系统发育有着密切关系,不仅对中枢神经元的发育、增殖分化、存活起重要作用,而且对损伤后神经元的修复与功能重塑也起重要作用。本研究通过从小鼠脑组织提取总RNA,逆转录获得cDNA,设计特异性引物扩增mBDNF基因,并克

关键词： mBDNF Bacmid 原核表达

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抗肿瘤活性肽研究进展

抗肿瘤活性肽研究进展

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华东地区生物化学与分子生物学学会联合会2017年学术交流会暨安徽省生物化学与分子生物学学会理事会议

作者：马慧霞张文杰许国强靳洋洋杜瑶吕正兵浙江理工大学生命科学学院浙江省家蚕生物反应器和生物医药重点实验室

21世纪,基因工程、生物化学和分子生物学等技术的日臻成熟,使得新发现的抗肿瘤活性肽不断涌现,相比于传统抗肿瘤药物,抗肿瘤活性肽因具有疗效高、分子量小、易于吸收和毒害性小等特点而成为目前关注的热点之一。抗肿瘤活性肽包括线性肽... 详细信息

21世纪,基因工程、生物化学和分子生物学等技术的日臻成熟,使得新发现的抗肿瘤活性肽不断涌现,相比于传统抗肿瘤药物,抗肿瘤活性肽因具有疗效高、分子量小、易于吸收和毒害性小等特点而成为目前关注的热点之一。抗肿瘤活性肽包括线性肽和环肽,一般由二到三十个氨基酸残基组成,可特异性结合并作用于肿瘤组织,与肿瘤生长、转移相关的信号转导分子相互作用,从而抑制肿瘤生长、转移或促进肿瘤细胞凋亡。目前,抗肿瘤活性肽的主要来源有生物体提取、肽库筛选、活性多肽的修饰改造、分子靶向设计、定向合成和运用基因重组技术获得等,实验证明,天然来源的抗肿瘤活性肽一般存在半衰期短、稳定性差、体内易降解等缺点,需要对其进行人工优化改造。抗肿瘤活性肽的分离纯化和活性检测也在科学家们的不断探索、研究下,找到了简单、高效的方法并建立了系统性的实验流程。研究发现,抗肿瘤活性肽的作用机制主要有:抑制肿瘤新生血管的生成、促进肿瘤细胞凋亡、阻滞肿瘤细胞周期、抑制肿瘤转移、直接作用于细胞表面、增强机体的免疫功能等。近年来,国家和社会都很注重生物产业的研究和发展,很多抗肿瘤活性肽类药物已进入了临床应用或临床试验。本文主要对抗肿瘤活性肽的研究现状和临床发展做扼要概括。

关键词：抗肿瘤活性肽肿瘤生长肿瘤细胞凋亡

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家蚕Argonaute2的表达分析及其结合RNA的初步研究

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浙江理工大学学报（自然科学版） 2014年第6期31卷 702-709页

作者：张玉洪叶挺盛清陈健于威王丹吴祥甫张耀洲聂作明浙江理工大学生命科学学院杭州310018 浙江理工大学浙江省家蚕生物反应器和生物医药重点实验室杭州310018

从家蚕cDNA文库中扩增到家蚕BmAGO2基因完整的ORF序列,通过Lasergene软件分析获得BmAGO2的抗原表位区(命名为Kago2),构建含Kago2的表达载体,转化大肠杆菌诱导表达,融合蛋白经镍柱亲和层析纯化后免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体,ELISA和W... 详细信息

从家蚕cDNA文库中扩增到家蚕BmAGO2基因完整的ORF序列,通过Lasergene软件分析获得BmAGO2的抗原表位区(命名为Kago2),构建含Kago2的表达载体,转化大肠杆菌诱导表达,融合蛋白经镍柱亲和层析纯化后免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体,ELISA和Western blotting检测抗血清的效价可达到1∶25 600以上,抗体特异性较好。表达谱分析结果显示,BmAGO2蛋白在家蚕卵期、蛹期、蛾期和五龄幼虫期均表达,但在蛹期表达量要偏低。而在五龄幼虫各组织中BmAGO2蛋白的表达差异较明显,BmAGO2蛋白在头部和表皮中大量表达,丝腺、马氏管和脂肪中也有少量表达,而在血淋巴、气管和中肠中未检测到该蛋白的表达。结合BmAGO2表达谱分析结果,进一步利用其抗体通过免疫共沉淀方法从BmAGO2蛋白表达量高的家蚕头部和表皮中分离出BmAGO2蛋白及结合的RNA,并逆转录成cDNA。以家蚕miRNA潜在的靶基因Bmem4,Bm(spl)-like,Bmemc,Bmmγ,Bmmβ2作为检测基因,荧光定量PCR分析获得的BmAGO2结合RNA,和对照组RNA相比,Bmem4,Bm(spl)-like,Bmemc,Bmmγ,Bmβ2基因在BmAGO2结合RNA中的含量分别富集了3.93、1.31、2.4、1.31、0.97倍。miRNA靶位点分析表明,Bmem4和Bmemc存在多个miRNA结合位点,极有可能是miRNA的靶基因。目前还没有有效的家蚕miRNA靶基因高通量鉴定方法,本实验为家蚕miRNA靶基因的高通量筛选提提供了可靠地实验途径。

关键词： BmAGO2 表达谱分析结合RNA 免疫共沉淀 miRNA靶基因

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抗PD-L1CAR基因的构建及CAR-T的功能活性研究

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浙江理工大学学报（自然科学版） 2017年第6期37卷 901-908页

作者：白静张洁雯施炜星陈健吕正兵浙江理工大学生命科学学院杭州310018 浙江理工大学浙江省家蚕生物反应器和生物医药重点实验室杭州310018

鉴于嵌合抗原受体T细胞(chimeric antigen receptor T cells,CAR-T)疗法应用于肿瘤治疗的临床试验已取得很大突破,设计了程序性死亡配体-1(programmed death ligand-1,PD-L1)特异性CAR-T细胞以体外杀伤肺癌细胞。通过克隆表达PD-L1_((73... 详细信息

鉴于嵌合抗原受体T细胞(chimeric antigen receptor T cells,CAR-T)疗法应用于肿瘤治疗的临床试验已取得很大突破,设计了程序性死亡配体-1(programmed death ligand-1,PD-L1)特异性CAR-T细胞以体外杀伤肺癌细胞。通过克隆表达PD-L1_((73-739)),并纯化PD-L1蛋白以免疫BALB/c小鼠制备获得PD-L1单克隆抗体;克隆PD-L1单克隆抗体单链可变区片段,与CD28、4-1BB、CD3-ζ链的基因体外融合构建第三代CAR基因,并克隆于慢病毒载体pCDH-CMV-EF1-copGFP上,包装成慢病毒。该慢病毒感染CD^(8+)T细胞,扩增5d,测定CAR的表达,表达率可达到22%以上。PD-L1靶向的肿瘤细胞杀伤作用分析显示,抗PD-L1CAR-T细胞有一定的体外杀伤活性。

关键词：肺癌程序性死亡配体-1 嵌合抗原受体单克隆抗体过继细胞治疗

来源：评论

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