目的研究亨廷顿蛋白相关蛋白1(Huntingtin-associated protein 1,Hap1)基因对成纤维细胞增殖的影响。方法体外分离培养获得Hap1基因敲除(Hap1^(-/-))的原代成纤维细胞,鉴定后采用EdU增殖实验、细胞周期(流式细胞术)检测验证Hap1敲除后...
详细信息
目的研究亨廷顿蛋白相关蛋白1(Huntingtin-associated protein 1,Hap1)基因对成纤维细胞增殖的影响。方法体外分离培养获得Hap1基因敲除(Hap1^(-/-))的原代成纤维细胞,鉴定后采用EdU增殖实验、细胞周期(流式细胞术)检测验证Hap1敲除后成纤维细胞增殖的改变;将野生型和Hap1^(-/-)成纤维细胞送转录组测序筛选增殖相关基因,实时荧光定量PCR(qPCR)验证相关基因表达水平的改变。对小鼠进行皮肤损伤造模检测Hap1敲减(Hap1^(+/-))小鼠皮肤损伤修复情况;PCNA免疫组化染色检测损伤修复过程中成纤维细胞的增殖水平。结果成功培养原代Hap1^(-/-)成纤维细胞;与野生型成纤维细胞相比,Hap1^(-/-)成纤维细胞EdU阳性比例减少,进入S期的细胞比例减少;原代成纤维细胞转录组测序筛选出Cdc25C、E2f7、E2f8和Ccl5四个差异表达的增殖相关基因,qPCR验证发现E2f7在Hap1敲除后表达增多。小鼠皮肤损伤结果显示,Hap1^(+/-)小鼠伤口面积较相同时间点野生型小鼠伤口面积大且愈合速度减慢,成纤维细胞增殖阳性密度低于野生型小鼠。结论 Hap1可能通过抑制细胞周期负性调节因子E2f7的表达对成纤维细胞增殖起正向调节作用,其缺失将抑制成纤维细胞进入S期,从而减少细胞增殖,影响伤口修复。
Twist相关蛋白1(Twist-related protein 1,TWIST1)是参与上皮-间充质转化(Epithelium-mesenchymal transition,EMT)和乳腺癌进展的重要转录因子。而以TWIST1为靶点的乳腺癌分子靶向药物研究是一个热门领域。近十年的研究中,出现了如微小...
详细信息
Twist相关蛋白1(Twist-related protein 1,TWIST1)是参与上皮-间充质转化(Epithelium-mesenchymal transition,EMT)和乳腺癌进展的重要转录因子。而以TWIST1为靶点的乳腺癌分子靶向药物研究是一个热门领域。近十年的研究中,出现了如微小RNA(microRNA,miRNA)、结合小分子干扰核糖核酸(Small interfering RNA,siRNA)的纳米微粒、槲皮素、姜黄素等一系列能够直接影响TWIST1或者通过影响TWIST1上游分子或其他未知途径影响TWIST1发挥功能的药物。现综述近十年的相关研究,以期对以TWIST1为靶点的乳腺癌分子靶向药物研究做一个简要梳理。
暂无评论