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中国医药导报 2016年第8期13卷 40-43页

作者：李童斐秦生辉湖北医药学院基础医学院病理学教研室湖北十堰442000 华中科技大学同济医学院呼吸疾病重点实验室同济医院病理科湖北武汉430000

呼吸道上皮细胞在呼吸疾病的发生发展中占有重要的地位,哺乳动物呼吸道上皮表面覆盖有纤毛,纤毛的摆动可以保护呼吸系统免于细菌、病毒以及其他致病因素的损害。因此纤毛摆动频率(CBF)的调控成为许多呼吸疾病发生发展的关键因素,可以用... 详细信息

呼吸道上皮细胞在呼吸疾病的发生发展中占有重要的地位,哺乳动物呼吸道上皮表面覆盖有纤毛,纤毛的摆动可以保护呼吸系统免于细菌、病毒以及其他致病因素的损害。因此纤毛摆动频率(CBF)的调控成为许多呼吸疾病发生发展的关键因素,可以用来研究呼吸道炎症、吸烟、感染、呼吸系统肿瘤等多种疾病。体外研究CBF的方法多是采用借助呼吸道上皮细胞培养以及活体呼吸道上皮分离等手段,但呼吸道上皮细胞的原代培养具有杂细胞多、不易分化纤毛等诸多问题。呼吸道上皮细胞的培养模式不断发展,本文简述了呼吸道上皮细胞主要的两种原代培养模式及各自的主要培养方法及改进发展情况,同时介绍并总结了呼吸道上皮细胞纤毛分化的鉴定及其摆动频率的检测,明确了各类培养模式对操作流程、培养周期、尤其是纤毛分化及摆动频率的影响,为在现有培养模式下改进技术得到能够诱导纤毛分化的有效培养方法奠定了基础。

关键词：呼吸道上皮细胞纤毛摆动频率培养模式纤毛分化

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AMP-AMPK-AS160信号通路在黄芪多糖刺激L6成肌细胞葡萄糖摄取中的作用

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中国病理生理杂志 2015年第10期 1869-1870页

作者：鲍芳吴胜英欧阳静萍刘坚湖北医药学院心血管生物研究室基础医学院病理生理学教研室武汉大学基础医学院病理生理学教研室

目的:探讨黄芪多糖(APS)对L6成肌细胞葡萄糖摄取的刺激作用及其机制。方法:培养L6成肌细胞,采用2-脱氧-[3H]-D-葡萄糖法检测细胞的葡萄糖摄取,高效液相色谱法检测细胞内的AMP含量,Western blotting法检测腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)和160... 详细信息

目的:探讨黄芪多糖(APS)对L6成肌细胞葡萄糖摄取的刺激作用及其机制。方法:培养L6成肌细胞,采用2-脱氧-[3H]-D-葡萄糖法检测细胞的葡萄糖摄取,高效液相色谱法检测细胞内的AMP含量,Western blotting法检测腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)和160 kD的Akt底物(AS160)的磷酸化水平;脂质体法瞬时转染4P突变型AS160(AS160-4P)质粒。结果:APS呈时

关键词：黄芪多糖 L6 黄氏多糖成肌细胞信号通路葡萄糖右旋糖己糖 AMPK AS

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窖蛋白-1在人肺浸润性腺癌中的表达及其与自噬的关系

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武汉大学学报（医学版） 2014年第1期35卷 20-25,36页

作者：宋建梁素美罗小青黄燕华薛敬玲陈洪雷湖北医药学院附属襄阳市第一人民医院肿瘤科湖北襄阳441000 武汉市肿瘤纳米诊断工程技术研究中心分子病理科湖北武汉430070 武汉大学基础医学院病理学教研室湖北武汉430071

目的:探讨窖蛋白-1(Cav-1)在人肺浸润性腺癌(PIA)组织中的表达以及与自噬标志物——微管相关蛋白轻链3B(MAP LC3B)的关系及它们的临床意义。方法:利用量子点免疫荧光组织化学(QDs-IHC)技术检测Cav-1和LC3B蛋白在肺腺癌组织芯片包括68例... 详细信息

目的:探讨窖蛋白-1(Cav-1)在人肺浸润性腺癌(PIA)组织中的表达以及与自噬标志物——微管相关蛋白轻链3B(MAP LC3B)的关系及它们的临床意义。方法:利用量子点免疫荧光组织化学(QDs-IHC)技术检测Cav-1和LC3B蛋白在肺腺癌组织芯片包括68例PIA组织和10例非癌性肺组织中的表达;同时在10例PIA和10例非癌性肺组织中利用定量实时PCR检测Cav-1和LC3B mRNA的变化。结果:与非癌变肺组织相比,Cav-1和LC3B蛋白和mRNA在肺浸润性腺癌肿瘤细胞的表达均显著降低(P<0.05)。Cav-1在肿瘤细胞和基质的表达均与腺泡为主型PIA的病理分级显著相关(P<0.05),而与其他临床病理参数均无关(P>0.05)。LC3B在贴壁型的PIA阳性率为60.0%(9/15)显著高于腺泡为主型PIA的阳性率26.3%(10/38)(P<0.05),与其他临床病理参数均无关(P>0.05)。Cav-1和LC3B蛋白在肿瘤细胞的表达呈显著正相关(P=0.028,r=0.267)。结论:无论是在肿瘤细胞还是基质,Cav-1表达缺失可促进肺浸润性腺癌的形成,其机制可能与肿瘤细胞自噬不足有关。

关键词：肺腺癌窖蛋白-1 癌相关成纤维细胞自噬

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药理学和病理生理学联合开展PBL教学初探

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现代医药卫生 2013年第13期29卷 2055-2056页

作者：汪雄吴胜英龚应霞张亚辉李贤玉潘龙瑞湖北医药学院基础医学院病理生理学教研室湖北十堰442000 湖北医药学院基础医学院药理学教研室湖北十堰442000

分析在药理学和病理生理学教学中联合开展以问题为基础的学习(PBL)教学法的必要性和可行性,阐述联合开展PBL教学的设计及应用,探讨两个学科联合开展PBL教学的效果。

关键词：教学方法药理学基于问题的学习病理生理学

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自噬基因LC3B在肺鳞癌中的表达意义及与窖蛋白-1的关系

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中华临床医师杂志(电子版) 2013年第22期 10029-10034页

作者：宋建梁素美高俊罗晓青薛敬玲陈洪雷湖北医药学院附属襄阳市第一人民医院肿瘤科武汉市肿瘤纳米诊断工程技术研究中心分子病理科 3. 武汉大学基础医学院病理学教研室

目的探讨自噬标志物——微管相关蛋白轻链3B(MAPLC3B)在人肺鳞癌组织中的表达以及与窖蛋白-1(Cav-1)的关系及它们的临床意义。方法利用量子点免疫荧光组织化学技术检测LC3B和Cav-1蛋白在肺鳞癌组织芯片包括100例肺鳞癌组织和20例非癌性... 详细信息

目的探讨自噬标志物——微管相关蛋白轻链3B(MAPLC3B)在人肺鳞癌组织中的表达以及与窖蛋白-1(Cav-1)的关系及它们的临床意义。方法利用量子点免疫荧光组织化学技术检测LC3B和Cav-1蛋白在肺鳞癌组织芯片包括100例肺鳞癌组织和20例非癌性肺组织上的表达;同时在20例肺鳞癌和20例非癌性肺组织中利用定量实时PCR法检测LC3B和Cav-1 mRNA的变化。结果与非癌变肺组织相比,LC3B和Cav-1蛋白和mRNA在肺鳞癌组织的表达均显著降低(P<0.01)。LC3B蛋白阳性表达与男性肺鳞癌患者显著相关,与淋巴结转移相关,但差异无显著性(P>0.05)。肿瘤细胞Cav-1蛋白阳性表达在肺鳞癌TNM分期(P=0.009)和淋巴结有无转移(P=0.027)之间的差异均有显著性,而与其他临床病理参数均无关(P>0.05)。基质Cav-1阳性率仅为10.12%(8/79),与肺鳞癌临床病理参数均无关(P>0.05)。LC3B和Cav-1蛋白在肺鳞癌肿瘤细胞的表达呈显著正相关(P=0.001,r=0.473)。结论自噬基因LC3B和Cav-1的缺失表达可能与肺鳞癌的发生有关,但二者共同阳性表达又可协同促进肿瘤的恶性进展。

关键词：癌,鳞状细胞自噬微管相关蛋白质类窖蛋白1 量子点

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量子点免疫荧光技术检测基质Cav-1、LDH-B和PKM2蛋白在人肺腺癌中的表达及其临床意义

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肿瘤 2012年第9期32卷 731-737页

作者：赵朋月宋建刁路明罗小青黄燕华王则胜陈洪雷武汉大学基础医学院病理学教研室湖北武汉430071 湖北医药学院附属襄阳市第一人民医院肿瘤科湖北襄阳441000 武汉市肿瘤纳米诊断工程技术研究中心分子病理科湖北武汉430070 武汉大学人民医院病理科湖北武汉430060

目的:检测基质Cav-1(caveolin-1)、M2型丙酮酸激酶(pyruvate kinase M2,PKM2)和左旋乳酸脱氢酶B(L-lactate dehydrogenase B,LDH-B)在人肺腺癌(pulmonary adenocarcinoma,PAC)组织中的表达,探讨基质Cav-1对PAC侵袭和转移的影响。方法:利用量子点免疫荧光组织化学技术检测68例PAC组织和16例非癌变肺组织中基质Cav-1、LDH-B和PKM2的表达,同时应用量子点免疫荧光双标法检测基质Cav-1和α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)的共表达。结果:基质Cav-1、LDH-B和PKM2在PAC组织中的阳性表达率分别为58.8%、54.4%和35.3%,在非癌变肺组织中的阳性表达率分别为100.0%、12.5%和6.3%,差异有统计学意义(P<0.05)。Cav-1、LDH-B和PKM2蛋白的表达与PAC患者的临床病理参数无相关性(P>0.05)。基质Cav-1与LDH-B和PKM2蛋白的表达呈负相关(P<0.05,r_s=-0.406;P<0.05,r_s=-0.320),基质LDH-B与PKM2蛋白的表达之间呈正相关(P<0.05,r_s=0.367)。结论:基质Cav-1表达缺失可能促进PAC的形成,其机制可能与上调LDH-B和PKM2的表达有关。

关键词：肺肿瘤能量代谢量子点癌相关成纤维细胞 Caveolin-1

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人FAM92A1基因诱饵表达质粒的构建与鉴定

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医学分子生物学杂志 2011年第3期8卷 240-244页

作者：方娟李瑞明卢智勇孙晓东陈洁阮绪芝湖北医药学院胚胎干细胞研究湖北省重点实验室湖北省十堰市442000 武汉大学基础医学院病理生理学教研室武汉市430071

目的构建人FAM92A1基因（hFAM92A1）的诱饵表达质粒pGBKT7-hFAM92A1并检测其蛋白表达、毒性和自激活作用.方法 PCR扩增hFAM92A1的基因编码序列并克隆入诱饵表达载体pGBKT7中,酶切和测序鉴定后,转化到酵母AHl09细胞中,Western印迹检测... 详细信息

目的构建人FAM92A1基因（hFAM92A1）的诱饵表达质粒pGBKT7-hFAM92A1并检测其蛋白表达、毒性和自激活作用.方法 PCR扩增hFAM92A1的基因编码序列并克隆入诱饵表达载体pGBKT7中,酶切和测序鉴定后,转化到酵母AHl09细胞中,Western印迹检测诱饵蛋白表达情况,同时检测诱饵蛋白的毒性和自激活作用.结果成功构建FAM92A1基因的诱饵表达质粒pGBKT7-hFAM92A1,测序结果正确.Western印迹实验证实酵母细胞高表达诱饵蛋白hFAM92A1,诱饵蛋白没有自激活作用.结论构建的诱饵表达质粒pGBKT7-hFAM92A1可用于下一步酵母双杂交系统实验,为进一步研究hFAM92A1功能奠定了基础.

关键词： hFAM92A1 诱饵表达质粒诱饵蛋白

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藤梨根乙酸乙酯提取物促凋亡作用的实验研究

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陕西中医 2010年第10期31卷 1424-1426页

作者：田林刁路民国宏莉张丽湖北医药学院附属人民医院十堰442000 武汉大学基础医学院病理学教研室武汉430070

目的:探讨藤梨根乙酸乙酯提取物对肿瘤细胞的促凋亡作用。方法:MTT比色法检测藤梨根乙酸乙酯提取物在不同浓度及不同时间对人食管癌Eca-109细胞生长作用,TUNEL法检测其对癌细胞生长的诱导凋亡效应。结果:藤梨根乙酸乙酯提取物对人食管癌... 详细信息

目的:探讨藤梨根乙酸乙酯提取物对肿瘤细胞的促凋亡作用。方法:MTT比色法检测藤梨根乙酸乙酯提取物在不同浓度及不同时间对人食管癌Eca-109细胞生长作用,TUNEL法检测其对癌细胞生长的诱导凋亡效应。结果:藤梨根乙酸乙酯提取物对人食管癌Eca-109细胞的生长抑制作用随着药物浓度的升高和作用时间的延长而增强。提取物对瘤细胞有明显的凋亡效应。结论:藤梨根乙酸乙酯提取物通过促凋亡作用能有效抑制人食管癌Eca-109细胞的生长。

关键词：抗肿瘤(中药)/药理学猕猴桃科/药理学食管肿瘤细胞凋亡

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