检索结果-内蒙古大学图书馆

中华临床医师杂志（电子版） 2014年第10期8卷 74-77页

作者：牟玲燕沈蒋君孙爱群舒建洪李司浙江理工大学生命科学学院浙江省家蚕生物反应器和生物医药重点实验室杭州310018

目的研究纯化大肠杆菌中Aβ42蛋白的表达情况,并探索该蛋白接种小鼠后抗体的产生情况。方法构建表达载体pGEX-4T-1-Aβ42,设置不同的诱导温度来进行Aβ42在大肠杆菌中表达。用SDS-PAGE、GST柱及Western blot来鉴定纯化目的蛋白。动物实... 详细信息

目的研究纯化大肠杆菌中Aβ42蛋白的表达情况,并探索该蛋白接种小鼠后抗体的产生情况。方法构建表达载体pGEX-4T-1-Aβ42,设置不同的诱导温度来进行Aβ42在大肠杆菌中表达。用SDS-PAGE、GST柱及Western blot来鉴定纯化目的蛋白。动物实验中,用福氏佐剂采用背部多点注射的方式免疫BALB/c小鼠3次。间接ELISA法检测免疫小鼠血清和脑组织匀浆上清液中特异性抗体的滴度。结果在25℃下,经1.0 mmol/L的IPTG诱导后该蛋白表达量最多,实现可溶性表达。小鼠实验中,第2次免疫后,Aβ42蛋白组小鼠的免疫血清有抗Aβ42抗体产生,且第三次免疫后,抗体数量增高。同时,在脑组织匀浆上清液中也可检测出低滴度的抗Aβ42抗体。结论在大肠杆菌中可获得了高纯度的可溶性Aβ42蛋白。该蛋白结合福氏佐剂免疫BALB/c小鼠后,可诱导小鼠产生特异性的抗Aβ42抗体。

关键词：大肠杆菌 Aβ42 可溶性蛋白

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生物类专业生理学课程思政建设中“三联动”实施机制的构建与应用

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首都师范大学学报（自然科学版） 2023年第5期44卷 108-113,120页

作者：王丹骆菁菁陈加伟王瑶瑶郭建军浙江理工大学生命科学与医药学院浙江杭州310018 浙江省家蚕生物反应器与生物医药重点实验室浙江杭州310018

为了充分发挥生理学课程的育人功能,培养德才兼备的生物学人才,使生物类专业的学生未来能够更好地服务于我国经济和社会发展的战略目标,浙江理工大学生命科学与医药学院生理学课程团队教师在课程思政体系建设中,尝试构建了任课教师+学... 详细信息

为了充分发挥生理学课程的育人功能,培养德才兼备的生物学人才,使生物类专业的学生未来能够更好地服务于我国经济和社会发展的战略目标,浙江理工大学生命科学与医药学院生理学课程团队教师在课程思政体系建设中,尝试构建了任课教师+学工行政人员、第一课堂+第二课堂、线上+线下的三联动实施机制,并在其思政教学中进行了初步应用,取得了良好的教学效果及学生反馈。因此,团队教师认为三联动机制可以作为开展生理学课程思政教育的有效运行措施,并对同行有参考借鉴作用。

关键词：生物学生理学课程课程思政“ 三联动”机制

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丙酮酸脱氢酶活性缺失与疾病发生的研究进展

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生命的化学 2017年第5期37卷 751-760页

作者：陈伟才欧文斌浙江理工大学浙江省家蚕生物反应器与生物医药重点实验室杭州310018 浙江清华长三角研究院浙江省应用酶学重点实验室嘉兴314000

丙酮酸脱氢酶系(pyruvate dehydrogenase complex,PDH_C)主要由丙酮酸脱氢酶(E1)、二氢硫辛酸乙酰转移酶(E2)、二氢硫辛酸脱氢酶(E3)和E3结合蛋白(E3BP)组成,绝大多数的丙酮酸脱氢酶系缺失都是由丙酮酸脱氢酶E1α亚基突变或者磷酸化引起... 详细信息

丙酮酸脱氢酶系(pyruvate dehydrogenase complex,PDH_C)主要由丙酮酸脱氢酶(E1)、二氢硫辛酸乙酰转移酶(E2)、二氢硫辛酸脱氢酶(E3)和E3结合蛋白(E3BP)组成,绝大多数的丙酮酸脱氢酶系缺失都是由丙酮酸脱氢酶E1α亚基突变或者磷酸化引起,仅有少数突变发生在E2、E3和E3BP上。本文就PDHC的结构与功能,PDHA1基因突变和E1α磷酸化与其功能的关系,及在相关疾病包括肿瘤的发生、发展和转移中的分子机制的研究进展做一总结,以期对因E1α功能丧失引起的疾病的诊断与治疗有所借鉴意义。

关键词：丙酮酸脱氢酶突变磷酸化疾病肿瘤

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家蚕脂质运载蛋白基因BmLip32的特征与表达活性分析

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蚕业科学 2009年第2期35卷 264-272页

作者：牛伟涛李珊珊聂作明陈健吕正兵王丹吴燕吴怡高攀于威盛清沈红丹张耀洲浙江理工大学生命科学学院生物化学研究所浙江家蚕生物反应器和生物医药重点实验室杭州310018 浙江理工大学生命科学学院生物技术系杭州310018

从已构建的家蚕蛹期cDNA文库中筛选得到一条新的cDNA片断,经生物信息学分析发现其编码框具有脂质运载蛋白(lipocalin)保守结构域,命名为BmLip32基因,GenBank登录号为FJ602775。构建融合表达质粒pET-28a-BmLip32后转化大肠杆菌BL21并诱... 详细信息

从已构建的家蚕蛹期cDNA文库中筛选得到一条新的cDNA片断,经生物信息学分析发现其编码框具有脂质运载蛋白(lipocalin)保守结构域,命名为BmLip32基因,GenBank登录号为FJ602775。构建融合表达质粒pET-28a-BmLip32后转化大肠杆菌BL21并诱导表达,将纯化的His-BmLip32融合蛋白免疫新西兰大白兔成功制备多克隆抗体,效价大于1∶12 800。RT-PCR检测结果表明BmLip32在家蚕蛹期转录水平最高,在5龄幼虫头部中的转录水平明显高于其它组织。Western blotting分析结果显示BmLip32在5龄幼虫头部大量表达。免疫细胞化学实验显示BmLip32蛋白存在于家蚕Bm5细胞的细胞质中。推测BmLip32基因是家蚕神经系统发育相关的重要调控基因。

关键词：家蚕 BmLip32基因表达活性实时荧光定量PCR 免疫印迹免疫细胞化学

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公告

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蚕业科学 2019年第4期45卷 516-516页

作者：《蚕业科学》编辑部浙江理工大学生命科学与医药学院杭州 310018 浙江省家蚕生物反应器和生物医药重点实验室浙江省家蚕生物反应器和生物医药重点实验室杭州 310018

为了提高期刊的编辑出版效率,《蚕业科学》期刊已开通官方网站,并启用在线投稿系统,网址为http://***/cn/***。在线投稿系统包括作者工作区、外审专家工作区和编辑工作区3个子系统,通过网上投稿、网上查稿、网上审稿,实现作者、编辑、... 详细信息

为了提高期刊的编辑出版效率,《蚕业科学》期刊已开通官方网站,并启用在线投稿系统,网址为http://***/cn/***。在线投稿系统包括作者工作区、外审专家工作区和编辑工作区3个子系统,通过网上投稿、网上查稿、网上审稿,实现作者、编辑、审稿专家的一体化在线交流与稿件协同处理。欢迎各位作者、审稿专家登陆访问!

关键词：在线投稿系统审稿专家网上审稿 journal 官方网站协同处理在线交流网上投稿

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Bmp24缺失对家蚕核型多角体病毒基因组的复制、转录及病毒组装的影响

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浙江理工大学学报（自然科学版） 2016年第1期35卷 109-115页

作者：陈琛于威史利利巩成见蒋磊童富淡浙江理工大学生物化学研究所杭州310018 浙江理工大学浙江省家蚕生物反应器和生物医药重点实验室杭州310018

研究Bmp24基因的生物学功能,利用Red重组技术和Bac-to-Bac系统构建Bmp24缺失型病毒(Bmp24-ko-Bacmid)和Bmp24修复型病毒(Bmp24-re-Bacmid)。然后将Bmp24-ko-Bacmid、Bmp24-re-Bacmid以及野生型病毒(wtBacmid)分别转染BmN细胞,病毒滴度测定发现3种病毒都能产生有活力的子代病毒并使细胞发病,但Bmp24-ko-Bacmid在各个时相的滴度值显著低于其他两种病毒(P<0.05)。电镜观察结果发现Bmp24-ko-Bacmid感染的细胞中只有少量细长的杆状结构,而其他两种病毒感染细胞后能够产生大量具有囊膜包裹的成熟病毒粒子。qPCR实验结果显示,Bmp24缺失不会影响病毒基因组的复制,同时qRT-PCR结果显示Bmp24缺失使早期、晚期基因和极晚期基因的转录水平显著低于野生型病毒(P<0.05)。

关键词：家蚕核型多角体病毒 Bmp24基因 Red重组系统 Bac-to-Bac系统

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家蚕核型多角体病毒(BmNPV)ORF122基因缺失对病毒复制和转录的影响

家蚕核型多角体病毒(BmNPV)ORF122基因缺失对病毒复制和转录的影响

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华东六省一市生物化学与分子生物学学会2014年学术交流大会暨浙江省第十一届学会会员代表大会

作者：朱丽萍何欢解纯刚浙江理工大学生物化学研究所浙江省家蚕生物反应器和生物医药重点实验室

家蚕杆状病毒基因Bm122位于BmNPV(T3株)基因组116325-116928nt,读码框全长606bp,编码201个氨基酸。有研究表明Bm122的转录起始于转染后3h,并且由宿主的RNA聚合酶Ⅱ所转录,由此推测Bm122是一个早期基因。Bm122起始密码子上游240nt和189n... 详细信息

家蚕杆状病毒基因Bm122位于BmNPV(T3株)基因组116325-116928nt,读码框全长606bp,编码201个氨基酸。有研究表明Bm122的转录起始于转染后3h,并且由宿主的RNA聚合酶Ⅱ所转录,由此推测Bm122是一个早期基因。Bm122起始密码子上游240nt和189nt处分别有CAGT和TATA盒结构,编码的蛋白大小为23KDa左右,Bm122编码的蛋白定位于细胞核内。推测Bm122可能与病毒DNA的复制和晚期基因表达有关。但是,对于Bm122基因产物对病毒的复制及转录影响和作用机制没有具体的报道。本实验旨在通过对Bm122基因的敲除和异位补回来研究的它对病毒基因复制与转录的影响。

关键词： BmNPV Bm122 Red重组病毒复制病毒转录

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Thanatin和orf91鲨肝肽融合基因在大肠杆菌中的表达及重组产物抗菌活性研究

Thanatin和orf91鲨肝肽融合基因在大肠杆菌中的表达及重组产物抗...

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华东地区生物化学与分子生物学学会联合会2017年学术交流会暨安徽省生物化学与分子生物学学会理事会议

作者：张文杰马慧霞许国强靳洋洋杜瑶吕正兵浙江理工大学生命科学学院浙江省家蚕生物反应器和生物医药重点实验室

随着抗生素的广泛使用,耐药性问题日益严重,抗菌肽的高效抗菌作用为解决这一问题提供了可能。抗菌肽是一种阳离子小肽,对革兰氏阴性菌及革兰氏阳性菌均有较好的抑制作用,但抗菌肽天然含量很低难以满足需求,重组表达常会对宿主菌有危害... 详细信息

随着抗生素的广泛使用,耐药性问题日益严重,抗菌肽的高效抗菌作用为解决这一问题提供了可能。抗菌肽是一种阳离子小肽,对革兰氏阴性菌及革兰氏阳性菌均有较好的抑制作用,但抗菌肽天然含量很低难以满足需求,重组表达常会对宿主菌有危害性。鲨鱼肝脏具有免疫调节、代谢调控等作用,本研究从条纹斑竹鲨的肝脏中筛选众多鲨肝肽,可能具有某些潜在功能。根据抗菌肽等电点高的特点,筛选出等电点与抗菌肽Thanatin相近的鲨肝肽orf1,将融合基因与本实验室的特殊载体pETduet-His-SUMO相连,通过原核表达的方法将两段多肽融合在一起,以期提高抗菌肽的抑菌效果,并实现抗菌肽的大量表达。本研究最终实验共得到两种重组融合多肽,一种是抗菌肽在融合多肽的N端,另外一种是鲨肝肽在N端。将得到的重组蛋白进行抗菌活性初步分析,通过综合两个浓度组初步得到结论:两种重组蛋白对革兰氏阴性菌和革兰氏阳性菌的抑菌活性比Thanatin高;重组蛋白or1th对革兰氏阳性菌的MIC小于3.04×10mol/L,而Thanatin和重组蛋白,thor1小对革兰氏阳性菌的MIC大于3.04×10mol/L,因此or1th即抑菌活性最高。由此得,重组蛋白与Thanatin相比较,获得的蛋白表达量质量浓度增加,虽然摩尔浓度降低了,但是在相同摩尔浓度之下,两种重组蛋白的抑菌活性比Thanatin的抑菌活性明显增加,特别是重组蛋白or1th的抑菌活性大大增加,且在设置的高摩尔浓度下,重组蛋白or1th的抑菌能力比常用抗生素的抑菌能力强,在低浓度下(3.04×10mol/L),重组蛋白or1th的抑革兰氏阳性菌能力比常用抗生素强,还发现两种蛋白的抗菌活性及表达量均得到了提高,值得进一步研究。

关键词：鲨肝肽革兰氏阴性菌 orf91 Thanatin 抗菌活性大肠杆菌

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家蚕杆状病毒(BmNPV)Bm122基因的缺失影响芽生型病毒粒子的形成

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浙江理工大学学报（自然科学版） 2016年第2期35卷 277-282页

作者：朱丽萍于威陈滨何欢解纯刚浙江理工大学生物化学研究所杭州310018 浙江理工大学浙江省家蚕生物反应器和生物医药重点实验室杭州310018

为研究家蚕杆状病毒（BmNPV）编码的Bm122基因的生物学功能,利用Red重组技术和Bac-to-Bac系统分别构建了Bm122-ko-bacmid和Bm122-re-bacmid,实现对Bm122基因的敲除和异位补回。进而将Bm122-kobacmid、Bm122-re-bacmid、wtbacmid（野生型）分别转染BmN细胞,病毒滴度测定结果显示：Bm122缺失后,病毒无法形成正常水平的芽生型病毒粒子（budded virus,BV）,表明该基因是病毒生成有感染力的BV所必需的基因;透射电子显微镜观察发现,Bm122敲除后细胞内未观察到杆状病毒粒子,进一步证实Bm122的缺失影响了BV的生成。qPCR结果显示,Bm122缺失后病毒DNA复制水平降低。结果表明,Bm122是病毒生成正常水平的BV所必需的基因。

关键词：家蚕杆状病毒 Bm122基因 Red重组技术 Bac-to-Bac系统病毒复制

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家蚕pBmHPC-21基因的克隆、表达及亚细胞定位

家蚕pBmHPC-21基因的克隆、表达及亚细胞定位

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华东六省一市生物化学与分子生物学会2009年学术交流会

作者：杨丹张耀洲浙江理工大学生物化学研究所浙江省家蚕生物反应器和生物医药重点实验室

家蚕30K蛋白是在家蚕血液中大量表达的一类低分子量脂蛋白,也是桑蚕特有的一类蛋白质。该类蛋白由脂肪体合成,并分泌到血液中,它们是家蚕生长发育过程中的主要存储蛋白之一,也是家蚕胚胎发育的重要能源物质。在本实验室的家蚕蛹cDNA文库... 详细信息

家蚕30K蛋白是在家蚕血液中大量表达的一类低分子量脂蛋白,也是桑蚕特有的一类蛋白质。该类蛋白由脂肪体合成,并分泌到血液中,它们是家蚕生长发育过程中的主要存储蛋白之一,也是家蚕胚胎发育的重要能源物质。在本实验室的家蚕蛹cDNA文库中,我们发

关键词：亚细胞定位 pBmHPC-21

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