检索结果-内蒙古大学图书馆

基于蛋白质组学技术探讨麻疹减毒活疫苗191株抑制三阴性乳腺癌细胞增殖的可能机制

中国肿瘤生物治疗杂志 2023年第7期30卷 568-576页

作者：姚梦玮李玉迁徐庆胜方小菡魏洪迟茜文刘蕊贵州医科大学基础医学院微生物学教研室贵州贵阳550025 贵州医科大学贵州省普通高等学校病原生物学特色重点实验室贵州贵阳550025 贵州医科大学基础医学国家级实验教学中心贵州贵阳550025 贵州中医药大学第二附属医院红岩院区中心实验室贵州贵阳550003

目的:基于蛋白质组学技术探讨麻疹减毒活疫苗191株(MV-Hu191)在体内外对三阴性乳腺癌MDA-MB-231、4T1细胞的影响及其作用机制。方法:采用CCK-8法检测MV-Hu191对MDA-MB-231和4T1细胞增殖的影响;液相色谱-质谱联用技术分析MV-Hu191处理对M... 详细信息

目的:基于蛋白质组学技术探讨麻疹减毒活疫苗191株(MV-Hu191)在体内外对三阴性乳腺癌MDA-MB-231、4T1细胞的影响及其作用机制。方法:采用CCK-8法检测MV-Hu191对MDA-MB-231和4T1细胞增殖的影响;液相色谱-质谱联用技术分析MV-Hu191处理对MDA-MB-231细胞中蛋白质谱的影响,多重数据库筛选蛋白质谱中的典型差异蛋白质并进行GO、KEGG、亚细胞定位与功能注释。瘤内注射1×106 TCID50 MV-Hu191干预4T1细胞移植瘤模型小鼠,流式细胞术检测小鼠脾组织中T细胞亚群,ELISA法检测小鼠血清TNF-α和IL-6含量。结果:体外实验结果表明,MV-Hu191具有抑制MDA-MB-231和4T1细胞增殖的作用,差异均具有统计学意义(P<0.01)。蛋白质组学分析结果显示,MV-Hu191作用MDA-MB-231细胞后明显上调蛋白质有38个、下调有12个;差异表达的蛋白质主要参与细胞黏附、信号受体激活、细胞代谢、应激反应等生物学过程,22个差异蛋白质亚细胞定位位于细胞外,KEGG功能分类显示与免疫调节功能相关的差异蛋白质最多且均为上调蛋白,包括C4A、C8B、SERPINF2、A2M、SERPINC1、CTSB、SERPING1、C5;PPI预测发现免疫相关差异蛋白与CD4、CD8、TNF-α及IL-6相互关联。体内实验结果显示,MV-Hu191干预组小鼠脾组织中CD4+T细胞数量略高于对照组,但差异无统计学意义(P>0.05),CD4+/CD8+T细胞比值明显高于对照组(P<0.05),血清TNF-α和IL-6含量显著上升(均P<0.01)。结论:MV-Hu191显著抑制MDA-MB-231、4T1细胞增殖及拮抗4T1细胞荷瘤小鼠成瘤性,其机制可能是MV-Hu191通过激活免疫效应分子实现抗肿瘤作用。

关键词：麻疹溶瘤病毒 MV-Hu191 三阴性乳腺癌 MDA-MB-231细胞 4T1细胞细胞增殖蛋白质组学

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肿瘤相关成纤维细胞的代谢重编程及其对肿瘤代谢重编程的调节

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肿瘤 2020年第10期40卷 733-740页

作者：司桂凡周春仙朱诗国上海中医药大学基础医学院免疫学与病原生物学教研室上海201203 上海中医药大学基础医学院病理教研室上海201203

肿瘤微环境中往往是缺氧状态且营养匮乏,因而肿瘤需要通过改变代谢以适应营养匮乏的环境。肿瘤相关成纤维细胞(cancer-associated fibroblasts,CAFs),作为肿瘤微环境的主要成分对肿瘤的生长有重要影响。研究显示,CAFs能够通过自身发生... 详细信息

肿瘤微环境中往往是缺氧状态且营养匮乏,因而肿瘤需要通过改变代谢以适应营养匮乏的环境。肿瘤相关成纤维细胞(cancer-associated fibroblasts,CAFs),作为肿瘤微环境的主要成分对肿瘤的生长有重要影响。研究显示,CAFs能够通过自身发生代谢重编程,生成营养物质来维持肿瘤的生长;同时,CAFs能够调节肿瘤细胞的代谢重编程以适应肿瘤微环境。本文将就CAFs的代谢重编程以及对肿瘤细胞代谢重编程的调节作用作一综述,并讨论其可能的机制,以期为肿瘤治疗的靶点提供一些新的方向。

关键词：肿瘤癌相关成纤维细胞肿瘤微环境代谢重编程

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杨梅素通过磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白信号通路诱导MTB感染巨噬细胞发生自噬的研究

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中国防痨杂志 2020年第2期42卷 101-107页

作者：孙锦霞张晴雯李银虹姜昕上海中医药大学基础医学院免疫学与病原生物学教研室 201203

目的对杨梅素通过磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(PI3K/Akt/mTOR)信号通路诱导MTB感染的巨噬细胞发生自噬进行研究,从而探讨杨梅素抗结核作用的机理。方法用CCK8法检测杨梅素对细胞增殖的影响,确定安全的用药范围;... 详细信息

目的对杨梅素通过磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(PI3K/Akt/mTOR)信号通路诱导MTB感染的巨噬细胞发生自噬进行研究,从而探讨杨梅素抗结核作用的机理。方法用CCK8法检测杨梅素对细胞增殖的影响,确定安全的用药范围;以H37Ra菌株感染的小鼠巨噬细胞Raw 264.7为模型组,并设空白组和药物处理组。按感染复数(MOI,即细菌∶细胞=10∶1)加入模型组、药物处理组,共孵育4h后,磷酸盐缓冲液(PBS)洗3次以弃掉未进入胞内的MTB。药物处理组分别用不同浓度(12.5、25、50、100μmol/L)的杨梅素作用24h,Western blot法检测自噬相关蛋白即“微管相关蛋白1轻链3-Ⅱ(LC3-Ⅱ)和p62”表达水平的变化,并以此筛选出杨梅素促进自噬的最佳作用浓度;100μmol/L杨梅素作用于感染细胞72h后,0.1%聚乙二醇辛基苯基醚(Triton X-100)冰上裂解细胞10min,菌落形成单位(CFU)法检测巨噬细胞胞内荷菌量;杨梅素作用感染细胞不同时间(30、60、180min)后Western blot测定PI3K/Akt/mTOR信号通路中Akt、mTOR的磷酸化水平。以Image J软件做蛋白定量分析,用GraphPad Prism 7.0制图,采用单因素方差分析(ANOVA)进行统计分析,以P<0.05为差异有统计学意义。结果杨梅素在100μmol/L浓度以下细胞生存率在90%左右,对细胞毒性较小;Western blot结果显示:与模型组(0.52±0.01)相比,杨梅素不同浓度(12.5、25、50、100μmol/L)处理均能促进LC3Ⅱ的表达(0.59±0.02、0.65±0.01、0.71±0.01、0.83±0.01),差异有统计学意义(t=2.97、P=0.04,t=7.91、P=0.00,t=9.77、P=0.00,t=16.37、P=0.00);而较模型组p62蛋白(0.86±0.02),药物处理亦能抑制p62的表达(0.72±0.01、0.86±0.00、0.60±0.02、0.58±0.01),25μmol/L杨梅素处理组差异无统计学意义(t=0.81、P=0.46),12.5、50、100μmol/L处理组差异均有统计学意义(t=6.50、P=0.00,t=9.53、P=0.00,t=12.01、P=0.00);杨梅素促进自噬的最佳药物浓度为100μmol/L;100μmol/L杨梅素作用于感染细胞72h后,对胞内MTB的抑制率为21.02%;模型组细胞在MTB感染后30、60、180min时,PI3K/Akt/mTOR通路中Akt蛋白的磷酸化(p-Akt)水平(1.23±0.01、1.52±0.01、0.74±0.02)明显增加,而杨梅素作用相同的时间后,可明显抑制Akt蛋白的磷酸化(0.99±0.01、0.96±0.01、0.43±0.01),差异有统计学意义(t=27.60、P=0.00,t=30.06、P=0.00,t=18.60、P=0.00);而模型组磷酸化mTOR(p-mTOR)蛋白水平仅在MTB感染后180min(0.57±0.00)明显增加(t=94.61、P=0.00),杨梅素作用180min亦能抑制mTOR蛋白的磷酸化(0.46±0.01),差异有统计学意义(t=21.60、P=0.00)。结论杨梅素通过抑制Akt和mTOR蛋白的磷酸化来抑制PI3K/Akt/mTOR通路,从而诱导MTB感染的巨噬细胞发生自噬来杀灭胞内的MTB。

关键词：分枝杆菌结核巨噬细胞自噬磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白杨梅素

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附子炮制工艺之比较

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内蒙古中医药 2022年第1期41卷 134-137页

作者：金晓华王晶晶黄钰澄张会择赖宇成都中医药大学附属医院四川成都610072 成都中医药大学基础医学院病原生物学与免疫学教研室四川成都611137

附子药用历史悠久,药效显著,素有"回阳救逆第一要药"之称。但其生品毒性大,须炮制入药以提高临床用药安全性。附子炮制方法众多,古有炮、烧、炙、炒、煨等,今有干热烘制、高压蒸制、微波炮制等,各法去毒存性效果不一。本文通... 详细信息

附子药用历史悠久,药效显著,素有"回阳救逆第一要药"之称。但其生品毒性大,须炮制入药以提高临床用药安全性。附子炮制方法众多,古有炮、烧、炙、炒、煨等,今有干热烘制、高压蒸制、微波炮制等,各法去毒存性效果不一。本文通过分析附子炮制典籍及现代研究,从古代附子炮制工艺、现代附子炮制工艺、炮制减毒原理以及各炮制方法比较等方面进行系统分析,在现有高压蒸制优化方法上,以多种双酯型生物碱和单酯型生物碱含量变化为指标,筛选出一种可供《中华人民共和国药典》收录的简便、规范的高压蒸制方案。

关键词：附子炮制历史沿革现代研究

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靶向β2-AR抑制M2极化的华蟾素分子对接及实验验证

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时珍国医国药 2021年第11期32卷 2589-2591页

作者：缪珠雷李玉虎杨鸣泽上海中医药大学基础医学院免疫学与病原生物学教研室上海201203 海门市康泉蟾衣科技打限公司江苏海门226100

目的探讨华蟾素预防肿瘤侵袭转移的机制。方法用LeDock软件对华蟾素水溶性成分与β2-AR进行分子对接计算筛选,ELISA方法检测筛选得到的候选单体对巨噬细胞M1和M2型相关细胞因子分泌的影响。结果分子对接显示蟾蜍噻咛在候选单体中与β2-A... 详细信息

目的探讨华蟾素预防肿瘤侵袭转移的机制。方法用LeDock软件对华蟾素水溶性成分与β2-AR进行分子对接计算筛选,ELISA方法检测筛选得到的候选单体对巨噬细胞M1和M2型相关细胞因子分泌的影响。结果分子对接显示蟾蜍噻咛在候选单体中与β2-AR结合自由能最低,ELISA实验结果显示其能下调异丙肾上腺素诱导的巨噬细胞分泌M2型相关细胞因子,上调M1型相关细胞因子分泌。结论蟾蜍噻咛可通过靶向β2-AR发挥抑制M2极化的作用。

关键词：华蟾素 β2肾上腺素能受体巨噬细胞极化分子对接蟾蜍噻咛

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玫瑰树碱促进NK细胞识别与杀伤非小细胞肺癌细胞的研究

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中国药理学通报 2020年第9期36卷 1240-1247页

作者：阎学伟龚陈媛祝晓雯胥孜杭姚超王莉新朱诗国上海中医药大学基础医学院上海201203 上海中医药大学经方理论应用研究中心上海201203 上海中医药大学免疫学与病原生物学教研室上海201203

目的探讨玫瑰树碱(ellipticine,EPT)对人NK细胞杀伤非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)细胞的作用及机制。方法MTT法和CCK8法分别测定EPT对A549、H1299细胞和NK细胞增殖的影响。免疫荧光检测EPT对A549、H1299细胞DNA损伤... 详细信息

目的探讨玫瑰树碱(ellipticine,EPT)对人NK细胞杀伤非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)细胞的作用及机制。方法MTT法和CCK8法分别测定EPT对A549、H1299细胞和NK细胞增殖的影响。免疫荧光检测EPT对A549、H1299细胞DNA损伤影响。化学发光法测定EPT对NK细胞杀伤NSCLC细胞杀伤活性的影响。流式细胞术检测EPT对NK细胞脱颗粒CD107α表达影响,以及A549、H1299细胞表面MICA/B表达情况。结果EPT明显抑制A549、H1299细胞的增殖且有时间和浓度依赖性(P<0.05),在24、48、72 h的IC50分别是12.06、3.76、1.65μmol·L^-1和12.9、8.56、4.80μmol·L^-1。EPT对NK细胞的24、48 h的IC50是112.71、72.03μmol·L^-1。EPT在1、2μmol·L^-1作用A549和H1299细胞24 h后,诱导DNA损伤,同时上调细胞表面MICA/B的表达(P<0.05),可明显增加NK细胞脱颗粒水平(P<0.05),增强NK细胞杀伤NSCLC细胞作用(P<0.05)。结论EPT可抑制NSCLC细胞增殖,诱导DNA损伤,上调NSCLC细胞表面配体MICA/B表达,同时增加NK细胞脱颗粒水平,促进NK细胞的识别与杀伤作用。

关键词：玫瑰树碱非小细胞肺癌 NK细胞 MICA/B 自然杀伤细胞2族成员D DNA损伤

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黄芪多糖对人肺癌顺铂耐药株A549/DDP细胞耐药性的影响及其机制

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吉林大学学报（医学版） 2020年第6期46卷 1162-1168,I0004页

作者：柳叶陈龙云湖北中医药大学检验学院临床微生物学教研室湖北武汉430065 湖北中医药大学基础医学院生物化学教研室湖北武汉430065

目的:探讨黄芪多糖(APS)对人肺癌顺铂(DDP)耐药A549/DDP细胞耐药性的影响,并阐明其可能的作用机制。方法:将对数生长期A549/DDP细胞分为对照组(不经药物干预)、APS组(给予25、50、100、200和400 mg·L^-1 APS)、DDP组(给予2、4、8... 详细信息

目的:探讨黄芪多糖(APS)对人肺癌顺铂(DDP)耐药A549/DDP细胞耐药性的影响,并阐明其可能的作用机制。方法:将对数生长期A549/DDP细胞分为对照组(不经药物干预)、APS组(给予25、50、100、200和400 mg·L^-1 APS)、DDP组(给予2、4、8、16和32 mg·L^-1 DDP)及APS+DDP组(给予100 mg·L^-1 APS和2、4、8、16和32 mg·L^-1 DDP),药物处理A549/DDP细胞24 h,采用CCK-8法检测各组A549/DDP细胞增殖抑制率,并计算半数抑制浓度(IC50)。将A549/DDP细胞分为对照组(不经药物干预)、APS组(给予100 mg·L^-1 APS)、DDP组(给予11.46 mg·L^-1 DDP)及APS+DDP组(给予100 mg·L^-1 APS和11.46 mg·L^-1 DDP),药物处理细胞24 h,采用Transwell小室法检测各组A549/DDP细胞迁移情况,流式细胞术检测各组A549/DDP细胞凋亡率和线粒体膜电位,Western blotting法检测各组A549/DDP细胞中B淋巴细胞瘤2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、P糖蛋白(P-gp)、磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)、磷酸化磷脂酰肌醇3激酶(p-PI3K)、蛋白激酶B(AKT)和磷酸化蛋白激酶B(p-AKT)蛋白表达水平。结果:CCK-8法检测,与DDP组比较,APS+DDP组的A549/DDP细胞IC50降低。Transwell小室法检测,与对照组比较,APS组A549/DDP细胞迁移能力无明显变化;与DDP组比较,APS+DDP组A549/DDP细胞迁移数降低。流式细胞术检测,与对照组比较,APS组A549/DDP细胞凋亡率和线粒体膜电位差异无统计学意义(P>0.05),DDP组A549/DDP细胞凋亡率升高,线粒体膜电位降低(P<0.05);与DDP组比较,APS+DDP组A549/DDP细胞凋亡率升高,线粒体膜电位降低(P<0.05)。Western blotting法检测,与对照组比较,APS组A549/DDP细胞中Bcl-2和P-gp蛋白表达水平降低(P<0.05),p-PI3K/PI3K和p-AKT/AKT比值降低(P<0.05),Bax蛋白表达水平差异无统计学意义(P>0.05);与APS组比较,DDP组A549/DDP细胞中Bcl-2和P-gp蛋白表达水平降低(P<0.05),p-PI3K/PI3K和p-AKT/AKT比值降低P<0.05),Bax蛋白表达水平升高(P<0.05);与DDP组比较,APS+DDP组A549/DDP细胞中Bcl-2和P-gp蛋白表达水平降低(P<0.05),p-PI3K/PI3K和p-AKT/AKT比值降低(P<0.05),Bax蛋白表达水平升高(P<0.05)。结论:APS能逆转A549/DDP细胞耐药性,其机制可能与其阻断PI3K/AKT信号通路和诱导线粒体损伤有关联。

关键词：黄芪多糖 A549/DDP细胞耐药性磷脂酰肌醇3激酶蛋白激酶B

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医学微生物学系统化教学模式的构建

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教育现代化 2020年第30期 67-69页

作者：伍志伟刘永琦薛娜颜春鲁甘肃中医药大学基础医学院病原生物学与免疫学教研室

随着系统化教学模式在不同课程的逐步开展和完善,医学微生物学作为医学相关专业的重要基础课程之一,依据教学内容和专业特色在本教研室建立一套行之有效的系统化教学体系显得非常必要。科学、合理的医学微生物学系统化教学模式在提升教... 详细信息

随着系统化教学模式在不同课程的逐步开展和完善,医学微生物学作为医学相关专业的重要基础课程之一,依据教学内容和专业特色在本教研室建立一套行之有效的系统化教学体系显得非常必要。科学、合理的医学微生物学系统化教学模式在提升教师教学水平、培养学生系统化学习方式、扩大学生知识视野、提高学生培养质量等方面具有重要意义。

关键词：医学微生物学系统化教学模式教学体系课程方案

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调控自然杀伤细胞抗肿瘤活性药物的研究进展

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中国药学杂志 2019年第6期54卷 437-443页

作者：阎学伟朱诗国上海中医药大学基础医学院上海201203 上海中医药大学免疫学与病原生物学教研室上海201203

自然杀伤(natural killer,NK)细胞是一类不同于T、B细胞的具有细胞毒作用的淋巴细胞。很多NK细胞相关的抗肿瘤免疫疗法已经应用于临床,如NK细胞过继回输、NK细胞抑制性受体抑制剂、促NK细胞因子回输、嵌合抗原受体-NK(chimeric antigen ... 详细信息

自然杀伤(natural killer,NK)细胞是一类不同于T、B细胞的具有细胞毒作用的淋巴细胞。很多NK细胞相关的抗肿瘤免疫疗法已经应用于临床,如NK细胞过继回输、NK细胞抑制性受体抑制剂、促NK细胞因子回输、嵌合抗原受体-NK(chimeric antigen receptor-NK,CAR-NK)细胞回输等。另外,使用药物强化NK细胞抗肿瘤作用的疗法也具有很好的前景。目前存在很多关于药物促进NK细胞识别和杀伤肿瘤细胞的报道,其机制主要与药物上调自然杀伤细胞2族成员D(naturalkiller group 2 member D,NKG2D)配体、自然细胞毒性受体(natural cytotoxicity receptors,NCR)配体、NKG2D受体等的表达及增加促NK细胞相关细胞因子的释放有关。笔者就近年基于药物治疗促进NK细胞抗肿瘤的研究进行综述,为以后的研究提供参考。

关键词：自然杀伤细胞肿瘤免疫治疗自然杀伤细胞2族成员D

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抗炎中药与阿尔茨海默病防治

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世界科学技术-中医药现代化 2019年第9期21卷 1917-1923页

作者：杨贵珍柯尊记上海中医药大学基础医学院免疫学与病原生物学教研室上海201203 上海中医药大学基础医学院神经科学研究中心上海201203

阿尔茨海默病(Alzheimerdisease,AD)是最常见的年龄相关的神经系统退行性疾病,年龄是AD最重要的危险因素。神经递质紊乱、氧化应激、Aβ蛋白聚集、tau蛋白过度磷酸化、线粒体结构和功能异常、慢性炎症等被认为是AD的主要发病机制。炎症... 详细信息

阿尔茨海默病(Alzheimerdisease,AD)是最常见的年龄相关的神经系统退行性疾病,年龄是AD最重要的危险因素。神经递质紊乱、氧化应激、Aβ蛋白聚集、tau蛋白过度磷酸化、线粒体结构和功能异常、慢性炎症等被认为是AD的主要发病机制。炎症反应在AD的发生及进程中发挥重要作用。炎症/免疫细胞激活,细胞因子和补体系统调节功能紊乱,外周淋巴细胞的入侵对AD的发生发展产生错综复杂的影响。抗炎治疗,尤其是天然抗炎化合物在防治AD中的作用已经引起了人们的重视。本文对抗炎中药用于预防AD的研究做一小结。

关键词：阿尔茨海默病神经系统炎症中药抗炎

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