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海南医学院学报 2023年第19期29卷 1510-1514页

作者：黄晗易红艳马燕琳海南医学院第一附属医院海南省人类生殖与遗传重点实验室生殖医学科海南省地方病(地中海贫血)临床医学研究中心海南海口570102 海南医学院热带转化医学教育部重点实验室海南海口571199 海南医学院第一附属医院海口市人类遗传资源保藏重点实验室海南海口570102

随着人类辅助生殖技术中卵胞浆内单精子注射(intracytoplasmic sperm injection,ICSI)技术在临床中的发展及其应用,人卵母细胞质量的评估被认为对成功怀孕和植入至关重要。迄今已有许多关于卵母细胞形态影响胚胎发育的报道。既往多项研... 详细信息

随着人类辅助生殖技术中卵胞浆内单精子注射(intracytoplasmic sperm injection,ICSI)技术在临床中的发展及其应用,人卵母细胞质量的评估被认为对成功怀孕和植入至关重要。迄今已有许多关于卵母细胞形态影响胚胎发育的报道。既往多项研究中表明卵母细胞内滑面内质网聚集体(smooth endoplasmic reticulum clusters,SERC)的出现可能会影响卵母细胞的受精及胚胎的发育进程。然而,随着近年来含SERC卵母细胞的正常体外受精并获得健康后代的报道逐渐增多,临床上对于是否继续使用含SERC卵母细胞进行辅助生殖治疗仍存在一定争议。基于此,本综述旨在对近年来国内外关于卵母细胞内SERC的研究进展进行综述。

关键词：滑面内质网聚集体卵母细胞妊娠率流产率畸形率

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宫内干细胞治疗多种胎儿遗传性疾病的可能性

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中国组织工程研究 2021年第31期25卷 5034-5039页

作者：揭秋玲孙菲南方医科大学南方医院妇产科广东省广州市510515 海南医学院第一附属医院海南省人类生殖与遗传重点实验室生殖医学科海南省地方病(地中海贫血)临床医学研究中心海南省海口市570102 海南医学院热带转化医学教育部重点实验室海南省海口市570102 海南医学院第一附属医院海口市人类遗传资源保藏重点实验室海南省海口市570102

背景:产前诊断筛查技术的发展使得产前治疗成为可能。对于多种胎儿遗传性疾病,宫内干细胞治疗具有显著的优势。目的:通过目前已有的实验研究和临床资料分析宫内干细胞治疗产前胎儿疾病的可行性。方法:应用计算机检索中国知网、万方医学... 详细信息

背景:产前诊断筛查技术的发展使得产前治疗成为可能。对于多种胎儿遗传性疾病,宫内干细胞治疗具有显著的优势。目的:通过目前已有的实验研究和临床资料分析宫内干细胞治疗产前胎儿疾病的可行性。方法:应用计算机检索中国知网、万方医学网、PubMed数据库中的相关文献,检索时间从建库至2020-06-16,检索中文关键词为“宫内干细胞治疗,胎儿”,英文关键词为“in utero stem cell therapy,fetal”。结果与结论:随着产前诊断筛查技术和干细胞治疗技术的发展,宫内干细胞在多种胎儿遗传性疾病治疗中具有显著的优势。胎儿自身发育的生理特点也为宫内干细胞移植提供了条件。临床前动物实验研究从嵌合体植入水平和免疫耐受等方面为宫内干细胞移植治疗的临床应用奠定了基础。近年来,产前诊断筛查技术的发展,伴随高通量分子检测、微创手术等方法,可在妊娠早期检测出多种胎儿疾病,也使得产前宫内治疗成为可能。

关键词：宫内干细胞免疫遗传性疾病严重联合免疫缺陷症造血干细胞间充质干细胞羊水干细胞治疗综述

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比较人不同细胞来源诱导多能干细胞与胚胎干细胞拟胚体的分化培养过程

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中国组织工程研究 2021年第25期25卷 4019-4024页

作者：韦云剑张风波龙平江欣星马燕琳孙菲李崎海南医学院第一附属医院海南省人类生殖与遗传重点实验室生殖医学科海南省地方病(地中海贫血)临床医学研究中心海南省海口市570102 海南医学院热带转化医学教育部重点实验室海南省海口市570102 海南医学院第一附属医院海口市人类遗传资源保藏重点实验室海南省海口市570102 安徽省妇幼保健院产科安徽省合肥市230000 南方医科大学南方医院妇产科广东省广州市510515

背景:通过小分子化合物、质粒转染等方法可成功诱导出无病毒载体整合的诱导多能干细胞。与胚胎干细胞相似,诱导多能干细胞可向造血祖细胞进行自由分化,但外源性因子的转入及不同来源人体细胞是否对诱导多能干细胞的分化及诱导造血祖细... 详细信息

背景:通过小分子化合物、质粒转染等方法可成功诱导出无病毒载体整合的诱导多能干细胞。与胚胎干细胞相似,诱导多能干细胞可向造血祖细胞进行自由分化,但外源性因子的转入及不同来源人体细胞是否对诱导多能干细胞的分化及诱导造血祖细胞产生影响,目前尚未清楚。目的:比较人不同细胞来源诱导多能干细胞和胚胎干细胞拟胚体的基因表达差异,为诱导多能干细胞的临床转化进行探索。方法:分别选用羊水细胞及尿细胞来源诱导多能干细胞和人胚胎干细胞进行诱导分化。收集分化不同时间点的拟胚体,检测多能性基因Oct4、Sox2、Nanog以及内胚层标记基因GATA4、中胚层标记基因MSX1、外胚层标记基因PAX6、造血干细胞标记基因CD34和CD43的表达。结果与结论:①羊水细胞来源诱导多能干细胞拟胚体在培养第8天检测不到Oct4、Sox2、Nanog表达,尿细胞来源诱导多能干细胞和胚胎干细胞拟胚体可维持表达至第16天;②羊水细胞来源诱导多能干细胞拟胚体中GATA4、MSX1、PAX6表达量峰值出现在第4天,持续表达到第8-12天,而其他2种细胞拟胚体中GATA4、MSX1、PAX6表达量峰值出现在第4-8天,并且可持续表达至第12-16天;三胚层标记基因在尿细胞来源诱导多能干细胞拟胚体中的表达量明显高于其他2种细胞拟胚体;③在羊水细胞、尿细胞来源诱导多能干细胞拟胚体中造血干细胞比率在第12天达峰值,而胚胎干细胞拟胚体中造血干细胞比率在第4天达峰值,尿细胞来源诱导多能干细胞拟胚体中造血干细胞比率高于其他2种细胞拟胚体;④人不同细胞来源诱导多能干细胞及胚胎干细胞拟胚体分化培养过程中均具有全能性及三胚层分化能力但各具特点。尿细胞来源诱导多能干细胞或许更适合替代胚胎干细胞成为体外研究造血细胞分化的模型。

关键词：干细胞诱导多能干细胞胚胎干细胞拟胚体多能性造血分化造血干细胞羊水细胞尿细胞

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β-地中海贫血治疗的研究进展

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实用医学杂志 2021年第6期37卷 816-820页

作者：杨花梅孙菲马燕琳李崎海南医学院第一附属医院海南省人类生殖与遗传重点实验室海口570100 海南医学院第一附属医院生殖医学科海口570100 海南省地方病(地中海贫血)临床医学研究中心海口570100 海南医学院热带转化医学教育部重点实验室海口570100 海口市人类遗传资源保藏重点实验室海口570100

β-地中海贫血是由于β-珠蛋白基因异常而导致的单基因遗传病,是地中海贫血中最常见的类型。尽管目前治疗地中海贫血的方法有很多,比如输血、铁螯合、脾切除、异体造血干细胞移植(HSCT)等,但在治愈地中海贫血的道路上仍面临巨大的挑战... 详细信息

β-地中海贫血是由于β-珠蛋白基因异常而导致的单基因遗传病,是地中海贫血中最常见的类型。尽管目前治疗地中海贫血的方法有很多,比如输血、铁螯合、脾切除、异体造血干细胞移植(HSCT)等,但在治愈地中海贫血的道路上仍面临巨大的挑战。本文主要根据β-地中海贫血的发病机制系统阐述其目前的临床治疗策略,并着重叙述基因治疗技术如何治愈β-地中海贫血的研究进展。

关键词： β-地中海贫血 β-珠蛋白 γ-珠蛋白慢病毒载体基因治疗

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IVF-ET中注射HCG后不同授精时间对受精结局的影响

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海南医学院学报 2021年第3期27卷 186-191页

作者：汪佳星王良盛龙平毛记龙黄元华海南医学院第一附属医院海南省人类生殖与遗传重点实验室海南医学院第一附属医院生殖医学科海南医学院第一附属医院海南省地方病(地中海贫血)临床医学研究中心海南医学院第一附属医院海口市人类遗传资源保藏重点实验室海南海口570102 海南医学院第一附属医院脊柱骨病科海南海口570102

目的:研究在IVF-ET中HCG注射后的授精时间对胚胎发育和临床结局的影响,分析最佳授精时间,为优化IVF-ET实验室操作规程和改善临床妊娠结局提供基础和实验依据。方法:选取2016年1月~2018年8月期间,女方年龄≤38岁、因输卵管因素不孕在本... 详细信息

目的:研究在IVF-ET中HCG注射后的授精时间对胚胎发育和临床结局的影响,分析最佳授精时间,为优化IVF-ET实验室操作规程和改善临床妊娠结局提供基础和实验依据。方法:选取2016年1月~2018年8月期间,女方年龄≤38岁、因输卵管因素不孕在本中心行IVF-ET助孕的1140例周期进行回顾性分析。根据HCG注射后不同的授精时间分组:注射HCG后38~39 h授精为A组、注射HCG后39~40 h授精为B组、注射HCG后40~41 h授精为C组、注射HCG后41~42 h授精为D组,对各组一般情况、实验室指标(2PN卵裂率、正常受精率、优质胚胎率、可利用胚胎率)和临床指标(胚胎着床率、早期流产率、临床妊娠率)进行比较分析;同时分析在最佳授精时间内进行IVF-ET助孕患者的促排方案对其受精结局的影响。结果:分析各组2PN卵裂率、胚胎着床率、可利用胚胎率、早期流产率和临床妊娠率,差异均无统计学意义(P>0.05);正常受精率:A组(65.9%)超长方案(72.3%)>长方案(69.6%),其差异有统计学意义(P<0.05)。结论:(1)本中心行IVF-ET助孕患者的最佳授精时间为HCG注射后41~42 h,此时患者受精有较高的临床妊娠率和较低的流产率,可获得更好的临床结局;且正常受精率和优质胚胎率随注射HCG后授精时间延长而呈现上升的趋势;(2)本中心IVF-ET助孕患者在HCG注射后41~42 h范围内,其拮抗剂方案优于长方案和超长方案。

关键词：体外受精-胚胎移植(IVF-ET) 授精时间人绒毛膜促性腺激素(HCG)

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microRNA、滋养细胞与PE关系的研究

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海南医学院学报 2021年第2期27卷 150-154页

作者：俎维华刘晶马燕琳李崎王珍黄元华海南省人类生殖与遗传重点实验室海南医学院第一附属医院生殖医学科海南省地方病(地中海贫血)临床医学研究中心海南医学院热带转化医学教育部重点实验室海南海口571199

子痫前期(PE)是妊娠期发生的疾病,发病机制尚不明确,胎盘及胎儿的娩出可以有效缓解症状。滋养层细胞是胎盘的主要细胞成分,胎盘的正常发育依赖滋养细胞的正常分化、增殖、迁移和侵袭。microRNA是一类小的非编码RNA,在PE患者中呈现差异... 详细信息

子痫前期(PE)是妊娠期发生的疾病,发病机制尚不明确,胎盘及胎儿的娩出可以有效缓解症状。滋养层细胞是胎盘的主要细胞成分,胎盘的正常发育依赖滋养细胞的正常分化、增殖、迁移和侵袭。microRNA是一类小的非编码RNA,在PE患者中呈现差异性表达,其通过调控滋养细胞的功能参与PE的发生。miRNA有望成为子痫前期的早期预测标记物,并为PE发病机制的研究和治疗提供新的思路。

关键词： miRNA 子痫前期滋养细胞胎盘靶基因

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辅助生殖技术不同受精方式对子代出生缺陷的临床研究

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海南医学院学报 2021年第22期27卷 1704-1708页

作者：谢宝国马燕琳黄元华海南医学院热带转化医学教育部重点实验室海南省地中海贫血临床医学研究中心海南省人类生殖与遗传重点实验室海南医学院第一附属医院生殖医学科海南海口570102

目的:探讨辅助生殖技术采用不同受精方式[体外受精(in vitro fertilization,IVF)和卵胞浆内单精子注射(intracytoplasmic sperm injection,ICSI)]的新生儿出生缺陷的发生情况。方法:回顾性分析2015年1月~2020年1月年龄小于35岁的不孕症... 详细信息

目的:探讨辅助生殖技术采用不同受精方式[体外受精(in vitro fertilization,IVF)和卵胞浆内单精子注射(intracytoplasmic sperm injection,ICSI)]的新生儿出生缺陷的发生情况。方法:回顾性分析2015年1月~2020年1月年龄小于35岁的不孕症患者,在我中心接受IVF/ICSI-ET助孕后,单胎分娩新生儿4229例的临床资料。依据不同受精方式,分为IVF组2967例和ICSI组1262例。比较分析两组的新生儿出生的一般情况、出生缺陷和出生缺陷发生的部位。结果:两组新生儿的出生体重、孕周和性别比,差异无统计学意义(P>0.05)。38例(0.90%)新生儿出现出生缺陷,其中IVF组的新生儿出生缺陷30例(1.01%),ICSI组的新生儿出生缺陷8例(0.63%);两组新生儿出生缺陷的发生率,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:辅助生殖技术中,不同受精方式(IVF和ICSI)对单胎活产儿的出生缺陷发生率并无明显影响。

关键词：辅助生殖技术出生缺陷体外受精卵泡浆内单精子注射

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拮抗剂促排卵方案反向黄体生成素添加对高龄卵巢储备减退患者初次体外受精-胚胎移植妊娠结局的影响

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中国计划生育和妇产科 2021年第10期13卷 79-81,86页

作者：谢宝国马燕琳黄元华海南医学院热带转化医学教育部重点实验室海南海口570102 海南省地中海贫血临床医学研究中心海南海口570102 海南省人类生殖与遗传重点实验室海南海口570102 海南医学院第一附属医院生殖医学科海南海口570102

目的探讨拮抗剂促排卵方案中添加黄体生成素(luteinizing hormone,LH)对高龄卵巢储备功能减退(diminished ovarian reserve,DOR)患者初次体外受精-胚胎移植(in vitro fertilization embryo transfer,IVF-ET)临床结局的影响。方法选择2019年6月至2020年12月在海南医学院第一附属医院生殖医学中心就诊首次行IVF-ET助孕并符合DOR诊断标准的150例患者。依据是否添加LH将患者分为两组:单用卵泡刺激素(follicle stimulating hormone,FSH)为对照组(86例);促性腺激素释放激素拮抗剂日开始添加LH至绒毛膜促性腺激素日为研究组(64例),收集两组患者的获卵数、2PN受精率、优质胚胎率、着床率、临床妊娠率等并进行分析。结果两组患者的年龄、不孕年限、基础性激素水平、窦卵泡计数、体质量指数和抗苗勒管激素比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。两组患者促性腺激素(gonadotropin,Gn)总量,Gn使用时间、扳机日P水平、扳机日子宫内膜厚度和获卵数比较,差异无统计学意义(P>0.05)。研究组患者的2PN受精率、可利用胚胎数和优质胚胎率显著高于对照组(P<0.05),着床率和临床妊娠率优于对照组,差异无统计学意义(P>0.05)。结论对于高龄DOR患者拮抗剂方案促排过程中反向添加LH可能有助于改善卵子质量,改善临床结局。

关键词：卵巢储备功能减退拮抗剂方案黄体生成素体外受精-胚胎移植临床妊娠率

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双酚A对人早孕绒毛滋养细胞IGF-I及ADAM12表达的影响

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中国临床研究 2019年第7期32卷 893-897页

作者：张毅陈松陈宏健卢惠周繇马燕琳海南医学院第一附属医院生殖医学中心海南省人类生殖与遗传重点实验室

目的探讨对人早孕绒毛滋养细胞采用不同浓度双酚A(BPA)干扰,对其胰岛素样生长因子I(IGF-I)及解整合素-金属蛋白酶12(ADAM12)表达的影响。方法取海南医学院妇产科门诊人流室一名自然妊娠早孕50 d孕妇的新鲜绒毛组织制备绒毛滋养细胞(孕... 详细信息

目的探讨对人早孕绒毛滋养细胞采用不同浓度双酚A(BPA)干扰,对其胰岛素样生长因子I(IGF-I)及解整合素-金属蛋白酶12(ADAM12)表达的影响。方法取海南医学院妇产科门诊人流室一名自然妊娠早孕50 d孕妇的新鲜绒毛组织制备绒毛滋养细胞(孕妇知情同意,并经医院伦理委员会批准),配制4组含不同浓度BPA的培养液(A组:1×10^-4g/L,B组:1×10^-5g/L,C组:1×10^-6g/L,D组:1×10^-7g/L),并设培养基(E组:BPA 0 g/L)为对照组,进行滋养细胞培养,72 h后收取滋养细胞行实时荧光定量聚合酶链式反应(real-time PCR)实验,检测不同浓度BPA条件下IGF-I、ADAM12 mRNA表达量的变化。结果各实验组中ADAM12、IGF-I mRNA的表达受BPA的影响,均有不同程度升高。当BPA浓度为1×10^-5g/L(B组)时,IGF-I mRNA的表达明显升高,是C组的3.18倍(P<0.01),是对照组E组的5.48倍(P<0.01);ADAM12 mRNA的表达量明显上升,是C组的4.19倍(P<0.01),是对照组E组的6.27倍(P<0.01)。结论 BPA对绒毛滋养细胞的IGF-I和ADAM12的mRNA表达有刺激升高的作用。

关键词：双酚A 雌激素绒毛滋养细胞胰岛素样生长因子I 解整合素-金属蛋白酶12 实时荧光定量酶链式聚合反应

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海南地区地中海贫血筛检者的基因结果分析

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实用医学杂志 2020年第8期36卷 1092-1095页

作者：揭秋玲李崎孙文页周繇陈宏健黄慧敏卢伟英马燕琳海南医学院第一附属医院海南省人类生殖与遗传重点实验室(海南医学院第一附属医院生殖医学科/海南省地方病(地中海贫血)临床医学研究中心/海口市人类遗传资源保藏重点实验室) 海口570102 海南医学院热带转化医学教育部重点实验室海口571199 南方医科大学南方医院妇产科广州510515

目的了解海南地区人群中α、β-地贫基因型的分布情况。方法对20450名受检者采用gap-PCR法、PCR-RBD法进行α、β-地贫基因型诊断,进行统计分析。结果20450例受检者中共检出4031例(21.03%)地贫基因携带者。α-地贫3627例(17.74%),共20... 详细信息

目的了解海南地区人群中α、β-地贫基因型的分布情况。方法对20450名受检者采用gap-PCR法、PCR-RBD法进行α、β-地贫基因型诊断,进行统计分析。结果20450例受检者中共检出4031例(21.03%)地贫基因携带者。α-地贫3627例(17.74%),共20种基因组合类型,以-α3.7/αα最为常见,其中静止型2419例(66.69%),轻型1144例(31.54%),中间型64例(1.77%)。β-地贫465例(2.27%),共15种基因组合类型,以41-42M/βN最为常见,其中轻型427例(91.83%),中间型34例(7.31%),重型4例(0.86%)。αβ-复合地贫209例(1.02%),共39种αβ-复合地贫基因组合类型,以-α4.2/αα复合41-42M/βN最为常见,其中重型地贫5例(2.40%)。结论海南地贫发生率较高,遗传背景复杂,对海南地区人群进行地贫基因诊断,为地贫的防治提供基础,提高人口素质。

关键词：地中海贫血基因型携带率海南

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