检索结果-内蒙古大学图书馆

肿瘤研究与临床 2013年第7期25卷 441-444页

作者：汤祥军张力王晓勋黄宽明鲁军体曹刚张相华涂汉军湖北医药学院附属太和医院神经外科湖北十堰442000 湖北医药学院附属太和医院生命科学研究所湖北十堰442000

目的探讨转染肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体（TRAIL）基因的骨髓间充质干细胞（BMSC）基因表达情况及其功能。方法实验分三组，即转染TRAIL基因组、转染空载体组及空白对照组。用脂质体法将TRAIL转入绿色荧光蛋白（GFP）-BMSC中，反转... 详细信息

目的探讨转染肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体（TRAIL）基因的骨髓间充质干细胞（BMSC）基因表达情况及其功能。方法实验分三组，即转染TRAIL基因组、转染空载体组及空白对照组。用脂质体法将TRAIL转入绿色荧光蛋白（GFP）-BMSC中，反转录PCR法检测BMSC的TRAIL mRNA水平，Western blot、免疫荧光法检测TRAIL蛋白的表达；将携带有TRAIL的GFP-BMSC同大鼠C6胶质瘤细胞共培养，通过四甲基偶氮唑蓝比色法检测其对肿瘤细胞的旁观者效应，Hochest-PI双染色法观察TRAIL转染的BMSC对C6细胞凋亡的影响。结果免疫荧光检测显示，转染TRAIL 24、48 h的GFP-BMSC细胞质和细胞膜有TRAIL蛋白的表达，24 h比48 h荧光强，空白对照组及空载体组细胞未见表达。反转录PCR、Western blot显示转染TRAIL基因组细胞TRAIL mRNA及蛋白高表达，空白对照组及空载体组未见表达。转染TRAIL的GFP-BMSC明显抑制C6细胞存活，抑制率为（62.7±0.1）%，高于空载体组的（16.7±0.1）%（P＜0.05），同时转染TRAIL基因的BMSC可促进C6细胞的凋亡。结论转染TRAIL的BMSC能够稳定表达目的基因，且能促进大鼠C6胶质瘤细胞凋亡，具有明显的旁观者效应。

关键词：肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体骨髓间充质干细胞凋亡

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STAT3介导了血小板源性生长因子BB诱导的大鼠血管平滑肌细胞Pim-1表达

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中国病理生理杂志 2013年第5期29卷 804-809页

作者：孙晓东王燕王汉琴黄铁柱湖北医药学院基础医学研究所湖北十堰442000 湖北医药学院附属太和医院生命科学研究所湖北十堰442000 湖北医药学院人体解剖学教研室湖北十堰442000

目的:观察血小板源性生长因子BB(PDGF-BB)是否可以诱导大鼠血管平滑肌细胞(VSMCs)表达Pim-1及Pim-1对VSMCs增殖的影响,探讨STAT3信号分子在这一过程中的作用,为血管重建性疾病(VRD)的研究提供实验依据。方法:不同浓度PDGF-BB作用不同时... 详细信息

目的:观察血小板源性生长因子BB(PDGF-BB)是否可以诱导大鼠血管平滑肌细胞(VSMCs)表达Pim-1及Pim-1对VSMCs增殖的影响,探讨STAT3信号分子在这一过程中的作用,为血管重建性疾病(VRD)的研究提供实验依据。方法:不同浓度PDGF-BB作用不同时间刺激体外培养的VSMCs,用细胞计数法检测增殖;用re-al-time RT-PCR检测Pim-1 mRNA表达水平;Western blotting检测STAT3的活性变化;用放线菌素D(actinomycinD)、AG490(JAK特异性抑制剂)及siRNA沉默Pim-1和STAT3进行干预。结果:PDGF-BB(20μg/L)作用VSMCs24 h,可以诱导细胞增殖,Pim-1沉默抑制了这一过程;正常未经处理的VSMCs Pim-1 mRNA表达量较低,不同浓度PDGF-BB(10μg/L～50μg/L)作用VSMCs 1 h,Pim-1 mRNA表达明显增加,其中以20μg/L最显著;用PDGF-BB(20μg/L)作用VSMCs不同时间(0.5 h～4 h),可显著上调Pim-1 mRNA表达,以0.5 h最显著。用actinomycin D及AG490预处理后Pim-1 mRNA表达随之降低。PDGF-BB可激活VSMCs中磷酸化STAT3水平,AG490和转染STAT3-siRNA可抑制STAT3的磷酸化以及相应的Pim-1 mRNA表达。结论:PDGF-BB可通过Pim-1调节VSMCs增殖;STAT3可能参与了PDGF-BB诱导的VSMCs Pim-1表达。

关键词： Pim-1蛋白 STAT3转录因子血管平滑肌细胞 RNA干扰血小板源性生长因子BB

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慢性牙周炎患者血清E-selectin的水平及其S128R基因多态性的研究

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实用口腔医学杂志 2011年第3期27卷 394-397页

作者：罗志晓柴红波夏凌云江玲王晓勋冷卫东湖北医药学院附属太和医院口腔科十堰442000 湖北医药学院附属太和医院生命科学研究所十堰442000

目的:探讨中国汉族人群中E-选择素第4外显子S128R基因多态性与慢性牙周炎(chronic periodontitis,CP)的相关性,以及CP对血清E选择素水平的影响。方法:采用病例-对照研究方法,应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术检测C... 详细信息

目的:探讨中国汉族人群中E-选择素第4外显子S128R基因多态性与慢性牙周炎(chronic periodontitis,CP)的相关性,以及CP对血清E选择素水平的影响。方法:采用病例-对照研究方法,应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术检测CP患者和健康对照者的E-选择素第4外显子S128R的基因型和等位基因分布,同时采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测CP患者和对照者血清E-selectin水平。结果:基因型频率符合Hardy-Weinberg平衡。E-selectin基因型SS、SR频率在对照组与CP组分别为93.7%、6.3%和83.9%、16.1%,等位基因S、R频率在对照组和CP组分别为96.9%、3.1%和92.0%、7.97%。基因型频率和等位基因频率在CP组和对照组间的差异均有显著性(P<0.05),CP患者血清E-selectin水平显著高于对照组(P<0.01)。结论:E-选择素第4外显子S128R基因多态性与CP有相关性,R等位基因可能是CP患者易感性的遗传标志之一。CP患者血清E-selectin水平明显升高。

关键词： E-选择素慢性牙周炎基因多态性

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ATG5介导内皮细胞外泌体调控平滑肌细胞增殖

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安徽医科大学学报 2020年第11期55卷 1718-1724页

作者：李征远胡培周琳单勐也郭兴荣湖北医药学院生物医药研究院胚胎干细胞研究湖北省重点实验室十堰442000 湖北医药学院附属太和医院生命科学研究所十堰442000 湖北医药学院附属太和医院检验科十堰442000

目的探究ATG5介导人脐静脉内皮细胞外泌体对小鼠胸主动脉平滑肌细胞增殖的影响。方法利用0.1%Ⅱ型胶原酶灌注消化法获得原代人脐静脉内皮细胞;利用组织块贴壁法分离原代小鼠胸主动脉平滑肌细胞;利用超速离心法提取内皮细胞外泌体;利用... 详细信息

目的探究ATG5介导人脐静脉内皮细胞外泌体对小鼠胸主动脉平滑肌细胞增殖的影响。方法利用0.1%Ⅱ型胶原酶灌注消化法获得原代人脐静脉内皮细胞;利用组织块贴壁法分离原代小鼠胸主动脉平滑肌细胞;利用超速离心法提取内皮细胞外泌体;利用共聚焦高内涵成像分析仪示踪平滑肌细胞摄取内皮细胞外泌体;利用siRNA干扰内皮细胞ATG5蛋白表达;利用高内涵DPC成像模式分析平滑肌细胞增殖能力。结果成功得到活性好、纯度高的人脐静脉内皮细胞和小鼠胸主动脉平滑肌细胞。超速离心法获得的内皮细胞外泌体经免疫印迹鉴定,呈Hsp70、TSG101、CD9和CD63阳性。高内涵示踪结果显示平滑肌细胞在共培养30 min后开始摄取内皮细胞外泌体,共培养4 h后,平滑肌细胞摄取的外泌体明显增多。高内涵监测结果显示,与对照组比较,ATG5干扰组内皮细胞分泌的外泌体在浓度为200μg/ml时能够明显抑制平滑肌细胞的增殖。结论ATG5可通过介导内皮细胞外泌体调控平滑肌细胞增殖。

关键词：人脐静脉内皮细胞小鼠胸主动脉平滑肌细胞外泌体 ATG5

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督脉电针对脊髓损伤大鼠生长相关蛋白43表达的影响

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中国康复理论与实践 2014年第1期20卷 27-29页

作者：李兵奎曾彬常巍王达义杨琪王晓勋余连军刘涛湖北医药学院附属太和医院脊柱外科湖北十堰市442000 湖北医药学院附属东风公司总医院内科湖北十堰市442000 湖北医药学院附属太和医院生命科学研究所湖北十堰市442000 湖北医药学院附属太和医院病理科湖北十堰市442000

目的研究督脉电针对大鼠脊髓损伤后生长相关蛋白43(GAP-43)基因及蛋白表达的影响。方法利用多中心急性脊髓损伤打击器建立Sprague-Dawley大鼠T11脊髓损伤模型,造模成功后分为对照组(A组,n=18)和督脉电针组(B组,n=18)。造模后1周,B组接... 详细信息

目的研究督脉电针对大鼠脊髓损伤后生长相关蛋白43(GAP-43)基因及蛋白表达的影响。方法利用多中心急性脊髓损伤打击器建立Sprague-Dawley大鼠T11脊髓损伤模型,造模成功后分为对照组(A组,n=18)和督脉电针组(B组,n=18)。造模后1周,B组接受督脉电针治疗每天1次。两组大鼠于造模后1、2、4、8周行BBB后肢运动功能评分;造模后2、4、8周,采用RT-PCR检测GAP-43 mRNA表达,采用免疫组化染色检测GAP-43蛋白表达。结果造模后,与A组比较,B组BBB评分明显升高(P<0.01),GAP-43 mRNA相对表达量明显升高(P<0.01),GAP-43蛋白阳性表达明显增强(P<0.01)。结论督脉电针可促进脊髓损伤大鼠GAP-43表达。

关键词：脊髓损伤督脉电针生长相关蛋白43

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小鼠IL-2基因的RT-PCR克隆

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湖北农业科学 2013年第14期52卷 3367-3369页

作者：唐微景冬梅董兰李莉王娜曾海湖北医药学院附属太和医院生命科学研究所湖北十堰442000 郧阳医学院第一临床学院湖北十堰442000

根据GenBank中小鼠的IL-2 cDNA序列设计引物,从小鼠肝脏组织中提取总RNA,采用RT-PCR技术扩增出小鼠的IL-2基因。结果表明,克隆出了IL-2基因,获得了与预期大小相一致的850 bp的DNA片段,为研究其组成、结构和利用基因工程生产该药物打下... 详细信息

根据GenBank中小鼠的IL-2 cDNA序列设计引物,从小鼠肝脏组织中提取总RNA,采用RT-PCR技术扩增出小鼠的IL-2基因。结果表明,克隆出了IL-2基因,获得了与预期大小相一致的850 bp的DNA片段,为研究其组成、结构和利用基因工程生产该药物打下基础。

关键词：小鼠白细胞介素2(IL-2)基因反转录

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新基因FAM92A1-289与增殖细胞核抗原PCNA相互作用的验证

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医学研究杂志 2016年第3期45卷 49-52页

作者：桂卉郭兴荣方娟沈君豪阮绪芝湖北医药学院附属太和医院生命科学研究所十堰442000

目的利用免疫共沉淀技术验证未知蛋白FAM92A1-289和PCNA(增殖细胞核抗原)之间的相互作用。方法构建带有嘌呤霉素抗性的载体CMV-SP6--GFP-FAM92A1-289和真核表达载体PCDNA3.1-PCNA,先将CMV-SP6-GFP-FAM92A1-289载体转染入Hela细胞,通过... 详细信息

目的利用免疫共沉淀技术验证未知蛋白FAM92A1-289和PCNA(增殖细胞核抗原)之间的相互作用。方法构建带有嘌呤霉素抗性的载体CMV-SP6--GFP-FAM92A1-289和真核表达载体PCDNA3.1-PCNA,先将CMV-SP6-GFP-FAM92A1-289载体转染入Hela细胞,通过最合适浓度的嘌呤霉素筛选,得到稳定表达FAM92A1-289的Hela/FAM92A1-289细胞,再将载体PCDNA3.1-PCNA转染入Hela/FAM92A1-289细胞,利用免疫共沉淀来验证FAM92A1-289和PCNA之间的相互作用。结果构建的重组表达载体经双酶切、测序鉴定正确,稳定表达株Hela/FAM92A1-289细胞构建成功,PCNA单克隆抗体沉淀蛋白复合物后,用GFP抗体进行Western blot法检测,检测出了GFP-FAM92A1-289蛋白。结论免疫共沉淀证明了FAM92A1-289和PCNA之间存在相互作用。

关键词： FAM92A1-289 PCNA 免疫共沉淀相互作用

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siRNA沉默Chk1基因对乳腺癌细胞MCF-7增殖的影响及其作用机制的探讨

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临床肿瘤学杂志 2012年第6期17卷 498-500页

作者：刘志祥朱圣明李瑞明王晓勋湖北医药学院附属太和医院检验科湖北十堰442000 湖北医药学院附属太和医院肿瘤科 442000 湖北医药学院附属太和医院生命科学研究所 442000

目的探讨siRNA沉默检测点激酶1(Chk1)基因对乳腺癌细胞MCF-7增殖和周期的影响及其作用机制。方法采用RNAi技术将乳腺癌细胞MCF-7中Chk1基因沉默,用Western blotting检测转染前后MCF-7细胞中Chk1蛋白表达情况;采用MTT比色法和流式细胞术... 详细信息

目的探讨siRNA沉默检测点激酶1(Chk1)基因对乳腺癌细胞MCF-7增殖和周期的影响及其作用机制。方法采用RNAi技术将乳腺癌细胞MCF-7中Chk1基因沉默,用Western blotting检测转染前后MCF-7细胞中Chk1蛋白表达情况;采用MTT比色法和流式细胞术分析Chk1基因沉默对乳腺癌细胞MCF-7增殖和周期的影响。结果 Chk1 siRNA转染后,MCF-7细胞中Chk1蛋白表达下降约82%,明显低于未转染组和脂质体转染组(P<0.05)。Chk1 siRNA转染组转染48h的MCF-7细胞增殖活性下降,其增殖抑制率为44.7%,明显高于脂质体转染组的5.26%(P<0.05)。流式细胞仪检测显示,Chk1 siRNA转染组G2/M期比例为(11.3±0.7)%,明显低于未转染组(44.2±1.9)%和脂质体转染组(45.3±2.1)%,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 siRNA沉默Chk1基因可明显抑制人乳腺癌细胞MCF-7增殖,并且其抑制增殖作用与减弱G2/M期阻滞有关。

关键词： MCF-7细胞株 RNA干扰细胞周期检测点激酶1

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129例急性白血病流式细胞术免疫分型的特点分析

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中国实验诊断学 2013年第1期17卷 124-126页

作者：刘志祥姚忠红李瑞明王晓勋湖北医药学院附属太和医院检验科湖北十堰442000 湖北医药学院附属太和医院脊柱外科湖北十堰442000 湖北医药学院附属太和医院生命科学研究所湖北十堰442000

免疫分型是用已知的单克隆抗体鉴定细胞表面或细胞内的免疫标志，剖析细胞的来源及分化阶段，与流式细胞术联合应用使诊断白血病更精细、全面，对为临床合理治疗、判断预后提供科学依据。我们应用CD45／SSC设门的三色荧光流式细胞术对12... 详细信息

免疫分型是用已知的单克隆抗体鉴定细胞表面或细胞内的免疫标志，剖析细胞的来源及分化阶段，与流式细胞术联合应用使诊断白血病更精细、全面，对为临床合理治疗、判断预后提供科学依据。我们应用CD45／SSC设门的三色荧光流式细胞术对129例急性白血病患者进行较全面的免疫分型检测，对其结果和诊断标准进行分析。

关键词：急性白血病患者流式细胞术免疫分型 CD45 SSC设门联合应用诊断标准免疫标志细胞表面

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TBX2基因在头颈鳞癌中甲基化相关的预后分析

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数理医药学杂志 2024年第2期37卷 100-107页

作者：昝雨欣丁妍湖北医药学院生物医药研究院湖北十堰442000 湖北医药学院附属太和医院生命科学研究所湖北十堰442000 胚胎干细胞研究湖北省重点实验室湖北十堰442000

目的探究TBX2基因与头颈鳞癌(head and neck squamous cell carcinoma,HNSCC)的关系,分析甲基化预后的价值。方法综合利用UCSC Xena数据库、基因表达综合(Gene Expression Omnibus,GEO)数据库、人类蛋白质图谱(Human Protein Atlas,HPA)数据库、UALCAN数据库挖掘TBX2基因的表达、DNA甲基化和临床相关性,利用基因集富集分析(gene set enrichment analysis,GSEA)法富集TBX2在HNSCC中所参与的信号通路。结果TBX2基因在HNSCC中高表达,TBX2基因高、低表达组HNSCC患者的总生存率(overall survival,OS)无明显差异,但HNSCC中TBX2基因的表达与临床分级分期有关。TBX2基因某些cg位点的低甲基化水平与较差的OS和无进展生存期(progression free survival,PFS)密切相关。GSEA结果显示,TBX2基因主要参与钙信号通路、黏着斑、蛋白酶体等多条通路。结论TBX2基因可作为HNSCC特异性诊断和预后的生物标志物。

关键词： TBX2基因甲基化头颈鳞癌预后

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