检索结果-内蒙古大学图书馆

微生物学报 2025年第2期65卷 524-536页

作者：唐雅碧吴佳玲李晓谢宁深圳大学生命与海洋科学学院深圳市微生物基因工程重点实验室广东深圳

丝状真菌的衰老是一个涉及多种生理生化变化的复杂过程,受外部环境和遗传的共同影响,且伴随细胞功能退化与生理损伤。丝状真菌因其遗传操作容易、生命周期短、便于量化的衰老特征等优势被广泛用于衰老机制研究。本研究对丝状真菌的衰老... 详细信息

丝状真菌的衰老是一个涉及多种生理生化变化的复杂过程,受外部环境和遗传的共同影响,且伴随细胞功能退化与生理损伤。丝状真菌因其遗传操作容易、生命周期短、便于量化的衰老特征等优势被广泛用于衰老机制研究。本研究对丝状真菌的衰老特征进行综述,并归纳环境因素、线粒体稳定性、氧化应激和代谢水平等影响衰老的因素,解析衰老过程的调控机制,进一步挖掘丝状真菌在工业应用中的应用价值,期望能为人类衰老的研究提供新的研究思路。

关键词：丝状真菌衰老线粒体DNA(mtDNA)稳定性自噬遗传调控机制

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铜离子与SALI3-2蛋白的相互作用

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高等学校化学学报 2013年第1期34卷 128-134页

作者：唐玉林高占徐宏贺建芝董一含郑易之深圳市微生物基因工程重点实验室深圳大学生命科学学院深圳518060 深圳市海洋生物资源与生态环境重点实验室

用1/2 MS固体培养基培养拟南芥幼苗,研究了CuCl2对转Sali3-2基因植株生长的影响,发现转基因植株Sali3-2的表达可提高其耐受Cu2+胁迫的能力.进一步克隆Sali3-2基因,表达并纯化了缺失信号肽的SALI3-2蛋白.利用固定金属离子亲和色谱(IMAC)... 详细信息

用1/2 MS固体培养基培养拟南芥幼苗,研究了CuCl2对转Sali3-2基因植株生长的影响,发现转基因植株Sali3-2的表达可提高其耐受Cu2+胁迫的能力.进一步克隆Sali3-2基因,表达并纯化了缺失信号肽的SALI3-2蛋白.利用固定金属离子亲和色谱(IMAC)分析发现,Cu2+能够与SALI3-2蛋白结合.通过荧光光谱及圆二色光谱(CD)进一步研究了Cu2+与SALI3-2蛋白间的键合机理.结果表明,Cu2+可引起SALI3-2蛋白内源性荧光猝灭,其猝灭机制为静态猝灭;Cu2+与SALI3-2蛋白的结合常数为8.89×106,结合位点数为***分析显示,Cu2+与SALI3-2蛋白的结合未使SALI3-2蛋白二级结构发生明显改变.由此推测,在高浓度铜离子胁迫下,SALI3-2蛋白通过结合一定数量的Cu2+使蛋白的构象发生改变,这可能是SALI3-2蛋白的表达使植物耐受Cu2+胁迫能力提高的分子机制之一.

关键词：铜离子 SALI3-2蛋白金属离子亲和层析荧光光谱圆二色光谱

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人脑中硒蛋白W与鞘脂激活蛋白原相互作用的筛选与验证

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生物化学与生物物理进展 2014年第8期41卷 755-764页

作者：陈平刘晴马孝杰王诗捷刘琼倪嘉缵深圳大学生命科学学院深圳市海洋生物资源与环境重点实验深圳市微生物基因工程重点实验室深圳508160

硒蛋白W(SelW)是人脑中一种重要的硒蛋白.在缺硒的条件下,SelW在脑中具有优先储备的特性,但其具体机制和在脑中的功能至今尚不清楚.本文以SelW突变体SelW′为"诱饵",采用酵母双杂交系统对人胎脑文库进行筛选,获得与SelW相互... 详细信息

硒蛋白W(SelW)是人脑中一种重要的硒蛋白.在缺硒的条件下,SelW在脑中具有优先储备的特性,但其具体机制和在脑中的功能至今尚不清楚.本文以SelW突变体SelW′为"诱饵",采用酵母双杂交系统对人胎脑文库进行筛选,获得与SelW相互作用的蛋白,其中一种为鞘脂激活蛋白原(PSAP).采用荧光共振能量转移技术中的受体漂白和敏化发射两种方法,验证了SelW与PSAP的相互作用.构建表达载体在大肠杆菌中成功表达出SelW′,利用Pull-down技术验证了SelW′与PSAP在细胞外的直接相互作用.采用免疫共沉淀的方法验证了上述两种蛋白在昆明小鼠脑组织中的内源性相互作用.基于SelW和PSAP的已知生物功能,推测SelW可能在脑部发育和神经退行性疾病形成过程中发挥着重要作用.

关键词：硒蛋白W 酵母双杂交,荧光共振能量转移,Pul-down技术免疫共沉淀鞘脂激活蛋白原

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纳升液相色谱-高分辨串联质谱研究冻存条件对唾液多肽组的影响

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分析化学 2016年第12期44卷 1887-1891页

作者：徐金玲洪晓愉李水明王勇深圳大学生命与海洋科学学院深圳市微生物基因工程重点实验室深圳大学深圳市海洋生物资源与生态环境重点实验室

唾液多肽组学为疾病相关的生物标记物研究提供了新方法,但冻存条件对分析结果的影响并不清楚。本研究采用氧化石墨烯-磷酸镧纳米复合材料分离富集唾液多肽,利用纳升液相色谱-高分辨串联质谱技术,考察唾液样品分别置于-80℃与-20℃冻存6... 详细信息

唾液多肽组学为疾病相关的生物标记物研究提供了新方法,但冻存条件对分析结果的影响并不清楚。本研究采用氧化石墨烯-磷酸镧纳米复合材料分离富集唾液多肽,利用纳升液相色谱-高分辨串联质谱技术,考察唾液样品分别置于-80℃与-20℃冻存6个月后对唾液多肽组的影响。结果表明,在-80℃冻存条件下的唾液样品中,共鉴定出归属于33种蛋白的429条肽段;在-20℃冻存条件下的唾液样品中,鉴定出595条肽段,对应31种蛋白。实验结果表明,相比于-80℃,唾液置于-20℃条件下的新增加肽段主要来源于已有肽段的降解,并且唾液中的蛋白质也发生了一定降解。本研究在肽段序列水平上考察了冻存条件对多肽的影响,结果表明,-20℃冻存条件不适合长期保存用于多肽组分析的唾液样品。本研究结果可为相关医学研究提供借鉴。

关键词：唾液多肽组纳升液相色谱-高分辨串联质谱肽段

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粉尘螨Ⅰ类变应原(Der fⅠ)的克隆表达、纯化及免疫学特性

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昆虫学报 2006年第2期49卷 213-218页

作者：朱健琦刘志刚高波吉坤美邢苗深圳大学生命科学学院深圳市微生物基因工程重点实验室广东深圳518060 深圳市微生物基因工程重点实验室

粉尘螨Ⅰ类变应原(Der fⅠ)是粉尘螨Dermatophagoidesfarinae主要变应原,可引发Ⅰ型变态反应。挑取纯培养的粉尘螨,提取总RNA,采用RT-PCR方法有效地扩增出DerfⅠ片段,产物连接入T载体(pMD18)。经扩增后,用NdeⅠ和XhoⅠ双酶切后将目的片... 详细信息

粉尘螨Ⅰ类变应原(Der fⅠ)是粉尘螨Dermatophagoidesfarinae主要变应原,可引发Ⅰ型变态反应。挑取纯培养的粉尘螨,提取总RNA,采用RT-PCR方法有效地扩增出DerfⅠ片段,产物连接入T载体(pMD18)。经扩增后,用NdeⅠ和XhoⅠ双酶切后将目的片段连接到pET24a表达载体上,得到重组质粒pET24a-DerfⅠ,工程菌经IPTG诱导培养,高效表达出DerfⅠ蛋白,该蛋白主要以包涵体形式存在。表达产物经亲和层析纯化,用Westernblot及ELISA方法检测免疫学活性,结果表明目的蛋白具有良好的免疫原性。

关键词：粉尘螨变应原表达纯化特性鉴定

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PSTI1可提高大肠杆菌应答胁迫能力

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深圳大学学报（理工版） 2011年第4期28卷 347-355页

作者：刘士德陈汗英张建华田生礼李水明李慧丽李明华邢苗深圳大学生命科学学院深圳市微生物基因工程重点实验室深圳518060

指出含典型34肽重复序列结构域(tetratricopeptide repeat,TPR)的胁迫诱导蛋白(stress-in-ducible protein-1,STI1)是真核生物特有的一类与胁迫应答有关的分子伴侣蛋白.作者从多头绒泡菌分离出一个STI1类似蛋白cDNA,因其编码蛋白含有两... 详细信息

指出含典型34肽重复序列结构域(tetratricopeptide repeat,TPR)的胁迫诱导蛋白(stress-in-ducible protein-1,STI1)是真核生物特有的一类与胁迫应答有关的分子伴侣蛋白.作者从多头绒泡菌分离出一个STI1类似蛋白cDNA,因其编码蛋白含有两个非典型的TPR结构域,命名为PSTI1.为了解PSTI1对原核生物胁迫应答功能的影响,观察表达PSTI1的大肠杆菌(Escherichia coli,***)与原菌株的增殖差异,发现PSTI1表达菌耐受盐、渗透压、重金属离子、氧化、缺氧和酸碱变化胁迫的能力均增强,但对高温敏感.PSTI1保守结构域TPR1能提高***耐受渗透压胁迫的能力,但TPR2会使***对盐和渗透压胁迫敏感,说明TPR1和TPR2在PSTI1调控胁迫应答中可能扮演不同角色.通过pull-down和质谱分析技术检测了与PSTI1作用的***蛋白,发现PSTI1能与***的HtpG(Hsp90)、La蛋白酶和过氧化氢酶HpII等作用,说明PSTI1具有原核生物非典型TPR结构域蛋白的类似功能,是类似STI1的胁迫应答蛋白.

关键词：微生物细胞生物学多头绒泡菌 STI1类似蛋白 cDNA文库大肠杆菌胁迫应答真菌基因工程基因编码

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多头绒泡菌PSCL32.5蛋白的性质及其含量在细胞周期中的变化

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Acta Genetica Sinica 2004年第3期31卷 305-310页

作者：刘士德张建华邢苗深圳大学生命科学院深圳市微生物基因工程重点实验室深圳518060

用免疫印迹技术检测到低等真核生物多头绒泡菌中含有两种与HeLa细胞SC3 5单克隆抗体反应的蛋白 ,其分子量分别为 3 2 5kD和 82 5kD ,将其命名为PSCL3 2 5和PSCL82 5。用SDS PAGE技术对PSCL3 2 5蛋白进行了纯化 ,用等电聚焦方法确定... 详细信息

用免疫印迹技术检测到低等真核生物多头绒泡菌中含有两种与HeLa细胞SC3 5单克隆抗体反应的蛋白 ,其分子量分别为 3 2 5kD和 82 5kD ,将其命名为PSCL3 2 5和PSCL82 5。用SDS PAGE技术对PSCL3 2 5蛋白进行了纯化 ,用等电聚焦方法确定PSCL3 2 5蛋白的等电点为 6 19。应用免疫印迹技术检测多头绒泡菌细胞周期不同时相的PSCL3 2 5含量 ,发现该蛋白的含量在细胞周期中是变化的 ,在S早期时含量最低 ,从S期到G2 期含量逐步增高 ,G2

关键词：多头绒泡菌 SC35类似蛋白 PSCL32.5蛋白等电点细胞周期

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纳升液相色谱-高分辨串联质谱分析尿液多肽组及其翻译后修饰

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分析化学 2016年第5期44卷 716-722页

作者：洪晓愉李水明王勇深圳大学生命与海洋科学学院深圳市微生物基因工程重点实验室深圳大学生命与海洋科学学院深圳市海洋生物资源与生态环境重点实验室

多肽组是指生物体表达的所有多肽,尿液等体液的多肽组是生物标记物的重要来源。本研究采用氧化石墨烯-磷酸镧纳米磁性复合材料分离富集尿液多肽,进行纳升液相色谱-高分辨串联质谱分析,从单一样本中鉴定了归属于123个蛋白质的790条肽段... 详细信息

多肽组是指生物体表达的所有多肽,尿液等体液的多肽组是生物标记物的重要来源。本研究采用氧化石墨烯-磷酸镧纳米磁性复合材料分离富集尿液多肽,进行纳升液相色谱-高分辨串联质谱分析,从单一样本中鉴定了归属于123个蛋白质的790条肽段。研究表明,这些肽段在蛋白质水平上不是平均分布的。此外,本研究检测到了肽段的氧化、磷酸化和脱氨化等翻译后修饰现象,观察到了尿液多肽的阶梯序列性,从蛋白水平上对尿液多肽组进行了生物信息学分析,结果表明,这些多肽所归属的大部分蛋白质之间存在相互作用。本方法可为在尿液中寻找疾病的标志物提供方法学支持。

关键词：多肽组纳升液相色谱-高分辨串联质谱尿液翻译后修饰

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胚胎晚期富集蛋白与生物的干旱胁迫耐受性

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生物工程学报 2010年第5期26卷 569-575页

作者：刘昀刘国宝李冉辉邹永东郑易之深圳大学生命科学学院深圳市微生物基因工程重点实验室深圳518060

胚胎晚期富集蛋白(Late embryogenesis abundant,LEA)是参与生物体抵抗干旱胁迫的一类重要蛋白。LEA蛋白可分为7组。大多数LEA蛋白具有亲水性及热稳定性。LEA蛋白在水溶液中通常为无折叠状态,但脱水胁迫可诱导其转变为α-螺旋。近年来关... 详细信息

胚胎晚期富集蛋白(Late embryogenesis abundant,LEA)是参与生物体抵抗干旱胁迫的一类重要蛋白。LEA蛋白可分为7组。大多数LEA蛋白具有亲水性及热稳定性。LEA蛋白在水溶液中通常为无折叠状态,但脱水胁迫可诱导其转变为α-螺旋。近年来关于LEA蛋白的研究取得了较多进展。研究结果表明LEA蛋白可定位于细胞内的多种细胞器中,且LEA蛋白可能具有多重保护作用,如保护蛋白质及酶活性、或保护细胞的膜结构、或具有抗氧化作用、结合离子或保护DNA等。以下主要介绍了LEA蛋白的功能、二级结构及保护作用机制。

关键词：胚胎晚期富集蛋白干旱胁迫亚细胞定位蛋白质二级结构多重保护功能

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双启动子对重组溶源性枯草杆菌中外源蛋白表达的增强作用

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生物工程学报 2006年第2期22卷 191-197页

作者：刘刚张燕邢苗深圳市微生物基因工程重点实验室深圳大学生命科学学院深圳518060

探讨了双启动子对基于溶源性噬菌体构建的重组枯草杆菌中外源蛋白表达的影响。分别将不含或含有本身启动子的α-淀粉酶基因(来源于Bacillus amyloliquefaciens)和青霉素酰化酶基因(来源于Bacillus megaterium)克隆到溶源性枯草杆菌中,... 详细信息

探讨了双启动子对基于溶源性噬菌体构建的重组枯草杆菌中外源蛋白表达的影响。分别将不含或含有本身启动子的α-淀粉酶基因(来源于Bacillus amyloliquefaciens)和青霉素酰化酶基因(来源于Bacillus megaterium)克隆到溶源性枯草杆菌中,得到重组菌***1,***2,***1以及***2。由于同源重组,所克隆的片段整合到溶源性枯草杆菌中的噬菌体基因组上,并处于噬菌体强启动子的下游。在重组菌AMY1和PA1中,在热诱导的情况下外源基因的转录只受到噬菌体启动子的作用,而在重组菌AMY2和PA2中,在热诱导下外源基因的转录同时受到噬菌体启动子和基因本身所带启动子的作用。双启动子的应用使重组α-淀粉酶的表达量提高了133%,使重组青霉素酰化酶的表达量提高了113%。

关键词： α-淀粉酶解淀粉芽孢杆菌巨大芽孢杆菌枯草芽孢杆菌双启动子青霉素酰化酶

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