检索结果-内蒙古大学图书馆

中华医学会2014全国微生物学与免疫学学术年会

作者：寇静远潘兴杨靖石新丽黄筱钧邓昭敏秦臻王保宁李明远李婉宜四川大学微生物学教研室湖北医药学院微生物学教研室河北中医学院基础医学院

目的由于流感病毒的基因结构呈节段性分布,当人流感病毒和禽流感病毒同时感染同一个体时,这种特殊的基因排列方式极可能通过其基因重组而产生一种对人类全新的流感病毒株,从而导致流感的全球性暴发流行。因此,流感疫苗的研究焦点是研发...

目的由于流感病毒的基因结构呈节段性分布,当人流感病毒和禽流感病毒同时感染同一个体时,这种特殊的基因排列方式极可能通过其基因重组而产生一种对人类全新的流感病毒株,从而导致流感的全球性暴发流行。因此,流感疫苗的研究焦点是研发对不同亚型流感病毒都具有交叉保护作用的通用型长效疫苗,而多表位基因疫苗的构想有望实现这一目标。本研究设计、构建含分子内佐剂的流感病毒多表位基因疫苗CTB-Eg,并检测其真核表达载体pEGFP-C2/CTB-Eg在HEK293T细胞

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木犀草素抑制乳腺癌细胞MDA-MB-231中SDF-1α/CXCR4通路的作用

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肿瘤基础与临床 2014年第3期27卷 199-202页

作者：李文仿欧琴张华赵宗彬王耕湖北医药学院附属太和医院普外三科湖北十堰442000 湖北医药学院基础医学院微生物学教研室湖北十堰442000

目的探讨木犀草素对乳腺癌细胞MDA-MB-231中SDF-1α/CXCR4信号通路抑制作用。方法采用不同浓度的木犀草素处理乳腺癌细胞MDA-MB-231,观察乳腺癌细胞MDA-MB-231的细胞增殖、趋化运动及CXCR4蛋白表达。结果木犀草素明显抑制乳腺癌细胞MDA-... 详细信息

目的探讨木犀草素对乳腺癌细胞MDA-MB-231中SDF-1α/CXCR4信号通路抑制作用。方法采用不同浓度的木犀草素处理乳腺癌细胞MDA-MB-231,观察乳腺癌细胞MDA-MB-231的细胞增殖、趋化运动及CXCR4蛋白表达。结果木犀草素明显抑制乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖,明显抑制乳腺癌细胞MDA-MB-231 CXCR4蛋白表达,并明显抑制SDF-1α/CXCR4对乳腺癌细胞MDA-MB-231的激活。结论木犀草素可抑制乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖及SDF-1α/CXCR4介导的乳腺癌细胞的信号激活作用,在预防乳腺癌复发及转移中可能有重要的作用。

关键词：木犀草素乳腺癌 CXCR4

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幽门螺杆菌在胃癌形成中的作用机制

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四川生理科学杂志 2014年第1期36卷 27-31页

作者：谢铁松雷如军邵义敏杨靖刘益国十堰市铁路医院湖北十堰442716 湖北医药学院基础医学院微生物学教研室湖北十堰442000 四川大学基础医学与法医学院微生物学教研室四川成都610041

尽管近年来胃癌的发病率和死亡率有所下降,但在世界范围内它仍位于常见恶性肿瘤发病率和死亡率的第二位。胃癌的形成是一个多因素、多步骤的复杂过程,幽门螺杆菌感染、宿主遗传因素和环境因素等共同决定了这个过程。本文综述了近年来幽... 详细信息

尽管近年来胃癌的发病率和死亡率有所下降,但在世界范围内它仍位于常见恶性肿瘤发病率和死亡率的第二位。胃癌的形成是一个多因素、多步骤的复杂过程,幽门螺杆菌感染、宿主遗传因素和环境因素等共同决定了这个过程。本文综述了近年来幽门螺杆菌在胃癌形成中的作用机制研究进展,探明幽门螺杆菌与胃癌相关的特异性因子或特异性作用链有助于人类胃癌的防治。

关键词：幽门螺旋杆菌胃癌机制

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幽门螺杆菌体外培养影响因素探讨

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中国病原生物学杂志 2013年第7期8卷 595-597页

作者：邝玉杨远李婉宜李明远杨靖四川大学华西基础医学与法医学院微生物学教研室四川成都610041 湖北医药学院微生物学教研室湖北十堰442000

目的探索影响幽门螺杆菌体外培养的影响因素。方法观察不同培养时间幽门螺杆菌的菌落特点和细菌形态特点,确定幽门螺杆菌的最佳培养时间;通过SYTO9/PI核酸染料对暴露于空气中不同时间的幽门螺杆菌进行死活菌的染色,估计幽门螺杆菌在空... 详细信息

目的探索影响幽门螺杆菌体外培养的影响因素。方法观察不同培养时间幽门螺杆菌的菌落特点和细菌形态特点,确定幽门螺杆菌的最佳培养时间;通过SYTO9/PI核酸染料对暴露于空气中不同时间的幽门螺杆菌进行死活菌的染色,估计幽门螺杆菌在空气中的存活时间。结果培养3d的幽门螺杆菌菌落为针尖大小、形态为典型弯曲杆菌,培养超过3d的幽门螺杆菌菌落直径可达1mm,菌体形态多为球型;荧光染色检查显示,暴露在空气中的幽门螺杆菌随着暴露时间的延长逐渐死亡,4h后几乎全部死亡。结论幽门螺杆菌体外培养最佳培养时间为3d,且菌体形态典型。幽门螺杆菌暴露于空气中的存活时间≤4h。

关键词：幽门螺杆菌培养荧光染色

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卵黄抗体技术在人类胃肠道疾病诊治中的应用

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现代预防医学 2013年第17期40卷 3243-3245页

作者：石新丽杨靖王保宁李明远四川大学华西基础医学与法医学院微生物学教研室河北中医学院湖北医药学院

随着细菌耐药性及肿瘤抗药性的不断出现,卵黄抗体技术(IgY技术)正逐渐成为研究热点。本文综述了IgY技术在人类消化道肿瘤的靶向治疗,细菌性、病毒性、真菌性消化道感染疾病的治疗以及寄生虫病的诊断等方面的应用。我们认为IgY技术在人... 详细信息

随着细菌耐药性及肿瘤抗药性的不断出现,卵黄抗体技术(IgY技术)正逐渐成为研究热点。本文综述了IgY技术在人类消化道肿瘤的靶向治疗,细菌性、病毒性、真菌性消化道感染疾病的治疗以及寄生虫病的诊断等方面的应用。我们认为IgY技术在人类胃肠道疾病诊治中有广阔的发展空间。

关键词： IgY技术卵黄抗体胃肠道疾病

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DNA损伤的同源重组修复机制

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西部医学 2013年第10期25卷 1586-1589页

作者：杨靖石新丽李莎王保宁李明远四川大学基础医学与法医学院微生物学教研室四川成都610041 湖北医药学院基础医学院微生物学教研室湖北十堰442000

自然界生物体的基因组保持其完整性是机体细胞发挥正常功能和维持基本生存的必要条件。基因组在染色体自我复制的过程中由于受到各种内源性因素或者外源性因素的影响,存在多种形式的损伤。DNA的双链断裂(DSB)是DNA最为严重的损伤形式,... 详细信息

自然界生物体的基因组保持其完整性是机体细胞发挥正常功能和维持基本生存的必要条件。基因组在染色体自我复制的过程中由于受到各种内源性因素或者外源性因素的影响,存在多种形式的损伤。DNA的双链断裂(DSB)是DNA最为严重的损伤形式,是诱发细胞学的反应最为复杂的、生物学的后果最为严重的、与恶性肿瘤等等健康相关问题的关系最为密切的损伤类型,如不能得到及时而准确地修复,可能会导致基因的突变、基因组的不稳定、细胞染色体的丢失和重组或者导致细胞的凋亡甚至癌变。现已发现同源重组修复途径(HR)是真核生物中DSB的主要修复途径和方式,本文就HR的组成和修复机制进行综述。

关键词： DNA双链断裂(DSB) 同源重组修复途径(HR) 肿瘤

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抗体的系统性检测方法

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四川生理科学杂志 2013年第3期35卷 121-123页

作者：杨靖孙卫兵邝玉湖北医药学院基础医学院微生物学教研室湖北十堰442000 四川大学华西基础医学与法医学院微生物学教研室四川成都610041 湖北省十堰市西苑医院呼吸内科湖北十堰442000

21世纪随着现代生物技术、信息技术在生物医学工程学等研究领域的不断深入,以细胞工程技术和基因工程技术为主体的抗体工程药物近年来取得了突破性进展,其应用已涉及医学、农业、食品、环境等众多领域。当前生物医药正在成为发展潜力无... 详细信息

21世纪随着现代生物技术、信息技术在生物医学工程学等研究领域的不断深入,以细胞工程技术和基因工程技术为主体的抗体工程药物近年来取得了突破性进展,其应用已涉及医学、农业、食品、环境等众多领域。当前生物医药正在成为发展潜力无限的产业,而生物医药领域中发展最快的是抗体工程药物,在基础研究、蛋白纯化、环境与食品监测、疾病诊断预防及治疗和优生优育等方面均有不可替代的重要作用。虽然抗体的制备技术日趋完善,但用于诊断和治疗的抗体必须符合高纯度、高效价、高可用性的要求,对抗体的制备、分离和鉴定就显得尤为重要。本文简要阐述了抗体工程药物制备中对抗体成分的系统性检测方法,包括纯度检测、特异性检测、亲和力检测、效价检测等,并对抗体这种特殊蛋白的常用定量检测方法进行了比较。

关键词：抗体鉴定 ELISA Lowry法 BCA法

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幽门螺杆菌双基因多表位重组原核表达工程菌的构建及其表达特性的研究

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成都医学院学报 2013年第4期8卷 410-414页

作者：杨靖潘兴欧琴周法庭李建春祝捷周永君李明远王保宁四川大学华西基础医学与法医学院微生物学教研室成都610041 湖北医药学院微生物学教研室十堰442000 四川万可泰生物技术有限责任公司成都610041

目的构建含幽门螺杆菌尿素酶保守基因序列ureI和ureB的双基因(简称IB)多表位原核表达质粒以及原核表达工程菌,并研究其微生物学特性。方法通过生物信息学方法从ureI和ureB基因中筛选T细胞和B细胞优势表位基因序列,人工合成所选择的表位... 详细信息

目的构建含幽门螺杆菌尿素酶保守基因序列ureI和ureB的双基因(简称IB)多表位原核表达质粒以及原核表达工程菌,并研究其微生物学特性。方法通过生物信息学方法从ureI和ureB基因中筛选T细胞和B细胞优势表位基因序列,人工合成所选择的表位基因序列并构建原核重组表达质粒pET28a(+)/IB。经限制性内切酶(EcoR I,Xho I)鉴定及DNA测序鉴定后,将重组质粒导入大肠杆菌BL21(DE3)。该工程菌经IPTG诱导后,用SDS-PAGE检测重组蛋白(rIB)的表达情况,用Western blot检测rIB的免疫反应性。结果构建的双基因多表位基因序列与所设计的一致;工程菌经IPTG诱导后做SDS-PAGE电泳显示,在28kD左右有一条明显蛋白条带,Western blot结果显示在28kD左右出现特异反应条带。结论成功构建含ureI和ureB双基因序列的原核表达质粒pET28a(+)/IB及工程菌,该工程菌表达的重组蛋白rIB能被抗幽门螺杆菌悉尼株(*** SS1)的特异抗体所识别,表明该新重组蛋白与幽门螺杆菌有高度相关性。

关键词：幽门螺杆菌双基因多表位原核表达

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幽门螺杆菌BIB原核表达工程菌的构建及微生物学特性分析

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西部医学 2013年第10期25卷 1451-1454页

作者：潘兴肖继红杨靖王保宁李健春周法庭祝捷周永君李婉宜李明远四川大学华西基础医学与法医学院四川成都610041 四川万可泰生物技术有限责任公司四川成都610000 兰州大学第二医院体检中心甘肃兰州730030 湖北医药学院微生物学教研室湖北十堰442000

目的构建融合了幽门螺杆菌尿素膜通道蛋白(Ure I)、尿素酶B亚单位(Ure B)的表位基因及霍乱毒素B亚单位(CTB)的原核表达质粒pET28a(+)/ct B/ure I-B(简称BIB)及其原核表达工程菌,并研究其生物学特性。方法参考基因库中ure I、ure B、ct ... 详细信息

目的构建融合了幽门螺杆菌尿素膜通道蛋白(Ure I)、尿素酶B亚单位(Ure B)的表位基因及霍乱毒素B亚单位(CTB)的原核表达质粒pET28a(+)/ct B/ure I-B(简称BIB)及其原核表达工程菌,并研究其生物学特性。方法参考基因库中ure I、ure B、ct B的基因序列,合成不含信号肽的ct B基因及ure I、ure B优势表位基因,串联融合,形成多靶点重组ct B/ure I-B基因(简称BIB基因),并构建pET28a(+)/BIB原核表达质粒,经限制性内切酶Nco I、Xho I酶切以及DNA测序鉴定正确后,将重组质粒导入大肠杆菌BL21(DE3)中,构建含BIB基因的原核表达工程菌。经乳糖诱导后,SDS-PAGE电泳检测重组蛋白(rBIB),Western blot及肌注BALB/c小鼠实验检测rBIB的免疫反应性和免疫原型。结果构建的原核表达质粒pET28a(+)/BIB,经双酶切和测序分析显示,构建的BIB基因与设计序列100%一致。乳糖诱导后,SDS-PAGE电泳显示在33kD左右出现一条明显蛋白条带,Western blot检测在33kD左右出现特异反应条带,肌注免疫BALB/c小鼠产生了较高的抗体水平。结论成功构建了pET28a(+)/BIB原核表达质粒及BIB原核表达工程菌,该工程菌可表达重组蛋白rBIB,且该重组蛋白具有良好的免疫反应性及免疫原性。

关键词：幽门螺杆菌原核表达工程菌 Ure CTB 重组多表位

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幽门螺杆菌ureI-B和ctB融合蛋白的表达及免疫特性分析

幽门螺杆菌ureI-B和ctB融合蛋白的表达及免疫特性分析

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第三届中国临床微生物学大会暨微生物学与免疫学论坛

作者：王保宁杨靖李建春祝捷周永君李明远四川大学华西基础医学与法医学院微生物学教研室湖北医药学院微生物学教研室四川万可泰生物技术有限责任公司

构建融合幽门螺杆菌尿素膜通道蛋白(UreI),尿素酶B亚单位(UreB)和霍乱毒素B亚单位(ctB)的原核表达质粒pET28a(+)/ctB/UreI-B(简称pET28a(+)/BIB)并初步研究融合蛋白ctB/UreI-B(简称BIB)的表达特性和免疫特性。方法:采用基因人工合成的... 详细信息

构建融合幽门螺杆菌尿素膜通道蛋白(UreI),尿素酶B亚单位(UreB)和霍乱毒素B亚单位(ctB)的原核表达质粒pET28a(+)/ctB/UreI-B(简称pET28a(+)/BIB)并初步研究融合蛋白ctB/UreI-B(简称BIB)的表达特性和免疫特性。方法:采用基因人工合成的方法获得BIB基因,构建pET28a(+)/BIB表达载体。将该质粒转化到*** Rosseta(DE3),经酶切和序列分析鉴定正确后IPTG诱导表达。优化融合蛋白诱导表达条件,亲和层析纯化后SDS-PAGE和Western blot分析。用BIB、IB(UreI-B)和佐剂CTB分别免疫小鼠,ELISA检测抗体产生情况。结果:构建的pET28a(+)/BIB表达载体与对应基因的序列同源性为100%。在37℃,0.75mmol/L IPTG诱导2小时后,融合蛋白的表达量占菌体总蛋白的30%,亲和层析纯化后蛋白纯度为83%。Westernblot表明融合蛋白能与相应的抗体反应。BIB、IB和CTB免疫小鼠后第7天即产生IgG抗体,14天后抗体效价分别达到12800、3200和3200,第21天后效价分别为16000、8800和12800。结论:成功构建了能表达BIB蛋白的大肠杆菌表达菌株。融合蛋白BIB既含有分子内佐剂又具有***定植关键分子,有很高的免疫原性和免疫反应性,pET28a(+)/BIB工程菌可作为幽门螺杆菌融合蛋白疫苗研究的候选菌株。

关键词：免疫特性 CTB BIB ureI-B ctB 幽门螺杆菌

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