检索结果-内蒙古大学图书馆

中国老年学杂志 2012年第21期32卷 4700-4703页

作者：李祥邹立林吕建新高基民温州医学院浙江省医学遗传学重点实验室浙江省模式生物技术与应用重点实验室浙江温州325035

目的通过PCR将丙肝病毒(HCV)Core与蜂毒素信号肽(Mel)进行融合,构建到pIZ/V5载体上获得pIZ/V5-Core-Mel表达载体。方法将pIZ/V5-Mel-core稳定转染Sf9细胞,经Zeocin抗性筛选,获得单克隆抗性细胞株。RT-PCR检测结果表明获得稳定表达Mel-c... 详细信息

目的通过PCR将丙肝病毒(HCV)Core与蜂毒素信号肽(Mel)进行融合,构建到pIZ/V5载体上获得pIZ/V5-Core-Mel表达载体。方法将pIZ/V5-Mel-core稳定转染Sf9细胞,经Zeocin抗性筛选,获得单克隆抗性细胞株。RT-PCR检测结果表明获得稳定表达Mel-core的细胞系Sf9-Core。对稳定细胞系Sf9-Core的上清进行离心纯化并Western印迹检测。结果在上清离心纯化的样品中有HCV Core形成的类病毒颗粒(VLPs)。透射电镜显示Core蛋白能自组装成直径约30 nm的球形颗粒。结论该研究成功构建了HCV Core与蜂毒素信号肽的融合蛋白并在Sf9细胞稳定表达,在细胞培养的上清中获得了VLPs。

关键词：丙型肝炎病毒 Core蛋白类病毒颗粒

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毛细管技术筛查AZF微缺失方法的建立及临床验证

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中华医学遗传学杂志 2016年第4期33卷 550-554页

作者：何天文赵辉赵馨卢建郑毅春张畅斌尹爱华广东省妇幼保健院医学遗传中心、广东省妇幼代谢与遗传病重点实验室、广东省妇幼保健院生殖中心广州511442

目的应用毛细管技术建立一种准确、快速和简便的Y染色体AZF微缺失筛查方法，并将其应用于临床检测。方法用FAM、JOE和TAMRA荧光基团标记PCR引物，进行多重定量荧光PCR，建立毛细管技术筛查Y染色体AZF微缺失的方法，并对725例非梗阻性无... 详细信息

目的应用毛细管技术建立一种准确、快速和简便的Y染色体AZF微缺失筛查方法，并将其应用于临床检测。方法用FAM、JOE和TAMRA荧光基团标记PCR引物，进行多重定量荧光PCR，建立毛细管技术筛查Y染色体AZF微缺失的方法，并对725例非梗阻性无精症、严重少精症或轻度少弱精症的男性不育患者进行AZF微缺失筛查。结果成功建立了毛细管技术筛查AZF微缺失方法。在725例非梗阻性无精症、严重少精症或轻度少弱精症男性不育患者中，共检出38例AZF微缺失，总缺失率为5．24％，其中无精症组缺失率为8．62％（15／174），严重少精症组缺失率为6．75％（16／237），轻度少弱精症组缺失率为2．23％（7／314）。结论所建立的毛细管技术筛查Y染色体AZF微缺失方法具有准确、快速和简便优点，具有重要的临床应用价值。

关键词： Y染色体无精子症因子多重定量荧光PCR

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轮状病毒SA11衣壳蛋白VP7的毕赤酵母重组表达及IgY的制备

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中华预防医学杂志 2009年第6期43卷 526-530页

作者：张诗海罗庆礼周银娣李静徐元宏沈继龙安徽医科大学第一附属医院检验科合肥230022 安徽省人兽共患病重点实验室教育部省部共建重要遗传病基因资源利用重点实验室

目的真核重组表达轮状病毒（rotavirus，RV）SA11株VP7衣壳蛋白并制备、纯化其卵黄抗体（IgY）。方法将SA11标准株在MA104细胞中增殖，收集病毒液。从病毒液中提取RNA，通过逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）扩增获得SA11株衣壳蛋白VP7的长... 详细信息

目的真核重组表达轮状病毒（rotavirus，RV）SA11株VP7衣壳蛋白并制备、纯化其卵黄抗体（IgY）。方法将SA11标准株在MA104细胞中增殖，收集病毒液。从病毒液中提取RNA，通过逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）扩增获得SA11株衣壳蛋白VP7的长度为978bp的编码基因，将PCR产物连接到pMD18-T载体上，进行测序。将重组体亚克隆到分泌表达载体pPICZαB中，再将重组体转化人大肠杆菌rop10中，用BstXI线性化酶切重组质粒后电转入毕赤酵母X-33中，进行测序。转染成功的菌落再用甲醇诱导表达，亲和层析法纯化重组蛋白抗原，十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS—PAGE）和蛋白免疫印迹（Western blotting）鉴定，用重组蛋白免疫罗曼母鸡，收集鸡蛋，Western blotting鉴定、纯化IgY。结果细胞增殖液中提取的RNA银染可见11个条带，成功构建了含pPICZαB—SAllVP7的毕赤酵母X-35，毕赤酵母X-33分泌的融合蛋白被收集、纯化。毕赤酵母X-33表达的SA11VP7的衣壳蛋白经Western blotting验证与预测蛋白相对分子质量40200相符。从鸡蛋中提取的鸡的IgV验证为抗Vfy7的抗体。纯度可达到95％，1个鸡蛋能产10．2mg的IgY。结论抗重组RVSA11衣壳蛋白VP7和IgY的成功制备为疫苗和诊断试剂的开发奠定了基础。

关键词：轮状病毒属衣壳蛋白质类卵黄免疫球蛋白

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β珠蛋白基因3′UTR+101G>C(HBB:c.*233G>C)变异的遗传学效应分析

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中国实验血液学杂志 2021年第4期29卷 1271-1274页

作者：杜丽姚翠泽包秀琴梁杰袁腾龙秦丹卿王继成广东省妇幼保健院医学遗传中心广东省妇幼代谢与遗传病重点实验室广东省出生缺陷防治管理中心广东广州511442

目的:探讨β珠蛋白基因3′UTR+101G>C(HBB:c.*233G>C)变异是否具有遗传学效应,为地中海贫血的基因诊断和遗传咨询提供依据。方法:应用全血细胞分析和毛细管电泳进行血液学指标分析,采用PCR-流式荧光杂交法检测中国南方人群常见的2... 详细信息

目的:探讨β珠蛋白基因3′UTR+101G>C(HBB:c.*233G>C)变异是否具有遗传学效应,为地中海贫血的基因诊断和遗传咨询提供依据。方法:应用全血细胞分析和毛细管电泳进行血液学指标分析,采用PCR-流式荧光杂交法检测中国南方人群常见的23种地中海贫血相关突变,采用一代测序方法检测β珠蛋白基因(HBB)的其他变异位点。结果:在463个进行HBB基因测序的病例中共检测到7个病例携带HBB:c.*233G>C变异,其中4例同时携带HBB基因其他致病性变异(2例反式排列,2例顺式排列),均为典型的轻型β地中海贫血的血液学特征,3例同时携带异常血红蛋白变异,均不具有β地中海贫血的血液学特征。结论:本研究的数据显示HBB:c.*233G>C变异无明显遗传学效应,应为多态性位点。

关键词： β珠蛋白基因 3′UTR+101G>C HBB:c.*233G>C

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产前Wolf-Hirschhorn综合征的临床诊断

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实用医学杂志 2019年第10期35卷 1664-1668页

作者：郭莉何轶群卢建钟银环任丛勉郑来萍尹爱华广东省妇幼保健院医学遗传中心广东省妇幼代谢与遗传病重点实验室广州511442

目的研究产前Wolf-Hirschhorn综合征(WHS)胎儿的临床特点,探讨其诊断方法与产前超声特征,为产前遗传咨询提供依据。方法回顾性分析2013年1月至2018年12月在广东省幼保健院医学遗传中心就诊或转诊需介入性产前诊断的孕妇,分析WHS胎儿的... 详细信息

目的研究产前Wolf-Hirschhorn综合征(WHS)胎儿的临床特点,探讨其诊断方法与产前超声特征,为产前遗传咨询提供依据。方法回顾性分析2013年1月至2018年12月在广东省幼保健院医学遗传中心就诊或转诊需介入性产前诊断的孕妇,分析WHS胎儿的传统染色体G显带和微阵列分析(chromosomal microarray analysis,CMA)结果,并结合临床资料综合分析。结果 (1)介入性检测染色体共34 956例,诊断胎儿WHS共14例。传统染色体G显带检出13例,2例隐匿性不平衡易位。CMA检出所有的14例,可准确提示缺失片段大小,并检出2例隐匿性不平衡易位染色体来源。(2)产前超声表现孕中/晚期异常13例,早期1例,包括胎儿宫内生长受限(IUGR)12例,肾发育异常9例,鼻骨发育异常5例等。结论 (1)传统染色体G显带可检出大多数WHS,CMA可提高诊断准确性,特别是隐匿性不平衡易位。唐氏生化筛查高风险有一定提示作用。(2)胎儿肾发育异常和鼻骨发育异常可能是WHS早期表现之一,产前超声未发现胎儿颜面异常不能排除WHS。

关键词：产前诊断 Wolf Hirschhorn综合征染色体微阵列超声异常

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组蛋白乙酰化调控因子在动物早期胚胎发育过程中的作用研究进展

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浙江大学学报（农业与生命科学版） 2024年第5期50卷 715-723页

作者：李潇腾赵盼盼张坤浙江大学动物科学学院浙江省奶牛遗传改良与乳品质研究重点实验室浙江杭州310058

精卵结合后,动物胚胎在早期发育过程中会经历剧烈的表观遗传重编程,包括DNA甲基化、组蛋白修饰和染色质重塑等,以确保受精前后高度分化的配子形成全能性的细胞。重编程与早期胚胎发育过程的各个阶段紧密相关,有多种调控因子参与其中,如... 详细信息

精卵结合后,动物胚胎在早期发育过程中会经历剧烈的表观遗传重编程,包括DNA甲基化、组蛋白修饰和染色质重塑等,以确保受精前后高度分化的配子形成全能性的细胞。重编程与早期胚胎发育过程的各个阶段紧密相关,有多种调控因子参与其中,如乙酰转移酶、脱乙酰酶及组蛋白修饰阅读器等均参与组蛋白乙酰化的调控,并发挥重要功能。本文综述了组蛋白乙酰化调控因子在动物早期胚胎发育过程中的作用,探讨了早期胚胎发育过程中的表观遗传现象及机制,有助于更好地理解哺乳动物早期胚胎发育机制,减少胚胎发育缺陷,从而提升家畜繁殖力。

关键词：家畜繁殖早期胚胎着床前表观遗传组蛋白乙酰化

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CNV-seq结合QF-PCR在孕早期流产物检测中的临床应用价值

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现代妇产科进展 2023年第3期32卷 166-170页

作者：郭芳芳侯亚萍胡听听彭海山杨洁霞广东省妇幼保健院医学遗传中心广东省妇幼代谢与遗传病重点实验室广州511400

目的:探讨拷贝数变异测序(CNV-seq)结合定量荧光聚合酶链反应(QF-PCR)在孕早期流产物遗传学检测中的临床应用价值。方法:收集2019年1月至2022年2月在广东省妇幼保健院就诊的孕早期(13周以内)孕妇流产物组织样本,通过CNV-seq结合QF-PCR... 详细信息

目的:探讨拷贝数变异测序(CNV-seq)结合定量荧光聚合酶链反应(QF-PCR)在孕早期流产物遗传学检测中的临床应用价值。方法:收集2019年1月至2022年2月在广东省妇幼保健院就诊的孕早期(13周以内)孕妇流产物组织样本,通过CNV-seq结合QF-PCR检测流产物组织的染色体拷贝数变异情况,分析其中染色体拷贝数异常变异的分布及发生率并评估其临床价值。结果:4145例孕早期流产物组织样本中,65.01%(2695/4145)样本提示结果异常,包括51.97%(2154/4145)非整倍体、7.04%(292/4145)三倍体、3.98%(165/4145)部分非整倍体、0.70%(29/4145)同源单亲二倍体、0.05%(2/4145)四倍体以及1.28%(53/4145)微缺失/重复。在所有异常结果中,10M以上的大片段拷贝数异常占96.96%(2613/2695)。在1.97%(53/2695)的孤立性亚显微拷贝数异常中发现了3种复发性致病性亚显微拷贝数异常,分别是22q11.21微缺失/微重复、2qter微缺失(位于2q37.3末端区域内)。结论:CNV-seq结合QF-PCR检测分析孕早期流产物组织中染色体拷贝数变异,可为流产后精准的临床管理和再生育指导提供依据;发现3种潜在的可能与流产相关的致病性亚显微拷贝数异常。

关键词：拷贝数变异测序定量荧光聚合酶链反应孕早期流产

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牛和小鼠早期胚胎发育过程中细胞谱系发育调控的比较

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浙江大学学报（农业与生命科学版） 2023年第6期49卷 765-775页

作者：吴潇彤史延李爽王少华张坤浙江大学动物科学学院浙江省奶牛遗传改良与乳品质研究重点实验室浙江杭州310058

高产奶牛繁殖效率低是世界性难题,其中早期胚胎死亡率高是主要原因之一。当前对牛早期胚胎发育的研究有限,而对于小鼠这种模式动物的早期胚胎发育研究已相当深入。因此,本文从胚胎形态、转录因子以及信号通路3方面对牛和小鼠早期胚胎发... 详细信息

高产奶牛繁殖效率低是世界性难题,其中早期胚胎死亡率高是主要原因之一。当前对牛早期胚胎发育的研究有限,而对于小鼠这种模式动物的早期胚胎发育研究已相当深入。因此,本文从胚胎形态、转录因子以及信号通路3方面对牛和小鼠早期胚胎发育过程进行比较,以加深对牛早期胚胎发育的认识。经比较发现,受精后,牛和小鼠早期胚胎在不同时期发生母源因子降解、合子基因组激活、细胞极性建立和不对称分裂,最终使得胚胎形态发生变化,形成具有3个胚层(滋养外胚层、上胚层和原始内胚层)的囊胚。此外,牛和小鼠早期胚胎发育过程中,多个转录因子及信号通路形成复杂网络调控细胞谱系分化。综上所述,在牛和小鼠早期胚胎发育过程中,相似的生物学事件陆续发生,但是细胞谱系分化的调控呈现差异性,提示我们将小鼠早期胚胎作为研究模型的局限性,该领域的研究对提高奶牛繁殖效率以及促进牛遗传改良工作具有重要意义。

关键词：牛小鼠着床前早期胚胎谱系分化滋养外胚层内细胞团

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泌乳盛期奶牛肝脏脂肪变性影响生产性能的代谢机制

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浙江大学学报（农业与生命科学版） 2024年第5期50卷 805-816页

作者：刘潇怡王迪铭孙会增刘建新浙江大学动物科学学院浙江省奶牛遗传改良与乳品质研究重点实验室浙江杭州310058

为揭示奶牛肝脏脂肪变性影响生产性能的代谢机制,以健康奶牛为对照,本研究比较分析了肝脏轻度脂肪变性奶牛的生理生化指标和转录组测序结果。肝脏组织学观察发现,当脂肪变性时,苏木精-伊红染色的肝脏组织切片中可观察到大小不等的近圆... 详细信息

为揭示奶牛肝脏脂肪变性影响生产性能的代谢机制,以健康奶牛为对照,本研究比较分析了肝脏轻度脂肪变性奶牛的生理生化指标和转录组测序结果。肝脏组织学观察发现,当脂肪变性时,苏木精-伊红染色的肝脏组织切片中可观察到大小不等的近圆形空泡。与健康奶牛相比,肝脏轻度脂肪变性奶牛的脂肪矫正乳、能量矫正乳、乳脂含量均显著降低,而血浆生化指标无明显差异。对肝脏组织进行转录组测序,共发现241个差异表达基因(differentially expressed genes,DEGs),其中表达下调的DEGs有136个,表达上调的DEGs有105个。通过基因本体(gene ontology,GO)功能注释发现,DEGs主要富集于脂质代谢相关的生物学过程与分子功能中;通过京都基因和基因组数据库(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)通路富集分析发现,DEGs显著富集于类固醇生物合成、胆固醇代谢、非酒精性脂肪性肝病等脂质代谢相关通路。另外,对全体基因进行基因集富集分析(gene set enrichment analysis,GSEA)发现,基因主要富集于脂肪酸延长通路、过氧化物酶体增殖物激活受体信号通路等影响脂质代谢的重要通路。上述结果表明,肝脏脂肪变性影响了奶牛肝脏的脂质代谢,进而影响了奶牛全身代谢,引起了奶牛乳脂含量等生产性能改变。

关键词：高产奶牛泌乳盛期脂肪变性肝脏转录组

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基于SSR标记的克氏原螯虾种质资源遗传多样性研究

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华中农业大学学报 2016年第2期35卷 63-68页

作者：李喜莲李飞朱俊杰顾志敏农业部淡水渔业健康养殖重点实验室/浙江省淡水水产遗传育种重点实验室/浙江省淡水水产研究所湖州313001

选用10对克氏原螯虾微卫星引物对桐庐（TL）、太湖（TH）、湖北（HB）、江西（Jx）、洪泽湖（HZH）、崇明（cM）、广西（Gx）、海盐（HY）8个克氏原螯虾群体的遗传多样性状况和遗传结构进行研究。结果发现，8个克氏原螯虾群体的平均观... 详细信息

选用10对克氏原螯虾微卫星引物对桐庐（TL）、太湖（TH）、湖北（HB）、江西（Jx）、洪泽湖（HZH）、崇明（cM）、广西（Gx）、海盐（HY）8个克氏原螯虾群体的遗传多样性状况和遗传结构进行研究。结果发现，8个克氏原螯虾群体的平均观测杂合度值为0．5257～0．7400，平均期望杂合度值在0．6238～0．7434之间，平均多态信息含量在0．4209～0．6840之间。其中广西（GX）群体遗传多样性最高，太湖（TH）群体遗传多样性最低。采用MEGA4．0计算各地理种群间的遗传距离，遗传距离最远的是崇明（CM）和江西（JX）群体，遗传距离最近的是湖北（HB）和太湖（TH）群体。结果显示，这8个地理种群资源遗传多样性较高。

关键词：克氏原螯虾微卫星序列(SSR) 遗传多样性遗传结构

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