检索结果-内蒙古大学图书馆

菲律宾香蕉上常见蚧虫分类检索

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植物检疫 2013年第3期27卷 84-87页

作者：向才玉焦懿余道坚陈志粦徐浪娄定风康林谢晓露深圳出入境检验检疫局广东深圳518045 深圳市检验检疫科学研究院深圳市外来有害生物检测技术研发重点实验室

蚧虫是水果上常见的重要害虫,近年来,在进口菲律宾的香蕉上检疫截获多种蚧虫。本文编制了常见15种蚧虫的检索表,并对其中属于我国进境植物检疫性有害生物的3种蚧虫的具体形态特征及其分布做了详细描述,可为口岸检疫鉴定提供参考资料。

关键词：菲律宾香蕉蚧虫蚧总科检索表

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水稻细菌性谷枯病研究进展

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中国植保导刊 2015年第7期35卷 73-78页

作者：龙海李芳荣冯建军李一农深圳出入境检验检疫局广东深圳518001 深圳市检验检疫科学研究院深圳市外来有害生物检测技术研发重点实验室广东深圳518045

水稻细菌性谷枯病病菌是我国进境植物检疫性细菌,由其引起的水稻细菌性谷枯病是水稻上的重要病害,在热带和亚热带的水稻产区发生严重。本文综述了该病菌的分类、生理特征、寄主、致病机理及病害症状与防病措施等方面的研究进展。了解水... 详细信息

水稻细菌性谷枯病病菌是我国进境植物检疫性细菌,由其引起的水稻细菌性谷枯病是水稻上的重要病害,在热带和亚热带的水稻产区发生严重。本文综述了该病菌的分类、生理特征、寄主、致病机理及病害症状与防病措施等方面的研究进展。了解水稻细菌性谷枯病病菌的致病机理以及水稻对该病的防卫机制有利于制定更有效的防治策略。

关键词：细菌性谷枯病毒黄菌素脂酶防治

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小反刍兽疫病毒H蛋白的原核表达和免疫学活性鉴定

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动物医学进展 2014年第11期35卷 6-9页

作者：陶虹孙洁李健波刘建利阮周曦张彩虹曹琛福吕建强花群义杨俊兴深圳出入境检验检疫局动植物检验检疫技术中心广东深圳518045 深圳市外来有害生物检测技术研发重点实验室广东深圳518045

研究小反刍兽疫病毒(Peste des petits ruminants virus,PPRV)H蛋白生物学活性,为建立PPRV抗体检测方法提供材料。根据GenBank已发表的PPRV H蛋白质序列,设计上、下游引物,以PPRV核酸为模板进行PCR扩增,扩增产物克隆至pET52/LIC载体中,... 详细信息

研究小反刍兽疫病毒(Peste des petits ruminants virus,PPRV)H蛋白生物学活性,为建立PPRV抗体检测方法提供材料。根据GenBank已发表的PPRV H蛋白质序列,设计上、下游引物,以PPRV核酸为模板进行PCR扩增,扩增产物克隆至pET52/LIC载体中,构建了pET52/LIC-PPRV H表达载体。将pET52/LIC-PPRV H重组质粒转化大肠埃希菌BL21(DE3)进行融合表达,经SDS-PAGE电泳分析,可见PPRV H蛋白成功得到了表达,融合蛋白的分子质量约为75ku,Western blot分析表明所表达的重组蛋白可与PPRV阳性血清发生特异性反应,说明表达的PPRV H蛋白可以作为建立PPRV抗体检测的蛋白。

关键词：小反刍兽疫病毒 H蛋白原核表达

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口蹄疫病毒抗原胶体金试纸条的研究

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动物医学进展 2012年第3期33卷 14-18页

作者：吕建强杨俊兴花群义曹琛福张彩虹陶虹刘建利阮周曦深圳出入境检验检疫局动植物检验检疫技术中心广东深圳518045 深圳市外来有害生物检测技术研发重点实验室广东深圳518045

利用单克隆抗体技术制备抗口蹄疫病毒的单克隆抗体,特异性试验表明其只与O、A、Asia 1型3种血清型FMDV抗原结合。进而采用胶体金标记技术,以胶体金标记的抗口蹄疫病毒单克隆抗体、多克隆血清抗体和葡萄球菌A蛋白为主要材料,研制口蹄疫... 详细信息

利用单克隆抗体技术制备抗口蹄疫病毒的单克隆抗体,特异性试验表明其只与O、A、Asia 1型3种血清型FMDV抗原结合。进而采用胶体金标记技术,以胶体金标记的抗口蹄疫病毒单克隆抗体、多克隆血清抗体和葡萄球菌A蛋白为主要材料,研制口蹄疫快速检测试纸条。该试纸条检测O、A、Asia 1型3种血清型灭活口蹄疫病毒均为阳性,检测水疱性口炎病毒、猪水疱病病毒、蓝舌病病毒、猪蓝耳病病毒4种灭活抗原及小反刍兽疫病毒疫苗株均为阴性,试验结果与口蹄疫实时荧光定量RT-PCR方法的完全一致,表明其具有良好的特异性。敏感性试验结果是,试纸条的检测极限为1∶160稀释的样品,其敏感性相当于实时荧光定量RT-PCR方法的1/64。由于试纸条具有操作方便、检测快速等优点,因此该试纸条可以用于大量临床样品的快速检测和现场检测。

关键词：口蹄疫病毒单克隆抗体胶体金试纸条

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非洲马瘟间接ELISA方法的建立及初步应用

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动物医学进展 2012年第3期33卷 6-9页

作者：曹琛福叶奕优宗卉张彩虹吕建强杨俊兴花群义深圳市外来有害生物检测技术研发重点实验室广东深圳518045 深圳出入境检验检疫局动植物检验检疫技术中心广东深圳518045

为建立检测非洲马瘟间接酶联免疫吸附试验方法,利用重组杆状病毒感染昆虫细胞表达出具有良好抗原性的VP7蛋白,将感染VP7重组杆状病毒的昆虫细胞裂解液作为包被抗原,通过优化包被抗原浓度、二抗稀释度等,建立了检测非洲马瘟的间接ELISA方... 详细信息

为建立检测非洲马瘟间接酶联免疫吸附试验方法,利用重组杆状病毒感染昆虫细胞表达出具有良好抗原性的VP7蛋白,将感染VP7重组杆状病毒的昆虫细胞裂解液作为包被抗原,通过优化包被抗原浓度、二抗稀释度等,建立了检测非洲马瘟的间接ELISA方法,并进行了初步运用。结果表明,直接利用真核细胞表达VP7蛋白的昆虫细胞裂解液作为包被液可成功建立检测非洲马瘟的间接ELISA方法。

关键词：非洲马瘟间接酶联免疫吸附试验 VP7蛋白真核表达

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基于锁核酸探针的双重荧光实时RT-PCR检测方法鉴别新城疫中强毒株与弱毒株

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中国预防兽医学报 2012年第9期34卷 719-723页

作者：秦智锋刘建利卢体康林庆燕吕建强曹琛福阮周曦曾少灵陈书琨廖立珊孙洁张彩虹花群义深圳出入境检验检疫局广东深圳518001 深圳市外来有害生物质检测技术研发重点实验室广东深圳518045

为鉴别新城疫病毒(NDV)强毒株和弱毒株,本研究建立了基于新型锁核酸(LNA)探针的实时荧光RT-PCR检测方法(Duplex LNA rRT-PCR)。该方法针对NDVF基因裂解位点设计了两条新型LNA探针,通过对11株NDV株进行大将军脂duplex LNA rRT-PCR检测方... 详细信息

为鉴别新城疫病毒(NDV)强毒株和弱毒株,本研究建立了基于新型锁核酸(LNA)探针的实时荧光RT-PCR检测方法(Duplex LNA rRT-PCR)。该方法针对NDVF基因裂解位点设计了两条新型LNA探针,通过对11株NDV株进行大将军脂duplex LNA rRT-PCR检测方法检测,验证该方法的特异性;通过对副粘病毒I型(APMV-1)和NDV中强毒株(vNDV)不同浓度病毒液进行检测,确定该方法的灵敏度,并与TaqMan实时荧光RT-PCR检测方法进行比较。结果显示本研究所建立的方法对11株NDV检测的特异性为100%(11/11),优于TaqMan实时荧光RT-PCR检测方法(10/11);所建立的duplex LNA rRT-PCR方法检测中强毒株F48E9和弱毒株LaSota的灵敏度分别为10个EID50和0.1个EID50,比美国农业部推荐的TaqMan实时荧光RT-PCR检测方法低10倍。本研究利用新型LNA探针技术,建立了鉴别NDV中强毒株与弱毒株的duplex LNA rRT-PCR检测方法,可以特异性检测NDV并有效区分中强毒株与弱毒株,适合用于鸡场和进出境动物产品中NDV的快速检测。

关键词：新城疫病毒中强毒株弱毒株 LNA RT-PCR 鉴别检测

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检疫性疫霉DNA条形码筛选

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植物病理学报 2016年第2期46卷 213-222页

作者：高瑞芳程颖慧王颖汪莹国立耘章桂明深圳出入境检验检疫局动植物检验检疫技术中心深圳518045 深圳市外来有害生物检测技术研发重点实验室深圳518045 中国农业大学农学与生物技术学院北京100193

疫霉是世界关注的一类植物病原真菌。以疫霉属80个种122个菌株为研究材料,以ITS、CO1、EF-1α和β-tubulin 4个基因片段为候选DNA条形码,分析表明ITS、CO1基因的PCR扩增和测序成功率最高,分别为100%和96.7%;ITS、CO1和β-tubulin存在明... 详细信息

疫霉是世界关注的一类植物病原真菌。以疫霉属80个种122个菌株为研究材料,以ITS、CO1、EF-1α和β-tubulin 4个基因片段为候选DNA条形码,分析表明ITS、CO1基因的PCR扩增和测序成功率最高,分别为100%和96.7%;ITS、CO1和β-tubulin存在明显的条码间隔,但种间、种内距离频率分布存在较小重叠;种间、种内遗传距离Wilcoxon秩和检验结果认为各基因对种内遗传距离的效力相等,对种间遗传距离的区分能力为ITS>CO1>β-tubulin。CO1基因和ITS片段可同时作为11种检疫性疫霉的首选DNA条形码,β-tubulin基因可作为辅助DNA条形码。

关键词：检疫性疫霉 DNA条形码遗传距离条码间隔

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MALDI-TOF质谱技术检测豆类作物病原细菌

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植物检疫 2015年第4期29卷 31-37页

作者：冯建军龙海李志锋吴绍精李一农章桂明深圳出入境检验检疫局广东深圳518045 深圳市检验检疫科学研究院深圳市外来有害生物检测技术研发重点实验室广西大学农学院

本文通过基于基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)技术分析豆类作物上7种主要病原细菌,建立了MALDI-TOF MS分析方法。结果表明:构建的MALDI-TOF质谱检测数据库可以快速、准确地区分和鉴定该作物上的主要病原菌。该分析方法... 详细信息

本文通过基于基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)技术分析豆类作物上7种主要病原细菌,建立了MALDI-TOF MS分析方法。结果表明:构建的MALDI-TOF质谱检测数据库可以快速、准确地区分和鉴定该作物上的主要病原菌。该分析方法具有属特异性和致病变种特异性,可用于豆类作物主要病原细菌的检测。

关键词： MALDI-TOF MS 植物病原细菌豆类检测

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伪狂犬病病毒实时荧光PCR的建立和应用

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动物医学进展 2010年第3期31卷 21-25页

作者：吕建强何云蔚卢体康花群义秦智锋陶虹杨俊兴阮周曦深圳出入境检验检疫局深圳市外来有害生物检测技术研发重点实验室广东深圳518010 创世纪转基因技术有限公司广东深圳518048

伪狂犬病是世界范围内严重影响养猪业发展的重要动物疫病,快速检测是有效防控该病的重要措施之一。为了建立该病的快速分子生物学检测方法,根据GenBank中登录的伪狂犬病病毒gD基因序列,选择高度保守区域设计引物和TaqMan荧光探针,通过... 详细信息

伪狂犬病是世界范围内严重影响养猪业发展的重要动物疫病,快速检测是有效防控该病的重要措施之一。为了建立该病的快速分子生物学检测方法,根据GenBank中登录的伪狂犬病病毒gD基因序列,选择高度保守区域设计引物和TaqMan荧光探针,通过对实时荧光PCR反应条件进行优化,建立了用于检测伪狂犬病病毒的实时荧光PCR方法。特异性试验结果表明,该检测方法只能检测到目的病毒,表明其具有良好的特异性。灵敏性试验发现,其最低检测限可达1.42pg/μL的总DNA,与PCR方法的灵敏度对比试验表明,其敏感度比PCR至少高10倍。对同一样品进行重复性检测,在组内及组间检测的荧光扩增曲线基本重叠,证实其重复性好。对180份临床样品进行伪狂犬病病毒核酸检测,结果发现有52份阳性样品。结果表明,所建立的实时荧光PCR方法可对伪狂犬病病毒进行准确、快速的检测,具有特异性好、灵敏度高、重复性好的优点,是开展伪狂犬病的临床检测和疫情监测工作的有力工具。

关键词：伪狂犬病病毒实时荧光PCR 检测

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检疫性疫霉DNA条形码标准分子构建

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菌物学报 2016年第3期35卷 317-325页

作者：高瑞芳汪莹程颖慧王颖国立耘章桂明深圳出入境检验检疫局动植物检验检疫技术中心广东深圳518045 深圳市外来有害生物检测技术研发重点实验室广东深圳518045 中国农业大学农学与生物技术学院北京100193

质粒标准分子是指含有外源基因和内源标准基因特异性片段的重组质粒分子。DNA条形码技术是通过对标准目的基因的DNA序列进行分析从而进行物种鉴定的技术。构建基于DNA条形码的质粒标准分子是DNA条形码技术应用于检测实践的要求。本研究... 详细信息

质粒标准分子是指含有外源基因和内源标准基因特异性片段的重组质粒分子。DNA条形码技术是通过对标准目的基因的DNA序列进行分析从而进行物种鉴定的技术。构建基于DNA条形码的质粒标准分子是DNA条形码技术应用于检测实践的要求。本研究将这两种检测鉴定技术相结合应用于检疫性疫霉的检测,构建了11种检疫性疫霉的DNA条形码标准分子,进行了测序验证、均匀性、稳定性和特异性验证。结果表明,构建的质粒标准分子准确度、均匀性、稳定性和特异性均良好,对实际口岸检验检疫工作具有实践应用价值。

关键词：检疫性疫霉质粒标准分子 DNA条形码

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