检索结果-内蒙古大学图书馆

血清反应因子全长及N端片段过表达慢病毒载体的构建及其对心脏干细胞分化的影响

临床与实验病理学杂志 2017年第10期33卷 1109-1115页

作者：雷洪王可可哈艳平贾亚楠李汝佳申志华郭峻莉揭伟广东医科大学基础医学院病理学系湛江524023 广东医科大学基础医学院病理生理学教研室湛江524023 海南医学院第一附属医院心血管研究所海口570102

目的探讨血清反应因子全长(SRF-Full)及N端片段(SRF-N,1-254aa)对TGF-β1诱导c-Kit+心脏干细胞(cardiac stem cell,CSC)分化的影响。方法从c DNA文库扩增大鼠SRF-Full及SRF-N表达序列并克隆入酶切线性化慢病毒载体GV358(Ubi-MCS-3FLAG-SV40-EGFP-IRES-puromycin),转化感受态细胞筛选出阳性克隆并测序鉴定。将SRF-Full及SRF-N过表达质粒与病毒包装辅助质粒共转染工具细胞HEK293T,包装慢病毒。磁激活细胞分选法分离乳SD大鼠c-Kit+CSC,将SRF-Full及SRF-N过表达慢病毒感染CSC并经TGF-β1诱导,定量PCR分析下游分化基因mRNA水平的变化。结果成功扩增出SRF-Full及SRF-N编码序列并正确连接入线性化载体,获得的阳性转化子经测序无误。将转化子质粒与病毒包装辅助质粒共转染HEK293T后,获得滴度为2×108TU/m L的慢病毒颗粒,Western blot检测到预期Flag融合蛋白。重组慢病毒感染CSC后细胞核中见e GFP信号。TGF-β1诱导CSC出现心肌细胞分化基因(Nkx2.5、Gata4、c Tn I)及平滑肌细胞分化基因(SM22α)的表达,内皮细胞分化(v WF)无影响,SRF-Full促进CSC的心肌细胞分化,而SRF-N则抑制这种分化。结论成功构建SRFFull及SRF-N过表达重组慢病毒质粒。SRF-Full促进而SRF-N减弱TGF-β1诱导CSC的心肌细胞分化。

关键词：血清反应因子血清反应因子N端片段质粒构建心脏干细胞细胞分化

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

过表达长链非编码RNA H19促进miR-124-3p表达抑制肝癌细胞增殖

引用

第三军医大学学报 2016年第6期38卷 554-559页

作者：吕细林黄刚肖曼刘孟刚陈玥琦张楠张艳何凤田第三军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室重庆400038 海南医学院理学院生物化学与分子生物学教研室海口570102 第三军医大学大坪医院野战外科研究所肝胆外科重庆400042 第三军医大学学员旅15营重庆400038

目的探讨长链非编码RNA H19(long non-coding RNA H19,lncRNA H19)对miR-124-3p表达的影响及在肝癌细胞增殖中的作用。方法 Real-time PCR检测肝癌细胞系及临床标本中lncRNA H19和miR-124-3p的表达;在肝癌细胞系Hep G2和SMMC7721中过表达lncRNA H19,Real-time PCR检测miR-124-3p及其靶基因cyclin D1的表达;Western blot检测cyclin D1蛋白表达水平;CCK-8法检测lncRNA H19对细胞增殖的影响;过表达lncRNA H19同时加入antagomiR-124-3p后,检测miR-124-3p及其靶基因表达情况及细胞增殖情况。结果 lncRNA H19和miR-124-3p在肝癌细胞系及肝癌组织中均低表达(P<0.05);过表达lncRNA H19后miR-124-3p表达显著增加(P<0.05),miR-124-3p的靶基因cyclin D1蛋白和mRNA表达明显下降(P<0.05),细胞增殖受到抑制(P<0.05);过表达lncRNA H19同时干扰miR-124-3p后,细胞增殖抑制作用减弱(P<0.05)。结论长链非编码RNA H19通过促进miR-124-3p表达,进而抑制其靶基因cyclin D1表达而抑制肝癌细胞增殖。

关键词： lncRNA H19 miR-124-3p cyclin D1 肝癌细胞增殖

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

小鼠FAM3C基因重组腺病毒载体的构建及其在肾系膜细胞中的表达

引用

生物技术世界 2015年第7期12卷 17-19页

作者：樊守艳王杨张晓燕韦祎王继浩海南医学院生理学教研室海南海口571199 北京大学医学部生理及病理生理学系北京100191 海南医学院中医学院海南海口571199

目的:利用Ad Easy TMsystem构建携带小鼠FAM3C基因的重组腺病毒,转染至人胚肾细胞系HEK293细胞,检测外源FAM3C在细胞中的表达。方法:取小鼠肾脏提取RNA,创建c DNA文库,用PCR的方法扩增FAM3C基因,将其克隆到p EASY-1载体中,T3连接酶连接... 详细信息

目的:利用Ad Easy TMsystem构建携带小鼠FAM3C基因的重组腺病毒,转染至人胚肾细胞系HEK293细胞,检测外源FAM3C在细胞中的表达。方法:取小鼠肾脏提取RNA,创建c DNA文库,用PCR的方法扩增FAM3C基因,将其克隆到p EASY-1载体中,T3连接酶连接。经Bgl II单酶切后,接入p Ad Tra Ck-CMV穿梭载体,T4连接酶连接,构建重组腺病毒的穿梭质粒p Ad Tra Ck-CMV-FAM3C。将经Pme I线性化的p Ad Track-CMFAM3C电穿孔共转化入BJ5183重组细菌,获取重组腺病毒质粒Ad-FAM3C,再将经Pac I线性化的Ad-FAM3C重组病毒骨架质粒转染人胚胎肾细胞系HEK293细胞,包装并扩增病毒。用Ad-FAM3C感染小鼠肾系膜细胞,Western blot法检测FAM3C在小鼠肾系膜细胞中的表达。结果:DNA序列分析和琼脂糖凝胶电泳结果表明,已构建表达FAM3C基因的重组腺病毒,该腺病毒在体外能有效感染小鼠肾系膜细胞,且高表达FAM3C蛋白。结论:成功地构建了携带小鼠FAM3C基因的重组腺病毒,为进一步阐明FAM3C的功能及作用机制奠定实验基础。

关键词： FAM3C 腺病毒肾系膜细胞

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

氢氯噻嗪的利尿及抗利尿两面性对运动健康管理的启示

氢氯噻嗪的利尿及抗利尿两面性对运动健康管理的启示

引用

第八届健康产业论坛暨第五次全国健康管理学学术会议

作者：王杨刘嫱樊守艳董战玲王晗乔娜张林云天佑陈志斌海南医学院临床学院康复基础医学教研室海南医学院理学院药理学教研室海南医学院基础医学部医学生理学教研室苏州大学运动医学研究所

目的氢氯噻嗪作为利尿剂兼有利尿和抗利尿作用，而对低纬度地区湿热环境下人体的组织水含量控制及电解质平衡具有重要意义.本研究根据药理学教研室的基础实验数据，观察并分析了动物机体在安静状态时氢氯噻嗪干预与非干预下摄水量与组... 详细信息

目的氢氯噻嗪作为利尿剂兼有利尿和抗利尿作用，而对低纬度地区湿热环境下人体的组织水含量控制及电解质平衡具有重要意义.本研究根据药理学教研室的基础实验数据，观察并分析了动物机体在安静状态时氢氯噻嗪干预与非干预下摄水量与组织水含量变化的作用规律，为一步了解亚热带环境下的人体在运动及健康管理中的氢氯噻嗪使用提供新思路.方法实验动物分为氢氯噻嗪干预大鼠组及无药对照鼠组，动物采用日常生活方式、无特定运动负荷，对其分别采用自由饮水、少量清水灌胃(4h：125ml/kg)、较大量清水灌胃(4h：175ml/kg)及超量清水灌胃(4h：260ml/kg)四种摄水方式.观察不同摄水量大鼠6h尿量、血浆渗透压及脑组织含水量变化.结果自由饮水和少量灌水时，药物干预组大鼠6h尿量高于对照组大鼠(p﹤＜0.01);较大量灌水和超量灌水时药物干预大鼠6h尿量少于对照组大鼠(p＜0.01);超量灌水(4h：260ml/kg)药物干预大鼠血浆渗透压低于对照组大鼠，而脑组织含水量高于对照组大鼠(p＜0.01);药物干预组大鼠肾组织含水量显著上升，而对照组无显著变化.结论氢氯噻嗪利尿作用与抗利尿作用并存，这与摄水量及组织含水量及尿量关系密切.当体液上升不显著时呈现利尿效果，而摄水量显著上升则呈现出抗利尿效果.氢氯噻嗪服用时过量摄水会引起组织含水量上升，导致水中毒.该机理对于了解低纬度湿热环境下以及海上医学活动中人体电解质及含水量管理具有进一步探讨的价值.

关键词：噻嗪类利尿剂摄水量组织水含量

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

非临床医学专业基础医学概论导向性教学的思考

引用

中国校外教育（中旬刊） 2013年第S1期 568-568页

作者：翁启芳梁平海南医学院生理学教研室海南医学院基础医学综合教研室

通过充分了解非临床医学专业基础医学概论课程的教学现状，以教师为主导、学生为主体的导向性教学模式为基础，提高课堂教学效率，逐步完善非临床医学专业基础医学概论课程的教学建设。

关键词：非临床医学专业基础医学概论教学思考

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

金雀异黄素与5-氟尿嘧啶单独或联合抑制人胃癌BGC-823细胞的体外研究

引用

重庆医科大学学报 2012年第12期37卷 1053-1058页

作者：王正文龚军朱明才汤为学崔海宁海南医学院附属医院普外科海口570102 四川省医学科学院.四川省人民医院肝胆胰外科成都610072 重庆医科大学附属第一医院普外科重庆400016 重庆医科大学基础医学院病理生理学教研室重庆400016

目的:研究金雀异黄素(Genistein,Gen)与5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-FU)联合应用对人胃癌细胞BGC-823的生长抑制是否具有协同作用及其可能的作用机制。方法:MTT法检测Gen、5-FU单独及联合对BGC-823细胞生长的抑制作用并用中效原理定量... 详细信息

目的:研究金雀异黄素(Genistein,Gen)与5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-FU)联合应用对人胃癌细胞BGC-823的生长抑制是否具有协同作用及其可能的作用机制。方法:MTT法检测Gen、5-FU单独及联合对BGC-823细胞生长的抑制作用并用中效原理定量分析两药合用的剂量-效应关系。Gen、5-FU单独及联合处理BGC-823细胞72 h后,流式细胞术检测细胞周期分布的变化,并在透射电镜下观察细胞超微结构的改变。结果:Gen、5-FU单用或联合应用对BGC-823细胞的生长均有显著的增殖抑制作用且呈剂量和时间依赖性。两药联合应用时,当药物效应(抑制率)大于50%时,具有协同作用[合用指数(Combination index,CI)≤1];6.06 mg/L Gen作用72 h后,95.74%的BGC-823阻滞在G2/M期;1.23 mg/L 5-FU作用72 h后,G0/G1及S期细胞分别为58.26%和41.59%,0.81 mg/L Gen与1.01 mg/L 5-FU联合应用72 h后,67.99%的BGC-823细胞阻滞在G0/G1期。Gen、5-FU单独或联合均可诱导BGC-823细胞凋亡。结论:Gen和5-FU单独或联合应用,均对BGC-823细胞具有抑制增殖的作用,在一定浓度范围内,Gen与5-FU联合应用对胃癌细胞的增殖具有协同抑制作用,Gen与5-FU可能通过阻滞细胞周期和诱导细胞凋亡而抑制胃癌细胞的生长。该研究为Gen与5-FU可能联合用于胃癌的治疗提供了依据。

关键词：金雀异黄素 5-氟尿嘧啶胃癌抑制作用细胞周期凋亡

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

甲胎蛋白抑制PTEN活性导致肝癌细胞耐受ATRA诱导的凋亡

引用

生物化学与生物物理进展 2011年第3期38卷 227-238页

作者：朱明月符史干李孟森谢协驹李刚海南医学院分子生物学重点实验室海口571159 海南医学院生理学教研室海口571159 海南医学院肿瘤研究所海口570102 海南医学院病理生理学教研室海口571159 北京大学医学部生物化学与分子生物学系北京100191

研究甲胎蛋白(α-fetoprotein,AFP)对肝癌细胞内PTEN/AKT信息通路信号传递的影响.用Western blotting法分析全反式维甲酸(all trans retinoic acid,ATRA)处理人肝癌Bel 7402和HepG2细胞24 h后PTEN表达的变化.免疫共沉淀(Co-IP)技术研究AFP与PTEN相互作用.激光共聚焦显微镜观察AFP与PTEN在细胞共定位.RNA干扰(RNAi)技术抑制AFP表达,再用ATRA处理24 h后检测细胞内PTEN表达的变化,并分析蛋白激酶B(AKT)的磷酸化.用pcDNA3.1质粒和人afp基因连接构建表达AFP的载体(称为pcDNA3.1-afp),然后转染到不表达AFP的人肝癌HLE细胞.结果显示,人肝癌Bel 7402和HepG2细胞均有PTEN的表达,ATRA(160μmol/L)处理24 h后能促进这些细胞的PTEN表达.Co-IP技术研究发现AFP能与PTEN结合.共聚焦显微镜观察显示AFP与PTEN共定位于细胞浆.干扰AFP表达后,PTEN表达明显提高.抑制AFP表达后,ATRA能显著促进Bel 7402细胞内PTEN的表达,并能抑制AKT的磷酸化.转染pcDNA3.1-afp载体后,HLE细胞内有AFP表达,并与PTEN结合,且发现pcDNA3.1-afp载体能增加AKT的磷酸化[p-AKT(Ser473)],对抗ATRA抑制HLE细胞增殖.研究的结论是:肝癌细胞内表达的AFP能与PTEN结合并抑制PTEN对AKT的去磷酸化作用,肝癌细胞内高表达的AFP能激活AKT信息通路.胞浆内的AFP是肝癌细胞耐受ATRA的重要因子.

关键词：甲胎蛋白 PTEN 肝癌细胞 PI3K/AKT信号通路

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

紫外激光辐射区肝组织β连环蛋白及过氧化物酶体增殖物激活受体γ蛋白的表达

引用

中国组织工程研究与临床康复 2011年第33期15卷 6191-6195页

作者：王杨王旭葆董战玲戚燕王晗符史干海南医学院康复基础医学教研室海南省海口市571101 海南医学院生理学教研室海南省海口市571101 北京工业大学激光工程研究院北京市100124 中国电子科技集团公司第十一研究所北京市100015

背景:研究表明经典的wnt信号途径可通过抑制成脂分化关键因子过氧化物酶体增殖物激活受体γ而抑制细胞向脂肪细胞的分化。目的:观察紫外光辐射肝组织致创后自然恢复期不同阶段β连环蛋白及过氧化物酶体增殖物激活受体γ的表达。方法:将... 详细信息

背景:研究表明经典的wnt信号途径可通过抑制成脂分化关键因子过氧化物酶体增殖物激活受体γ而抑制细胞向脂肪细胞的分化。目的:观察紫外光辐射肝组织致创后自然恢复期不同阶段β连环蛋白及过氧化物酶体增殖物激活受体γ的表达。方法:将雄性SD大鼠随机分4组:激光致创组大鼠是以355nm紫外激光辐射肝叶形成损伤区,器械致创对照组则以手术剪肝叶致创,假手术组仅做腹部切开及缝合,正常组大鼠仅实施正常喂养。结果与结论:紫外激光可在肝组织形成边缘整齐的消融区并在周围形成可自然修复的有限致损区域。免疫组织化学图像平面测量表明紫外激光辐射后自然恢复1周大鼠肝组织中β连环蛋白表达低于各对照组(P<0.01),而自然恢复表达β连环蛋白辐射区周围组织表达高于正常(P<0.01)。蛋白印迹结果显示辐射致创组辐射后自然同时过氧化物酶体增殖物激活受体γ蛋白2周恢复高于1周恢复(P<0.01),且恢复期肝组织中可同时表达过氧化物酶体增殖物激活受体γ1及2。结果证实,辐射区旁组织自然恢复各阶段存在不同的β连环蛋白及过氧化物酶体增殖物激活受体γ表达调控,2周自然恢复后辐射区旁组织成脂进程得到加强。

关键词：紫外激光消融 β连环蛋白过氧化物酶体增殖物激活受体γ 大鼠组织工程

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

L-精氨酸对血管钙化大鼠核心结合因子1表达的影响

引用

宁夏医科大学学报 2011年第7期33卷 619-621,628,F0003页

作者：龙儒桃翁启芳徐华王菲杨晓玲张鸣号李慧张娟张慧云马兰曹军李桂忠海南医学院病理生理学教研室海口571101 海南医学院生理学教研室海口571101 宁夏医科大学基础医学院病理生理学系银川750004

目的探讨L-精氨酸(L-arginine,L-Arg)对大鼠血管钙化的作用及其机制。方法利用维生素D3、尼古丁制备大鼠血管钙化模型,并将大鼠随机分为6组:对照组(CON)、钙化组(VDN)、L-NAME组(L-NA)、钙化+L-NAME组(VLN)、钙化+低剂量L-Arg组(VLA)、... 详细信息

目的探讨L-精氨酸(L-arginine,L-Arg)对大鼠血管钙化的作用及其机制。方法利用维生素D3、尼古丁制备大鼠血管钙化模型,并将大鼠随机分为6组:对照组(CON)、钙化组(VDN)、L-NAME组(L-NA)、钙化+L-NAME组(VLN)、钙化+低剂量L-Arg组(VLA)、钙化+高剂量L-Arg组(VHA)。常规饲养6周后采集标本,胸主动脉行Von Kossa染色,用原子吸收分光光度法检测大鼠血管组织钙含量、碱性磷酸酶活性及NO含量,western blot技术检测核心结合因子1(core binding factor-1,cbfα1)的表达。结果 VonKossa染色,VDN组明显见到钙化颗粒,并成片状,使用L-Arg干预后钙化颗粒明显减少;VDN组的血管组织钙含量、碱性磷酸酶活性较CON组均明显增加(P<0.05),VLA与VHA组血管组织钙含量、碱性磷酸酶活性均较VDN组明显降低(P<0.05);VDN组血管组织NO含量较CON组明显减少(P<0.05),VLA与VHA组均较VDN组升高(P<0.05);western blot检测表明,VDN组cbfα1表达水平较CON组明显升高(P<0.05),VLA与VHA组较VDN组明显降低(P<0.05)。结论 L-Arg可能通过降低核心结合因子1的表达起到减轻血管钙化的作用。

关键词：核心结合因子-1 血管钙化左旋精氨酸一氧化氮

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

肝细胞生长因子信号途径激活促进疟原虫子孢子感染

引用

中国热带医学 2010年第4期10卷 393-395页

作者：钟南田黄风迎谭光宏郭峻莉符皎荣海南医学院基础医学部组织与胚胎学教研室海南海口571101 海南医学院海南省热带病重点实验室海南海口571101

目的研究肝细胞生长因子及其信号通路激活与疟原虫肝细胞感染的关系。方法采用ELISA和Western blot来检测肝细胞生长因子。用FITC标记的葡聚糖吸收测定法检测肝细胞损伤,通过免疫荧光法观察肝细胞生长因子的表达与损伤的肝细胞的关系。... 详细信息

目的研究肝细胞生长因子及其信号通路激活与疟原虫肝细胞感染的关系。方法采用ELISA和Western blot来检测肝细胞生长因子。用FITC标记的葡聚糖吸收测定法检测肝细胞损伤,通过免疫荧光法观察肝细胞生长因子的表达与损伤的肝细胞的关系。同时,采用免疫共沉淀的方法检测肝细胞生长因子及其受体信号通路的激活以及磷酸化。结果疟原虫子孢子感染肝细胞后造成了肝细胞损伤,同时诱导了肝细胞生长因子的合成、表达和释放,肝细胞生长因子促使疟原虫子孢子感染肝细胞,肝细胞生长因子及其受体信号通路的激活是疟原虫子孢子感染肝细胞的必要前提。结论肝细胞生长因子及其受体可能是疟疾治疗的潜在靶点。

关键词：肝细胞生长因子疟疾疟原虫子孢子信号通路

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：

通借通还

建议与咨询 留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案： 新增检索档案 确定 取消

请选择收藏分类： 新增自定义分类 确定 取消

通借通还

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：