贴壁细胞有着较为明显的区域差异性,这意味着将单个细胞作为一个均匀的整体来研究是不够精准的。传统的亚细胞水平的研究着重关注了细胞本身结构和功能的不均匀性,但很少有文献报道一种简便而可靠的方法制造出不均匀的微环境,来对目标单细胞进行局部刺激。而单细胞则很有可能在局部刺激下才可能显示出"隐藏"的性质(如自我修复能力等),且体内细胞所处微环境也常会不均匀(如处在两种组织界面的细胞),因而发展单细胞局部处理的技术对于我们更加深入地进行单细胞研究有着重要的意义。在本研究中,我们发展了一种用于原位处理单细胞局部区域的微流控探针技术,该探针能够通过产生稳定的局域微环境分布来对样品单细胞进行原位局部处理。该方法已经成功地被应用于单个Caco-2,MCF-7,U87细胞的局部裂解以及单个U87细胞的局部染色(Mito-Tracker Green FM,Mito-Tracker Red CMXRos,ER-Tracker Green)的过程中,单个U87细胞局部区域被裂解后而产生的修复与再生现象也已被成功观察到,从而证明了该方法的可行性与重要性。该方法利用非接触式微流控探针技术,成本低廉、操作简便且几乎不会对细胞造成严重的机械伤害。该方法可作为一种细胞前处理技术,向细胞的局部区域递送大部分现有的细胞修饰及刺激试剂(如水溶性染色剂及药物等),并结合单细胞质谱等分析技术,更加全面深入地揭示单细胞的性质,为单细胞研究的进一步发展奠定基础。
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