检索结果-内蒙古大学图书馆

作者：王保宁杨靖李建春祝捷周永君李明远四川大学华西基础医学与法医学院微生物学教研室湖北医药学院微生物学教研室四川万可泰生物技术有限责任公司

目的:构建含有分子内佐剂ctB的幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,***)尿素酶双亚基多表位DNA疫苗(pVAX1-ctB-ureI-ureB,以下简写为BIB),评价其作为DNA疫苗的保护效果。方法:在分析***定植关键分子尿素膜通道蛋白UreI(Urease I)和尿素酶... 详细信息

目的:构建含有分子内佐剂ctB的幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,***)尿素酶双亚基多表位DNA疫苗(pVAX1-ctB-ureI-ureB,以下简写为BIB),评价其作为DNA疫苗的保护效果。方法:在分析***定植关键分子尿素膜通道蛋白UreI(Urease I)和尿素酶催化亚基UreB(Urease B)免疫表位基础上,设计出含两个蛋白优势抗原表位的核酸序列(ureI-B),在ureI-B序列的N端接入佐剂基因ctB,构建真核表达质粒BIB。将鉴定正确的真核表达质粒PVAX1/BIB转染293T细胞,用RT-PCR方法和细胞免疫荧光技术分析融合基因片段的表达情况。20只BALB/c小鼠随机均分为2组,在BIB DNA疫苗肌肉注射免疫后第5周对小鼠施以*** SS1菌株连续3次灌胃攻击。攻击后第35天,分别用PCR法、免疫组化法、组织HE染色病理分析法对小鼠胃黏膜进行***感染情况分析。结果:重组质粒BIB的酶切鉴定、PCR结果分析、测序结果分析显示与预期100%一致。BIB质粒DNA转染293细胞后在转录水平证明了融合基因能在293T细胞中表达,荧光免疫分析显示表达在细胞贡中,小鼠胃黏膜PCR检测、免疫组织化学检查、组织HE染色病理分析及胃炎评分结果提示BIB DNA疫苗对***攻击感染有保护作用,保护率为87.5%。结论:成功构建含分子内佐剂ctB的*** DNA疫苗BIB,动物实验证实肌肉注射该DNA疫苗能对*** SS1引起的感染产生有效免疫保护性。

关键词：多表位免疫保护性幽门螺杆菌初步研究 DNA

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布鲁菌强毒株与疫苗株基因间的比较基因组研究

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中华实验和临床感染病杂志（电子版） 2015年第4期9卷 109-111页

作者：赵琴李儒贵刘翔占国清杨靖李蓓谭华炳湖北医药学院附属人民医院感染性疾病科(湖北医药学院肝病研究室发热疾病研究室)十堰市442000 湖北省房县人民医院检验科湖北房县442100 湖北医药学院微生物学教研室十堰市442000

目的比较我国布鲁菌强毒株与不同疫苗株基因组间的差异,寻找布鲁菌强毒株及不同种群布鲁菌所特有的基因。方法利用布鲁菌全基因组DNA芯片,进行牛、羊布鲁菌强毒株及我国常用布鲁菌疫苗株M5株(羊种)、S2株(猪种)、S19株(牛种)和104M株(牛... 详细信息

目的比较我国布鲁菌强毒株与不同疫苗株基因组间的差异,寻找布鲁菌强毒株及不同种群布鲁菌所特有的基因。方法利用布鲁菌全基因组DNA芯片,进行牛、羊布鲁菌强毒株及我国常用布鲁菌疫苗株M5株(羊种)、S2株(猪种)、S19株(牛种)和104M株(牛种)间比较基因组学研究,寻找布鲁菌强毒株及不同种群布鲁菌特有的基因。结果在牛和羊布鲁菌强毒株中共发现263个在所有疫苗株中缺失的基因;发现BMEII0827-BMEII0849基因片段在牛布鲁菌疫苗株与强毒株中均缺失,而在羊及猪布鲁菌中能检测到;在猪布鲁菌疫苗株中比牛、羊布鲁菌缺失了一个BMEI1684-BMEI1702的基因片段。结论通过DNA芯片比较基因组学的研究,寻找到布鲁菌强毒株及不同种群布鲁菌所特有的基因,为布鲁菌致病机制的研究提供了靶标。

关键词：布鲁菌比较基因组疫苗毒力相关因子

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抗体的系统性检测方法

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四川生理科学杂志 2013年第3期35卷 121-123页

作者：杨靖孙卫兵邝玉湖北医药学院基础医学院微生物学教研室湖北十堰442000 四川大学华西基础医学与法医学院微生物学教研室四川成都610041 湖北省十堰市西苑医院呼吸内科湖北十堰442000

21世纪随着现代生物技术、信息技术在生物医学工程学等研究领域的不断深入,以细胞工程技术和基因工程技术为主体的抗体工程药物近年来取得了突破性进展,其应用已涉及医学、农业、食品、环境等众多领域。当前生物医药正在成为发展潜力无... 详细信息

21世纪随着现代生物技术、信息技术在生物医学工程学等研究领域的不断深入,以细胞工程技术和基因工程技术为主体的抗体工程药物近年来取得了突破性进展,其应用已涉及医学、农业、食品、环境等众多领域。当前生物医药正在成为发展潜力无限的产业,而生物医药领域中发展最快的是抗体工程药物,在基础研究、蛋白纯化、环境与食品监测、疾病诊断预防及治疗和优生优育等方面均有不可替代的重要作用。虽然抗体的制备技术日趋完善,但用于诊断和治疗的抗体必须符合高纯度、高效价、高可用性的要求,对抗体的制备、分离和鉴定就显得尤为重要。本文简要阐述了抗体工程药物制备中对抗体成分的系统性检测方法,包括纯度检测、特异性检测、亲和力检测、效价检测等,并对抗体这种特殊蛋白的常用定量检测方法进行了比较。

关键词：抗体鉴定 ELISA Lowry法 BCA法

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冠突散囊菌nsdD基因超表达菌株的构建及表型分析

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基因组学与应用生物学 2017年第3期36卷 900-905页

作者：余春芳熊庆李文仿谭玉梅刘永翔刘作易欧琴湖北医药学院基础医学院微生物学教研室十堰442000 贵州省科学技术厅贵阳550002 十堰市太和医院普外科十堰442000 贵州省农业生物技术重点实验室贵阳550006 贵州省生物技术研究所贵阳550006 贵州省农业科学院贵阳550006

为了研究冠突散囊菌nsdD基因的功能,本研究将冠突散囊菌nsdD的cDNA置于强启动子三磷酸甘油醛脱氢酶启动子PgpdA下游及色氨酸合成酶C基因终止子TtrpC上游构建nsdD基因超表达载体PURT5750,采用根癌农杆菌介导方法将表达质粒PURT5750转化... 详细信息

为了研究冠突散囊菌nsdD基因的功能,本研究将冠突散囊菌nsdD的cDNA置于强启动子三磷酸甘油醛脱氢酶启动子PgpdA下游及色氨酸合成酶C基因终止子TtrpC上游构建nsdD基因超表达载体PURT5750,采用根癌农杆菌介导方法将表达质粒PURT5750转化到冠突散囊菌进行功能验证。结果显示向基因组随机插入外源质粒DNA,随机挑选11个nsd D基因超表达转化子,对nsdD基因超表达转化子菌株培养观察并与野生型菌株相比发现,在5%和17%NaCl培养基中菌落差异不显著,而且仍能产生成熟的有性孢子。本实验为冠突散囊菌有性发育调控机制的研究提供了技术基础。

关键词：冠突散囊菌表达质粒构建 nsdD基因超表达农杆菌介导

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多视角录播模式在病原生物学实验教学中的应用设想

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四川生理科学杂志 2017年第3期39卷 162-163页

作者：周琳琳李婉宜杨靖曾蔚马巨辉张卫华李明远邝玉四川大学华西基础医学与法医学院微生物学教研室四川成都610041 湖北医药学院基础医学院微生物学教研室湖北十堰442000 四川大学华西基础医学与法医学院形态学实验室四川成都610041 四川大学计算机学院四川成都610065

为推进病原生物学实验教学改革,设想建立以多视角录播模式为基础的病原生物学实验教学体系,包括病原生物学实验教学多视角录播系统和病原生物学实验操作数字化评估系统。希望通过人机交互的实验教学、操作和评估方式,在提高学生学习积... 详细信息

为推进病原生物学实验教学改革,设想建立以多视角录播模式为基础的病原生物学实验教学体系,包括病原生物学实验教学多视角录播系统和病原生物学实验操作数字化评估系统。希望通过人机交互的实验教学、操作和评估方式,在提高学生学习积极性的同时,更有效地培养学生的观察能力、思维能力和实验操作能力。

关键词：多视角录播模式病原生物学实验实验教学改革

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PCOS患者体质指数、体脂率与其糖脂代谢指标的相关性

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标记免疫分析与临床 2018年第7期25卷 1052-1056页

作者：林丽游先容杨靖郭俊十堰市太和医院检验科湖北十堰442000 宜宾市第一人民医院消毒供应中心四川宜宾644000 湖北医药学院基础医学院微生物学教研室湖北十堰442000 湖北医药学院附属东风总医院肿瘤科湖北十堰442000

目的比较不同体质指数、体脂率的多囊卵巢综合征(PCOS)患者糖脂代谢指标的差异,探讨PCOS患者体质指数、体脂率与代谢综合征的相关性。方法选取2015年1月至2016年12月于我院确诊的106例PCOS患者,测定其体格、激素、糖代谢和脂代谢指标,... 详细信息

目的比较不同体质指数、体脂率的多囊卵巢综合征(PCOS)患者糖脂代谢指标的差异,探讨PCOS患者体质指数、体脂率与代谢综合征的相关性。方法选取2015年1月至2016年12月于我院确诊的106例PCOS患者,测定其体格、激素、糖代谢和脂代谢指标,分析体质指数、体脂率与相关指标的相关性。结果按体质指数(BMI)≥28kg/m^2和体脂率(BF%)≥35%来划分体型,(1)不同体型PCOS患者性激素结合球蛋白(SHBG)、黄体生成素(LH)/促卵泡刺激素(FSH)比值差异有统计学意义(P<0.05);(2)不同体型患者空腹胰岛素(FINS)、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、葡萄糖耐量试验餐后30min血糖(PBG30)、餐后30min胰岛素水平(INS30)和餐后30min胰岛素抵抗指数(HOMA-M30)差异均有统计学意义(P<0.05);(3)不同体型患者甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL-C)及甘油三酯/高密度脂蛋白(TG/HDL-C)差异有统计学意义(P<0.05);(4)患者体型与胰岛素抵抗和脂代谢异常有相关性(P<0.05)。结论肥胖是PCOS患者发生胰岛素抵抗和脂代谢异常的重要危险因素,PCOS治疗中应合理控制患者体重,降低代谢综合征发生率。

关键词：多囊卵巢综合征胰岛素抵抗脂代谢异常体质指数体脂率

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867例妇科门诊女性生殖道分泌物病原菌分离鉴定及耐药情况

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安徽医药 2019年第2期23卷 300-303页

作者：唐玉芳杨靖李世林十堰市妇幼保健院妇科湖北十堰442000 湖北医药学院基础医学院微生物学教研室湖北十堰442000 十堰市东风国药茅箭医院中医康复科湖北十堰442000

目的回顾分析867例育龄女性生殖道分泌物病原菌分布和耐药情况,为临床用药提供参考。方法 2016年1—12月选取十堰市妇幼保健院867例育龄女性生殖道分泌物进行培养,用VITEK全自动细菌仪进行菌株分离鉴定和耐药试验分析。结果 867份样本... 详细信息

目的回顾分析867例育龄女性生殖道分泌物病原菌分布和耐药情况,为临床用药提供参考。方法 2016年1—12月选取十堰市妇幼保健院867例育龄女性生殖道分泌物进行培养,用VITEK全自动细菌仪进行菌株分离鉴定和耐药试验分析。结果 867份样本中检出377份病原菌阳性,阳性检出率43.5%,不同婚姻状况和文化程度病人样本阳性检出率差异有统计学意义(P<0.05)。检出病原菌402株,其中革兰阳性菌139株(占34.6%,主要为葡萄球菌、粪肠球菌和无乳链球菌),革兰阴性菌160株(占39.8%,主要为大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和阴道加德纳菌),真菌103株(占25.6%,主要为白色假丝酵母菌和光滑假丝酵母菌)。革兰阳性菌对青霉素、复方新诺明和庆大霉素总体耐药性较高,对万古霉素敏感;革兰阴性菌对氨苄西林、头孢唑林和复方新诺明耐药性较高,对亚胺培南较为敏感;除对氟康唑和硝酸咪康唑耐药性接近40%外,真菌整体耐药性不高。结论该地区妇科门诊病人阴道分泌物病原菌阳性检出率较高,不同菌株对药物敏感性不同,临床上应结合药敏分析结果合理选择药物。

关键词：生殖道分泌物病原菌药敏试验细菌培养

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幽门螺杆菌BIB原核表达工程菌的构建及微生物学特性分析

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西部医学 2013年第10期25卷 1451-1454页

作者：潘兴肖继红杨靖王保宁李健春周法庭祝捷周永君李婉宜李明远四川大学华西基础医学与法医学院四川成都610041 四川万可泰生物技术有限责任公司四川成都610000 兰州大学第二医院体检中心甘肃兰州730030 湖北医药学院微生物学教研室湖北十堰442000

目的构建融合了幽门螺杆菌尿素膜通道蛋白(Ure I)、尿素酶B亚单位(Ure B)的表位基因及霍乱毒素B亚单位(CTB)的原核表达质粒pET28a(+)/ct B/ure I-B(简称BIB)及其原核表达工程菌,并研究其生物学特性。方法参考基因库中ure I、ure B、ct ... 详细信息

目的构建融合了幽门螺杆菌尿素膜通道蛋白(Ure I)、尿素酶B亚单位(Ure B)的表位基因及霍乱毒素B亚单位(CTB)的原核表达质粒pET28a(+)/ct B/ure I-B(简称BIB)及其原核表达工程菌,并研究其生物学特性。方法参考基因库中ure I、ure B、ct B的基因序列,合成不含信号肽的ct B基因及ure I、ure B优势表位基因,串联融合,形成多靶点重组ct B/ure I-B基因(简称BIB基因),并构建pET28a(+)/BIB原核表达质粒,经限制性内切酶Nco I、Xho I酶切以及DNA测序鉴定正确后,将重组质粒导入大肠杆菌BL21(DE3)中,构建含BIB基因的原核表达工程菌。经乳糖诱导后,SDS-PAGE电泳检测重组蛋白(rBIB),Western blot及肌注BALB/c小鼠实验检测rBIB的免疫反应性和免疫原型。结果构建的原核表达质粒pET28a(+)/BIB,经双酶切和测序分析显示,构建的BIB基因与设计序列100%一致。乳糖诱导后,SDS-PAGE电泳显示在33kD左右出现一条明显蛋白条带,Western blot检测在33kD左右出现特异反应条带,肌注免疫BALB/c小鼠产生了较高的抗体水平。结论成功构建了pET28a(+)/BIB原核表达质粒及BIB原核表达工程菌,该工程菌可表达重组蛋白rBIB,且该重组蛋白具有良好的免疫反应性及免疫原性。

关键词：幽门螺杆菌原核表达工程菌 Ure CTB 重组多表位

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磁性电化学免疫法及其在乙脑病毒检测中的应用

磁性电化学免疫法及其在乙脑病毒检测中的应用

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第十一届全国电分析化学会议

作者：李芳梅力李么明赵开弘陈焕春吴鹏胡涌刚曹胜波华中农业大学农业微生物学国家重点实验室华中科技大学环境科学与工程学院湖北医药学院太和医院临床检验部华中农业大学生命科学与技术学院

＜正＞乙型脑炎是一种由乙型脑炎病毒引起的严重危害人畜健康的虫媒性病毒性传染病[1]。发展一种高效、快速、特异性强的抗原检测方法对乙型脑炎的早期诊断和预防控制具有重要意义。近年来,将磁珠分离技术与电化学免疫检测技术联用受到... 详细信息

＜正＞乙型脑炎是一种由乙型脑炎病毒引起的严重危害人畜健康的虫媒性病毒性传染病[1]。发展一种高效、快速、特异性强的抗原检测方法对乙型脑炎的早期诊断和预防控制具有重要意义。近年来,将磁珠分离技术与电化学免疫检测技术联用受到了越来越多的关注[2-3]。本文设计了一种磁性金工作电极,利用其将磁珠分离技术和电化学免疫技术相结合发展了一种新的乙脑病毒检测方法。研究过程中发现当金磁在表面修饰了

关键词：磁性电化学免疫法乙型脑炎病毒检测

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