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第十二届浙江渔业科技论坛

作者：程顺刘士力蒋文枰迟美丽顾志敏贾永义浙江省淡水水产研究所农业部淡水渔业健康养殖重点实验室/浙江省淡水水产遗传育种重点实验室

采用实验生态—显微观察方法对翘嘴鲌精子的生理特性进行了研究,并用两步降温法超低温冷冻保存翘嘴鲌精子,筛选出了适宜的稀释液与抗冻剂配方。结果表明,翘嘴鲌适宜的盐度范围为0-4,pH为5.5-8时,精子激活率较高,其中pH为5.5时,精子运动... 详细信息

采用实验生态—显微观察方法对翘嘴鲌精子的生理特性进行了研究,并用两步降温法超低温冷冻保存翘嘴鲌精子,筛选出了适宜的稀释液与抗冻剂配方。结果表明,翘嘴鲌适宜的盐度范围为0-4,pH为5.5-8时,精子激活率较高,其中pH为5.5时,精子运动时间与寿命最长;翘嘴鲌精子在4℃条件下保存84h仍有48.33%的激活率,在25℃条件下保存84h时精子死亡。以D-15为稀释液,10%乙二醇(EG)为抗冻剂,采用两步降温法超低温冷冻保存翘嘴鲌精子,解冻后精子活力最高,冻精激活率、运动时间和寿命分别为62.67%、63.33min和83.67min。

关键词：翘嘴鲌精子生理特性超低温冷冻

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湖州河川沙塘鳢群体线粒体DNA cyt b基因序列的遗传多样性分析

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水产学杂志 2023年第1期36卷 22-28,35页

作者：卞玉玲刘士力刘一诺贾永义李飞迟美丽郑建波程顺顾志敏上海海洋大学农业农村部淡水水产种质资源重点实验室上海201306 浙江省淡水水产研究所农业农村部淡水渔业健康养殖重点实验室/浙江省淡水水产遗传育种重点实验室浙江湖州313001 上海海洋大学上海水产养殖工程技术研究中心上海201306 上海海洋大学水产科学国家级实验教学示范中心上海201306

河川沙塘鳢具有肉鲜味美,细嫩可口的特点,营养价值与经济价值颇高,是一种极具发展潜力的水产养殖品种,对野生和人工繁育河川沙塘鳢的遗传结构进行检测分析,可为选育和种质保护提供参考资料。本文对湖州河川沙塘鳢(钟管野生群体及八里店... 详细信息

河川沙塘鳢具有肉鲜味美,细嫩可口的特点,营养价值与经济价值颇高,是一种极具发展潜力的水产养殖品种,对野生和人工繁育河川沙塘鳢的遗传结构进行检测分析,可为选育和种质保护提供参考资料。本文对湖州河川沙塘鳢(钟管野生群体及八里店养殖群体)的线粒体细胞色素b(cyt b)基因全长进行扩增和测序,并应用生物信息学软件与Gen Bank中太湖、鄱阳湖和巢湖3个群体的数据进行比较。河川沙塘鳢cyt b基因全长1141 bp,4种碱基在所得序列中平均含量为A(26.8%)、G(13.8%)、T(28.0%)、C(31.4%),序列分析显示,cyt b基因序列中变异位点378个,占分析位点的44.26%,含有241个简约信息位点,平均转颠换比值(TS/TV)为0.76。在5个群体138个个体中共检测到75个单倍型,平均单倍型多样性为0.869~1.000,核苷酸多样性为0.01431~0.03848。各群体间遗传距离差异较大(0.01493~0.05868),其中八里店与钟管群体的遗传距离最小(0.01493),而鄱阳湖与巢湖群体的遗传距离最大(0.05868),与构建的聚类图分析结果一致。群体中性检验显示八里店、钟管和太湖的Tajima’s D和Fu’s Fs值为正值;鄱阳湖和巢湖群体为负值,5个群体Tajima’s D和Fu’s Fs检验均不显著(P>0.01)。总体上,5个群体间具有较高程度的遗传分化。除了湖州的八里店与钟管群体共享6种单倍型外,其他群体间基本不共享单倍型,这可能是八里店养殖群体亲本来源于钟管野生群体的原因。应用cyt b基因可以明确地将湖州、太湖、鄱阳湖和巢湖群体之间区分开来。

关键词：河川沙塘鳢线粒体DNA 细胞色素b基因遗传分化

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杂交鲟“红嘴病”病原的分离及其灭活疫苗免疫效果的评价

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中国预防兽医学报 2024年第10期46卷 1072-1079页

作者：胡谋黄雷姚嘉赟徐洋蔺凌云沈锦玉许式见潘晓艺浙江省淡水水产研究所农业部淡水渔业健康养殖重点实验室/浙江省鱼类健康与营养重点实验室/湖州市渔业环境与水产品质量安全重点实验室浙江湖州313001 农业农村部鲟鱼遗传育种重点实验室杭州千岛湖鲟龙科技股份有限公司浙江杭州311700 衢州鲟龙水产食品科技开发有限公司浙江衢州324000

为研究杂交鲟“红嘴病”的病原,本研究对自然患“红嘴病”杂交鲟的肾脏、肝脏进行病原菌的分离,对分离株经形态学观察、生化特性鉴定、16S rRNA基因的PCR扩增及序列分析,并将分离菌以1.0×10^(7)cfu/mL~1.0×10^(3)cfu/mL的剂... 详细信息

为研究杂交鲟“红嘴病”的病原,本研究对自然患“红嘴病”杂交鲟的肾脏、肝脏进行病原菌的分离,对分离株经形态学观察、生化特性鉴定、16S rRNA基因的PCR扩增及序列分析,并将分离菌以1.0×10^(7)cfu/mL~1.0×10^(3)cfu/mL的剂量感染健康杂交鲟,每日观察并记录鲟鱼的活力和死亡数,感染后10 d对各组发病鱼剖检并再次分离病原菌。采用SPSS 19.0的概率单位图解法计算该分离菌对杂交鲟的半数致死量(LD50)。结果显示,从患病杂交鲟肾脏中分离到一株优势革兰氏阳性菌株KS2,呈卵圆形或圆形,成双或成链状排列。生化鉴定结果显示,分离株KS2与停乳链球菌停乳亚种的生化特征一致;PCR结果显示,从分离菌中扩增到约1 500 bp的16S r RNA基因片段,其与停乳链球菌停乳亚种16S rRNA基因的同源性达100%,二者在进化树中聚为一支。以上结果表明从杂交鲟中分离到一株停乳链球菌停乳亚种KS2株。感染试验结果显示,感染组发病鲟鱼均出现嘴部充血肿胀、肛门红肿等“红嘴病”典型症状,并从濒死鲟鱼肾脏中分离的细菌与原感染菌的形态、生化特征均一致;经计算分离菌株KS2对杂交鲟的LD50为3.83×10^(4)cfu/mL。结合上述结果判定菌株KS2为杂交鲟发病的病原菌。利用0.5%甲醛制备KS2菌株灭活疫苗,经安全性检验合格后将其以两种剂量(灭活前分别为1.0×10^(8)cfu/mL及1.0×10^(7)cfu/mL的菌液)免疫杂交鲟,分别于免疫后不同时间采血,采用试剂盒测定各组鲟鱼血清中C3补体和免疫球蛋白IgM的含量,免疫后90 d每组鱼分别经腹腔注射0.5 mL(1.0×10^(7)cfu/mL)停乳链球菌攻毒,通过观察记录10 d内鲟鱼的发病和死亡情况,计算疫苗的相对保护率(RPS),评估该疫苗在实验室阶段对鲟鱼的免疫保护效果。在田间试验中利用该灭活疫苗(1.0×10^(8)cfu/mL)免疫58 637尾杂交鲟,另将66 544尾鲟鱼作为空白对照组,统计患“红嘴病”死亡鲟鱼的数量,评估该疫苗在田间试验阶段对鲟鱼的免疫保护效果。实验室免疫保护试验结果显示,免疫后60 d和90 d,免疫组鲟鱼血清中C3补体和IgM的含量均显著高于PBS对照组(P<0.05),且免疫后30 d~90 d,高剂量免疫组鲟鱼血清中上述两个指标的含量均随时间的延长而升高。攻毒结果显示:高、低剂量灭活疫苗免疫组和对照组杂交鲟的RPS分别为75%、50%。灭活疫苗田间试验结果显示,免疫组杂交鲟因“红嘴病”死亡鲟鱼1 295尾,明显低于对照组死亡的3 799尾,死亡率降低了3.5%。综上所述,本研究证实停乳链球菌停乳亚种是杂交鲟“红嘴病”的病原,对杂交鲟的致病性较强。首次制备鲟鱼源停乳链球菌灭活疫苗,通过实验室免疫保护试验和田间免疫试验证明该疫苗的免疫原性较强,能够刺激鲟鱼产生较强的体液免疫反应,对鲟鱼的免疫保护效果较好,具有很好的应用前景。本研究为鲟鱼“红嘴病”疫苗的研制提供了重要参考依据,对该病的防治具有重要意义。

关键词：杂交鲟停乳链球菌细菌鉴定灭活疫苗免疫作用

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义乌市岩口水库底泥特征、营养盐含量及污染现状分析

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浙江海洋学院学报（自然科学版） 2015年第3期34卷 255-262页

作者：原居林李明杨元杰辛建美顾志敏浙江省淡水水产研究所农业部淡水渔业健康养殖重点实验室浙江生淡水水产遗传育种重点实验室浙江湖州313001 金华市水产技术推广站浙江金华321000

2014年2月至11月每季度一次对浙江省义乌市岩口水库底泥孔隙率、含水率、总氮(TN)、总磷(TN)、总有机质(TOM)含量进行了调查,,分析了底泥的特性、营养盐的来源、相互关系及影响其分布的因素,合理评价了底泥的肥力和污染现状。结果表明:... 详细信息

2014年2月至11月每季度一次对浙江省义乌市岩口水库底泥孔隙率、含水率、总氮(TN)、总磷(TN)、总有机质(TOM)含量进行了调查,,分析了底泥的特性、营养盐的来源、相互关系及影响其分布的因素,合理评价了底泥的肥力和污染现状。结果表明:岩口水库底泥孔隙率、含水率、TN、TP和TOM的平均值分别为(73.54±7.87)%、(87.84±7.01)%、(3 898±1315.83)mg/kg、(900±632.19)mg/kg和(136±28.47)g/kg。通过比较碳/氮(C/N)比值发现,底泥中TOM主要来源于陆源污染物;各站间不同季节底泥TN、TP、TOM的含量受陆源污染物输入、水动力条件等影响;相关性分析表明,底泥中TN和TOM显著相关;有机指数评价底泥肥力结果表明底泥肥力处于肥污染状态;生源要素法评价结果显示底泥总氮污染较为严重,总磷污染程度较低。

关键词：岩口水库底泥营养盐污染现状

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罗氏沼虾高效饲料转化选育家系与原种后代肌肉营养成分的比较

罗氏沼虾高效饲料转化选育家系与原种后代肌肉营养成分的比较

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第十届世界华人鱼虾营养学术研讨会

作者：孙丽慧潘茜陈建明沈斌乾姜建湖浙江省淡水水产研究所农业部淡水渔业健康养殖重点实验室浙江省鱼类健康与营养重点实验室浙江省淡水水产遗传育种重点实验室湖州 313001

对同等养殖条件下所养成罗氏沼虾高效饲料转化选育第3代不同家系与2个原种后代(缅甸MF和孟加拉BF)肌肉营养成分进行测定，从营养成分角度分析和评价罗氏沼虾高效饲料转化选育第3代家系的品质。对饲料转化率高的8个家系(FH1～8)、饲料转... 详细信息

对同等养殖条件下所养成罗氏沼虾高效饲料转化选育第3代不同家系与2个原种后代(缅甸MF和孟加拉BF)肌肉营养成分进行测定，从营养成分角度分析和评价罗氏沼虾高效饲料转化选育第3代家系的品质。对饲料转化率高的8个家系(FH1～8)、饲料转化率低的4个家系(FL1～4)及2个对照(MF和BF)，共计14组的沼虾肌肉营养成分进行了测定。

关键词：罗氏沼虾高效饲料转化选育家系肌肉营养成分

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水产养殖固体废弃物有机肥对土壤肥效和蔬菜品质的影响

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中国农学通报 2024年第19期40卷 102-108页

作者：丁兰徐胜南周聃刘梅李万祈邹松保安吉县农业农村局养殖业管理科浙江安吉313300 农业农村部淡水渔业健康养殖重点实验室/浙江省淡水水产遗传育种重点实验室/浙江省淡水水产研究所浙江湖州313001

研究旨在探讨水产养殖固体废弃物作为有机肥料对土壤肥力和蔬菜品质的影响。通过田间小区试验,设置4个不同处理组,分别为不施肥+辣椒(CK1)、不施肥+番茄(CK2)、施鱼粪有机肥+辣椒(T_(1))、施鸡粪有机肥+辣椒(T_(2))、施鱼粪有机肥+番茄(... 详细信息

研究旨在探讨水产养殖固体废弃物作为有机肥料对土壤肥力和蔬菜品质的影响。通过田间小区试验,设置4个不同处理组,分别为不施肥+辣椒(CK1)、不施肥+番茄(CK2)、施鱼粪有机肥+辣椒(T_(1))、施鸡粪有机肥+辣椒(T_(2))、施鱼粪有机肥+番茄(T_(3))、施鸡粪有机肥+番茄(T_(4)),研究鱼粪有机肥施用对土壤肥力、辣椒和番茄生长及果实品质的影响。研究结果显示,与空白对照组相比,鱼粪有机肥可以显著增加土壤微生物数量,提高土壤有机质、全氮、全磷、有效磷、孔隙度等指标数值,从而增加土壤肥力,改善土壤物理结构,促进辣椒和番茄植株生长。同时鱼粪处理组蔬菜果实维生素C含量平均提高11.9%~24.0%、可溶性糖含量提高8.1%~16.7%,果实品质显著改善、营养价值提升。然而,与市售商品鸡粪有机肥相比,还需优化相关营养成分比例配置,尤其是提高速效钾含量。

关键词：养殖池塘固体废弃物水产养殖固体废弃物有机肥土壤肥效土壤肥力蔬菜品质鱼粪、鸡粪、田间试验

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马口鱼规模化人工繁殖技术的初步研究

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浙江海洋大学学报（自然科学版） 2017年第5期36卷 409-413页

作者：练青平张任驰宓国强姚子亮刘士力黄富有陆君吴燕琴农业部淡水渔业健康养殖重点实验室浙江省淡水水产遗传育种重点实验室浙江省淡水水产研究所浙江湖州313001 浙江省丽水市水产技术推广站浙江丽水323000

于2016~2017年进行了人工养殖条件下马口鱼规模化人工繁殖试验,并对其胚胎发育进行了观察。结果表明:对人工养殖的马口鱼亲本注射混合催产激素,可以促使成熟的雌鱼产卵,在水温17~24.5℃条件下,效应时间为17.5~20.5h,在孵化水温(23±... 详细信息

于2016~2017年进行了人工养殖条件下马口鱼规模化人工繁殖试验,并对其胚胎发育进行了观察。结果表明:对人工养殖的马口鱼亲本注射混合催产激素,可以促使成熟的雌鱼产卵,在水温17~24.5℃条件下,效应时间为17.5~20.5h,在孵化水温(23±1)℃条件下,从受精卵到仔鱼出膜需52.17 h,孵化积温需要1 199.91 h·℃,胚胎发育过程经过卵裂-原肠、器官形成和出苗期等三个阶段。试验共获得受精卵44万粒,初孵仔鱼29万尾,催产率、受精率和孵化率分别为83.13%、80.23%和80.95%。马口鱼的卵为圆形,呈桔黄色或浅黄色。马口鱼规模化人工繁殖的成功可为该鱼的人工养殖和人工增殖放流提供了充足的苗种,也为其它溪流性鱼类规模化繁殖提供借鉴。

关键词：马口鱼人工繁殖胚胎发育

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翘嘴鲌胰岛素样生长因子-Ⅰ(IGF-Ⅰ)基因的克隆及序列分析

翘嘴鲌胰岛素样生长因子-Ⅰ(IGF-Ⅰ)基因的克隆及序列分析

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2018年（第十三届）浙江渔业科技论坛

作者：刘士力程顺蒋文枰迟美丽郑建波贾永义赵金良顾志敏浙江省淡水水产研究所农业部淡水渔业健康养殖重点实验室/浙江省淡水水产遗传育种重点实验室上海海洋大学农业部淡水水产种质资源重点实验室

本研究采用保守引物进行PCR成功扩增了编码翘嘴鲌胰岛素样生长因子-Ⅰ（IGF-Ⅰ）的基因。该基因全长14 567 bp,由5个外显子和4个内含子组成。翘嘴鲌的5个外显子长度分别为298、160、182、36和1360 bp。推测的阅读框为486bp,编码由161个... 详细信息

本研究采用保守引物进行PCR成功扩增了编码翘嘴鲌胰岛素样生长因子-Ⅰ（IGF-Ⅰ）的基因。该基因全长14 567 bp,由5个外显子和4个内含子组成。翘嘴鲌的5个外显子长度分别为298、160、182、36和1360 bp。推测的阅读框为486bp,编码由161个氨基酸组成的IGF-Ⅰ前体蛋白。前体肽由信号肽、成熟肽、E肽三部分组成,其中信号肽44个氨基酸,成熟肽70个氨基酸,E肽47个氨基酸。成熟肽由B、C、A、D四个区域组成,其中B结构域和A结构域的保守性最高,在这2个区域包含由6个半胱氨酸残基形成的3个二硫键。翘嘴鲌B区域还包含保守的IGF-Ⅰ受体识别序列(Phe-Tyr-Phe)。E肽的长度表明翘嘴鲌IGF-Ⅰ属Ea-2型。同源性分析表明翘嘴鲌与鲤科鱼类的IGF-Ⅰ编码氨基酸同源性较高,为94%—100%,但在聚类分析中翘嘴鲌并不是首先和鲌亚科的鱼类聚集在一起。Real-time qPCR组织特异性表达结果显示IGF-Ⅰ mRNA在肝脏组织中的表达量最高,显著高于其它组织,脾、心脏、精巢、脑次之,肾、鳃、胃和卵巢中表达量较低。翘嘴鲌IGF-Ⅰ基因4个内含子长度分别为1 170、9 364、251和1 746 bp。相对外显子来说,种间内含子变异较大,其中第三内含子变异最大。翘嘴鲌IGF-Ⅰ基因中包含6个微卫星,（GATG）AATAT（ATAG）位于第一内含子中,（CT）、（TTA）、（AC）、（TG）和（ATT）位于第二内含子中。其中4个微卫星位点具有多态性,将它们在120尾同塘养殖的翘嘴鲌中进行基因型与生长性状的关联性分析,均未达到显著水平（P>0.05）。结果为进一步研究该基因的表达、功能及其转录调控特征奠定了分子基础。

关键词：翘嘴鲌胰岛素样生长因子-Ⅰ基因内含子微卫星序列分析

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瓯江唇生产性苗种繁育技术

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水产养殖 2017年第2期38卷 7-9页

作者：陆君练青平姚子亮宓国强吴燕琴张任驰丽水市水产技术推广站浙江丽水323000 浙江省淡水水产研究所农业部淡水渔业健康养殖重点实验室浙江省淡水水产遗传育种重点实验室浙江湖州313001

唇[鱼骨]（Hemibarbus labeo）属鲤形目，鲤科，鮈亚科，[鱼骨]属，其分布广，除西部高原地区之外，我国南北各大水系、浙江省内各水系都有分布，为瓯江流域主要经济鱼类之一。

关键词：瓯江流域苗种繁育技术鱼骨生产性高原地区经济鱼类鲤形目浙江省

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基于系统动力学模型的淡水渔业捕捞时间和喂养策略的优化分析

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江苏农业科学 2020年第2期48卷 164-170页

作者：刘梅原居林倪蒙张雷鸣顾志敏农业农村部淡水渔业健康养殖重点实验室/浙江省淡水水产遗传育种重点实验室/浙江省淡水水产研究所浙江湖州313001 上海海洋大学水产与生命科学学院上海201306

从系统动力学角度出发,着眼于动态系统的整体统筹,综合考虑环境、生态和经济3方面要素,利用系统模拟软件Stella 9.1.3构建我国内陆淡水渔业池塘养殖系统动力学模型,再结合Berkeley Madonna优化软件,以水产养殖户总利润最大化为目标函数... 详细信息

从系统动力学角度出发,着眼于动态系统的整体统筹,综合考虑环境、生态和经济3方面要素,利用系统模拟软件Stella 9.1.3构建我国内陆淡水渔业池塘养殖系统动力学模型,再结合Berkeley Madonna优化软件,以水产养殖户总利润最大化为目标函数对模型进行优化。获取最佳捕捞时间和最优喂养方案,并反推此时对应的最佳养殖容量,同时利用扰动法对所建模型进行参数敏感性分析,以进一步有效提高养殖容量,指导养殖生产,实现淡水渔业经济生态互利共赢局面,以期实现我国内陆淡水养殖业的可持续发展。

关键词：最佳捕捞时间最优喂养方案池塘养殖系统系统动力学 Stella模型软件

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