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药物评价研究 2024年第5期47卷 1131-1145页

作者：江顺郭莹莹赵利军刘明邱振鹏李洪亮汪选斌湖北医药学院附属人民医院药学部中药药理实验室和药学院武当特色中药研究湖北省重点实验室湖北医药学院生物医药研究院湖北十堰442000 湖北中医药大学药学院湖北武汉430065

预知子(Akebiae Fructus)是武当特色中药,具有抗炎、抗菌、抗肿瘤、抗抑郁等多种药理作用。主要含有三萜皂苷类、绿原酸类等化学成分,在临床使用中多以复方的形式治疗肝癌、胃癌、乳腺癌、前列腺癌等多种肿瘤,尤其是对于消化系统肿瘤,... 详细信息

预知子(Akebiae Fructus)是武当特色中药,具有抗炎、抗菌、抗肿瘤、抗抑郁等多种药理作用。主要含有三萜皂苷类、绿原酸类等化学成分,在临床使用中多以复方的形式治疗肝癌、胃癌、乳腺癌、前列腺癌等多种肿瘤,尤其是对于消化系统肿瘤,具有很高的使用价值。结合国内外文献对预知子的化学成分、抗消化道肿瘤的药理作用及相关机制、在临床上常用的药对配伍组合进行了归纳总结,以期对明确预知子发挥药理作用的有效成分提供一定参考。对抗消化道肿瘤药理及作用机制的归纳总结,有望对今后预知子抗消化道肿瘤作用机制的深入研究起到一定帮助作用。预知子在临床上常以复方的形式发挥治疗作用,而药对为复方的基本构成单位,对预知子临床上常用药对的归纳总结可为复杂的复方研究提供基础以及对预知子的临床使用提供一定参考。

关键词：预知子化学成分消化系统肿瘤药对三萜皂苷绿原酸

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淫羊藿苷通过抑制内质网应激减轻异丙肾上腺素诱导的H9c2细胞肥大损伤

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中国病理生理杂志 2021年第4期37卷 619-625页

作者：周琳罗娟戢艳琼路玲俐张秋芳湖北医药学院药理教研室湖北十堰442000 湖北医药学院武当特色中药研究湖北省重点实验室湖北十堰442000

目的:观察淫羊藿苷(ICA)对异丙肾上腺素(ISO)诱导的H9c2细胞肥大损伤的作用,并进一步探讨其机制是否与内质网应激(ERS)有关。方法:将对数生长期的H9c2细胞随机分为正常对照组、ISO(10μmol/L)组、ISO+ICA(10μmol/L)组、ISO+ICA(20μmol... 详细信息

目的:观察淫羊藿苷(ICA)对异丙肾上腺素(ISO)诱导的H9c2细胞肥大损伤的作用,并进一步探讨其机制是否与内质网应激(ERS)有关。方法:将对数生长期的H9c2细胞随机分为正常对照组、ISO(10μmol/L)组、ISO+ICA(10μmol/L)组、ISO+ICA(20μmol/L)组、ISO+ICA(40μmol/L)组、ISO+4-苯基丁酸(4-PBA,5 mmol/L)组和ISO+美托洛尔(Meto,5μmol/L)组,ICA、4-PBA及Meto预给药1 h,ISO作用48 h。采用MTT法测定细胞活力;检测细胞培养上清液中乳酸脱氢酶(LDH)活性以评价心肌细胞损伤程度;罗丹明标记的鬼笔环肽染H9c2细胞骨架,测定细胞表面积;Hoechst 33258和TUNEL染色测定细胞凋亡率;Western blot检测ERS标志蛋白葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、GRP94和CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)的表达。结果:ICA能显著抑制ISO诱导的H9c2细胞肥大及凋亡,减少心肌细胞表面积及LDH的释放,降低细胞凋亡率,下调GRP78、GRP94和CHOP的表达。结论:淫羊藿苷能够有效抑制ISO诱导的H9c2细胞肥大及凋亡,其机制可能与抑制ERS相关信号通路有关。

关键词：淫羊藿苷异丙肾上腺素 H9c2细胞内质网应激心肌肥大

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传统中药材全蝎热稳定性多肽的消化酶抗性研究

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湖北医药学院学报 2024年第4期43卷 364-370页

作者：覃陈虎孙芳叶祥东罗旭东陈宗运湖北医药学院基础医学院生物化学教研室湖北医药学院武当特色中药研究湖北省重点实验室湖北十堰442000

目的:研究传统中药材全蝎三种热稳定性多肽BmKcug2、BmKcug2-P1和Martentoxin-P2的消化酶抗性。方法:结合重组表达、消化酶耐受实验、高效液相色谱技术及结构分析,评价多肽BmKcug2、BmKcug2-P1和Martentoxin-P2的肠胃蛋白酶稳定性。结果... 详细信息

目的:研究传统中药材全蝎三种热稳定性多肽BmKcug2、BmKcug2-P1和Martentoxin-P2的消化酶抗性。方法:结合重组表达、消化酶耐受实验、高效液相色谱技术及结构分析,评价多肽BmKcug2、BmKcug2-P1和Martentoxin-P2的肠胃蛋白酶稳定性。结果:多肽BmKcug2对胃蛋白酶、胰蛋白酶、α-胰凝乳蛋白酶都有很好的稳定性;多肽BmKcug2-P1对胃蛋白酶稳定性较好,对胰蛋白酶也具有一定的抗性,但对α-胰凝乳蛋白酶稳定较差;多肽Martentoxin-P2的酶稳定性谱与BmKcug2-P1类似。结论:本研究发现了全蝎毒腺中存在多肽能够耐受肠胃蛋白酶的消化作用,阐明了全蝎毒腺中多肽的消化酶稳定性,为深入研究全蝎中有效药用成分提供了思路,为系统研究全蝎多肽活性成分和口服给药途径之间的关系奠定了基础。

关键词：全蝎多肽肠胃蛋白酶酶稳定性

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蜂毒肽Protopolybia-MPⅢ及其优化突变体对HSV-1病毒复制周期不同阶段的抑制活性研究

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湖北医药学院学报 2024年第4期43卷 343-348页

作者：孙芳邬理莉覃陈虎罗旭东陈宗运叶祥东湖北医药学院基础医学院生物化学教研室湖北医药学院武当特色中药研究湖北省重点实验室湖北十堰442000

目的:研究蜂毒肽Protopolybia-MPⅢ及其优化突变体MPⅢ-3/4/7/10/14在体外对Ⅰ型单纯疱疹病毒(HSV-1)复制周期不同阶段的抑制活性。方法:通过qPCR技术和多肽分阶段孵育平台,检测蜂毒肽Protopoly⁃bia-MPⅢ及5个优化突变体在Vero细胞内对H... 详细信息

目的:研究蜂毒肽Protopolybia-MPⅢ及其优化突变体MPⅢ-3/4/7/10/14在体外对Ⅰ型单纯疱疹病毒(HSV-1)复制周期不同阶段的抑制活性。方法:通过qPCR技术和多肽分阶段孵育平台,检测蜂毒肽Protopoly⁃bia-MPⅢ及5个优化突变体在Vero细胞内对HSV-1感染的预防作用,以及其对HSV-1复制周期不同阶段的影响。结果:Protopolybia-MPⅢ多肽突变体MPⅢ-4/10/14预处理Vero细胞后去除上清,能限制HSV-1感染。进一步通过多肽抗病毒作用阶段分析实验,发现野生型多肽Protopolybia-MPⅢ主要作用于HSV-1复制周期的吸附阶段,而MPⅢ-3/14主要作用于病毒复制周期的进入/融合以及进入后阶段,MPⅢ-4/7主要作用于病毒复制周期的吸附以及进入/融合阶段,MPⅢ-10主要作用于病毒复制周期的吸附以及进入后阶段。结论:本工作明确了蜂毒肽Protopolybia-MPⅢ及其突变体MPⅢ-3/4/7/10/14对HSV-1复制周期不同阶段的抑制活性,初步阐明了Protopolybia-MPⅢ多肽优化突变体抗病毒活性提高的原因,为胡蜂抗病毒多肽的分子设计和药用研究奠定基础。

关键词：胡蜂毒液多肽优化突变体 Ⅰ型单纯疱疹病毒复制周期

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基于方剂学和液-质联用方法的武当道墨质量分析研究

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医学研究与教育 2025年第2期42卷 25-36页

作者：凌旭戢太阳金永昌金志雄湖北医药学院药学院药物质检教研室湖北十堰442000 武当特色中药研究湖北省重点实验室湖北十堰442000 湖北医药学院附属东风总医院药学部湖北十堰442001

目的发展武当道墨的快速简便分析方法,用于综合评价武当道墨的质量。方法查阅中国药典结合方剂学对武当道墨处方进行分析。采用容量分析法测定其物理常数和化学成分含量。基于回流提取法提取制剂中极性较大易溶出组分并采用高效液相色谱... 详细信息

目的发展武当道墨的快速简便分析方法,用于综合评价武当道墨的质量。方法查阅中国药典结合方剂学对武当道墨处方进行分析。采用容量分析法测定其物理常数和化学成分含量。基于回流提取法提取制剂中极性较大易溶出组分并采用高效液相色谱-质谱联用技术(High Performance Liquid Chro-matography-Mass Spectrometry,HPLC-MS)对其进行鉴别和测定。结果武当道墨性温、寒,味辛、苦,主要归于肝经、心经,主升、浮,主功效为消肿解毒、排脓止痛。其密度为1.416 g/cm3,熔程为47~77℃,pH值为8.03.挥发油含量约为0.04 mL/g,其中阿魏酸、丹皮酚、金合欢素、乌头碱、士的宁等5个成分含量最高。毒性生物碱含量限度符合国家标准。结论本研究初步探明了武当道墨处方性味归经、功效和主要成分,阐释了成分与药理药效之间的关系,为建立其质量分析方法提供了思路。

关键词：武当道墨提取分离理化常数含量测定质量控制

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三种Mastoparan胡蜂多肽的抗菌功能和分子优化研究

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湖北医药学院学报 2023年第5期42卷 469-474页

作者：叶祥东周海梅孙芳覃陈虎陈宗运罗旭东湖北医药学院基础医学院生物化学教研室武当特色中药研究湖北省重点实验室湖北十堰442000

目的:探究Protopolybia exigua胡蜂毒液来源Mastoparan家族蜂毒肽Protopolybia-MPⅠ、-MPⅡ和-MPⅢ的结构特征与抗菌功能并进行分子优化。方法:结合分子模拟和圆二色谱法分析Protopolybia-MPⅠ、-MPⅡ和-MPⅢ的结构特征,采用MIC方法评价... 详细信息

目的:探究Protopolybia exigua胡蜂毒液来源Mastoparan家族蜂毒肽Protopolybia-MPⅠ、-MPⅡ和-MPⅢ的结构特征与抗菌功能并进行分子优化。方法:结合分子模拟和圆二色谱法分析Protopolybia-MPⅠ、-MPⅡ和-MPⅢ的结构特征,采用MIC方法评价Protopolybia-MPⅠ、-MPⅡ和-MPⅢ的抗菌活性;基于Protopolybia-MPⅠ与-MPⅢ的序列与活性差异设计突变体并进行抗菌活性评价。结果:Protopolybia-MPⅠ、-MPⅡ和-MPⅢ均具有典型的α-螺旋构象;Protopolybia-MPⅢ对金黄色葡萄球菌和鲍曼不动杆菌具有显著的抗菌活性;通过设计突变体发现Protopolybia-MPⅢ-3、-6与-12的抗菌活性明显改善。结论:本研究为临床新型肽类抗菌药物的研发提供了先导分子,并丰富了对Mastoparan家族蜂毒肽的认识。

关键词：蜂毒肽 Mastoparan家族多肽 Protopolybia-MPⅢ 抗菌活性分子优化

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UPLC-Q-TOF/MS/MS法分析长柄臭黄荆醇提物化学成分

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湖北医药学院学报 2022年第4期41卷 327-332页

作者：李洪亮刘凯琪陈晓静段菊凤郭莹莹汪选斌湖北医药学院附属人民医院药学部中药药理实验室湖北十堰442000 湖北医药学院生物医药研究院湖北十堰442000 湖北医药学院武当特色中药研究湖北省重点实验室湖北十堰442000

目的:采用超高效液相色谱-四级杆-飞行时间串联质谱法(UPLC-Q-TOF/MS/MS)鉴定长柄臭黄荆醇提物化学成分。方法:采用Waters ACQUITY UPLC HSS T3 (2.1 mm×100 mm, 1.8μm)色谱柱,流动相(0.1%甲酸水溶液-乙腈)梯度洗脱,使用AB Sciex ... 详细信息

目的:采用超高效液相色谱-四级杆-飞行时间串联质谱法(UPLC-Q-TOF/MS/MS)鉴定长柄臭黄荆醇提物化学成分。方法:采用Waters ACQUITY UPLC HSS T3 (2.1 mm×100 mm, 1.8μm)色谱柱,流动相(0.1%甲酸水溶液-乙腈)梯度洗脱,使用AB Sciex Triple TOF■ 4600高分辨质谱。基于ESI正、负离子采集模式获得MS并进行数据分析。在此基础上,根据成分保留时间结合Natural Products HR-MS/MS Spectral Library 1.0数据库进行匹配及相关文献报道进行结构鉴定。结果:从长柄臭黄荆醇提物中共鉴定出53个化合物,其中黄酮类19种,酚酸类16种,苯乙醇类5种,脂肪酸类6种,杂环类化合物7种。结论:UPLC-Q-TOF/MS/MS可快速鉴定长柄臭黄荆醇提物的化学成分,为长柄臭黄荆质量控制、发现新化合物和有价值的药用成分提供依据。

关键词：长柄臭黄荆醇提物 UPLC-Q-TOF/MS/MS 化学成分定性分析

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聚多巴胺-氧化石墨烯修饰电极在葛根中葛根素与大豆苷元分析的应用研究

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湖北医药学院学报 2021年第5期40卷 446-453页

作者：刘茜雅王紫珺凌旭湖北医药学院药学院药物质检教研室湖北十堰442000 湖北医药学院武当特色中药研究湖北省重点实验室湖北十堰442000

目的:建立一种快速、简便定量分析葛根中葛根素和大豆苷元的方法,用于含葛根中药的质量控制。方法:利用葛根素和大豆苷元的电化学氧化活性,采用差分脉冲伏安法,以聚多巴胺-氧化石墨烯复合物修饰电极测定不同浓度的葛根素和大豆苷元混合... 详细信息

目的:建立一种快速、简便定量分析葛根中葛根素和大豆苷元的方法,用于含葛根中药的质量控制。方法:利用葛根素和大豆苷元的电化学氧化活性,采用差分脉冲伏安法,以聚多巴胺-氧化石墨烯复合物修饰电极测定不同浓度的葛根素和大豆苷元混合溶液在该电极上的电化学氧化过程中的峰电流,并分析其与浓度之间的关系,从而实现对含葛根素和大豆苷元混合溶液的简便、高灵敏度检测。结果:在pH=8.0的0.02 mol/mL Tris-HCl缓冲盐为支持电解质的溶液中,不同浓度的葛根素和大豆苷元的混合溶液,得到一系列良好的氧化峰,峰电位Ep=0.600 V,峰电流Ip与混合溶液浓度C在5.0×10^(-5)~2.0×10^(-3) mg/mL范围内线性关系良好,其线性关系式为Ip=25􀆰209C+4.44,相关系数为r=0.9981;同时在这个范围内葛根中葛根素和大豆苷元的加样回收率也较高(75􀆰31%~87.24%)。结论:聚多巴胺-氧化石墨烯复合物修饰电极对葛根素和大豆苷元具有良好的电化学响应,为建立复杂样品中微量葛根素和大豆苷元的快速、简便、灵敏的定量分析方法提供了新思路。

关键词：葛根素大豆苷元差分脉冲伏安法聚多巴胺-氧化石墨烯复合物定量分析

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E2F1 siRNA通过抑制血红素诱导的神经元凋亡发挥保护作用

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安徽医科大学学报 2020年第6期55卷 842-847页

作者：赵丹李贤玉袁美春吴艳石柳柳张志锋湖北医药学院生理教研室十堰442000 胚胎干细胞研究湖北省重点实验室十堰442000 武当特色中药研究湖北省重点实验室十堰442000

目的探讨E2F转录因子1(E2F1)在血红素诱导的大鼠原代皮层神经元损伤中的作用及机制。方法体外培养大鼠原代皮层神经元并鉴定,采用不同浓度血红素处理神经元,12 h后LDH实验及MTT实验检测细胞损伤;免疫荧光双染观察神经元E2F1定位;Western... 详细信息

目的探讨E2F转录因子1(E2F1)在血红素诱导的大鼠原代皮层神经元损伤中的作用及机制。方法体外培养大鼠原代皮层神经元并鉴定,采用不同浓度血红素处理神经元,12 h后LDH实验及MTT实验检测细胞损伤;免疫荧光双染观察神经元E2F1定位;Western blot检测神经元E2F1表达;将神经元分为溶剂组(DMSO组)、损伤组(Hemin组)、阴性对照组(Hemin+Control siRNA组)、治疗组(Hemin+E2F1siRNA组)进行TUNEL染色及caspase活性检测。结果神经元培养至第7天,NeuN染色阳性率达95%;血红素(50、100、200μmol/L)处理后神经元LDH释放率增加、细胞生存率降低、E2F1表达上调(F=22.9,P<0.05);与阴性对照组相比,治疗组神经元LDH释放率降低([(73.6±5.2)%vs(42±4.1)%,F=343.4,P<0.05]、细胞生存率升高[(28.7±3.4)%vs(61±2.9)%,F=127.7,P<0.05];TUNEL结果显示血红素诱导神经元凋亡增加,治疗组凋亡减少(F=67.2,P<0.05);caspase活性检测显示血红素损伤组神经元caspase-3、caspase-8、caspase-9活性升高(t=15.7,t=9.7,t=7.8,P<0.05),治疗组caspase-3、caspase-8、caspase-9活性降低(t=8.6,t=7.3,t=5.7,P<0.05)。结论 E2F1 siRNA可能通过抑制血红素诱导的神经元凋亡而发挥神经保护作用。

关键词：脑出血血红素转录因子E2F1 细胞凋亡神经保护

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Bcl-2转录抑制因子1在肝癌组织中的表达及意义

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中国普通外科杂志 2020年第7期29卷 849-856页

作者：刘佳玲黄林生张朔祁莎莎鲍阳李飞湖北医药学院药学院药理学系湖北十堰442000 湖北省十堰市太和医院肝胆胰外科湖北十堰442000 武当特色中药研究湖北省重点实验室湖北十堰442000

背景与目的:已有研究显示,Bcl-2转录抑制因子1(Bit1)在多种肿瘤中异常表达并在肿瘤进展中发挥重要作用,Bit1在肝细胞癌(HCC)中的表达水平及临床意义值得探讨。本研究通过检测Bit1在HCC组织中的表达,分析其与HCC患者临床病理特征及预后... 详细信息

背景与目的:已有研究显示,Bcl-2转录抑制因子1(Bit1)在多种肿瘤中异常表达并在肿瘤进展中发挥重要作用,Bit1在肝细胞癌(HCC)中的表达水平及临床意义值得探讨。本研究通过检测Bit1在HCC组织中的表达,分析其与HCC患者临床病理特征及预后的关系,从而探讨Bit1在HCC中的临床意义。方法:采用q RT-PCR、Westernblot检测34例HCC患者手术切除癌组织及对应癌旁组织Bit1m RNA及蛋白表达情况,用免疫组化法检测组织芯片中90例HCC患者癌组织与对应癌旁组织Bit1蛋白表达情况并分析其表达与HCC患者临床病理参数及预后的关系。结果:q RT-PCR与Westernblot检测结果显示,与癌旁组织比较,Bit1在HCC组织中的m RNA及蛋白表达水平均明显上调(P<0.05)。免疫组化结果显示,Bit1蛋白定位于细胞质,其在癌组织中的高表达率明显高于癌旁组织(P<0.05),且Bit1在HCC组织中的表达与HCC患者肿瘤的复发及病理分级明显有关(均P<0.05),Kaplan-Meier分析显示,Bit1蛋白高表达患者总生存率和无病生存率低于Bit1蛋白低表达患者,但差异均未达统计学意义(P=0.547、0.414)。结论:Bit1在HCC组织中高表达,且Bit1表达与肿瘤的复发及病理分级密切相关,提示Bit1可能是影响肿瘤进展的重要分子,其有望成为HCC患者个体化治疗靶点。

关键词：癌,肝细胞 Bcl-2转录抑制因子1 生物标记,肿瘤

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