检索结果-内蒙古大学图书馆

西部医学 2013年第10期25卷 1451-1454页

作者：潘兴肖继红杨靖王保宁李健春周法庭祝捷周永君李婉宜李明远四川大学华西基础医学与法医学院四川成都610041 四川万可泰生物技术有限责任公司四川成都610000 兰州大学第二医院体检中心甘肃兰州730030 湖北医药学院微生物学教研室湖北十堰442000

目的构建融合了幽门螺杆菌尿素膜通道蛋白(Ure I)、尿素酶B亚单位(Ure B)的表位基因及霍乱毒素B亚单位(CTB)的原核表达质粒pET28a(+)/ct B/ure I-B(简称BIB)及其原核表达工程菌,并研究其生物学特性。方法参考基因库中ure I、ure B、ct ... 详细信息

目的构建融合了幽门螺杆菌尿素膜通道蛋白(Ure I)、尿素酶B亚单位(Ure B)的表位基因及霍乱毒素B亚单位(CTB)的原核表达质粒pET28a(+)/ct B/ure I-B(简称BIB)及其原核表达工程菌,并研究其生物学特性。方法参考基因库中ure I、ure B、ct B的基因序列,合成不含信号肽的ct B基因及ure I、ure B优势表位基因,串联融合,形成多靶点重组ct B/ure I-B基因(简称BIB基因),并构建pET28a(+)/BIB原核表达质粒,经限制性内切酶Nco I、Xho I酶切以及DNA测序鉴定正确后,将重组质粒导入大肠杆菌BL21(DE3)中,构建含BIB基因的原核表达工程菌。经乳糖诱导后,SDS-PAGE电泳检测重组蛋白(rBIB),Western blot及肌注BALB/c小鼠实验检测rBIB的免疫反应性和免疫原型。结果构建的原核表达质粒pET28a(+)/BIB,经双酶切和测序分析显示,构建的BIB基因与设计序列100%一致。乳糖诱导后,SDS-PAGE电泳显示在33kD左右出现一条明显蛋白条带,Western blot检测在33kD左右出现特异反应条带,肌注免疫BALB/c小鼠产生了较高的抗体水平。结论成功构建了pET28a(+)/BIB原核表达质粒及BIB原核表达工程菌,该工程菌可表达重组蛋白rBIB,且该重组蛋白具有良好的免疫反应性及免疫原性。

关键词：幽门螺杆菌原核表达工程菌 Ure CTB 重组多表位

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幽门螺杆菌ureI-B和ctB融合蛋白的表达及免疫特性分析

幽门螺杆菌ureI-B和ctB融合蛋白的表达及免疫特性分析

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第三届中国临床微生物学大会暨微生物学与免疫学论坛

作者：王保宁杨靖李建春祝捷周永君李明远四川大学华西基础医学与法医学院微生物学教研室湖北医药学院微生物学教研室四川万可泰生物技术有限责任公司

构建融合幽门螺杆菌尿素膜通道蛋白(UreI),尿素酶B亚单位(UreB)和霍乱毒素B亚单位(ctB)的原核表达质粒pET28a(+)/ctB/UreI-B(简称pET28a(+)/BIB)并初步研究融合蛋白ctB/UreI-B(简称BIB)的表达特性和免疫特性。方法:采用基因人工合成的... 详细信息

构建融合幽门螺杆菌尿素膜通道蛋白(UreI),尿素酶B亚单位(UreB)和霍乱毒素B亚单位(ctB)的原核表达质粒pET28a(+)/ctB/UreI-B(简称pET28a(+)/BIB)并初步研究融合蛋白ctB/UreI-B(简称BIB)的表达特性和免疫特性。方法:采用基因人工合成的方法获得BIB基因,构建pET28a(+)/BIB表达载体。将该质粒转化到*** Rosseta(DE3),经酶切和序列分析鉴定正确后IPTG诱导表达。优化融合蛋白诱导表达条件,亲和层析纯化后SDS-PAGE和Western blot分析。用BIB、IB(UreI-B)和佐剂CTB分别免疫小鼠,ELISA检测抗体产生情况。结果:构建的pET28a(+)/BIB表达载体与对应基因的序列同源性为100%。在37℃,0.75mmol/L IPTG诱导2小时后,融合蛋白的表达量占菌体总蛋白的30%,亲和层析纯化后蛋白纯度为83%。Westernblot表明融合蛋白能与相应的抗体反应。BIB、IB和CTB免疫小鼠后第7天即产生IgG抗体,14天后抗体效价分别达到12800、3200和3200,第21天后效价分别为16000、8800和12800。结论:成功构建了能表达BIB蛋白的大肠杆菌表达菌株。融合蛋白BIB既含有分子内佐剂又具有***定植关键分子,有很高的免疫原性和免疫反应性,pET28a(+)/BIB工程菌可作为幽门螺杆菌融合蛋白疫苗研究的候选菌株。

关键词：免疫特性 CTB BIB ureI-B ctB 幽门螺杆菌

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幽门螺杆菌多表位DNA疫苗的构建及免疫保护性初步研究

幽门螺杆菌多表位DNA疫苗的构建及免疫保护性初步研究

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第三届中国临床微生物学大会暨微生物学与免疫学论坛

目的:构建含有分子内佐剂ctB的幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,***)尿素酶双亚基多表位DNA疫苗(pVAX1-ctB-ureI-ureB,以下简写为BIB),评价其作为DNA疫苗的保护效果。方法:在分析***定植关键分子尿素膜通道蛋白UreI(Urease I)和尿素酶... 详细信息

目的:构建含有分子内佐剂ctB的幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,***)尿素酶双亚基多表位DNA疫苗(pVAX1-ctB-ureI-ureB,以下简写为BIB),评价其作为DNA疫苗的保护效果。方法:在分析***定植关键分子尿素膜通道蛋白UreI(Urease I)和尿素酶催化亚基UreB(Urease B)免疫表位基础上,设计出含两个蛋白优势抗原表位的核酸序列(ureI-B),在ureI-B序列的N端接入佐剂基因ctB,构建真核表达质粒BIB。将鉴定正确的真核表达质粒PVAX1/BIB转染293T细胞,用RT-PCR方法和细胞免疫荧光技术分析融合基因片段的表达情况。20只BALB/c小鼠随机均分为2组,在BIB DNA疫苗肌肉注射免疫后第5周对小鼠施以*** SS1菌株连续3次灌胃攻击。攻击后第35天,分别用PCR法、免疫组化法、组织HE染色病理分析法对小鼠胃黏膜进行***感染情况分析。结果:重组质粒BIB的酶切鉴定、PCR结果分析、测序结果分析显示与预期100%一致。BIB质粒DNA转染293细胞后在转录水平证明了融合基因能在293T细胞中表达,荧光免疫分析显示表达在细胞贡中,小鼠胃黏膜PCR检测、免疫组织化学检查、组织HE染色病理分析及胃炎评分结果提示BIB DNA疫苗对***攻击感染有保护作用,保护率为87.5%。结论:成功构建含分子内佐剂ctB的*** DNA疫苗BIB,动物实验证实肌肉注射该DNA疫苗能对*** SS1引起的感染产生有效免疫保护性。

关键词：多表位免疫保护性幽门螺杆菌初步研究 DNA

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医学生物学教学实践

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现代医药卫生 2011年第1期27卷 157-159页

作者：桑明孙晓东卫荣华朱敬王燕湖北医药学院基础医学院医学生物学教研室湖北十堰442000

医学生物学涵盖了生物学中与医学有密切联系的基本理论和基础知识的一门学科,是医学生的启蒙学科之一。本文介绍了我校医学生物学实验教学、理论教学的教学内容和学时分配,以及考试办法,并总结几点教学体会。

关键词：医学生物学教学改革教学内容优化

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乳腺良恶性病变组织中高危型乳头状瘤病毒16和18型检测及意义

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中华临床医师杂志（电子版） 2010年第9期4卷 147-148页

作者：欧琴王娅杨靖湖北医药学院基础医学院微生物学教研室湖北十堰442100

目的探讨人乳头状瘤病毒(HPV)16、18型感染与乳腺良性病变及乳腺癌的关系。方法采用原位杂交法检测HPV16、HPV18在乳腺纤维腺瘤、乳腺增生组织和乳腺癌组织中的表达。结果 HPV16在乳腺癌、乳腺增生症及乳腺纤维腺瘤组织中的感染率分别为... 详细信息

目的探讨人乳头状瘤病毒(HPV)16、18型感染与乳腺良性病变及乳腺癌的关系。方法采用原位杂交法检测HPV16、HPV18在乳腺纤维腺瘤、乳腺增生组织和乳腺癌组织中的表达。结果 HPV16在乳腺癌、乳腺增生症及乳腺纤维腺瘤组织中的感染率分别为57.5%(23/40)、30.0%(6/20)和25.0%(5/20),乳腺癌与其他两组差异有统计学意义,P<0.05;HPV18感染率分别为52.5%(21/40)、25.0%(5/20)和25.0%(5/20),乳腺癌与其他两组差异有统计学意义(P<0.05);HPV16和HPV18在乳腺癌、乳腺增生症及乳腺纤维腺瘤组织中的共感染率分别为47.5%(19/40)、15.0%(3/20)和20.0%(4/20),其中乳腺增生症与乳腺纤维腺瘤组织共感染率差异无统计学意义,而与乳腺癌组差异有统计学意义(P<0.05)。结论乳腺癌组织中HPV16、HPV18感染率明显高于良性乳腺组织,HPV16、HPV18感染与乳腺癌的关系有待进一步探讨。

关键词：乳腺肿瘤乳头状瘤病毒感染

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妊娠期分化型甲状腺癌诊治分析

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现代肿瘤医学 2010年第10期18卷 1933-1934页

作者：李文仿欧琴王明华王耕湖北医药学院附属太和医院普外科湖北十堰442000 湖北医药学院基础医学院微生物学教研室湖北十堰442000

目的:探讨妊娠期分化型甲状腺癌诊治方法。方法:回顾分析1988年6月-2009年10月我院20例妊娠期分化型甲状腺癌患者资料,根据手术时机分为A组(n=11):产后手术,B组(n=9):妊娠中期手术。结果:两组年龄、诊断时间、肿瘤分期、肿瘤大小、包膜... 详细信息

目的:探讨妊娠期分化型甲状腺癌诊治方法。方法:回顾分析1988年6月-2009年10月我院20例妊娠期分化型甲状腺癌患者资料,根据手术时机分为A组(n=11):产后手术,B组(n=9):妊娠中期手术。结果:两组年龄、诊断时间、肿瘤分期、肿瘤大小、包膜浸润及淋巴结转移情况无明显差异,两组手术花费时间、手术方式及并发症、住院时间、术后局部复发及远处转移无显著差异。结论:妊娠期分化型甲状腺癌治疗效果良好,产后手术并不影响预后。

关键词：妊娠期分化型甲状腺癌产后手术预后

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