检索结果-内蒙古大学图书馆

敲低TFAM通过上调ROS/ADAM17促进可溶型MICA生成抑制NK细胞杀伤人肝癌细胞的作用

细胞与分子免疫学杂志 2021年第3期37卷 257-264页

作者：吴丹何元方周幸春邢金良刘晓斌延安大学医学院免疫教研室陕西延安716000 空军军医大学基础医学院教学实验中心陕西西安710032 空军军医大学基础医学院生理与病理生理学教研室陕西西安710032

目的探索线粒体转录因子A(TFAM)表达下调促进肝癌细胞逃避自然杀伤(NK)细胞的作用及机制。方法免疫组织化学染色法检测肝癌及癌旁组织中TFAM的表达,分析肝癌组织中TFAM表达水平与肝癌患者临床参数及预后的相关性。利用慢病毒载体构建TFA... 详细信息

目的探索线粒体转录因子A(TFAM)表达下调促进肝癌细胞逃避自然杀伤(NK)细胞的作用及机制。方法免疫组织化学染色法检测肝癌及癌旁组织中TFAM的表达,分析肝癌组织中TFAM表达水平与肝癌患者临床参数及预后的相关性。利用慢病毒载体构建TFAM稳定干涉及过表达的肝癌细胞株,与NKL细胞共培养,ELISA检测培养上清中可溶性MHCⅠ类链相关分子A(sMICA)水平及NK细胞活化相关细胞因子的变化;流式细胞术检测肝癌细胞膜MICA的水平;乳酸脱氢酶(LDH)释放试验检测共培养的NKL细胞杀伤活性。调控共培养上清中sMICA的含量后,ELISA及LDH试验检测细胞因子及NKL细胞杀伤功能是否受到影响。调控TFAM干涉或过表达肝癌细胞内的活性氧(ROS)水平和解整合素金属蛋白酶17(ADAM17)表达,ELISA检测sMICA变化。结果与癌旁组织相比,TFAM在肝癌组织中显著低表达,且TFAM低表达肝癌患者其总生存期和无病生存期均显著低于TFAM高表达肝癌患者。敲低肝癌细胞TFAM后,细胞膜型MICA水平显著降低,而培养上清中的sMICA显著增加,细胞内ROS水平及ADAM17的表达均显著增强;肝癌细胞过表达TFAM后则相反。将TFAM稳定干涉的肝癌细胞与NKL细胞共培养后可显著降低NKL细胞活化细胞因子的分泌及杀伤功能,反之,与TFAM过表达的肝癌细胞与NKL细胞共培养后其活化相关细胞因子的表达及杀伤功能均显著增强。在肝癌细胞与NKL细胞共培养上清中加入MICA中和抗体,可显著恢复肝癌细胞TFAM干涉所导致的NKL细胞活性抑制及杀伤功能减弱;在共培养上清中加入重组MICA后,TFAM过表达所致的NK细胞活化及杀伤功能增强被显著抑制。敲低TFAM引起sMICA生成增加,但中和ROS或者敲低ADAM17后,可显著抑制sMICA生成;TFAM过表达导致sMICA生成减少,加入过氧化氢(H2O2)或者过表达ADAM17后,可显著增加sMICA生成。结论敲低TFAM上调ROS/ADAM17通路促进sMICA生成,抑制NK细胞的杀伤力。

关键词：肝细胞癌线粒体转录因子A(TFAM) 活性氧(ROS) 解整合素金属蛋白酶17(ADAM17) 可溶性MHCⅠ类链相关分子A(sMICA) 自然杀伤(NK)细胞

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三氧化二砷对人卵巢癌细胞SKOV3迁移、侵袭能力的影响及其相关分子机制

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药学服务与研究 2019年第2期19卷 93-97页

作者：周鹏王燕黄高翔李忆东海军军医大学基础医学院病理生理学教研室上海200433 上海杉达学院国际医学技术学院基础部上海201209

目的:探讨三氧化二砷(arsenic trioxide,As_2O_3)对人卵巢癌细胞迁移、侵袭的影响及其相关分子机制。方法:分别通过细胞划痕、Transwell小室及预包被Matrigel胶的Transwell小室(侵袭小室)方法,观察As_2O_3对人卵巢癌细胞SKOV3迁移、侵... 详细信息

目的:探讨三氧化二砷(arsenic trioxide,As_2O_3)对人卵巢癌细胞迁移、侵袭的影响及其相关分子机制。方法:分别通过细胞划痕、Transwell小室及预包被Matrigel胶的Transwell小室(侵袭小室)方法,观察As_2O_3对人卵巢癌细胞SKOV3迁移、侵袭能力的影响。蛋白质印迹法检测As_2O_3处理不同时间后肿瘤转移相关的蛋白,包括Rho相关蛋白激酶(Rho related protein kinase,ROCK)及基质金属蛋白酶家族(matrix metalloproteinase family,MMPs)蛋白的表达。结果:2μmol/L As_2O_3即可显著抑制SKOV3细胞的迁移及侵袭。蛋白质印迹法检测发现,As_2O_3可显著抑制ROCK1、ROCK2及MMP-9的表达,但对MMP-2表达无明显影响。结论:As_2O_3可明显抑制人卵巢癌细胞SKOV3的迁移、侵袭能力,这可能与其抑制ROCK1、ROCK2以及MMP-9的表达有关。

关键词：三氧化二砷卵巢癌迁移侵袭 Rho相关蛋白激酶

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从近视的普遍化看人类的拉马克式进化

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医学争鸣 2014年第1期5卷 13-16页

作者：王瑞安第四军医大学基础医学院病理学与病理生理学教研室陕西西安710032

这个世界戴眼镜的人越来越多。关于近视的机制,有很多的学说。但总体来看,近视是人类演化的方向。随着科学技术、生产力的发展,人类的劳作从粗狂向越来越精细的方向发展,需要长时间的近距离视物。同时,劳动的前期训练也即受教育的时间... 详细信息

这个世界戴眼镜的人越来越多。关于近视的机制,有很多的学说。但总体来看,近视是人类演化的方向。随着科学技术、生产力的发展,人类的劳作从粗狂向越来越精细的方向发展,需要长时间的近距离视物。同时,劳动的前期训练也即受教育的时间延长。近距离读书、工作,视物成像在视网膜后,需要调节后方能成像于视网膜上。调节方式有两种,即睫状肌收缩导致的晶状体屈光度加大调节和眼轴的加长调节。睫状肌收缩是短期行为,我们称之为调节;而眼轴的伸长为长期的调节方式,我们称之为适应。学界早已公认,近视可以遗传。如此看来,人类近视比例的增加,正是拉马克式演化。在本文中,我们通过对近视形成过程的分析,探讨达尔文和拉马克式进化理论的科学性。

关键词：近视适应进化达尔文拉马克中心法则达尔文工程主义

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体细胞突变肿瘤发生理论之悖论

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医学争鸣 2012年第4期3卷 25-26页

作者：梁媛覃君慧王敬博王瑞安第四军医大学基础医学院病理学与病理生理学教研室陕西西安710032

一个科学理论是否成立，有三个关键的指标。一是逻辑上的简洁性；二是能够解释以前不能解释的现象并能在现有的理论之间建立联系，也即连环性；三是不出现悖论。肿瘤发生的体细胞突变理论（somatic mutation theory，SMT）已主宰肿瘤发... 详细信息

一个科学理论是否成立，有三个关键的指标。一是逻辑上的简洁性；二是能够解释以前不能解释的现象并能在现有的理论之间建立联系，也即连环性；三是不出现悖论。肿瘤发生的体细胞突变理论（somatic mutation theory，SMT）已主宰肿瘤发生研究半个多世纪。

关键词：体细胞突变肿瘤发生悖论生理科学理论突变理论

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寿命延长可能是导致人类精子数量减少的主因

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医学争鸣 2013年第2期4卷 29-31页

作者：王瑞安第四军医大学基础医学院病理学与病理生理学教研室陕西西安710032

近年来人类精子数量的下降已成不争的事实并受到广泛关注。有意思的是,对于这一重要的问题全世界似乎很有共识——那就是,环境污染惹的祸。实际上略经分析就可知道,这种共识非常不靠谱。其实,生殖力与寿命相互消长是自然界的规律。精子... 详细信息

近年来人类精子数量的下降已成不争的事实并受到广泛关注。有意思的是,对于这一重要的问题全世界似乎很有共识——那就是,环境污染惹的祸。实际上略经分析就可知道,这种共识非常不靠谱。其实,生殖力与寿命相互消长是自然界的规律。精子数量的下降,只不过是人类寿命延长的必然。

关键词：精子数量环境污染寿命二噁英双酚A 邻二甲酸二丁酯

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病理医生不相信肿瘤EMT

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医学争鸣 2011年第6期2卷 25-26页

作者：王瑞安闫庆国张丰第四军医大学基础医学院病理学与病理生理学教研室陕西西安710032

皮一间充质转化（epithelial-mesenehymaltransition，EMT）原本是胚胎学的概念。内外胚层——主要是外胚层的细胞迁移到内外胚层问，形成星网状的组织，称为间充质（mesenchyme），我国病理学界习惯翻译为问叶组织。问充质细胞呈梭形... 详细信息

皮一间充质转化（epithelial-mesenehymaltransition，EMT）原本是胚胎学的概念。内外胚层——主要是外胚层的细胞迁移到内外胚层问，形成星网状的组织，称为间充质（mesenchyme），我国病理学界习惯翻译为问叶组织。问充质细胞呈梭形、星芒状等，细胞问连接疏松，便于细胞的迁移。起源于间充质细胞的中间丝多为波形蛋白（vimentin），或许与适应细胞的迁移需要有关。间充质形成真皮、结缔组织、骨骼、肌肉、心血管、淋巴系统、肾脏等组织器官。很多器官的组分，如脊髓的后根节、肾上腺的髓质、生殖腺体的发生等等都要经过长距离的细胞迁移。所以EMT是胚胎学必要的机制之一[1]。

关键词： EMT 病理医生间充质细胞细胞迁移肿瘤结缔组织组织器官外胚层

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自身免疫性肝病的电镜诊断与鉴别诊断

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细胞与分子免疫学杂志 2012年第1期28卷 78-80页

作者：黄晓峰韩英李增山尹文第四军医大学基础医学院中心实验室第四军医大学西京消化病医院第四军医大学基础医学院病理学与病理生理学教研室陕西西安710032

自身免疫性肝病的诊断和鉴别诊断目前还主要是依赖于临床表现、实验室检查（肝功能化验、自身抗体和免疫球蛋白检测）以及肝穿的光镜病理活检，电镜在自身免疫性肝病诊断中的价值还没有得到应有的重视。透射电镜检查不仅可以确诊很多代... 详细信息

自身免疫性肝病的诊断和鉴别诊断目前还主要是依赖于临床表现、实验室检查（肝功能化验、自身抗体和免疫球蛋白检测）以及肝穿的光镜病理活检，电镜在自身免疫性肝病诊断中的价值还没有得到应有的重视。透射电镜检查不仅可以确诊很多代谢性肝病、对于病毒性乙型肝炎、药物性肝病等疾病与自身免疫性肝病的鉴别诊断都具有独特价值；对于原发性胆汁性肝硬化以及自身免疫性肝炎本身的诊断也具有一定特异性。因此，有条件的单位应尽早和尽可能开展肝脏的超微结构检查，将电镜用于自身免疫性肝病的诊断和鉴别诊断。

关键词：自身免疫性肝病诊断鉴别诊断超微结构

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DPX封片胶在牙组织免疫组化染色防脱片中的作用

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细胞与分子免疫学杂志 2012年第4期28卷 418-418,421页

作者：王文勇黄晓峰闫庆国李擒龙张素珍王伯沄第四军医大学基础医学院病理学与病理生理学教研室暨西京医院病理科陕西西安710032 第四军医大学基础医学院中心实验室陕西西安710032

目的:研究DPX封片胶在牙组织免疫组化染色中的防脱片效果。方法:狗上前牙EDTA脱钙、常规石蜡包埋、切片、脱蜡、水洗、干燥后,用DPX封片胶在组织边缘和玻片上涂抹一圈,37℃烤干DPX封片胶,EnVision技术观察IL-1、基质金属蛋白酶1(MMP-1)... 详细信息

目的:研究DPX封片胶在牙组织免疫组化染色中的防脱片效果。方法:狗上前牙EDTA脱钙、常规石蜡包埋、切片、脱蜡、水洗、干燥后,用DPX封片胶在组织边缘和玻片上涂抹一圈,37℃烤干DPX封片胶,EnVision技术观察IL-1、基质金属蛋白酶1(MMP-1)、MMP-9的表达。结果:DPX封片胶处理后的切片,经微波抗原修复后,切片上的组织完整没有边缘脱落破损现象。免疫组化染色后,组织形态基本完整,相应分子表达定位准确,染色结果清晰。结论:DPX封片胶在牙齿等含钙组织免疫组化染色中有良好的防脱片作用。

关键词： DPX封片剂免疫组化组织防脱片抗原修复

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单细胞表观遗传测序技术最新进展

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陆军军医大学学报 2022年第1期44卷 74-78页

作者：倪兵高维武陆军军医大学(第三军医大学)高原军事医学系病理生理学教研室重庆400038 陆军军医大学(第三军医大学)基础医学院全军免疫学研究所重庆400038

单细胞测序技术是目前解码组织、器官、细胞、分子异质性的重要热门工具,其主要基于二代测序技术,根据其检测对象可分为单细胞基因组学测序技术、单细胞表观组学测序技术、单细胞转录组学测序技术,以及可同时解析多个组学的单细胞多组... 详细信息

单细胞测序技术是目前解码组织、器官、细胞、分子异质性的重要热门工具,其主要基于二代测序技术,根据其检测对象可分为单细胞基因组学测序技术、单细胞表观组学测序技术、单细胞转录组学测序技术,以及可同时解析多个组学的单细胞多组学测序技术。表观遗传学是连接基因组学和细胞表型的重要调控环节,其可通过染色质的可及性、DNA和组蛋白的修饰、核小体的排列、染色质的三维构象等发挥转录调控等作用。目前,已开发了多种检测不同表观层面的单细胞测序新技术,绘制了多种组织、器官、细胞的多个表观层面异质性的图谱,初步阐述了细胞转录异质性的表观决定机制。未来的新技术和新算法,以及单细胞测序技术在生命科学和医学疾病中的应用,将有望深度解码组织、器官、细胞、分子的异质性以及异质性的调控机制。

关键词：单细胞测序表观组学转录组学二代测序异质性

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敲低膀胱癌细胞热休克蛋白60(HSP60)通过上调乳酸脱氢酶A(LDHA)表达抑制人NKL细胞杀伤

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细胞与分子免疫学杂志 2021年第12期37卷 1098-1105页

作者：杨帆刘静姚田军吴丹周幸春张波空军军医大学第二附属医院唐都医院泌尿外科陕西西安710038 空军军医大学基础医学院病理与病理生理学教研室陕西西安710032

目的探索热休克蛋白60(HSP60)蛋白表达变化影响膀胱癌细胞逃避自然杀伤(NK)细胞免疫监视的作用及机制。方法免疫组织化学染色法检测HSP60在膀胱癌组织及癌旁组织中的表达,统计学分析HSP60在膀胱癌及癌旁组织的表达差异及HSP60表达水平... 详细信息

目的探索热休克蛋白60(HSP60)蛋白表达变化影响膀胱癌细胞逃避自然杀伤(NK)细胞免疫监视的作用及机制。方法免疫组织化学染色法检测HSP60在膀胱癌组织及癌旁组织中的表达,统计学分析HSP60在膀胱癌及癌旁组织的表达差异及HSP60表达水平与膀胱癌患者预后的相关性。利用腺病毒载体构建HSP60稳定干涉及过表达的膀胱癌细胞系并与NKL细胞共培养,ELISA及LDH释放实验检测NK细胞活化及杀伤能力的变化。Western blot法检测膀胱癌细胞乳酸脱氢酶A(LDHA)表达,试剂盒检测乳酸分泌。在HSP60稳定干涉及过表达的膀胱癌细胞系,利用小干涉RNA(siRNA)敲低或利用质粒过表达膀胱癌细胞中的LDHA,检测对NKL细胞杀伤能力的影响。利用线粒体活性氧探针MitoSOX检测线粒体活性氧(ROS)水平,Western blot法检测膀胱癌细胞缺氧诱导因子1α(HIF-1α)的蛋白表达,利用靶向线粒体抗氧化剂MitoEMPO及siRNA降低HSP60稳定干涉膀胱癌细胞中线粒体ROS及HIF-1α水平,探索HSP60表达降低促进LDHA表达的具体机制。结果膀胱癌组织HSP60蛋白的表达水平较癌旁组织显著降低,且HSP60表达越低的膀胱癌患者其预后越差;敲低HSP60蛋白表达可显著上调膀胱癌细胞LDHA的表达及乳酸的分泌,反之,过表达HSP60可显著抑制膀胱癌细胞LDHA的表达及乳酸的分泌;siRNA LDHA可显著增强HSP60敲低导致NKL细胞的杀伤抑制,同时过表达LDHA可显著抑制HSP60过表达导致NKL杀伤增强。此外,敲低膀胱癌细胞HSP60表达可通过激活ROS/HIF-1α通路促进LDHA的表达。结论敲低膀胱癌细胞HSP60表达通过激活ROS/HIF-1α通路促进LDHA的表达,抑制NK细胞的杀伤作用。

关键词：膀胱癌细胞热休克蛋白60(HSP60) 乳酸脱氢酶A(LDHA) 乳酸自然杀伤(NK)细胞

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