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可溶性丙型肝炎病毒E2糖蛋白抑制人活化CD4^+T细胞的促炎细胞因子分泌

细胞与分子免疫学杂志 2020年第2期36卷 117-121页

作者：杨敬宁向田湖北医药学院基础医学院免疫学教研室湖北十堰442000 湖北医药学院胚胎干细胞研究湖北省重点实验室湖北十堰442000 湖北恩施州中心医院临床检验中心湖北恩施445000

目的探索可溶性丙型肝炎病毒(HCV)E2糖蛋白对人活化CD4^+T细胞的免疫调节作用。方法真核表达质粒pcDNA3.1-HCV sE2转染HEK293T细胞,细胞培养上清经Ni-NTA树酯亲和层析纯化可溶性HCV E2蛋白。应用流式细胞术分选健康捐献者外周血CD4^+T细... 详细信息

目的探索可溶性丙型肝炎病毒(HCV)E2糖蛋白对人活化CD4^+T细胞的免疫调节作用。方法真核表达质粒pcDNA3.1-HCV sE2转染HEK293T细胞,细胞培养上清经Ni-NTA树酯亲和层析纯化可溶性HCV E2蛋白。应用流式细胞术分选健康捐献者外周血CD4^+T细胞,经1.0μg/mL小鼠抗人CD3单克隆抗体、1.0μg/mL小鼠抗人CD28单克隆抗体刺激培养48 h。刺激后的CD4^+T细胞分成空白对照组、(2、5、10)μg/mL HCV E2蛋白组,后者经HCV E2糖蛋白处理。培养36 h后,流式细胞术检测CD4^+T细胞程序性死亡蛋白1(PD-1)的表达变化,ELISA检测细胞培养上清液肿瘤坏死因子α(TNF-α)、γ干扰素(IFN-γ)的水平。结果与空白对照组比较,HCV E2蛋白组CD4^+T细胞PD-1表达轻微降低,但差异无统计学意义。与空白对照组比较,可溶性E2蛋白组CD4+T细胞分泌TNF-α水平明显降低,并呈剂量依赖性;可溶性E2蛋白组CD4^+T细胞分泌IFN-γ水平明显降低,但高低剂量组无明显差异。结论可溶性HCV E2蛋白抑制人活化CD4^+T细胞促炎细胞因子的分泌。

关键词：丙型肝炎病毒(HCV) E2糖蛋白 CD4^+T细胞程序性死亡蛋白1(PD-1) 肿瘤坏死因子α(TNF-α) γ干扰素(IFN-γ)

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人参皂苷Rb1对氧-糖剥夺诱导的大鼠原代皮层神经元损伤的保护作用

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中成药 2019年第10期41卷 2339-2344页

作者：张璟璇袁美春李海霞张志锋湖北医药学院基础医学院生理学教研室

目的探讨人参皂苷Rb1对氧-糖剥夺诱导的大鼠原代皮层神经元损伤的保护作用。方法神经元置于三气培养箱(85%N2、10%H2、5%CO2混合气体)中用无糖细胞外液中培养1.5 h,构建氧糖剥夺,分为对照组、模型组、人参皂苷Rb1组(0.2、2、20μmol/L)... 详细信息

目的探讨人参皂苷Rb1对氧-糖剥夺诱导的大鼠原代皮层神经元损伤的保护作用。方法神经元置于三气培养箱(85%N2、10%H2、5%CO2混合气体)中用无糖细胞外液中培养1.5 h,构建氧糖剥夺,分为对照组、模型组、人参皂苷Rb1组(0.2、2、20μmol/L)及人参皂苷Rb1(20μmol/L)+LY294002(1μmol/L)组。采用LDH法和PI/FDA双染检测神经元活性和凋亡率,Western blot法检测神经元p-Akt表达。结果与模型组比较,人参皂苷Rb1(2、20μmol/L)可显著降低神经元凋亡率、LDH释放(P<0.05),人参皂苷Rb1(0.2、2、20μmol/L)可显著提高神经元p-Akt表达(P<0.05);与人参皂苷Rb1组(20μmol/L)比较,人参皂苷Rb1+LY294002组可显著逆转人参皂苷Rb1对神经元凋亡、LDH释放的抑制作用,以及对p-Akt表达促进作用(P<0.05)。结论人参皂苷Rb1可经激活PI3K/Akt来减少OGD诱导的大鼠原代皮层神经元凋亡。

关键词：人参皂苷Rb1 神经元氧-糖剥夺 Akt

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紫草素通过PI3K/Akt通路抑制氧糖剥夺诱导的大鼠原代皮层神经元凋亡

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中国病理生理杂志 2019年第1期35卷 106-111页

作者：陈梦月陈伟东柳怡敏向思程殷慧玲张志锋湖北医药学院第一临床学院湖北十堰442000 湖北医药学院基础医学院生理学教研室湖北十堰442000

目的:探讨紫草素对氧糖剥夺(OGD)损伤模型中大鼠原代皮层神经元的作用及机制。方法:用不同浓度(0. 02、0. 2、2和20μmol/L)紫草素对大鼠原代皮层神经元经进行预处理,再经OGD损伤处理,用乳酸脱氢酶(LDH)释放法和荧光素二乙酸酯/碘化丙啶... 详细信息

目的:探讨紫草素对氧糖剥夺(OGD)损伤模型中大鼠原代皮层神经元的作用及机制。方法:用不同浓度(0. 02、0. 2、2和20μmol/L)紫草素对大鼠原代皮层神经元经进行预处理,再经OGD损伤处理,用乳酸脱氢酶(LDH)释放法和荧光素二乙酸酯/碘化丙啶(FDA/PI)双染法分别检测神经元活性和凋亡情况,选择最适紫草素浓度。然后,在加入紫草素之前提前加入LY294002(PI3K/Akt信号通路抑制剂,1μmol/L),用Wesern blot法检测神经元p-Akt(Ser473)水平变化,用LDH法和FDA/PI双染法检测神经元活性和凋亡率变化。结果:0. 2、2及20μmol/L的紫草素可显著提高神经元存活率(P <0. 05),同时还可使神经元内p-Akt(Ser473)水平显著升高(P <0. 05); LY294002可显著阻断紫草素对神经元p-Akt(Ser473)水平和凋亡率的影响(P <0. 05)。结论:紫草素可通过激活PI3K/Akt通路来减少OGD诱导的大鼠原代皮层神经元凋亡。

关键词：紫草素神经元氧糖剥夺 PI3K/Akt信号通路细胞凋亡

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IRGM基因多态性与尘肺易感性研究

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中国呼吸与危重监护杂志 2020年第4期19卷 366-370页

作者：王云袁乐永王梅芳孟忠吉段敬柱杜士明唐以军湖北医药学院附属十堰市太和医院呼吸与危重症学科湖北十堰442000 湖北医药学院基础医学院免疫教研室湖北十堰442000 湖北医药学院附属十堰市太和医院生物医学研究所湖北十堰442000 湖北医药学院附属十堰市太和医院科研处湖北十堰442000

目的探讨免疫相关鸟苷三磷酸酶M(IRGM)基因多态性与尘肺易感性的关系。方法采用病例–对照的研究方法,选择248例尘肺患者为病例组,275例年龄相近、同性别、同民族、同工种且工龄相近的非尘肺接尘工人为对照组。采用Sanger测序法检测病... 详细信息

目的探讨免疫相关鸟苷三磷酸酶M(IRGM)基因多态性与尘肺易感性的关系。方法采用病例–对照的研究方法,选择248例尘肺患者为病例组,275例年龄相近、同性别、同民族、同工种且工龄相近的非尘肺接尘工人为对照组。采用Sanger测序法检测病例组和对照组中IRGM基因三个单核苷酸多态性(SNP)位点的基因型和等位基因。应用SNPstats软件分析单个SNP和尘肺的相关性,应用在线软件SHEsis进行各个位点的连锁不平衡分析和单体型分析。结果IRGM基因rs4958846位点的TT基因型在病例组的分布频率高于对照组,TC与CC基因型在对照组中的分布频率高于病例组,等位基因T在病例组的分布频率高于对照组,等位基因C在对照组的分布频率高于病例组,差异均具有统计学意义(P<0.05)。IRGM基因rs4958842、rs4958843位点的基因型和等位基因在病例组和对照组中的分布差异均无统计学意义(P>0.05)。经连锁不平衡检验,IRGM的rs4958842、rs4958843、rs4958846三个基因两两位点之间均存在连锁不平衡(D’>0.7,r2>0.3)。对三个基因位点进行单体型分析,共构建4种单体型,其中ACT和ACC单体型在病例组和对照组中的频率分布差异具有统计学意义(P<0.05),所构建的其他单体型与尘肺的易感性无显著关联(P>0.05)。结论IRGM基因rs4958846位点的T等位基因和ACT单体型可能与尘肺的易感性有关。

关键词：尘肺易感性免疫相关鸟苷三磷酸酶M 基因多态性

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脂肪分布与在校大学生日常体力活动特点的相关性

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中国组织工程研究 2021年第8期25卷 1277-1283页

作者：舒文博陈梦池李华黄丽仟黄彬彬张文海吴亚臣王泽峰李俏丽刘鹏广西医科大学基础医学院人体解剖教研室广西壮族自治区南宁市530021 广西医科大学广西壮族自治区南宁市530021 湖北医药学院附属襄阳市第一人民医院急诊科EICU 湖北省襄阳市441000

背景:有研究发现不同强度体力活动对不同性别肥胖或者超重人群的脂肪成分改善程度存在差异。目的:分析在校大学生日常体力活动、脂肪分布特点,探究体力活动量与脂肪分布的相关性。方法:随机抽样的方法选取广西某高校就读大学生1875名,... 详细信息

背景:有研究发现不同强度体力活动对不同性别肥胖或者超重人群的脂肪成分改善程度存在差异。目的:分析在校大学生日常体力活动、脂肪分布特点,探究体力活动量与脂肪分布的相关性。方法:随机抽样的方法选取广西某高校就读大学生1875名,采用国际体力活动问卷(IPAQ)(中文版)搜集其近1周来的体力活动数据,采用体成分测量仪测量其脂肪参数。按体脂率大小将男、女大学生各分为3组,男大学生:体脂率≤10%、11%-21%、≥22%;女大学生:体脂率≤20%、21%-34%、≥35%。采用spss 23.0进行数据的处理和分析。研究方案的实施符合广西医科大学的相关伦理要求,参与者对试验过程完全知情同意。结果与结论:①脂肪含量:男大学生总脂肪量>皮下脂肪含量>躯干脂肪量>下肢脂肪量>内脏脂肪含量>上肢脂肪量;女大学生总脂肪量>皮下脂肪含量>躯干脂肪量>下肢脂肪量>上肢脂肪量>内脏脂肪含量;②体力活动方面:大学生低强度体力活动量>中强度体力活动量>高强度体力活动量;③体脂率水平:男大学生低强度体力活动量、中强度体力活动量、总体力活动量:<10%组大于11%-21%组大于≥22%组(均P<0.05),高强度体力活动量:<10%组大于11%-21%组和≥22%组(均P<0.05);女大学生低强度体力活动量、中强度体力活动量:<20%组大于21%-34%组和≥35%组(均P<0.05),高强度体力活动量、总体力活动量:<20%组大于21%-34%组大于≥35%组(均P<0.05);④相关分析:男大学生总脂肪量、内脏脂肪含量、躯干脂肪量、下肢脂肪量与低强度体力活动量呈显著负相关(均r<0,均P<0.05),其他脂肪参数与中强度体力活动量、高强度体力活动量、总体力活动量呈显著负相关(均r<0,均P<0.05),女大学生内脏脂肪含量与高强度体力活动量呈显著负相关(均r<0,均P<0.01),躯干脂肪量与高强度体力活动量、总体力活动量呈显著负相关(均r<0,均P<0.01),其他脂肪参数与低强度体力活动量、中强度体力活动量、高强度体力活动量、总体力活动量呈显著负相关(均r<0,均P<0.05);⑤结果说明,大学生体力活动量、脂肪分布存在性别差异,体力活动活跃人群体脂率较低;各强度体力活动量增加有利于机体脂肪减少;男大学生皮下脂肪含量、上肢脂肪量主要受到中强度体力活动量、高强度体力活动量影响,女大学生内脏脂肪含量、躯干脂肪量主要受高强度体力活动量影响。

关键词：体脂率大学生体力活动脂肪分布

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ManLAM结合TLR2激活肥大细胞释放外泌体诱导巨噬细胞向M2型极化

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细胞与分子免疫学杂志 2021年第6期37卷 481-486页

作者：唐晓磊胡锋夏先如章宏祥周发友黄友明吴艳红皖南医学院第二附属医院基础实验室及血管性疾病研究中心安徽芜湖241000 皖南医学院附属弋矶山医院输血科安徽芜湖241000 湖北医药学院附属太和医院检验科湖北十堰442700 皖南医学院第二附属医院呼吸科安徽芜湖241000 皖南医学院微生物与免疫教研室安徽芜湖241000

目的研究结核分枝杆菌(MTB)甘露糖冠化的脂阿拉伯甘露聚糖(ManLAM)脂糖诱导肥大细胞产生的外泌体招募并影响巨噬细胞极化从而逃避机体免疫的机制。方法培养H37Rv MTB并提取鉴定ManLAM。将提取的ManLAM处理肥大细胞,并收集其分泌的外泌体... 详细信息

目的研究结核分枝杆菌(MTB)甘露糖冠化的脂阿拉伯甘露聚糖(ManLAM)脂糖诱导肥大细胞产生的外泌体招募并影响巨噬细胞极化从而逃避机体免疫的机制。方法培养H37Rv MTB并提取鉴定ManLAM。将提取的ManLAM处理肥大细胞,并收集其分泌的外泌体,通过蛋白质组学和Western blot法分析鉴定外泌体中蛋白质组分。将收集的外泌体与THP-1细胞诱导分化的巨噬细胞共培养,通过Transwell^(TM)实验检测肥大细胞释放的外泌体对巨噬细胞的趋化作用,流式细胞术和实时定量PCR检测ManLAM诱导的巨噬细胞极化。结果成功提取并纯化了ManLAM,并通过气相色谱鉴定其甘露糖和阿拉伯糖的比例约为12.6∶9.4;ManLAM通过与肥大细胞的Toll样受体2(TLR2)结合,产生的外泌体中CC趋化因子配体2(CCL2)、白细胞介素4(IL-4)和IL-13水平较高;ManLAM诱导产生的外泌体能够招募巨噬细胞并且促进其高表达M2型标志分子精氨酸酶1(arginase-1)、IL-10和发现于炎症区分子1(FIZZ-1)。结论 ManLAM刺激肥大细胞分泌外泌体间接诱导巨噬细胞向M2型极化使MTB逃避免疫清除。

关键词：结核分枝杆菌(MTB) 甘露糖冠化的脂阿拉伯甘露聚糖(ManLAM) 肥大细胞外泌体巨噬细胞极化

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生命科学馆在临床医学教学中的应用

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医学信息 2020年第10期33卷 15-17页

作者：丁立刘睿孙敏湖北医药学院附属太和医院神经内科湖北医药学院基础医学院人体解剖教研室湖北医药学院附属太和医院普外科四病区

在医学生培养过程中,临床医学是一门极其重要的应用型学科,临床医学的教学不仅需要教师进行临床理论知识的传授,更需要培养医学生的临床实践能力,逐步帮助在校医学生向临床医生转变。然而目前临床教学资源的紧缺,极大影响了临床医学的... 详细信息

在医学生培养过程中,临床医学是一门极其重要的应用型学科,临床医学的教学不仅需要教师进行临床理论知识的传授,更需要培养医学生的临床实践能力,逐步帮助在校医学生向临床医生转变。然而目前临床教学资源的紧缺,极大影响了临床医学的教学质量。生命科学馆拥有大量不同种类标本并融合先进高科技信息技术,其有可能为临床教学提供资源。本文主要介绍生命科学馆在外科学、妇产科、医学影像学教学中作用,探索将生命科学馆与临床医学教学结合的新的教学方法,为临床医学的教学提供多元化的教学途径,进而提升教学效果,促进培养临床专业知识和临床实践专业技能扎实的综合型医学人才。

关键词：生命科学馆临床医学实践教学信息技术

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“三步曲”教学法在人体解剖学教学中的应用

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解剖学研究 2020年第2期42卷 181-182页

作者：王配军唐杰贺细菊庞磊姚淞元阮绪芝湖北医药学院基础医学院人体解剖学教研室湖北十堰442000 湖北医药学院基础医学院医学生物学教研室湖北十堰442000

运用"三步曲"教学法开展人体解剖学理论和实践教学,端正学生的学习态度,使学生掌握正确的学习方法,提高学生的综合素质。学生在学习时有法可依,有章可循,培养学生的思维能力和自主学习能力,收到了良好的教学效果。

关键词：人体解剖学教学法三步曲

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基于机能实验的微视频辅助生理学理论教学的效果评价

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中华医学教育探索杂志 2020年第10期19卷 1168-1171页

作者：李海霞张志锋吴艳罗斌吕艳霞张璟璇唐俊明熊顺华湖北医药学院基础医学院生理学教研室十堰442000

目的探讨基于机能实验的微视频辅助生理学理论教学的实施效果。方法选取湖北医药学院基础医学院2017级临床医学本科生1、2班(共140人)和3、4班(共123人)为研究对象。1、2班为对照组,3、4班为实验组;对照组采用讲授法为主的传统教学,实... 详细信息

目的探讨基于机能实验的微视频辅助生理学理论教学的实施效果。方法选取湖北医药学院基础医学院2017级临床医学本科生1、2班(共140人)和3、4班(共123人)为研究对象。1、2班为对照组,3、4班为实验组;对照组采用讲授法为主的传统教学,实验组在选定章节的教学中采用微视频辅助传统教学,微视频来源于机能实验的录制和编辑加工。课程结束后,通过问卷调查从课程设计、实施和效果3个层面及期末考试卷面成绩评估该方案。采用SPSS 17.0进行t检验。结果实验组学生期末卷面成绩[(81.02±9.64)分]显著高于对照组[(73.41±11.39)分],差异有统计学意义(t=-5.805,P<0.001)。其中涉及第二章内容得分[(8.07±0.94)vs.(6.14±1.05),t=-15.616,P<0.001],第四章内容得分[(16.16±1.79)vs.(10.9±2.23),t=-20.903,P<0.001]和第六章内容得分[(6.04±0.53)vs.(5.82±0.78),t=-2.638,P=0.009]差异均有统计学意义。实验组调查表回收率100%,90%以上学生对该教学方案更感兴趣,认为可加强对重难点知识的理解,有助于归纳和总结能力的培养。结论基于机能实验的微视频辅助教学有助于提高生理学的教学效果,值得推广。

关键词：机能实验微视频生理学医学教育教学改革

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bpV（pic）对血管性痴呆模型大鼠行为学及海马p-PKB(Ser473)表达的影响

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安徽医科大学学报 2019年第11期54卷 1707-1711页

作者：袁美春李海霞张志锋湖北医药学院基础医学院生理学教研室

目的:探讨钒氧化合物[双过氧二钾(吡啶-2-羧基)氧代钒酸盐,bpV(pic)]对血管性痴呆(VD)模型大鼠认知功能和海马神经元凋亡的作用及机制。方法:将36只SD成年雄鼠分为4组:sham组、sham+bpV(pic)组、VD组及VD+bpV(pic)组。VD+bpV(pic)组大... 详细信息

目的:探讨钒氧化合物[双过氧二钾(吡啶-2-羧基)氧代钒酸盐,bpV(pic)]对血管性痴呆(VD)模型大鼠认知功能和海马神经元凋亡的作用及机制。方法:将36只SD成年雄鼠分为4组:sham组、sham+bpV(pic)组、VD组及VD+bpV(pic)组。VD+bpV(pic)组大鼠造模后,bpV(pic)(1 mg/kg,10 ml)连续灌胃21 d,用Morris水迷宫(MWM)检测动物认知功能变化,用HE染色检测动物海马组织神经元病理形态学变化,用Wesern blot检测神经元天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶3剪切体(cleaved-caspase-3)和第473位丝氨酸磷酸化蛋白激酶B[p-PKB(Ser 473)]水平变化。结果:与VD模型组比较,VD+bpV(pic)组动物空间学习记忆功能缺陷改善(P<0.05);海马神经元的形态学损伤减轻;神经元cleaved-caspase-3表达降低(P<0.05);神经元p-PKB(Ser 473)水平升高(P<0.05)。结论:bpV(pic)可通过激活蛋白激酶B(PKB)活性来降低VD模型大鼠的空间学习记忆功能缺损和减少海马神经元凋亡。

关键词：双过氧二钾(吡啶-2-羧基)氧代钒酸盐血管性痴呆海马神经元凋亡蛋白激酶B

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