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南方医科大学学报 2018年第1期38卷 69-74页

作者：宋长宝魏金星李绿肖中举南方医科大学基础医学院生理学教研室广东广州510515

目的探究神经元对刺激声音听觉响应的发放模式本身是否影响刺激特异性适应(SSA)特性。方法以清醒小鼠的下丘神经元为研究对象,采用玻璃微电极贴附式记录下丘神经元在由两个不同频率(f1和f2)的纯音按不同重复概率随机组成的声音刺激序列... 详细信息

目的探究神经元对刺激声音听觉响应的发放模式本身是否影响刺激特异性适应(SSA)特性。方法以清醒小鼠的下丘神经元为研究对象,采用玻璃微电极贴附式记录下丘神经元在由两个不同频率(f1和f2)的纯音按不同重复概率随机组成的声音刺激序列下的听觉响应。并计算两个纯音总体或局部在标准刺激条件下的响应s(f1)与s(f2)即f1、f2作为标准声音时引起的神经元响应和在偏差刺激条件下的响应d(f1)与d(f2)即f1、f2作为偏差声音时引起的神经元响应。随后计算3个重要指标:(1)两个纯音的听觉响应强度差异指数(FDI);(2)频率特异的SSA指数(SI);(3)SSA指数(CSI),最后对数据进行统计分析。结果FDI较大神经元的CSI显著高于FDI较小的神经元(P<0.05),并且响应类型为初级响应型的神经元在不同时间段的SSA表现不同,相对于起始部分,持续部分的SSA显著地增高(P<0.05)。结论刺激声音的听觉响应模式也是SSA的重要影响因素。

关键词：刺激特异性适应响应模式清醒小鼠下丘神经元

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雌性小鼠次级听皮层对通讯声音的响应识别和修饰加工

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南方医科大学学报 2021年第7期41卷 1079-1086页

作者：雷书君肖中举南方医科大学基础医学院生理学教研室广东广州510515

目的研究C57雌鼠次级听皮层(A2)对乳鼠叫声(WC)的响应特点及机制。方法使用在体膜片钳技术和免疫荧光染色标记技术,标记和记录A2声诱发神经元的动作电位发放情况及细胞类型。对照组:使用纯音(Tone)和白噪音(Noise)刺激小鼠。WC声刺激组... 详细信息

目的研究C57雌鼠次级听皮层(A2)对乳鼠叫声(WC)的响应特点及机制。方法使用在体膜片钳技术和免疫荧光染色标记技术,标记和记录A2声诱发神经元的动作电位发放情况及细胞类型。对照组:使用纯音(Tone)和白噪音(Noise)刺激小鼠。WC声刺激组:使用WC声刺激小鼠,提取WC声中4,5 kHz,9 kHz,13.5 kHz的声波,设置为单一频率模拟组:使用4.5、9、13.5 kHz声波刺激小鼠。双频率模拟组:使用4.5 kHz+9 kHz,9 kHz+13.5 khz,4.5 kHz+13.5 kHz的组合声波刺激雌鼠。三频率模拟组:使用4 kHz+7.7 kHz+13.5 kHz和4.5 kHz 9 kHz+13.5 kHz的组合声波刺激小鼠。最后分析A2单个神经元对WC声以及各组模拟WC声的组合声、Tone、Noise的声诱发动作电位的发放模式、发放数、阈值、延时等情况。结果通过比较次级听皮层神经元对WC声、各组WC声的模拟声、Tone和Noise的响应发放数,发现在次级听皮层存在3种对WC敏感性不同的神经元,其中,对WC声敏感的神经元,它对WC声的平均响应发放数明显高于对各类模拟声和Noise的平均响应发放数,有统计学差异(P<0.001);比较这3类神经元对WC声、Tone、Noise的反应延时和阈值,发现对WC敏感的神经元和对WC不敏感的神经元对WC声的平均反应延时长于对纯音的平均反应延时,有统计学差异(P=0.002),但与对Noise的平均反应延时比较,则并无统计学差异(P=0.093);对WC声敏感的神经元对WC声的响应阈值低于对Tone、Noise的阈值(P=0.02);通过对神经元动作电位发放模式的分析,发现对WC声敏感的神经元主要是由小白蛋白抑制性中间神经元(PV)组成;免疫荧光双染结果提示实验组中对WC响应的A2神经元中,确实存在抑制性中间神经元。结论在雌性小鼠A2中,存在对WC通讯声敏感性不同的3种神经元。其中对WC声敏感的神经元主要是PV神经元,它对于不同类型声音的响应特性,有助于解释次级听皮层对通讯声音识别响应和修饰加工的机制。

关键词：次级听皮层小白蛋白中间神经元乳鼠蠕动声 GABA能神经元

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低氧高二氧化碳对大鼠肺动脉平滑肌细胞KATP通道表达的影响及其与p38MAPK通路的关系

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生理学报 2014年第3期66卷 283-288页

作者：马迎春黄林静郑梦晓王园园应磊王万铁温州医科大学基础医学院病理生理学教研室温州325035 温州医科大学浙江省立同德医院病理科杭州310012 温州医科大学缺血-再灌注损伤研究所温州325035

本文旨在探究ATP敏感性钾通道(KATP)在大鼠低氧高二氧化碳性肺动脉平滑肌细胞(pulmonary artery smooth muscle cells,PASMCs)中的表达及其与p38 MAPK信号通路的关系。体外培养SD大鼠PASMCs,复制低氧高二氧化碳模型,采用RTPCR技术及免... 详细信息

本文旨在探究ATP敏感性钾通道(KATP)在大鼠低氧高二氧化碳性肺动脉平滑肌细胞(pulmonary artery smooth muscle cells,PASMCs)中的表达及其与p38 MAPK信号通路的关系。体外培养SD大鼠PASMCs,复制低氧高二氧化碳模型,采用RTPCR技术及免疫印迹法检测KATP亚基磺酰脲类受体2B(sulfonylurea receptor 2B,SUR2B)和内向整流钾通道6.1(Kir6.1)mRNA及蛋白的表达水平。结果显示:(1)与常氧组(N组)、低氧高二氧化碳组(H组)、低氧高二氧化碳+溶剂DMSO对照组(HD组)、低氧高二氧化碳+p38 MAPK通路抑制剂SB203580组(HS组)相比,低氧高二氧化碳+p38 MAPK通路激动剂茴香霉素(Anisomycin)组(HA组)Kir6.1 mRNA与蛋白表达均明显降低(P<0.01),N组、H组、HD组、HS组间Kir6.1 mRNA与蛋白表达差异不显著(P>0.05);(2)与N组相比,H组、HD组、HS组、HA组SUR2B mRNA与蛋白表达均明显上升(P<0.05),H组、HD组、HS组、HA组间SUR2B mRNA与蛋白表达差异不显著(P>0.05)。以上结果提示:(1)低氧高二氧化碳、SB203580均没有引起Kir6.1 mRNA与蛋白表达变化,而茴香霉素下调Kir6.1 mRNA与蛋白表达,Kir6.1可能受其它类型的MAPK通路的调节;(2)低氧高二氧化碳明显上调SUR2B mRNA与蛋白表达,而SB203580、茴香霉素不影响低氧高二氧化碳所引起的SUR2B表达上调,低氧高二氧化碳引起的SUR2B表达的升高可能是非p38 MAPK通路依赖性的。

关键词：低氧高二氧化碳 ATP敏感性钾通道内向整流钾通道61 磺酰脲类受体2B p38丝裂原活化蛋白激酶大鼠

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别孕烯醇酮对帕金森病模型小鼠黑质多巴胺能神经元的影响及可能的分子机制

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解剖学报 2020年第4期51卷 473-482页

作者：王彤彤陈治池叶鑫边维杜娟娟傅维达陈梦娇李俊楠孙臣友温州医科大学基础医学院人体解剖学教研室浙江温州325035 台州职业技术学院医学与制药工程学院浙江台州318000 温州医科大学基础医学院神经科学研究所浙江温州325035 温州医科大学基础医学院组织学胚胎学教研室浙江温州325035 温州医科大学第一临床医学院浙江温州325035

目的探讨别孕烯醇酮(APα)对帕金森病(PD)小鼠黑质-纹状体多巴胺能系统及行为学的影响及可能的分子机制。方法90只3月龄体重为20~25 g雄性C57BL/6小鼠1侧纹状体被注射6-羟多巴胺(6-OHDA)复制小鼠PD模型,再给予APα及γ-氨基丁酸A受体(GA... 详细信息

目的探讨别孕烯醇酮(APα)对帕金森病(PD)小鼠黑质-纹状体多巴胺能系统及行为学的影响及可能的分子机制。方法90只3月龄体重为20~25 g雄性C57BL/6小鼠1侧纹状体被注射6-羟多巴胺(6-OHDA)复制小鼠PD模型,再给予APα及γ-氨基丁酸A受体(GABAAR)拮抗剂荷包牡丹碱(Bic)。采用ELISA检测血清及大脑皮质APα含量和纹状体多巴胺水平,免疫组织化学法检测黑质多巴胺能神经元及其纹状体纤维投射数量的变化,Western blotting检测中脑胞膜GABAAR、胞质及胞核各蛋白水平的变化,并通过免疫共沉淀验证它们之间的相互作用,观察小鼠行为学的变化。结果PD小鼠大脑皮质内源性APα水平显著降低,黑质多巴胺能阳性神经元及其纹状体纤维投射含量下降,胞膜、胞质和胞核各蛋白的水平也明显下降,小鼠的运动功能发生障碍。在给予外源性APα处理后,上述情况均有所改善。但在应用Bic后,上述调控GABAAR/钙离子-钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱδ3/脑源性神经营养因子信号呈现相反的变化,免疫共沉淀结果显示,蛋白之间存在相互作用。结论外源性的APα通过增加其内源性水平调控GABAAR/钙离子-钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱδ3/脑源性神经营养因子信号通路促进PD模型小鼠黑质-纹状体多巴胺能神经系统和小鼠行为学的改善。

关键词：别孕烯醇酮帕金森病多巴胺能神经元钙离子-钙调素依赖性蛋白激酶Ⅱδ3 脑源性神经营养因子免疫印迹法小鼠

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大蒜素诱导鼠肝癌细胞***细胞株凋亡

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复旦学报（医学版） 2006年第2期33卷 240-243页

作者：张燕沈宜汤为学重庆医科大学基础医学院病理生理教研室重庆400016

目的探讨大蒜素对体外培养的鼠肝癌细胞***生长的抑制和诱导细胞凋亡的作用。方法用MTT法检测药物效应,透射电镜及流式细胞仪观察大蒜素处理***细胞后细胞凋亡和细胞周期的改变。结果①MTT法证实大蒜素对***细胞生长有抑制作用,呈浓度... 详细信息

目的探讨大蒜素对体外培养的鼠肝癌细胞***生长的抑制和诱导细胞凋亡的作用。方法用MTT法检测药物效应,透射电镜及流式细胞仪观察大蒜素处理***细胞后细胞凋亡和细胞周期的改变。结果①MTT法证实大蒜素对***细胞生长有抑制作用,呈浓度、剂量-效应关系。②DAN琼脂糖凝胶电泳可见细胞凋亡特征性“DAN梯形”。③流式细胞仪检测发现大蒜素处理***细胞后细胞周期滞留于G0/G1期,对照组及实验组细胞凋亡率分别为(4.98±4.841)%、(20.91±5.272)%,并可见凋亡峰。④透射电镜可见***细胞出现凋亡细胞形态学改变。结论大蒜素对鼠肝癌细胞***有抑制作用,其抑制作用可能与诱导肝癌细胞凋亡、阻抑细胞周期有关。

关键词：抑制肿瘤凋亡细胞周期

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三七总皂苷对家兔离体小肠平滑肌自发收缩活动的影响

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中国应用生理学杂志 2010年第1期26卷 117-120页

作者：李茜关玥马会杰郭赞何瑞荣张翼河北医科大学基础医学院生理教研室石家庄050017

目的:观察三七总皂苷对家兔离体小肠平滑肌收缩活动的影响,并探讨其作用机制。方法:取健康家兔,雌雄不拘,将小肠离体后恒温灌流,观察三七总皂苷对家兔小肠自发收缩活动的影响;在灌流液中分别加入BayK8644、左旋硝基精氨酸甲酯(L-NAME)... 详细信息

目的:观察三七总皂苷对家兔离体小肠平滑肌收缩活动的影响,并探讨其作用机制。方法:取健康家兔,雌雄不拘,将小肠离体后恒温灌流,观察三七总皂苷对家兔小肠自发收缩活动的影响;在灌流液中分别加入BayK8644、左旋硝基精氨酸甲酯(L-NAME)后再加入三七总皂苷,研究其作用机制;在无钙台式液中加入rynodine后再加入三七总皂苷,研究其作用机制。结果:三七总皂苷剂量依赖性的抑制家兔离体小肠平滑肌收缩的幅度。BayK8644和L-NAME均可完全阻断三七总皂苷对家兔小肠平滑肌收缩活动的抑制作用。在无钙台式液中,三七总皂苷显著抑制rynodine引起的细胞内钙收缩活动。结论:三七总皂苷显著抑制家兔小肠平滑肌的收缩活动,其抑制收缩活动机制可能是:增加小肠平滑肌NO浓度,从而抑制细胞外钙内流和内钙释放。

关键词：三七总皂苷小肠平滑肌收缩活动钙离子

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5-羟色胺转运体基因异体表达模型的建立

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中国应用生理学杂志 2005年第4期21卷 444-448页

作者：王艺颖金珠李慈珍刘远谋上海第二医科大学基础医学院生理教研室上海200025

目的:探讨建立5-羟色胺转运体(5-HTT)基因异体表达模型的可行性,且为进一步探讨5-羟色胺重摄取的动力过程和条件以及其功能的调控机制奠定基础。方法:利用体外转录cRNA技术将克隆至pOTV中的5-HTT的cDNA转录、合成5HTT的cRNA,通过显微注... 详细信息

目的:探讨建立5-羟色胺转运体(5-HTT)基因异体表达模型的可行性,且为进一步探讨5-羟色胺重摄取的动力过程和条件以及其功能的调控机制奠定基础。方法:利用体外转录cRNA技术将克隆至pOTV中的5-HTT的cDNA转录、合成5HTT的cRNA,通过显微注射技术将该cRNA注入成熟雌性非洲爪蟾卵母细胞的胞质中,使其表达以建立5-羟色胺转运体(SERT)的异体表达模型,并用电压钳技术检测其转运功能。结果:爪蟾卵母细胞可被用做5-HTT的异体表达模型,其转运功能呈浓度依赖性并具饱和现象,转运过程可被特异阻断剂De-sipramine阻断。结论:非洲爪蟾卵母细胞可作为5-羟色胺等单胺类神经递质转运体的异体表达系统,为进一步研究转运体蛋白的功能和调控提供了有效工具。

关键词： 5-HT转运体(SERT) 卵母细胞异体表达电压钳

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大鼠海马神经细胞体外缺糖缺氧模型制备方法的改进

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中国组织工程研究 2007年第15期11卷 2810-2813页

作者：田映红李树基李晓文高天明南方医科大学基础医学院生理教研室南方医科大学基础医学院神经生物学教研室

目的:改进培养大鼠海马神经细胞体外缺糖缺氧模型制备方法,并通过兴奋性氨基酸N-甲基-D-天冬氨酸受体拮抗剂进行验证。方法:实验于2004-09/2005-06在南方医科大学基础医学院神经生物学教研室进行。实验材料:出生1d内清洁级SD大鼠,由南... 详细信息

目的:改进培养大鼠海马神经细胞体外缺糖缺氧模型制备方法,并通过兴奋性氨基酸N-甲基-D-天冬氨酸受体拮抗剂进行验证。方法:实验于2004-09/2005-06在南方医科大学基础医学院神经生物学教研室进行。实验材料:出生1d内清洁级SD大鼠,由南方医科大学实验动物中心提供(合格证号为粤证监字2004B023号)。N-甲基-D-天冬氨酸受体拮抗剂5-甲基二氢丙环庚烯亚胺马来酸(MK-801)和D-2-氨基-5-磷酰基戊酸(d-APV)购自Sigma公司。实验方法:取新生1dSD大鼠海马组织作神经细胞分散细胞原代培养,培养到13d时进行氧/葡萄糖剥夺模型的制备:将neurobasal培养基更换为不含葡萄糖的BSSo培养基,连续充以50mL/LCO2+950mL/LN2(体积比)混合气体。缺氧30,45,60,90min后取出细胞,更换为正常neurobasal培养基,恢复正常条件继续培养。将神经细胞随机分为正常对照组、单纯缺氧组、无糖缺氧组、MK-801组和d-APV组。将10μmol/LMK-801和500μmol/Ld-APV在通50mL/LCO2+950mL/LN2混合气前加入到BSSo培养基,缺氧结束后随BSSo培养基一起去掉。复氧24h后采用MTT比色法测神经细胞成活率及Hoechst荧光染料法测神经细胞凋亡率。结果:①随着氧/葡萄糖剥夺时间延长,神经细胞存活率下降。氧/葡萄糖剥夺30,45,60,90min再复氧24h,神经细胞存活率分别为(81.48±3.84)%、(63.14±3.14)%、(41.73±2.97)%和(16.78±2.12)%。②N-甲基-D-天冬氨酸受体拮抗剂MK-801(10μmol/L)和d-APV(500μmol/L)均能明显增加神经细胞存活率(P<0.05),并且两组细胞存活率与正常对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:实验制备的海马神经细胞短时间氧/葡萄糖剥夺模型可对神经细胞造成迟发性死亡,兴奋性氨基酸N-甲基-D-天冬氨酸受体拮抗剂可保护氧/葡萄糖剥夺诱导的神经细胞损伤,说明本实验建立的缺氧模型有效并简便可靠,并且缩短了缺氧时间。

关键词：缺氧模型海马神经元培养凋亡

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京尼平对小鼠棕色和白色脂肪组织UCP1表达的影响

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中国应用生理学杂志 2019年第1期35卷 74-78页

作者：申娜娜宫德正邹丰锴严宇关莉莉邹原大连医科大学基础医学院生理教研室辽宁大连116044

目的:棕色脂肪组织活化和白色脂肪组织棕化是改善减肥的良好策略。本研究利用冷刺激作为阳性对照,观察京尼平对小鼠脂肪组织活化与棕化的作用。方法:8周龄雄性C57BL/6J小鼠30只,随机分为正常对照组、京尼平组、冷刺激组,每组10只。京尼... 详细信息

目的:棕色脂肪组织活化和白色脂肪组织棕化是改善减肥的良好策略。本研究利用冷刺激作为阳性对照,观察京尼平对小鼠脂肪组织活化与棕化的作用。方法:8周龄雄性C57BL/6J小鼠30只,随机分为正常对照组、京尼平组、冷刺激组,每组10只。京尼平组小鼠腹腔注射给予京尼平处理(15 mg/(kg·d),连续9 d),对照组用生理盐水处理,冷刺激组小鼠在室温(22℃±2℃)下处理4 d后,置于4℃环境中进行冷刺激处理5 d(24 h/d)。检测各组小鼠每天摄食量、体重和体温变化,取肩胛下区、腹股沟区及附睾周围部分脂肪组织观察形态学的变化,测定棕色脂肪组织、皮下白色脂肪组织以及内脏白色脂肪组织解偶联蛋白1(UCP1)的表达。结果:与正常对照组相比,京尼平组小鼠白色脂肪湿重下降16%,冷刺激组下降28%,均有明显差异(P<0.05);京尼平组和冷刺激组白色脂肪组织颜色变深,HE染色显示脂肪细胞内的脂滴变小,数量增加;京尼平组小鼠的皮下、内脏白色脂肪组织和棕色3种脂肪组织中的UCP1表达量均明显增加(P<0.05)。结论:京尼平通过上调UCP1的表达促进棕色脂肪组织活化和白色脂肪组织棕化,此效应是京尼平降脂减轻体重的作用机制之一。

关键词：京尼平冷刺激棕色脂肪组织白色脂肪组织解偶联蛋白1 小鼠

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人正常宫颈上皮细胞感染沙眼衣原体的基因表达谱分析

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中华微生物学和免疫学杂志 2023年第2期43卷 93-101页

作者：贾如斯辰力李明洋杨佳吴芯蕾朱珊丽温州医科大学第一临床医学院(信息与工程学院) 温州325035 武汉大学医学部基础医学院武汉430062 温州医科大学基础医学院微生物学和免疫学教研室温州325035 温州医科大学第二临床医学院温州325035

目的分析人正常宫颈上皮细胞(HcerEpic)感染沙眼衣原体(Chlamydia trachomatis,Ct)前后基因表达谱差异。方法HcerEpic细胞经DEAE-D预处理后加入E型Ct标准株,培养44 h后收集HcerEpic细胞(感染组),并以未感染Ct的HcerEpic细胞作为对照组,... 详细信息

目的分析人正常宫颈上皮细胞(HcerEpic)感染沙眼衣原体(Chlamydia trachomatis,Ct)前后基因表达谱差异。方法HcerEpic细胞经DEAE-D预处理后加入E型Ct标准株,培养44 h后收集HcerEpic细胞(感染组),并以未感染Ct的HcerEpic细胞作为对照组,提取两组总RNA后反转录并构建cDNA文库。通过高通量测序分析两组基因表达谱差异,并选择代表性基因通过实时荧光定量PCR(qPCR)验证。结果共检测23997个基因,差异基因125个,其中上调基因119个,下调基因6个;GO分析显示差异基因富集于对病毒防御反应、Ⅰ型干扰素(interferon,IFN)信号通路、对Ⅰ型IFN的细胞反应等条目;KEGG富集通路为甲型流感、单纯疱疹病毒感染、EB病毒感染、HPV感染、NOD样受体通路等相关通路。结论人正常宫颈上皮细胞感染Ct前后转录组存在差异,差异基因主要富集于IFN通路,与细胞抗病毒过程密切相关。qPCR验证了ISG15、IFIT2、OASL、UBE2L6等差异显著且与IFN通路密切相关的基因。

关键词：沙眼衣原体宫颈上皮细胞转录组差异表达基因

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