检索结果-内蒙古大学图书馆

下调MDA-MB-231乳腺癌细胞骨硬化蛋白(SOST)可增加间接共培养的MG-63成骨细胞的成骨作用

细胞与分子免疫学杂志 2016年第11期32卷 1481-1485页

作者：程俊雄郭丹陈茜王婷黄佳祎重庆医科大学基础医学院病理生理学教研室分子医学与肿瘤研究中心重庆400016 重庆医科大学第二附属医院乳腺外科重庆400016

目的构建靶向抑制骨硬化蛋白(SOST)基因的小干扰RNA(siRNA)腺病毒,感染MDA-MB-231乳腺癌细胞并与MG-63成骨细胞共培养,检测对成骨相关分子表达的影响。方法针对SOST基因RNA序列设计带3个干扰片段的2对引物,以p B2B为模板,扩增"背靠... 详细信息

目的构建靶向抑制骨硬化蛋白(SOST)基因的小干扰RNA(siRNA)腺病毒,感染MDA-MB-231乳腺癌细胞并与MG-63成骨细胞共培养,检测对成骨相关分子表达的影响。方法针对SOST基因RNA序列设计带3个干扰片段的2对引物,以p B2B为模板,扩增"背靠背"排列的H1和U6启动子。两个PCR产物以Gibson DNA Assembly的方式同时连接腺病毒穿梭质粒p Ad Trace-OK,经同源重组、HEK293细胞包装获得SOST-siRNA腺病毒。感染MDA-MB-231乳腺癌细胞,实时定量PCR检测SOST mRNA的表达水平,ELISA检测SOST蛋白水平。将转染该腺病毒的MDA-MB-231细胞与MG-63成骨细胞间接共培养,实时定量PCR检测护骨因子(OPG)、骨钙蛋白(OCN)、整合素结合涎蛋白(IBSP)、核因子κB受体激活蛋白配体(RANKL)的表达情况。结果成功获得带3个干扰片段的腺病毒穿梭质粒,经同源重组和包装后,获得AdR-si SOST腺病毒。用该病毒感染MDA-MB-231细胞后,明显抑制SOST的表达。在乳腺癌骨转移体外模型中感染Ad-si SOST腺病毒,能导致MG-63细胞的OPG、OCN、IBSP mRNA表达上升,RANKL mRNA降低。结论在乳腺癌骨转移体外模型中感染Ad-si SOST腺病毒,能促进MG-63细胞的成骨分化,提高OPG/RANKL的比例。

关键词： SOST siRNA 腺病毒乳腺癌骨转移

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缺血预处理加用川芎嗪抑制肠缺血-再灌注性心肺细胞凋亡

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中国中西医结合急救杂志 2005年第6期12卷 351-354页

作者：金可可陈雷王卫王万铁宋张娟温州医学院病理生理学教研室浙江温州325035 温州医学院附属第一医院

目的:研究缺血预处理加川芎嗪对肠缺血再灌注大鼠心、肺细胞凋亡及相关基因B cl 2和B ax蛋白表达的影响。方法:健康SD大鼠,随机分为假手术对照组(Ⅰ组)、肠缺血再灌注组(Ⅱ组)、川芎嗪治疗组(Ⅲ组)、缺血预处理组(Ⅳ组)和川芎嗪+缺血预... 详细信息

目的:研究缺血预处理加川芎嗪对肠缺血再灌注大鼠心、肺细胞凋亡及相关基因B cl 2和B ax蛋白表达的影响。方法:健康SD大鼠,随机分为假手术对照组(Ⅰ组)、肠缺血再灌注组(Ⅱ组)、川芎嗪治疗组(Ⅲ组)、缺血预处理组(Ⅳ组)和川芎嗪+缺血预处理组(Ⅴ组)5组。用免疫组化法检测心、肺组织B cl 2和B ax蛋白表达,用末端脱氧核苷酸转移酶介导的生物素化脱氧尿嘧啶缺刻标记技术(TUNEL)检测心、肺细胞凋亡,并测定心、肺组织超氧化物歧化酶(SOD)和髓过氧化物酶(M PO)活性及丙二醛(M DA)含量。结果:Ⅴ组心、肺组织细胞凋亡指数明显低于除Ⅰ组外的其他各组,B cl 2蛋白表达明显增多,肺组织B ax蛋白表达明显减少,心肌细胞B ax蛋白表达明显比Ⅱ组降低,同时Ⅴ组心、肺组织SOD活性增高,M PO活性和M DA含量降低。结论:缺血预处理与川芎嗪联合应用对抑制肠缺血再灌注所致的心、肺细胞凋亡具有显著的协同作用。

关键词：缺血预处理川芎嗪细胞凋亡缺血-再灌注损伤,肠

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宫颈鳞癌中p16、p21^(WAF1)、Rb、cyclinE蛋白的表达

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临床与实验病理学杂志 2004年第5期20卷 554-556页

作者：董磊宋张娟温州医学院附属第一医院病理科温州医学院病理生理学教研室温州325000

目的　通过观察 p16、p2 1WAF1、Rb、cyclinE 4种细胞周期相关蛋白在宫颈鳞状细胞癌中的表达 ,探讨它们在宫颈癌的细胞周期调控中的作用。方法　采用免疫组化EliVision二步法对 88例宫颈鳞癌组织 ,16例宫颈上皮内病变 (CIN)组织 ,15例... 详细信息

目的　通过观察 p16、p2 1WAF1、Rb、cyclinE 4种细胞周期相关蛋白在宫颈鳞状细胞癌中的表达 ,探讨它们在宫颈癌的细胞周期调控中的作用。方法　采用免疫组化EliVision二步法对 88例宫颈鳞癌组织 ,16例宫颈上皮内病变 (CIN)组织 ,15例宫颈炎组织进行 p16、p2 1WAF1、Rb、cyclinE 4种蛋白表达的检测。结果　p16、p2 1WAF1、cyclinE在宫颈癌中的表达高于宫颈炎(P <0 0 5 ) ;Rb在宫颈癌的表达少于宫颈炎 (P <0 0 5 ) ;Rb与p16在宫颈癌中的表达呈负相关 (r =- 0 6 75 ,P <0 0 5 )。结论　宫颈癌细胞周期G1期中 ,由于Rb蛋白的缺失 ,使cyclinE表达升高 ,致使癌细胞增生 ;同时 ,p16、p2 1WAF1蛋白在宫颈癌中的表达增高 ,并失去抑制作用。

关键词：宫颈鳞癌蛋白表达 p16 p21^WAF1 Rb cyclinE

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金氏痔疮膏的药效学研究

金氏痔疮膏的药效学研究

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中国中西医结合学会大肠肛门病专业委员会第八届全国学术会议

作者：金定国金纯金可可王卫徐正衸金照温州医学院附属第二医院肛肠科温州医学院附属第二医院肛肠科温州医学院附属病理生理学教研室温州医学院附属病理生理学教研室温州医学院附属病理生理学教研室浙江省温州中西医结合医院肛肠科

通过动物实验,研究和观察金氏痔疮膏的消炎、镇痛、止血、止痒等效果.结果显示该药物具有良好的抗炎、止血功效,且效果强于马应龙麝香痔疮膏,并具有明显的镇痛和止痒作用.

关键词：金氏痔疮膏药效学研究

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新的β_2m基因打靶载体构建方法的建立

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中国病理生理杂志 2003年第7期19卷 889-893页

作者：孟瑛李树浓黄绍良中山大学第二附属医院儿科广东广州510120 中山大学中山医学院病理生理学教研室广东广州510089

目的 :采用常规方法 (同源片段的插入方向与Neo基因相同 )构建载体的同时 ,将两条同源臂反向插入Neo基因的两侧 ,构建新型小鼠 β2 m基因替换型打靶载体 β2 m -pPNT ,即增加 3’同源臂的长度 ,探讨同源臂插入位置和长度变化对同源重组... 详细信息

目的 :采用常规方法 (同源片段的插入方向与Neo基因相同 )构建载体的同时 ,将两条同源臂反向插入Neo基因的两侧 ,构建新型小鼠 β2 m基因替换型打靶载体 β2 m -pPNT ,即增加 3’同源臂的长度 ,探讨同源臂插入位置和长度变化对同源重组率的影响。方法 :设计和合成引物 ,经PCR从小鼠 β2 m -pSV2△HXgpt基因组克隆分别扩增出长度为 0 8kb和 4 2kb的 β2 m基因片段 ,作为 5’和 3’同源臂 ,分别反向插入载体pPNT的Neo基因上游和下游 ,构建小鼠 β2 m基因替换型打靶载体 β2 m -pPNT。结果 :经过PCR、限制性内切酶及DNA序列测定 ,证实此两条同源臂包含小鼠 β2 m的起始区和表达区 ,表明载体构建成功。结论 :PCR技术是构建基因打靶载体的简单而可靠方法。增加 3’同源臂的长度对研究提高胚胎干细胞基因敲除的同源重组率提供新的途径。

关键词：小鼠主要组织相容性复合物基因,β2m 基因打靶序列分析

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新型缺氧保护因子胞红蛋白的研究进展

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医学研究生学报 2015年第9期28卷 978-983页

作者：李维范文静屈顺林南华大学医学院病理生理学教研室衡阳医学硕士研究生421001 南华大学附属第二医院急诊科衡阳421001

作为珠蛋白家族的第四名成员,胞红蛋白在缺氧条件下的表达明显增强。其在生物体内分布广泛,具有多种重要的生物学功能,如抗氧化应激、抗纤维化、神经保护作用以及在心血管疾病、癌症等和缺氧有关的疾病中起到一定的保护作用。文中综合... 详细信息

作为珠蛋白家族的第四名成员,胞红蛋白在缺氧条件下的表达明显增强。其在生物体内分布广泛,具有多种重要的生物学功能,如抗氧化应激、抗纤维化、神经保护作用以及在心血管疾病、癌症等和缺氧有关的疾病中起到一定的保护作用。文中综合了近年来的研究成果,就胞红蛋白的结构与分布,抗纤维化、抗癌、促进肌肉再生等相关生理功能以及在缺氧下的表达调节和表达机制作一综述。

关键词：胞红蛋白生理功能缺氧表达机制

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川芎嗪对肾缺血再灌注损伤所致氧化应激的干预作用

川芎嗪对肾缺血再灌注损伤所致氧化应激的干预作用

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2008年浙江省肾脏病学术年会

作者：毛朝鸣陈辉乐王万铁金可可邱晓晓温州医学院第二附属医院肾内科温州医学院病理生理学教研室

目的:观测兔肾缺血再灌注损伤时氧化应激体系的变化、探讨中药川芎嗪注射液的干预作用及机制。方法:采用在体兔双侧肾动脉持续性阻断1h,再灌注5h的肾缺血再灌注损伤动物模型。日本大耳白兔30只,随机分成三组,每组10只:假手术对照组(S组)... 详细信息

目的:观测兔肾缺血再灌注损伤时氧化应激体系的变化、探讨中药川芎嗪注射液的干预作用及机制。方法:采用在体兔双侧肾动脉持续性阻断1h,再灌注5h的肾缺血再灌注损伤动物模型。日本大耳白兔30只,随机分成三组,每组10只:假手术对照组(S组),缺血再灌注组(IR组),缺

关键词：肾缺血再灌注损伤干预作用氧化应激川芎嗪

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YAP蛋白在HER2阳性乳腺癌拉帕替尼耐药中的作用

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第三军医大学学报 2020年第7期42卷 692-698页

作者：陈鹏徐婷郭丹黄佳祎重庆医科大学基础医学院病理生理学教研室重庆400016 重庆医科大学附属第二医院三腺外科重庆400016

目的建立乳腺癌拉帕替尼耐药细胞株,探讨Hippo通路中YAP蛋白在HER2阳性乳腺癌细胞拉帕替尼耐药中的作用及机制。方法采用逐步增加剂量与高浓度反复间歇诱导乳腺癌细胞株Skbr3对拉帕替尼耐药,耐药株命名为Skbr3-LR。用拉帕替尼同时处理... 详细信息

目的建立乳腺癌拉帕替尼耐药细胞株,探讨Hippo通路中YAP蛋白在HER2阳性乳腺癌细胞拉帕替尼耐药中的作用及机制。方法采用逐步增加剂量与高浓度反复间歇诱导乳腺癌细胞株Skbr3对拉帕替尼耐药,耐药株命名为Skbr3-LR。用拉帕替尼同时处理亲本细胞和耐药细胞株,CCK-8法检测其耐药指数;结晶紫染色和平板克隆形成实验检测细胞的存活状况;定量PCR检测上皮-间质化改变。定量PCR及Western blot检测YAP、TAZ的表达。以维替泊芬阻断耐药细胞株Skbr3-LR中YAP下游通路的激活,CCK-8法检测其细胞活性的改变并计算IC50值的变化;结晶紫染色检测细胞存活数量的变化。定量PCR及Western blot检测YAP表达的改变。结果与亲本细胞比较,结晶紫染色和平板克隆形成实验结果均显示,耐药株存活细胞数量明显增多。亲本细胞耐药指数为3.61μmol/L,耐药株耐药指数上升约8倍,为29.26μmol/L。PCR结果显示,与亲本细胞比较,耐药细胞株的上皮标志物E-cadherin表达降低,而间质标志物Twist、Vinemtin和N-cadherin表达上升,YAP/TAZ表达上升,差异均有统计学意义(P<0.05)。Western blot结果显示,耐药细胞株中总YAP和磷酸化YAP表达均较亲本细胞显著上升(P<0.05)。以维替泊芬阻断耐药细胞株YAP下游通路的激活后,其耐药指数为2.98μmol/L,较未处理的Skbr3-LR耐药指数下降约4倍;其存活细胞数量明显降低,YAP表达也明显降低(P<0.05)。结论成功建立了拉帕替尼获得性耐药的乳腺癌细胞模型,其耐药机制可能与Hippo信号通路下游的关键效应因子YAP表达异常有关。

关键词：拉帕替尼乳腺癌 Hippo YAP

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大鼠肾缺血-再灌注后p38MAPK蛋白表达的变化及银杏达莫注射液对其的影响

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中华中医药学刊 2011年第4期29卷 856-860页

作者：李丹张艳华陈少杰虞旭光林向东唐兰兰王淑君王园园黎关龙王万铁温州医学院附属乐清医院浙江温州325035 温州医学院病理生理学教研室浙江温州325035

目的:探讨银杏达莫注射液对肾缺血-再灌注损伤的保护作用及机制。方法:肾缺血1h再灌注1h建立大鼠肾缺血再灌注损伤模型,用银杏达莫注射液分别按剂量0.9、1.8、3.6mL/kg预处理7天。通过检测肾组织丙二醛含量、超氧化物歧化酶的活性及血... 详细信息

目的:探讨银杏达莫注射液对肾缺血-再灌注损伤的保护作用及机制。方法:肾缺血1h再灌注1h建立大鼠肾缺血再灌注损伤模型,用银杏达莫注射液分别按剂量0.9、1.8、3.6mL/kg预处理7天。通过检测肾组织丙二醛含量、超氧化物歧化酶的活性及血肌酐、血尿素氮的含量。电镜下观察各组肾组织的形态学变化,West-ern印迹法观察p38 MAPK蛋白的活化情况。结果:缺血再灌注损伤后,肾组织出现明显病理改变,肾组织丙二醛含量升高,超氧化物歧化酶活性下降,血肌酐、尿素氮水平升高,肾组织p-p38MAPK蛋白水平显著上升。银杏达莫注射液预处理能降低血肌酐、尿素氮水平及肾组织丙二醛含量,增强超氧化物歧化酶活性和下调p-p38MAPK蛋白水平,与模型组比较有显著性差异(P<0.05和P<0.01)。电镜观察肾组织的病理改变也明显好转。银杏达莫注射液不同剂量组之间无明显差异。结论:银杏达莫注射液对肾缺血再灌注损伤有良好的保护作用,其机制可能是通过清除氧自由基、减轻脂质过氧化反应而下调p38MAPK蛋白的表达以减轻再灌注损伤程度,进而大鼠肾功能。

关键词：肾缺血-再灌注损伤 p38MAPK 银杏达莫注射液

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内皮素-1和一氧化氮在肾缺血再灌注损伤时的动态变化及川芎嗪的干预作用

内皮素-1和一氧化氮在肾缺血再灌注损伤时的动态变化及川芎嗪的干...

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2008年浙江省肾脏病学术年会

作者：毛朝鸣陈辉乐王万铁金可可邱晓晓温州医学院第二附属医院肾内科温州医学院病理生理学教研室

目的:观测兔肾缺血再灌注损伤时内皮素-1(ET-1)和一氧化氮(NO)的动态变化,探讨川芎嗪注射液的干预作用及机制。方法:日本大耳白兔30只,随机均分为,假手术对照组(S组),缺

关键词：肾缺血再灌注损伤干预作用一氧化氮内皮素川芎嗪动态变化

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