检索结果-内蒙古大学图书馆

分子植物育种 2025年第2期23卷 437-450页

作者：魏炳峥占昭宏谢清标李春霞陶均海南大学热带作物学院海南省热带生物资源可持续利用重点实验室海口570228

为了解拟南芥中AMAR1及其旁系同源蛋白的蛋白特征,并分析它们在生长和逆境中的表达情况,本研究通过生物信息学和qPCR等方法分析了AMAR1家族蛋白特征及其表达特征。首先通过生物信息学分析在拟南芥中共鉴定了AMAR1的17个旁系同源蛋白(Par... 详细信息

为了解拟南芥中AMAR1及其旁系同源蛋白的蛋白特征,并分析它们在生长和逆境中的表达情况,本研究通过生物信息学和qPCR等方法分析了AMAR1家族蛋白特征及其表达特征。首先通过生物信息学分析在拟南芥中共鉴定了AMAR1的17个旁系同源蛋白(Paralogs),并将其命名为AMAR1家族蛋白。AMAR1家族蛋白分为Ⅰ类和Ⅱ类,其中Ⅰ类包含4个成员,Ⅱ类进一步分为Ⅱa和Ⅱb小类,分别包含5和9个成员。大多数AMAR1家族蛋白定位在叶绿体中,其中5个(AT1G15490,AT3G55880,AT1G52750,AT2-G40095和AMAR1)具有典型的跨膜结构域。大多数基因启动子区中含有脱落酸和光响应元件。结合转录组数据和qPCR分析发现,多个AMAR1基因家族成员参与非生物与生物胁迫响应应答。其中AT5G19850、AT2G26750、AT2G26740、AT4G37150、AT5G38520和AT4G24160在多种非生物胁迫处理时表达上升,而AMAR1、AT3G10840、AT4G12830、AT5G38520、AT3G05600和AT1G15490等6个基因在多种非生物胁迫时表达下降。病原细菌接种后AT2G40095、AT3G55880、AT4G24160、AT2G26740、AT1G74640、AT2G26750、AT4G37150和AMAR1的表达量显著上升,参与植物的防御响应。以上结果表明AMAR1家族蛋白参与多种胁迫应答响应,在拟南芥应对逆境和抵抗病原菌入侵过程中起重要作用。本研究为进一步探索α/β水解酶家族在植物生长发育、胁迫应答中的作用提供理论基础。

关键词：拟南芥 AMAR1基因家族生物与非生物胁迫响应表达生长发育

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植物内生曲霉HU0206的甲基环己酮代谢成分具有抗水稻黄单胞菌活性

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热带生物学报 2025年第2期16卷 254-259页

作者：任琴琴陈少微郑佳华王瑞徐良雄陶均海南大学热带农林学院/海南省热带生物资源可持续利用重点实验室海南海口570228 惠州学院生命科学学院广东惠州516007

已有研究表明植物内生曲霉Aspergillus ***0206的玉米发酵物具有良好的细菌拮抗活性,为进一步阐明其抗细菌活性物质基础,采用硅胶柱和凝胶柱层析及高效液相制备等色谱技术从该发酵物中分离到6个化合物,通过核磁共振波谱和质谱等方法分... 详细信息

已有研究表明植物内生曲霉Aspergillus ***0206的玉米发酵物具有良好的细菌拮抗活性,为进一步阐明其抗细菌活性物质基础,采用硅胶柱和凝胶柱层析及高效液相制备等色谱技术从该发酵物中分离到6个化合物,通过核磁共振波谱和质谱等方法分别鉴定为4个甲基环己酮化合物:ampelomin A(1)、7-hydroxyampelomin A(2)、7-O-ethylampelomin A(3)、2,3-dihydroxyl-7-O-ethylampelomin A(4)和2个甲基苯酚类化合物:2-(methoxymethyl)-1,4-benzenediol(5)和3-chlorogentisyl alcohol(6),其中化合物2~4为新化合物。载样量为50μg时,化合物1、2、6对水稻黄单胞菌具有较明显的拮抗活性,抑菌圈半径为4.0 mm,化合物6同时对金黄色葡萄球菌、耐甲氧西林葡萄球菌、黑胫病菌、青枯病菌也有较明显的抑制活性,而化合物3~5对水稻黄单胞菌,以及化合物1~5对上述其他4株测试菌均无抑制活性。本文还初步讨论了该真菌代谢产物的生物合成途径。

关键词：内生真菌代谢产物甲基环己酮抗细菌活性水稻黄单胞菌

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水稻S-腺苷甲硫氨酸合成酶基因响应病原菌及外源激素的表达分析

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江苏农业科学 2025年第4期53卷 64-72页

作者：刘茹燕魏炳峥占昭宏吴可建李春霞陶均海南大学热带农林学院/海南省热带生物资源可持续利用重点实验室海南海口570228

为了解S-腺苷甲硫氨酸合成酶(SAMS)在水稻逆境响应过程中的作用,首先分析了水稻中SAMS的家族成员SAM2(ZBS2)、SAM1、METK3、ZBS2L和SAM5的同源性及理化性质,其次分析了它们在水稻原生质体中的定位,最后分析了这些基因响应病原菌和植物... 详细信息

为了解S-腺苷甲硫氨酸合成酶(SAMS)在水稻逆境响应过程中的作用,首先分析了水稻中SAMS的家族成员SAM2(ZBS2)、SAM1、METK3、ZBS2L和SAM5的同源性及理化性质,其次分析了它们在水稻原生质体中的定位,最后分析了这些基因响应病原菌和植物激素的表达情况。试验结果表明,SAMS蛋白具有高度同源性,在水稻细胞质、细胞膜和细胞核中均有表达。水稻白叶枯病菌侵染下调ZBS2、SAM5表达,增强METK3、SAM1、ZBS2L表达。外源激素处理也影响SAMS表达:其中乙烯下调所有SAMS表达;赤霉素增强METK3表达,但减弱SAM1、SAM5表达;水杨酸诱导METK3表达,但抑制ZBS2、SAM1、ZBS2L和SAM5表达;脱落酸抑制ZBS2、METK3表达。因此,SAMS家族成员可能调控水稻的抗性反应,但功能和机制存在差异。

关键词： S-腺苷甲硫氨酸合成酶(SAMS)基因家族水稻抗病响应白叶枯病菌外源激素基因表达

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柱花草响应炭疽菌侵染的差异磷酸化蛋白质组学分析

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草地学报 2023年第3期31卷 699-709页

作者：张世子杨丽云高静王芳蒋凌雁海南大学热带作物学院/海南省热带生物资源可持续利用重点实验室海南海口570228

磷酸化是重要的蛋白翻译后修饰,在调节植物免疫方面起重要作用,但目前对柱花草与炭疽菌互作的磷酸化知之甚少。本文以太空诱变柱花草抗病株系‘2001-84’和感病株系‘2001-71’为试验材料,通过非标记定量磷酸化蛋白质组学,分析了两种株... 详细信息

磷酸化是重要的蛋白翻译后修饰,在调节植物免疫方面起重要作用,但目前对柱花草与炭疽菌互作的磷酸化知之甚少。本文以太空诱变柱花草抗病株系‘2001-84’和感病株系‘2001-71’为试验材料,通过非标记定量磷酸化蛋白质组学,分析了两种株系接种炭疽菌前后的差异磷酸化蛋白。结果表明:在‘2001-84’和‘2001-71’中分别有138个和106个蛋白的磷酸化丰度特异性响应炭疽菌侵染。蛋白功能与代谢通路富集分析发现两者具有明显的差异:‘2001-84’特异性磷酸化蛋白主要定位在质膜附近,参与胞内信号传导,并显著富集在MAPK级联信号通路、植物激素信号传导、病原菌互作途径等代谢通路;‘2001-71’则更多的定位于细胞器膜上,参与细胞器的分解,代谢通路只在剪接体途径显著富集。通过对‘2001-84’特异性磷酸化蛋白进一步分析,发掘了跟抗病相关的蛋白。本文研究可为后续解析柱花草抗炭疽病的分子机制和培育柱花草抗病品种提供参考。

关键词：柱花草胶胞炭疽菌磷酸化蛋白质组学抗病蛋白

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柱花草叶肉原生质体提取与瞬时表达体系构建

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草地学报 2023年第3期31卷 893-902页

作者：高静杨丽云张世子蒋凌雁海南大学热带作物学院/海南省热带生物资源可持续利用重点实验室海南海口570228

柱花草(Stylosanthes guianensis)是一种重要的热区豆科牧草,为利用原生质体瞬时表达体系开展柱花草基因功能研究,以20 d龄期‘热研5号’柱花草子叶为试验材料,通过正交试验考察不同因素对原生质体分离及转化效率的影响。结果表明:采用1... 详细信息

柱花草(Stylosanthes guianensis)是一种重要的热区豆科牧草,为利用原生质体瞬时表达体系开展柱花草基因功能研究,以20 d龄期‘热研5号’柱花草子叶为试验材料,通过正交试验考察不同因素对原生质体分离及转化效率的影响。结果表明:采用1.5%纤维素酶、1.25%离析酶、0.5 mol·L^(-1)甘露醇和4 mmol·L^(-1)MES酶解液组合,酶解时间为16 h时,原生质体的产量和活性均达到最佳,分别为(4.567×10^(6))个·g^(-1)和92.271%;原生质体浓度为(6×10^(5))个·mL^(-1)、质粒浓度为0.6μg·μL^(-1),PEG-4000浓度为50%、转化时间为5 min时,转化效率最高,可达52.524%。构建了目标蛋白SgRKL1表达载体pA7-BIUTNT::SgRKL1-GFP,利用PEG介导法将其转入柱花草原生质体,激光扫描共聚焦显微镜检测结果显示SgRKL1蛋白定位于细胞膜上,说明所建立的柱花草叶肉原生质体瞬时表达体系可应用于目标基因的瞬时表达和亚细胞定位研究。

关键词：柱花草叶肉原生质体酶解 PEG介导瞬时表达

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淹水胁迫对樱桃番茄苗期形态特征及叶绿素荧光特性的影响

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灌溉排水学报 2019年第11期38卷 8-15页

作者：童梦莹黄家权李长江海南大学热带作物学院海南省热带生物资源可持续利用重点实验室

【目的】探讨樱桃番茄苗期对淹水胁迫的响应机制,为热带地区反季节露地樱桃番茄的抗涝渍栽培提供参考。【方法】试验以5个不同的樱桃番茄品种作为材料,采用盆栽方式,以正常水分管理作为对照(CK),测定不同淹水天数后樱桃番茄苗期地上部... 详细信息

【目的】探讨樱桃番茄苗期对淹水胁迫的响应机制,为热带地区反季节露地樱桃番茄的抗涝渍栽培提供参考。【方法】试验以5个不同的樱桃番茄品种作为材料,采用盆栽方式,以正常水分管理作为对照(CK),测定不同淹水天数后樱桃番茄苗期地上部和地下部的形态特征指标,以及叶片叶绿素荧光参数等指标,分析淹水胁迫对樱桃番茄苗期形态特征及叶绿素荧光参数的影响。【结果】淹水胁迫显著降低了樱桃番茄的株高、茎粗、叶面积、叶片数和叶片SPAD值,但对叶片厚度没有显著影响。淹水处理对樱桃番茄根系直径没有显著影响,但显著增加了红妃6号和台湾赞美的根系体积;淹水处理显著增加了红妃6号的根长与根系表面积,但显著降低了千禧的根长和根表面积。淹水后,樱桃番茄叶片初始荧光(Fo)和非光化学淬灭系数(NPQ)增加;最大光化学效率(Fv/Fm)、表观电子传递速率(ETR)和光化学淬灭系数(qP)淹水处理后则显著降低,但红妃6号淹水处理后Fo、Fv/Fm、ETR和qP与CK相比没有显著差异。【结论】淹水胁迫严重影响了樱桃番茄的生长发育以及叶片叶绿素荧光,但不同品种间存在差异;红妃6号对淹水最不敏感,而千禧受淹水影响最大。

关键词：樱桃番茄淹水胁迫形态特征荧光参数

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基于CRISPR-Cas9技术构建橡胶树胶孢炭疽菌的基因敲除系统

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微生物学通报 2020年第1期47卷 109-117页

作者：郭燕华安邦海南大学热带作物学院海南省热带生物资源可持续利用重点实验室

[背景]CRISPR-Cas9基因组编辑技术为病原真菌的基因敲除、敲入及定点编辑提供了新的思路。[目的]建立适用于橡胶树胶孢炭疽菌的CRISPR-Cas9基因敲除系统。[方法]通过大肠杆菌原核表达系统合成含有细胞核定位信号的Cas9蛋白;以URA5为靶... 详细信息

[背景]CRISPR-Cas9基因组编辑技术为病原真菌的基因敲除、敲入及定点编辑提供了新的思路。[目的]建立适用于橡胶树胶孢炭疽菌的CRISPR-Cas9基因敲除系统。[方法]通过大肠杆菌原核表达系统合成含有细胞核定位信号的Cas9蛋白;以URA5为靶标基因,预测该基因中Cas9的切割位点,并在体外转录合成相应的SgRNA;体外构建Cas9-SgRNA复合体,并将该复合体转入橡胶树胶孢炭疽菌原生质体;通过表型筛选及测序鉴定,筛选URA5的敲除突变体菌株。[结果]体外表达的Cas9蛋白与SgRNA能够形成复合体,并在体外对目标基因URA5的DNA序列进行切割;Cas9-SgRNA复合体能够成功转入橡胶树胶孢炭疽菌原生质体,并完成对URA5的敲除;敲除突变株表现出尿嘧啶缺陷表现型。[结论]建立了适用于橡胶树胶孢炭疽菌的基因敲除系统。

关键词： CRISPR-Cas9 橡胶树胶孢炭疽菌基因敲除

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胶孢炭疽菌细胞骨架荧光标记菌株的构建

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生物技术通报 2021年第8期37卷 284-293页

作者：刘娜刘世科王倩男海南大学热带作物学院海南省热带生物资源可持续利用重点实验室海口570228

胶孢炭疽菌寄主广泛,能够引起众多植物产生炭疽病害。细胞骨架的结构及重排、极性分布都对菌丝生长、形态发生及致病性有着非常重要的作用,但是目前关于其菌丝生长及致病过程中细胞内骨架分布及动态变化情况还知之甚少。为了构建胶孢炭... 详细信息

胶孢炭疽菌寄主广泛,能够引起众多植物产生炭疽病害。细胞骨架的结构及重排、极性分布都对菌丝生长、形态发生及致病性有着非常重要的作用,但是目前关于其菌丝生长及致病过程中细胞内骨架分布及动态变化情况还知之甚少。为了构建胶孢炭疽菌微丝及微管骨架的荧光标记菌株,采用随机重组及同源重组原理,成功构建了Lifeact-EGFP、MBD-EGFP及CgTUB1-EGFP标记重组菌株。激光共聚焦显微镜观察表明Lifeact-EGFP能够清晰地标记胶孢炭疽菌微丝骨架、CgTUB1-EGFP能够清晰地标记微管骨架;而MBD-EGFP标记的菌株细胞中荧光强度较低。进一步对标记菌株的生长发育及致病力等生理表型进行分析,结果表明Lifeact-EGFP及CgTUB1-EGFP的标记并不影响胶孢炭疽菌正常的生理功能,这两种标记菌株能够用于后续实验,为进一步研究其细胞骨架动态变化及骨架结合蛋白的功能打下基础。

关键词：胶孢炭疽菌细胞骨架荧光标记

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蔗糖水解酶注释基因XC0805与野油菜黄单胞菌8004菌株的蔗糖利用及致病相关

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植物病理学报 2020年第6期50卷 758-765页

作者：郭艺李红叶李婷李春霞陈银华陶均海南大学热带作物学院/海南省热带生物资源可持续利用重点实验室海口570228

野油菜黄单胞菌(Xanthomonas campestris ***,Xcc)是造成十字花科植物减产的重要病原菌,其通过水孔或伤口进入植物体内并在维管束中快速繁殖。光合产物(蔗糖)的运输主要依靠植物维管组织,同时蔗糖也是维管组织重要的能量来源。本研究利... 详细信息

野油菜黄单胞菌(Xanthomonas campestris ***,Xcc)是造成十字花科植物减产的重要病原菌,其通过水孔或伤口进入植物体内并在维管束中快速繁殖。光合产物(蔗糖)的运输主要依靠植物维管组织,同时蔗糖也是维管组织重要的能量来源。本研究利用生物信息学和遗传学等方法对Xcc中参与蔗糖利用的基因进行了分析,并研究了这些基因与其致病力的关系。Xcc 8004菌株中注释的参与蔗糖分解蛋白的编码基因有XC1002、XC1642、XC1645和XC0805。XC1002和XC1642的编码产物属于糖苷水解酶GH97蛋白超家族,而XC1645和XC0805的编码产物则属于GH13家族。突变分析发现除XC0805外,其他3个都不影响Xcc的蔗糖利用能力。接种实验表明,XC0805参与Xcc的侵染或在植物体内的生长,其他3个不参与致病过程。另外,Xcc 8004中预测参与蔗糖转运的基因(XC0806和XC0807)突变并不影响细菌的蔗糖利用和致病力,表明其可能存在其他的蔗糖转运通路。上述结果说明XC0805可能是Xcc 8004主要的蔗糖水解酶基因,且在致病中起重要作用。

关键词：野油菜黄单胞菌蔗糖水解酶 XC0805 蔗糖利用致病力

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供磷水平对玉米丛枝菌根侵染及其对异质养分吸收的影响

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植物营养与肥料学报 2018年第1期24卷 163-169页

作者：金鑫曾新颖齐昌国尹黎燕邓燕海南省热带生物资源可持续利用重点实验室/海南大学热带农林学院海南海口570228

【目的】探究酸性土壤玉米丛枝菌根侵染对植物磷素吸收的促进作用,以加深理解根外菌丝对局部磷养分的获取如何受丛枝真菌侵染和环境磷养分的影响。【方法】以玉米为宿主植物,进行盆栽试验。在低磷酸性土壤上设置供P 0、50、500 mg/kg 3... 详细信息

【目的】探究酸性土壤玉米丛枝菌根侵染对植物磷素吸收的促进作用,以加深理解根外菌丝对局部磷养分的获取如何受丛枝真菌侵染和环境磷养分的影响。【方法】以玉米为宿主植物,进行盆栽试验。在低磷酸性土壤上设置供P 0、50、500 mg/kg 3个水平(P0、P50、P500),供试磷肥为磷酸二氢钾。每个处理再设置局部养分处理,即在每个重复中埋置两个各装有120 g灭菌土(提前加P 50 mg/kg)的塑料小管,分别用孔径为0.45μm(根系、菌丝均不能进入,以"–H"表示处理)和50μm(根系不能进入,菌丝可以进入,以"+H"表示处理)的尼龙膜封住管口。测定了玉米的生长与磷吸收、土著丛枝菌根真菌的侵染和根外菌丝密度以及菌丝对局部磷养分的获取。【结果】1)玉米株高、叶片SPAD值、全株干重、磷浓度及吸收量都随供磷水平升高而增加,以P50处理的根系干重最高,根冠比随供磷水平上升而降低。3个供磷水平下玉米根系均有不同程度的丛枝菌根真菌侵染。以P50处理的丛枝菌根侵染率、丛枝和孢囊结构发育最好;P0处理的丛枝菌根侵染率、丛枝丰度与P50处理没有显著差异,但孢囊丰度明显下降;P500处理虽然87.2%的根系具有侵染点,但整个根系形成的真菌结构、丛枝和孢囊比例远低于P0和P50处理,丛枝菌根的发育受到严重抑制。2)土体土(除塑料管之外的土)菌丝密度随供磷水平升高而降低,但P0和P50处理差异不显著。–H处理塑料管中的菌丝密度在3个供磷水平下基本不变,保持在极低水平,而+H处理塑料管中的菌丝密度随供磷水平升高而下降。在相同供磷水平下,土体土的菌丝密度最高,其次是+H处理,–H处理的菌丝密度最低。根外菌丝从+H处理塑料管中获取的磷随环境供磷水平的升高而减少。【结论】酸性土壤条件下,适当地供磷可以促进玉米根系生长和丛枝菌根真菌的侵染。根外菌丝对局部磷养分的获取受环境磷养分的调控,在环境磷养分较低而局部磷养分高于环境磷养分时,较多的菌丝会进入局部区域获取磷。

关键词：酸性土壤磷丛枝菌根侵染菌丝密度

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