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中国药理学通报 2025年第2期41卷 250-257页

作者：杨姣姣申晓荣闫欢杨勇樊卫平山西医科大学基础医学院微生物与免疫学教研室山西太原030000

目的探讨旋毛虫(trichinella spiralis,Ts)蛋白对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导巨噬细胞株RAW264.7产生炎症反应的影响及其机制。方法通过LPS刺激RAW264.7细胞建立炎症模型,实验共分为4组:对照(negative control,NC)组、Ts组(Ts 2 mg·L^(-1))、LPS处理组(LPS 1 mg·L^(-1))、Ts+LPS组(Ts 2 mg·L^(-1)+LPS 1 mg·L^(-1))。qRT-PCR检测巨噬细胞极化分子标志物iNOS、Arg1以及炎症因子IL-1β、IL-6的表达,Western blot检测IL-1β、IL-6、BRD2蛋白表达,免疫荧光实验检测BRD2。为探索Ts蛋白抑制炎症是否通过BRD2发挥作用,我们用siRNA靶向敲低BRD2分子,再次分组实验,qRT-PCR检测 iNOS、Arg1、IL-1β、IL-6 的表达,Western blot检测IL-1β、IL-6的表达。结果与对照组相比,LPS促进iNOS、IL-1β、IL-6及BRD2的表达,Ts蛋白干预可降低iNOS、IL-1β、IL-6、BRD2的表达。敲低 BRD2 后,Ts蛋白进一步降低iNOS,而Arg1、IL-1β、IL-6水平有所上升。结论 Ts蛋白通过调控巨噬细胞极化、抑制BRD2从而缓解LPS诱导的巨噬细胞炎症反应。

关键词：旋毛虫蛋白巨噬细胞炎症 BRD2 M1/M2极化 LPS

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人正常宫颈上皮细胞感染沙眼衣原体的基因表达谱分析

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中华微生物学和免疫学杂志 2023年第2期43卷 93-101页

作者：贾如斯辰力李明洋杨佳吴芯蕾朱珊丽温州医科大学第一临床医学院(信息与工程学院) 温州325035 武汉大学医学部基础医学院武汉430062 温州医科大学基础医学院微生物学和免疫学教研室温州325035 温州医科大学第二临床医学院温州325035

目的分析人正常宫颈上皮细胞(HcerEpic)感染沙眼衣原体(Chlamydia trachomatis,Ct)前后基因表达谱差异。方法HcerEpic细胞经DEAE-D预处理后加入E型Ct标准株,培养44 h后收集HcerEpic细胞(感染组),并以未感染Ct的HcerEpic细胞作为对照组,... 详细信息

目的分析人正常宫颈上皮细胞(HcerEpic)感染沙眼衣原体(Chlamydia trachomatis,Ct)前后基因表达谱差异。方法HcerEpic细胞经DEAE-D预处理后加入E型Ct标准株,培养44 h后收集HcerEpic细胞(感染组),并以未感染Ct的HcerEpic细胞作为对照组,提取两组总RNA后反转录并构建cDNA文库。通过高通量测序分析两组基因表达谱差异,并选择代表性基因通过实时荧光定量PCR(qPCR)验证。结果共检测23997个基因,差异基因125个,其中上调基因119个,下调基因6个;GO分析显示差异基因富集于对病毒防御反应、Ⅰ型干扰素(interferon,IFN)信号通路、对Ⅰ型IFN的细胞反应等条目;KEGG富集通路为甲型流感、单纯疱疹病毒感染、EB病毒感染、HPV感染、NOD样受体通路等相关通路。结论人正常宫颈上皮细胞感染Ct前后转录组存在差异,差异基因主要富集于IFN通路,与细胞抗病毒过程密切相关。qPCR验证了ISG15、IFIT2、OASL、UBE2L6等差异显著且与IFN通路密切相关的基因。

关键词：沙眼衣原体宫颈上皮细胞转录组差异表达基因

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系统性红斑狼疮患者外周血单个核细胞中HCMV基因表达谱及其特异性抗体特征

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病毒学报 2023年第1期39卷 113-123页

作者：施昕妤谢尚丹项超丽李宝青陈朝生薛向阳章慧娣温州医科大学基础医学院、分子病毒学与免疫学研究所、微生物与免疫学教研室温州325000 浙江大学医学院免疫研究所杭州310000 温州医科大学附属第二医院温州325000 温州医科大学附属第一医院温州325000

人类巨细胞病毒(Human cytomegalovirus,HCMV)感染是系统性红斑狼疮(Systemic lupus erythematosus,SLE)的重要病因,并会加剧疾病进展。然而,SLE患者外周血单个核细胞(Peripheral blood mononuclear cell,PBMC)中HCMV基因的表达谱及其特异性抗体特征尚未完全阐明,并且HCMV蛋白特异性抗体水平与SLE患者临床特征的相关性尚未得到证实。通过Poly(A)建库的mRNA转录组测序(Poly(A)RNA-Seq)检测3例SLE患者和3例健康对照者(Healthy control,HC)的PBMC中的HCMV基因表达谱。然后在10例SLE患者和10例HC的链特异性建库的mRNA转录组测序(strand-specific RNA-seq)结果中验证检测到的HCMV基因。除此之外,通过免疫信息学分析筛选HCMV基因的B细胞表位。ELISA用于检测120例SLE患者和75例HC血清中的HCMV特异性抗体水平,并将其与患者的临床特征相关联。本研究在SLE患者和HC的PBMC中检测到8个HCMV基因。免疫信息学分析筛选出7个HCMV基因的优势B细胞表位。与HC相比,SLE患者血清中UL32和UL82特异性抗体显著降低。UL32特异性抗体可能与SLE患者血细胞功能异常有关。UL82特异性抗体可能参与SLE患者免疫系统功能异常和肾脏功能障碍。受试者工作特征曲线(Receiver operating characteristic,ROC)分析表明,其中UL32特异性抗体可以有效区分SLE患者和HC。

关键词：人巨细胞病毒系统性红斑狼疮外周血单个核细胞 B细胞表位

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乳双歧杆菌对旋毛虫感染小鼠炎性细胞因子及肠道菌群的影响

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医学动物防制 2023年第3期39卷 282-287,293页

作者：迟茜文解文利姚梦玮李玉迁魏洪贵州医科大学基础医学院感染与免疫学实验室贵阳550025 贵州医科大学基础医学院微生物学教研室

目的探究不同剂量乳双歧杆菌对旋毛虫感染小鼠的虫荷量、炎症调节作用及肠道菌群组成的影响。方法取感染旋毛虫的小鼠(300条/只)随机分为模型组、乳双歧杆菌高剂量组、中剂量组、低剂量组,未感染旋毛虫小鼠作为空白对照组;高、中、低剂... 详细信息

目的探究不同剂量乳双歧杆菌对旋毛虫感染小鼠的虫荷量、炎症调节作用及肠道菌群组成的影响。方法取感染旋毛虫的小鼠(300条/只)随机分为模型组、乳双歧杆菌高剂量组、中剂量组、低剂量组,未感染旋毛虫小鼠作为空白对照组;高、中、低剂量组分别给予乳双歧杆菌灌胃,模型组和空白对照组每日给予等量磷酸缓冲盐溶液(phosphate buffered saline,PBS)连续灌胃30 d;胃蛋白酶消化法检测各组第7 d肠道成虫数量及第30 d肌肉幼虫数量。ELISA法检测各组模型小鼠血清中白细胞介素10(Interleukin-10,IL-10)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor,TNF-α)水平,采集各组小鼠肠道感染期粪便样本,采用16S rDNA高通量测序进行微生物组生物信息学分析,评估样本多样性和分类学特征。结果虫荷量结果显示,高剂量乳双歧杆菌显著降低旋毛虫感染小鼠第7 d肠道成虫及第30 d肌肉幼虫数量(P<0.05);炎性因子水平检测发现高剂量乳双歧杆菌使旋毛虫感染小鼠血清抑炎因子(IL-10)水平升高(P<0.05),促炎因子(TNF-α)水平降低(P<0.05)。肠道微生物组成结果显示,乳双歧杆菌干预使感染小鼠厚壁菌门与拟杆菌门比值上升,降低普雷沃菌属丰度,高剂量组中异杆菌属、颤螺菌属丰度增加,中剂量组中布劳特菌属增加。结论乳双歧杆菌能改善旋毛虫感染小鼠炎症表现,促进旋毛虫清除,提高感染小鼠肠道内有益菌丰度。

关键词：乳双歧杆菌旋毛虫肠道菌群虫荷量炎性因子

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白纹伊蚊唾液蛋白诱导的免疫应答对小鼠体内2型登革病毒感染的影响

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中国热带医学 2025年第5期25卷 588-593页

作者：周璐黄贞植牟安阳秦菲吴家红商正玲贵州医科大学基础医学院免疫学教研室贵州省微生物组与传染性疾病防控重点实验室贵州医科大学基础医学院寄生虫学教研室

目的探究白纹伊蚊唾液蛋白（mosquito salivary protein,MSP）诱导的免疫应答对Ⅰ型干扰素受体缺陷(IfnaR-/-)鼠中2型登革病毒（dengue virus,DENV-2）感染的影响。方法使用白纹伊蚊（广州株）雌蚊叮咬IfnaR-/-鼠，每周1次，连续4... 详细信息

目的探究白纹伊蚊唾液蛋白（mosquito salivary protein,MSP）诱导的免疫应答对Ⅰ型干扰素受体缺陷(IfnaR-/-)鼠中2型登革病毒（dengue virus,DENV-2）感染的影响。方法使用白纹伊蚊（广州株）雌蚊叮咬IfnaR-/-鼠，每周1次，连续4周进行主动免疫，并观察其饱血情况，末次叮咬后3周获取免疫血清。Western blot检测鼠血清中抗MSP抗体。间接ELISA法检测抗MSP IgG的效价及其亚类。使用NanojectⅡ自动纳升注射器（Drummond）将10～7TCID50/mL的DENV2显微注射入蚊胸部，采用实时荧光定量逆转录PCR（real-time quantitative reverse transcription PCR,qRT-PCR）检测不同时间点蚊唾液腺中DENV-E基因水平。使用DENV-2感染的雌蚊叮咬小鼠，qRT-PCR检测免疫/未免疫组蚊体内病毒残留量。蚊叮咬感染5 d后，qRT-PCR检测免疫/未免疫鼠不同组织中DENV-E基因的核酸变化；病毒空斑实验测定鼠脑组织中活病毒含量。结果 Western blot显示鼠血清中含有针对多种MSP的特异性IgG。抗MSP IgG效价可达1∶800，以IgG1为主，且可维持21 d。胸腔注射10 d后蚊唾液腺中DENV-E基因含量达复制平台期。叮咬完成后qRT-PCR结果显示蚊唾液腺中的余留病毒量，推测2组小鼠初始感染量相近。免疫组鼠的脾脏，肝脏，脑组织中的病毒核酸含量明显低于未免疫组（P<0.001），且脑组织中活病毒量低（P<0.001）。结论蚊唾液蛋白诱发的适应性免疫具有抑制DENV-2感染的效应，为探究白纹伊蚊唾液蛋白具有抗病毒的免疫原组分提供实验基础。

关键词：白纹伊蚊唾液蛋白登革病毒抗蚊唾液蛋白抗体免疫应答

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白纹伊蚊唾液蛋白诱导的免疫应答对小鼠体内DENV-2感染的影响

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中国热带医学 2025年

目的探究白纹伊蚊唾液蛋白（mosquito salivary protein， MSP）诱导的免疫应答对Ⅰ型干扰素受体缺陷(IfnaR-/-)鼠中2型登革病毒（dengue virus ， DENV-2）感染的影响。方法使用白纹伊蚊（广州株）雌蚊每周叮咬1次，连续4周免疫IfnaR... 详细信息

目的探究白纹伊蚊唾液蛋白（mosquito salivary protein， MSP）诱导的免疫应答对Ⅰ型干扰素受体缺陷(IfnaR-/-)鼠中2型登革病毒（dengue virus ， DENV-2）感染的影响。方法使用白纹伊蚊（广州株）雌蚊每周叮咬1次，连续4周免疫IfnaR-/-鼠，并观察其饱血情况，末次叮咬后3周获取免疫血清。Western blot检测鼠血清中抗MSP抗体。间接ELISA法检测抗MSP IgG的效价及其亚类。使用Nanoject Ⅱ自动纳升注射器（Drummond）将107TCID50/mL的DENV2显微注射入蚊胸部，采用实时荧光定量逆转录PCR（ real-time quantitative reverse transcription PCR， qRT-PCR）检测不同时间点蚊唾液腺中DENV-E基因水平。使用DENV-2感染的雌蚊叮咬小鼠，qRT-PCR检测免疫/未免疫组蚊体内病毒残留量。蚊叮咬感染5 d后，qRT-PCR检测免疫/未免疫鼠不同组织中DENV-E基因的核酸变化；病毒空斑实验测定鼠脑组织中活病毒含量。结果 Western blot显示鼠血清中含有针对多种MSP的特异性IgG。抗MSP IgG效价可达1:800，以IgG1为主，且可维持21 d。胸腔注射10 d后蚊唾液腺中DENV-E基因含量达复制平台期。叮咬完成后qRT-PCR结果显示蚊唾液腺中的余留病毒量，推测两组小鼠初始感染量相近。免疫组鼠的脾脏，肝脏，脑组织中的病毒核酸含量明显低于未免疫组（P<0.0001），且脑组织中活病毒量低（P<0.0013）。结论蚊唾液蛋白诱发的适应性免疫具有抑制DENV-2感染的效应，为探究白纹伊蚊唾液蛋白具有抗病毒的免疫原组分提供实验基础。

关键词：白纹伊蚊唾液蛋白登革病毒抗蚊唾液蛋白抗体免疫应答

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复合益生菌制剂缓解cuprizone诱导的小鼠神经脱髓鞘

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微生物学报 2022年第3期62卷 774-784页

作者：杨昊李琳刘青青康行杨晓丹刘海霞樊卫平山西医科大学基础医学院微生物与免疫学教研室山西晋中030619

【目的】探索复合益生菌制剂对双环己酮草酰二腙(cuprizone,CPZ)诱导的小鼠脑内神经脱髓鞘的作用。【方法】将27只小鼠随机分为正常组(NC)、模型组(CPZ)和益生菌处理组(probiotics)。NC组小鼠正常饲喂,CPZ组和probiotics组小鼠饲喂含0.2... 详细信息

【目的】探索复合益生菌制剂对双环己酮草酰二腙(cuprizone,CPZ)诱导的小鼠脑内神经脱髓鞘的作用。【方法】将27只小鼠随机分为正常组(NC)、模型组(CPZ)和益生菌处理组(probiotics)。NC组小鼠正常饲喂,CPZ组和probiotics组小鼠饲喂含0.2%CPZ的饲料且每天分别灌饲0.2 mL生理盐水及同体积(75亿菌落形成单位活菌)的复合益生菌制剂,6周后处死小鼠。通过快蓝染色(LFB)观察小鼠脑内神经髓鞘的完整性;苏木素-伊红染色(HE)、阿利新蓝染色及免疫荧光染色分别评估回肠及结肠组织病理学改变、黏蛋白的表达及紧密连接蛋白ZO-1、occludin的表达;ELISA检测脑组织匀浆脂多糖LPS水平;Western blotting检测脑组织TLR4/NF-κB信号通路的蛋白表达。【结果】与CPZ组相比,复合益生菌制剂干预后,发生在CPZ组小鼠大脑胼胝体内的神经脱髓鞘明显减少;回肠绒毛排列整齐致密,结肠腺体增多,炎细胞浸润减少,黏蛋白及紧密连接蛋白表达均增加;脑组织LPS水平显著降低,TLR4、NF-κB及P-IκB/IκB蛋白表达量下降。【结论】复合益生菌制剂可能通过降低肠壁通透性缓解CPZ诱导的小鼠中枢神经系统脱髓鞘。

关键词：双环己酮草酰二腙多发性硬化症(MS) 脱髓鞘益生菌肠屏障

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寻常性银屑病患者皮肤菌群差异研究

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临床皮肤科杂志 2024年第7期53卷 393-399页

作者：秦欢熊琦马龙徐运娥黄洋晏文王玉遵义医科大学基础医学院微生物学教研室贵州遵义563000 遵义医科大学附属医院皮肤科贵州遵义563000 遵义医科大学基础医学院免疫学教研室贵州遵义563000

目的:阐明贵州地区银屑病患者皮损样本、正常皮肤样本及健康人群皮肤样本之间皮肤定植微生物的差异。方法:纳入15例寻常性银屑病患者及6例健康志愿者,采集患者皮损样本、正常皮肤样本及志愿者健康皮肤样本微生物,提取DNA并扩增细菌、真... 详细信息

目的:阐明贵州地区银屑病患者皮损样本、正常皮肤样本及健康人群皮肤样本之间皮肤定植微生物的差异。方法:纳入15例寻常性银屑病患者及6例健康志愿者,采集患者皮损样本、正常皮肤样本及志愿者健康皮肤样本微生物,提取DNA并扩增细菌、真核微生物、真菌、古细菌扩增子,采用16S rDNA基因测序,分析微生物组成及丰度。结果:银屑病患者皮损部位微生物多样性较银屑病患者正常皮肤微生物高;组成成分分析发现其组成与正常皮肤表面微生物分离,呈现明显的聚类趋势。与银屑病患者正常皮肤微生物组成比较,银屑病患者皮损部位特异性高分布的菌群包括梭状芽胞杆菌纲-梭菌目-瘤胃菌科、梭状芽胞杆菌纲-梭菌目-毛螺旋菌科以及拟杆菌纲-拟杆菌目-拟杆菌科;而微生物低丰度菌群为乳杆菌目-乳酸细菌科以及假单胞菌目-莫拉菌科。结论:相比于银屑病患者正常皮肤定植的微生物,皮损部位微生物呈现特征性改变,提示差异性分布菌群可能是银屑病潜在的生物标志物。

关键词：银屑病皮肤微生物 16S rDNA 生物标志物

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炎症细胞因子与不同特征重性抑郁障碍的相关性

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中国免疫学杂志 2024年第4期40卷 791-795页

作者：闵雪王彦芳姚红张云巧山西医科大学基础医学院微生物与免疫学教研室太原030000 山西医科大学第一附属医院精神卫生科太原030000

目的:探讨血清炎症细胞因子与不同特征重性抑郁障碍的相关性。方法:ELISA检测血清炎症细胞因子,比较忧郁/动力不足特征(MPD)组、焦虑/躯体特征(ASD)组和健康对照(HC)组之间血清炎症细胞因子的差异。Spearman法分析炎症细胞因子与HAMD-1... 详细信息

目的:探讨血清炎症细胞因子与不同特征重性抑郁障碍的相关性。方法:ELISA检测血清炎症细胞因子,比较忧郁/动力不足特征(MPD)组、焦虑/躯体特征(ASD)组和健康对照(HC)组之间血清炎症细胞因子的差异。Spearman法分析炎症细胞因子与HAMD-17总分及各项因子分的相关性,二元Logistic回归分析测定不同特征重性抑郁障碍的独立危险因素。结果:与HC组和ASD组比较,MPD组血清IFN-α、IL-6水平升高(P<0.05);MPD组血清TNF-α水平与认知障碍因子分呈负相关(P<0.05),ASD组血清TNF-α水平与认知障碍因子分呈负相关(P<0.05),IL-6水平与睡眠障碍因子分呈负相关(P<0.05)。结论:炎症细胞因子与不同特征重性抑郁障碍的症状关联,IFN-α、TNF-α、IL-6、IL-10是忧郁/动力不足重性抑郁障碍的独立危险因素。IFN-α、IL-6可能作为区分忧郁/动力不足和焦虑/躯体重性抑郁障碍的客观生物标志物。

关键词：炎症细胞因子免疫重性抑郁障碍忧郁/动力不足特征焦虑/躯体特征

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防御素在抗结核分枝杆菌感染中的作用机制研究进展

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中国病原生物学杂志 2023年第1期18卷 121-125页

作者：高雪涵朱杰华刘利萍蒙祖迪亓凯卫麟娜秦欢罗军敏遵义医科大学基础医学院免疫学教研室贵州遵义563000 遵义医科大学附属医院医学检验科遵义医科大学基础医学院微生物学教研室

防御素是广泛分布于生物界的一类富含半胱氨酸的内源性阳离子抗菌肽,在抵抗病原微生物入侵及调节机体免疫功能等方面发挥重要作用。研究发现,防御素对细菌、真菌或病毒等均具有杀灭作用,其在抗结核分枝杆菌感染中也展现出突出优势。防... 详细信息

防御素是广泛分布于生物界的一类富含半胱氨酸的内源性阳离子抗菌肽,在抵抗病原微生物入侵及调节机体免疫功能等方面发挥重要作用。研究发现,防御素对细菌、真菌或病毒等均具有杀灭作用,其在抗结核分枝杆菌感染中也展现出突出优势。防御素独特的抗菌机理可以破坏结核分枝杆菌的细胞壁、细胞膜等生物学结构,从而抑制结核分枝杆菌。本文对防御素的分子结构、生物学作用、抗结核作用及机制予以综述。

关键词：防御素抗菌肽结核分枝杆菌机制免疫应答综述

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