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四川大学学报（医学版） 2014年第3期45卷 367-370页

作者：丁娜娜杨靖潘兴周永君李建春祝捷王保宁李明远四川大学华西基础医学与法医学院微生物学教研室成都610041 四川万可泰生物技术有限责任公司成都610000 湖北医药学院微生物学教研室十堰442000

目的构建含有幽门螺杆菌尿素酶(UreI、UreB)及粘附素(HpaA)的多表位原核表达质粒pET28a(+)/ureI-ureB-hpaA〔pET28a(+)/IBA〕及相应的原核表达工程菌,研究其表达特性。方法通过生物信息学方法从ureI、ureB和hpaA基因中筛选T细胞和B细胞... 详细信息

目的构建含有幽门螺杆菌尿素酶(UreI、UreB)及粘附素(HpaA)的多表位原核表达质粒pET28a(+)/ureI-ureB-hpaA〔pET28a(+)/IBA〕及相应的原核表达工程菌,研究其表达特性。方法通过生物信息学方法从ureI、ureB和hpaA基因中筛选T细胞和B细胞优势表位基因序列,人工合成并构建原核重组表达质粒pET28a(+)/IBA。经限制性内切酶(NdeⅠ,XhoⅠ)酶切鉴定及DNA测序鉴定后导入大肠杆菌BL21(DE3)。该工程菌经IPTG诱导后,用SDS-PAGE检测重组蛋白(rIBA)的表达情况,以抗幽门螺杆菌悉尼株(SS1株)特异卵黄抗体采用Western blot检测rIBA的抗原性。结果构建的多表位原核表达质粒pET28a(+)/IBA双酶切和测序鉴定与设计序列100%一致。工程菌经IPTG诱导后SDS-PAGE电泳显示在相对分子质量40×103左右有一条明显蛋白条带,Western blot显示有相应位置特异反应条带。结论成功构建幽门螺杆菌多表位重组原核表达质粒pET28a(+)/IBA及相应原核表达工程菌,该工程菌表达的rIBA具有抗原性,表明该重组蛋白与幽门螺杆菌有高度相关性。

关键词：幽门螺杆菌表位尿素酶粘附素工程菌

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湖北省十堰市老年人疾病负担分析

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中华老年医学杂志 2014年第12期33卷 1357-1360页

作者：刘颖王静周尚成陈晋刘锐曾映雪湖北医药学院卫生管理与卫生事业发展研究中心十堰442000 基础医学院预防医学教研室

目的探讨十堰市城区老年人流行病学疾病负担，了解影响老年人健康的主要疾病，为确定优先发展卫生领域提供科学依据。方法采用20072009年十堰市死因监测资料，以伤残调整损失寿命年（DALY）为疾病负担测量单位进行分析。结果十堰市城区6... 详细信息

目的探讨十堰市城区老年人流行病学疾病负担，了解影响老年人健康的主要疾病，为确定优先发展卫生领域提供科学依据。方法采用20072009年十堰市死因监测资料，以伤残调整损失寿命年（DALY）为疾病负担测量单位进行分析。结果十堰市城区60岁及以上人口占总人口16．1％，平均死亡率为20．9‰，平均造成DALY损失为299．5个寿命年／1000人口；慢性非传染性疾病为其主要死因（占89．7％），心血管疾病（47．7％，105．6个寿命年／1000人口）、恶性肿瘤（28．2％，66．6个寿命年／1000人口）、呼吸系统疾病（7．2％，15．5个寿命年／1000人口）列居死因顺位和疾病负担顺位前3位；除营养缺乏症、糖尿病和生殖泌尿系统疾病外，其他14种疾病男性引起的DALY均高于女性，营养缺乏症列居女性DALY顺位第3位。结论十堰市城区老年人DALY损失低于全国平均水平，慢性非传染性疾病是今后老年人疾病的防治重点，应特别关注心血管疾病和恶性肿瘤对老年人的影响，重视疾病的性别分布特征，将有利于老年人疾病的防控。

关键词：患病代价质量校正寿命

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Ag85A-HA2原核表达载体的构建及其抗甲型流感病毒免疫效果的研究

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四川大学学报（医学版） 2014年第4期45卷 547-551页

作者：邵京京杨靖戴军孟俊杰裴德翠李虹潘兴李婉宜四川大学华西基础医学与法医学院微生物学教研室成都610041 宜宾市第二人民医院检验科宜宾644000 湖北医药学院微生物学教研室十堰442000 四川大学西部妇幼研究院成都610041

目的构建结核杆菌分泌型抗原85A(Ag85A)与流感病毒血凝素(HA)中HA2(Ag85A-HA2)原核表达载体,并表达融合蛋白,研究其抗流感病毒的免疫保护效果。方法构建Ag85A-HA2原核表达载体pET-32a(+)/Ag85A-HA2;异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)... 详细信息

目的构建结核杆菌分泌型抗原85A(Ag85A)与流感病毒血凝素(HA)中HA2(Ag85A-HA2)原核表达载体,并表达融合蛋白,研究其抗流感病毒的免疫保护效果。方法构建Ag85A-HA2原核表达载体pET-32a(+)/Ag85A-HA2;异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)诱导表达Ag85A-HA2融合蛋白,十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析表达产物,并使用吸附多聚组氨酸标签(His-Tag)的蛋白纯化柱分离纯化蛋白;甲型流感病毒(influenza A virus,IAV)攻击重组蛋白免疫后的BALB/c小鼠(并设PBS对照组),通过观察小鼠肺病理切片、测定肺指数及肺指数抑制率、死亡保护率等指标分析其免疫保护效果。结果成功构建了原核表达载体pET-32a(+)/Ag85A-HA2;SDS-PAGE电泳分析显示成功表达相对分子质量为70×103的重组融合蛋白;动物实验表明,融合蛋白Ag85A-HA2对IAV攻击后的小鼠肺指数抑制率达到39.30%,死亡保护率达到80%,效果明显高于PBS对照组(P<0.05),肺部病理切片也证实融合蛋白Ag85A-HA2对小鼠肺部的保护效果显著。结论成功构建了Ag85A-HA2原核表达载体并表达出融合蛋白,该融合蛋白在动物体内能发挥良好的抗甲型流感病毒感染的免疫保护效果。

关键词：甲型流感病毒结核杆菌分泌型抗原85A 流感病毒血凝素原核表达融合蛋白免疫效果

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黄芪多糖对高游离脂肪酸所致巨噬细胞脂质沉积及腺苷酸活化蛋白激酶-脂肪酸结合蛋白4通路的作用

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中国医药 2014年第9期9卷 1388-1392页

作者：胡阳黔李静刘坚王文峰宋杰湖北医药学院附属东风医院消化内科湖北省十堰市442000 湖北医药学院基础医学院解剖教研室

目的：探讨黄芪多糖对高游离脂肪酸导致巨噬细胞内脂质沉积的作用及机制。方法将培养的单核源性巨噬细胞（ THP-1）分为对照组（加入与游离脂肪酸组等量的无水乙醇及牛血清清蛋白）、黄芪多糖组（培养液中加入黄芪多糖200 mg/L）、游离... 详细信息

目的：探讨黄芪多糖对高游离脂肪酸导致巨噬细胞内脂质沉积的作用及机制。方法将培养的单核源性巨噬细胞（ THP-1）分为对照组（加入与游离脂肪酸组等量的无水乙醇及牛血清清蛋白）、黄芪多糖组（培养液中加入黄芪多糖200 mg/L）、游离脂肪酸组（培养液中加入长链游离脂肪酸0．25 mmol/L）、游离脂肪酸加黄芪多糖组（培养液中加入黄芪多糖200 mg/L及长链游离脂肪酸0．25 mmol/L）及游离脂肪酸加黄芪多糖及腺苷酸活化蛋白激酶（AMPK）阻断剂（compound C）组（培养液中加入黄芪多糖200 mg/L、长链游离脂肪酸0．25 mmol/L及compound C 50μmol/L）。采用游离脂肪酸检测试剂盒和三酰甘油试剂盒分别检测游离脂肪酸及三酰甘油含量，油红O染色观察细胞内脂质蓄积，蛋白质印迹法检测细胞内AMPK、磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶（p-AMPK）、脂肪酸结合蛋白4（FABP4）的蛋白表达情况。结果①游离脂肪酸组三酰甘油及游离脂肪酸含量[（3．35±0．79）mmol/L、（29．3±1．7）μmol/L]明显高于对照组[（0．81±0．19）mmol/L、（15．7±1．3）μmol/L]和游离脂肪酸加黄芪多糖组[（1．46±0．25）mmol/L、（15．5±2．1）μmol/L]，差异均有统计学意义（均P＜0．01）。②油红O染色结果：游离脂肪酸组脂质含量较对照组增多，游离脂肪酸加黄芪多糖组脂质含量较游离脂肪酸组减少，提示游离脂肪酸增加细胞内脂质蓄积，而黄芪多糖减少细胞内脂质蓄积。③蛋白质印迹法检测AMPK、p-AMPK、FABP4的蛋白表达情况发现，与对照组相比，黄芪多糖组各种蛋白表达无明显变化，游离脂肪酸组p-AMPK表达明显少于对照组和游离脂肪酸加黄芪多糖组[（54．3±3．0）％比（100．0±1．4）％、（96．5±3．9）％]，FABP4表达明显高于对照组和游离脂肪酸加黄芪多糖组[（138．3±2．3）％比（100．0±3．1）％、（72．3±2．6）％]；与游离脂肪酸加黄芪多糖组比较，游离脂肪酸加黄芪多糖及compound C组FABP4表达明显增多[（136．9±4．3）％比（72．3±2．6）％]，差异均有统计学意义（均P＜0．01）。结论黄芪多糖可以通过AMPK-FABP4途径减少高游离脂肪酸导致的巨噬细胞内脂质蓄积。

关键词：黄芪多糖游离脂肪酸腺苷酸活化蛋白激酶脂肪酸结合蛋白4 巨噬细胞脂质沉积

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心肺复苏模型大鼠并发大量胸腹腔积液的实验观察

心肺复苏模型大鼠并发大量胸腹腔积液的实验观察

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中国病理生理学会心血管专业委员会第十五届学术大会暨国际心脏研究会中国分会第十二届学术大会

作者：潘国栋吴胜英李贤玉张亚辉刘坚汪雄湖北医药学院基础医学院病理生理教研室湖北十堰442000

目的:陆续有临床报道发现心跳骤停(CA)患者在心肺复苏(CPR)术中或术后并发严重胸腹腔积液.本研究通过建立动物实验,观察分析胸腹腔积液在CPR大鼠模型的发生情况.方法:选择成年雄性SD大鼠,随机分为sham组(n=6),CA组(n=6)和CPR组(n=12).C...

目的:陆续有临床报道发现心跳骤停(CA)患者在心肺复苏(CPR)术中或术后并发严重胸腹腔积液.本研究通过建立动物实验,观察分析胸腹腔积液在CPR大鼠模型的发生情况.方法:选择成年雄性SD大鼠,随机分为sham组(n=6),CA组(n=6)和CPR组(n=12).CA组和CPR组通过夹闭气管建立CA模型.CA组不进行特殊处理;CPR组在CA发生120 s后行CPR,给予持续人工通气(60 min-1)和5 min机械式胸外按压(200 min-);sham组行不阻塞气管的假手术,在术后7 min行胸外按压和人工通气,方案与CPR组相同.死亡动物立即取样尸检.幸存动物在术后30 min处死并取样尸检.观察和收集动物胸腹腔内的积液并化验分析.结果:CA组与CPR组大鼠气管夹闭5 min左右,动脉收缩压降至25 mmHg以下,CA发生.

关键词：

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2007-2009年湖北省某市城区居民糖尿病疾病负担分析

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中国慢性病预防与控制 2014年第4期22卷 390-392页

作者：刘颖王静陈晋刘锐曾映雪周尚成湖北医药学院卫生管理与卫生事业发展研究中心湖北省十堰442000 湖北医药学院基础医学院预防医学教研室

目的估算十堰市城区糖尿病流行病学疾病负担,为优先配置卫生资源提供依据。方法采用2007-2009年十堰市城区居民死因监测资料,以伤残调整寿命年（DALY）为疾病负担测量单位分析糖尿病流行病学疾病负担。结果 2007-2009年,十堰市城区居民... 详细信息

目的估算十堰市城区糖尿病流行病学疾病负担,为优先配置卫生资源提供依据。方法采用2007-2009年十堰市城区居民死因监测资料,以伤残调整寿命年（DALY）为疾病负担测量单位分析糖尿病流行病学疾病负担。结果 2007-2009年,十堰市城区居民糖尿病死亡率和DALY损失随着时间增长而升高。2009年,由糖尿病导致的早死引起的生命损失（YLL）是2007年的2.06倍;总人群DALY为每千人2.90个寿命年,男性为每千人2.64个寿命年,女性为每千人3.11个寿命年,女性DALY损失高于男性,60岁以上人群为较大疾病负担人群,30~59岁年龄段DALY同样较高;70岁以上人群YLL率较高。结论十堰市城区糖尿病患者死亡导致的寿命损失逐年增加,应加强60岁以上人群糖尿病筛查和治疗,同时关注中青年人群。

关键词：糖尿病疾病负担伤残调整损失寿命年死亡率

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木犀草素抑制乳腺癌细胞MDA-MB-231中SDF-1α/CXCR4通路的作用

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肿瘤基础与临床 2014年第3期27卷 199-202页

作者：李文仿欧琴张华赵宗彬王耕湖北医药学院附属太和医院普外三科湖北十堰442000 湖北医药学院基础医学院微生物学教研室湖北十堰442000

目的探讨木犀草素对乳腺癌细胞MDA-MB-231中SDF-1α/CXCR4信号通路抑制作用。方法采用不同浓度的木犀草素处理乳腺癌细胞MDA-MB-231,观察乳腺癌细胞MDA-MB-231的细胞增殖、趋化运动及CXCR4蛋白表达。结果木犀草素明显抑制乳腺癌细胞MDA-... 详细信息

目的探讨木犀草素对乳腺癌细胞MDA-MB-231中SDF-1α/CXCR4信号通路抑制作用。方法采用不同浓度的木犀草素处理乳腺癌细胞MDA-MB-231,观察乳腺癌细胞MDA-MB-231的细胞增殖、趋化运动及CXCR4蛋白表达。结果木犀草素明显抑制乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖,明显抑制乳腺癌细胞MDA-MB-231 CXCR4蛋白表达,并明显抑制SDF-1α/CXCR4对乳腺癌细胞MDA-MB-231的激活。结论木犀草素可抑制乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖及SDF-1α/CXCR4介导的乳腺癌细胞的信号激活作用,在预防乳腺癌复发及转移中可能有重要的作用。

关键词：木犀草素乳腺癌 CXCR4

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窖蛋白-1在人肺浸润性腺癌中的表达及其与自噬的关系

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武汉大学学报（医学版） 2014年第1期35卷 20-25,36页

作者：宋建梁素美罗小青黄燕华薛敬玲陈洪雷湖北医药学院附属襄阳市第一人民医院肿瘤科湖北襄阳441000 武汉市肿瘤纳米诊断工程技术研究中心分子病理科湖北武汉430070 武汉大学基础医学院病理学教研室湖北武汉430071

目的:探讨窖蛋白-1(Cav-1)在人肺浸润性腺癌(PIA)组织中的表达以及与自噬标志物——微管相关蛋白轻链3B(MAP LC3B)的关系及它们的临床意义。方法:利用量子点免疫荧光组织化学(QDs-IHC)技术检测Cav-1和LC3B蛋白在肺腺癌组织芯片包括68例... 详细信息

目的:探讨窖蛋白-1(Cav-1)在人肺浸润性腺癌(PIA)组织中的表达以及与自噬标志物——微管相关蛋白轻链3B(MAP LC3B)的关系及它们的临床意义。方法:利用量子点免疫荧光组织化学(QDs-IHC)技术检测Cav-1和LC3B蛋白在肺腺癌组织芯片包括68例PIA组织和10例非癌性肺组织中的表达;同时在10例PIA和10例非癌性肺组织中利用定量实时PCR检测Cav-1和LC3B mRNA的变化。结果:与非癌变肺组织相比,Cav-1和LC3B蛋白和mRNA在肺浸润性腺癌肿瘤细胞的表达均显著降低(P<0.05)。Cav-1在肿瘤细胞和基质的表达均与腺泡为主型PIA的病理分级显著相关(P<0.05),而与其他临床病理参数均无关(P>0.05)。LC3B在贴壁型的PIA阳性率为60.0%(9/15)显著高于腺泡为主型PIA的阳性率26.3%(10/38)(P<0.05),与其他临床病理参数均无关(P>0.05)。Cav-1和LC3B蛋白在肿瘤细胞的表达呈显著正相关(P=0.028,r=0.267)。结论:无论是在肿瘤细胞还是基质,Cav-1表达缺失可促进肺浸润性腺癌的形成,其机制可能与肿瘤细胞自噬不足有关。

关键词：肺腺癌窖蛋白-1 癌相关成纤维细胞自噬

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幽门螺杆菌在胃癌形成中的作用机制

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四川生理科学杂志 2014年第1期36卷 27-31页

作者：谢铁松雷如军邵义敏杨靖刘益国十堰市铁路医院湖北十堰442716 湖北医药学院基础医学院微生物学教研室湖北十堰442000 四川大学基础医学与法医学院微生物学教研室四川成都610041

尽管近年来胃癌的发病率和死亡率有所下降,但在世界范围内它仍位于常见恶性肿瘤发病率和死亡率的第二位。胃癌的形成是一个多因素、多步骤的复杂过程,幽门螺杆菌感染、宿主遗传因素和环境因素等共同决定了这个过程。本文综述了近年来幽... 详细信息

尽管近年来胃癌的发病率和死亡率有所下降,但在世界范围内它仍位于常见恶性肿瘤发病率和死亡率的第二位。胃癌的形成是一个多因素、多步骤的复杂过程,幽门螺杆菌感染、宿主遗传因素和环境因素等共同决定了这个过程。本文综述了近年来幽门螺杆菌在胃癌形成中的作用机制研究进展,探明幽门螺杆菌与胃癌相关的特异性因子或特异性作用链有助于人类胃癌的防治。

关键词：幽门螺旋杆菌胃癌机制

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TCRγ9/δ2(OT3)-Fc融合蛋白体内抗肿瘤效果研究

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湖北医药学院学报 2014年第2期33卷 106-109,F0002页

作者：郭阳郑静胡愉崔莲仙何维湖北医药学院基础医学院免疫教研室湖北十堰442000 北京协和医学院基础学院中国医学科学院基础医学研究所免疫学系北京100005

目的:研究TCRγ9/δ2(OT3)-Fc融合蛋白在体内抗肿瘤效果。方法:通过同位素99mTc标记技术观察TCRγ9/δ2(OT3)-Fc在荷瘤裸鼠体内的显像和分布,观察TCRγ9/δ2(OT3)-Fc对荷瘤裸鼠肿瘤生长和生存期的影响。结果:在荷瘤裸鼠体内99mTc-TCRγ9... 详细信息

目的:研究TCRγ9/δ2(OT3)-Fc融合蛋白在体内抗肿瘤效果。方法:通过同位素99mTc标记技术观察TCRγ9/δ2(OT3)-Fc在荷瘤裸鼠体内的显像和分布,观察TCRγ9/δ2(OT3)-Fc对荷瘤裸鼠肿瘤生长和生存期的影响。结果:在荷瘤裸鼠体内99mTc-TCRγ9/δ2(OT3)-Fc与肿瘤组织有明显的结合,并且其可抑制荷瘤裸鼠肿瘤生长速度,延长小鼠生存期。结论:本研究初步证实TCRγ9/δ2(OT3)-Fc在荷瘤裸鼠体内有一定的抗肿瘤效果,为肿瘤靶向性抗体治疗提供了新的思路。

关键词： TCRγ9 δ2(OT3)-Fc 肿瘤靶向治疗荷瘤裸鼠

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