检索结果-内蒙古大学图书馆

生物工程学报 2017年第7期33卷 1136-1144页

作者：骆爱玲杜春园赵雪梅梁继超陈勇湖北大学中药生物技术省重点实验室生物资源绿色转化湖北省协同创新中心湖北武汉430062

构建了miR-29b2c重组腺病毒Ad-miR-29b2c,考察了其对HGC-27、MGC-803胃癌细胞增殖及迁移的抑制作用。采用PCR从基因组扩增miR-29b2c片段,并克隆至腺病毒穿梭载体pAdTrack-CMV中,构建穿梭质粒pAdT-29b2c,经酶切及测序鉴定。穿梭质粒经Pm... 详细信息

构建了miR-29b2c重组腺病毒Ad-miR-29b2c,考察了其对HGC-27、MGC-803胃癌细胞增殖及迁移的抑制作用。采用PCR从基因组扩增miR-29b2c片段,并克隆至腺病毒穿梭载体pAdTrack-CMV中,构建穿梭质粒pAdT-29b2c,经酶切及测序鉴定。穿梭质粒经PmeⅠ线性化后与腺病毒骨架载体共转化BJ5183感受态,产生重组腺病毒质粒Ad-miR-29b2c,再经PacⅠ线性化后转染293A细胞进行包装。重组腺病毒扩增后感染HGC-27细胞,通过MTT及细胞迁移实验观察Ad-miR-29b2c对HGC-27、MGC-803细胞增殖及迁移的影响。采用Western blotting检测Ad-miR-29b2c对HGC-27、MGC-803细胞δ-catenin蛋白表达的影响。酶切、测序及荧光定量PCR结果表明重组腺病毒构建成功,miR-29b及miR-29c在HGC-27细胞过表达。MTT实验表明Ad-miR-29b2c能显著抑制HGC-27、MGC-803细胞增殖。细胞迁移实验表明Ad-miR-29b2c能显著抑制HGC-27、MGC-803细胞迁移。此外,Ad-miR-29b2c能显著降低HGC-27、MGC-803细胞δ-catenin蛋白表达水平。综上所述,构建了miR-29b2c的重组腺病毒,并发现其可以抑制胃癌细胞HGC-27和MGC-803的增殖及迁移,该作用可能与miR-29抑制HGC-27、MGC-803细胞δ-catenin蛋白表达有关。

关键词： miR-29 胃癌重组腺病毒基因治疗

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和厚朴酚及其代谢物在正常及2型糖尿病大鼠体内的药动学与组织分布对比研究

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药学学报 2018年第6期53卷 987-992页

作者：王俊俊汪玲余学进陈勇湖北大学中药生物技术省重点实验室生物资源绿色转化湖北省协同创新中心湖北武汉430062

本文旨在对比研究和厚朴酚在正常及2型糖尿病大鼠体内的药动学及组织分布差异。采用高脂饮食联合低剂量链脲佐菌素的方法造模,灌胃50 mg·kg^(-1)和厚朴酚后,采用HPLC法检测正常及糖尿病大鼠和厚朴酚及代谢产物在血浆及组织中的浓度... 详细信息

本文旨在对比研究和厚朴酚在正常及2型糖尿病大鼠体内的药动学及组织分布差异。采用高脂饮食联合低剂量链脲佐菌素的方法造模,灌胃50 mg·kg^(-1)和厚朴酚后,采用HPLC法检测正常及糖尿病大鼠和厚朴酚及代谢产物在血浆及组织中的浓度,计算药代动力学参数。结果表明糖尿病模型组和厚朴酚的AUC0-t(3 004.7±391.4μg·h L^(-1))、Cmax(614.7±182.4μg·L^(-1))相对于正常对照组AUC0-t(3 827.2±926.9μg·h·L^(-1))、Cmax(872.5±233.1μg·L^(-1))显著降低(P<0.05),模型组代谢产物M2的Cmax(2 785.3±756.3μg·L^(-1))和AUC0-t(6 830.6±2660.4μg·h·L^(-1))都大于正常对照组(Cmax为1 711.9±1 026.4μg·L^(-1),AUC0-t为5 472.9±2 527.2μg·h·L^(-1)),且Cmax有极显著性差异(P<0.01)。糖尿病模型组大鼠肝脏、肾脏和脑中和厚朴酚暴露量均高于正常对照组,M1在模型组肝脏中的暴露量高于正常组;M2在模型组肝脏和肾脏中的暴露量高于正常组。说明在糖尿病病理状态下,和厚朴酚及其代谢产物的药动学和组织分布发生了一定改变。

关键词：和厚朴酚糖尿病药动学组织分布

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高浓度绿原酸对L02细胞脂质堆积与氧化应激损伤的影响

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中草药 2017年第21期48卷 4471-4478页

作者：黎文卓刘亚云陈勇湖北大学中药生物技术省重点实验室及生物资源绿色转化协同创新中心湖北武汉430062

目的研究高浓度(>100μmol/L)绿原酸(CGA)对正常及非酒精性脂肪肝(NAFLD)状态下L02肝细胞脂质堆积与氧化应激的影响。方法用666μmol/L油酸(OA)-333μmol/L棕榈酸(PA)处理人正常肝细胞系L02 24 h构建体外肝细胞NAFLD模型。正常及模... 详细信息

目的研究高浓度(>100μmol/L)绿原酸(CGA)对正常及非酒精性脂肪肝(NAFLD)状态下L02肝细胞脂质堆积与氧化应激的影响。方法用666μmol/L油酸(OA)-333μmol/L棕榈酸(PA)处理人正常肝细胞系L02 24 h构建体外肝细胞NAFLD模型。正常及模型细胞经CGA(0.5、1、2 mmol/L)处理24 h后,油红O染色检测胞内脂滴的量,定量PCR及Western blotting检测细胞SREBP-1C、PNPLA3和CYP2E1的m RNA和蛋白表达量,荧光光度法检测胞内活性氧(ROS)的量。结果正常及NAFLD模型L02细胞经CGA处理后,均浓度依赖性提高了胞内脂滴与ROS的量,以及SREBP-1C、PNPLA3和CYP2E1的m RNA与蛋白表达水平。结论高浓度CGA(0.5、1、2 mmol/L)处理能促进正常及NAFLD模型L02细胞的脂堆积与氧化应激损伤。

关键词：绿原酸 L02细胞脂质堆积氧化应激非酒精性脂肪肝

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野鸦椿根抑制肝脂堆积活性部位及其化学成分研究

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中草药 2017年第8期48卷 1519-1523页

作者：田珂李燕慈龙慧张少君李路军湖北大学中药生物技术湖北省重点实验室生物资源绿色转化湖北省协同创新中心湖北武汉430062

目的研究野鸦椿Euscaphis japonica根抑制肝脂堆积活性部位及其化学成分。方法萃取法制备不同极性部位,以油酸诱导的Hep G2细胞脂堆积模型、油红O染色观察细胞内脂滴的堆积,并检测细胞内三酰甘油(TG)的量筛选抑制肝脂堆积活性部位,并采... 详细信息

目的研究野鸦椿Euscaphis japonica根抑制肝脂堆积活性部位及其化学成分。方法萃取法制备不同极性部位,以油酸诱导的Hep G2细胞脂堆积模型、油红O染色观察细胞内脂滴的堆积,并检测细胞内三酰甘油(TG)的量筛选抑制肝脂堆积活性部位,并采用硅胶、Sephadex LH-20、HPLC等多种色谱技术对活性部位进行分离纯化,根据理化性质和波谱数据鉴定化合物结构。结果石油醚部位能显著抑制油酸诱导的Hep G2细胞内脂滴的堆积并降低TG的量,从中分离得到9个化合物,分别鉴定为3β,19-二羟基-24-反式-阿魏酰基-熊果烷-12-烯-28-酸(1)、β-谷甾醇(2)、7-羟基-2-辛烯-5-内酯(3)、3,3′-二甲氧基-鞣花酸(4)、香草醛(5)、5-羰基-四氢呋喃-3-甲酸乙酯(6)、没食子酸(7)、3,3′-二甲氧基-鞣花酸-4-(5″-乙酰基)-α-L-阿拉伯糖苷(8)、佛手柑内酯(9)。结论石油醚部位为野鸦椿根抑制肝脂堆积活性部位,化合物1、6、8和9为首次从该属植物中分离得到。

关键词：野鸦椿脂堆积活性部位 3β,19-二羟基-24-反式-阿魏酰基-熊果烷-12-烯-28-酸 5-羰基-四氢呋喃-3-甲酸乙酯

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和厚朴酚长循环脂质体的制备及药动学研究

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中草药 2017年第18期48卷 3720-3727页

作者：陈一桢张文娟唐兰如刘红陈勇湖北大学中药生物技术湖北省重点实验室湖北大学生物资源绿色转化协同创新中心湖北武汉430062

目的优化和厚朴酚长循环脂质体(HLCL)制备工艺,并考察其体外释放及体内药动学特征。方法以和厚朴酚包封率为指标,通过正交试验优化HLCL组方,并对优化组方采用透射电子显微镜(TEM)扫描观察HLCL表面形态,透析法研究HLCL体外释放情况,UPLC-... 详细信息

目的优化和厚朴酚长循环脂质体(HLCL)制备工艺,并考察其体外释放及体内药动学特征。方法以和厚朴酚包封率为指标,通过正交试验优化HLCL组方,并对优化组方采用透射电子显微镜(TEM)扫描观察HLCL表面形态,透析法研究HLCL体外释放情况,UPLC-MS/MS法研究大鼠分别ig等剂量和厚朴酚及HLCL(20 mg/kg和厚朴酚)后的血浆药动学参数。结果 HLCL的最优制备条件为大豆磷脂酰胆碱-胆固醇-m PEG2000-DSPE的质量比为8∶1∶1、药脂质量比为1∶10、超声时间为12 min。在此条件下,HLCL在TEM下为圆球,包封率84.7%、载药量10.4%、平均粒径121.5 nm、Zeta电位-30.8 mV。HLCL体外释放缓慢,24 h在p H 1.2和p H 6.9释放介质中的累积释放率分别为80%和71%。大鼠ig给药后,HLCL组和厚朴酚的C_(max)、t_(max)、t_(1/2)分别为(23.29±11.76)ng/m L、(0.13±0.05)h和(10.59±5.72)h,和厚朴酚组的Cmax、tmax、t1/2分别为(79.34±56.32)ng/m L、(0.30±0.07)h和(4.44±3.14)h,两组的AUC0-∞无显著差异。结论与游离和厚朴酚相比,HLCL体外释放缓慢,体内吸收迅速、消除缓慢。

关键词：和厚朴酚长循环纳米脂质体体外释放药动学包封率正交试验透析法 UPLC-MS/MS 累积释放率

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二氢姜黄素对油酸诱导的非酒精性脂肪肝体外模型的预防作用与机制研究

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中草药 2018年第5期49卷 1092-1099页

作者：喻青青孟沫然刘亚云程银祥陈勇湖北大学中药生物技术湖北省重点实验室湖北大学生物资源绿色转化协同创新中心湖北武汉430062

目的研究二氢姜黄素对非酒精性脂肪肝病(NAFLD)的预防作用与机制。方法 HepG2细胞经0.5 mmol/L油酸(OA)与二氢姜黄素(0、5、10、20μmol/L)同时处理24 h后,检测细胞内三酰甘油(TG)、活性氧自由基(ROS)、一氧化氮(NO)含量以及细胞对荧光D... 详细信息

目的研究二氢姜黄素对非酒精性脂肪肝病(NAFLD)的预防作用与机制。方法 HepG2细胞经0.5 mmol/L油酸(OA)与二氢姜黄素(0、5、10、20μmol/L)同时处理24 h后,检测细胞内三酰甘油(TG)、活性氧自由基(ROS)、一氧化氮(NO)含量以及细胞对荧光D-葡萄糖同系物(2-NBDG)的摄取能力;采用RT-qPCR和Western blotting方法检测细胞中糖脂代谢与氧化应激相关基因固醇调节元件结合蛋白1c(SREBP-1C)、Patatin样磷酯酶结构域蛋3(PNPLA3)、过氧化物酶体增殖物激活受体α(PPARα)、磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)、磷酸化蛋白激酶B(pAKT)、蛋白激酶B(AKT)和核转录因子Nrf2(Nrf2)的mRNA与蛋白表达量。结果与对照组相比,OA处理组细胞内TG、ROS及NO含量明显上升,对2-NBDG的摄取能力降低,SREBP-1C和PNPLA3的mRNA及蛋白表达上调,PPARα、PI3K、pAKT/AKT和Nrf2的蛋白表达下调;与OA处理组相比,OA+二氢姜黄素组细胞内TG与NO含量降低,对2-NBDG的摄取能力升高,SREBP-1C和PNPLA3的mRNA与蛋白表达下调,PPARα、PI3K和Nrf2的蛋白表达及pAKT/AKT上调。结论二氢姜黄素对体外NAFLD细胞模型的预防作用机制包括:通过抑制脂合成关键基因(SREBP-1C和PNPLA3)及诱导脂氧化关键基因PPARα的表达,预防肝细胞脂堆积;通过上调PI3K的表达及pAKT/AKT水平,缓解胰岛素抵抗,促进肝细胞对葡萄糖的摄取;通过上调Nrf2的表达量,降低细胞内NO含量,缓解肝细胞的炎症反应及氧化损伤。

关键词：非酒精性脂肪肝病二氢姜黄素 HepG2细胞 L02细胞油酸预防作用

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二氢杨梅素长循环纳米脂质体的制备及大鼠体内药动学研究

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中草药 2018年第4期49卷 806-813页

作者：张文娟陈一桢唐兰如刘红陈勇湖北大学中药生物技术湖北省重点实验室湖北大学生物资源绿色转化协同创新中心湖北武汉430062

目的筛选二氢杨梅素(DMY)长循环纳米脂质体的最佳处方和制备工艺,研究其体外释放特性和大鼠体内药动学特征。方法采用薄膜超声法制备脂质体,通过单因素和正交试验优化脂质体处方和制备工艺;采用透射电子显微镜观察脂质体的外观形态,激... 详细信息

目的筛选二氢杨梅素(DMY)长循环纳米脂质体的最佳处方和制备工艺,研究其体外释放特性和大鼠体内药动学特征。方法采用薄膜超声法制备脂质体,通过单因素和正交试验优化脂质体处方和制备工艺;采用透射电子显微镜观察脂质体的外观形态,激光粒径分析仪测定脂质体的粒径和Zeta电位;采用透析法研究脂质体体外释放特性,LC-MS/MS法测定大鼠血药浓度。结果优化的DMY脂质体制备条件为大豆磷脂酰胆碱-胆固醇-DSPE-m PEG2000物质的量比为75∶20∶5,DMY与类脂的质量比为1∶12,载药温度为60℃,载药介质为pH 5.0 PBS缓冲液,超声时间为20 min。在此条件下,DMY的包封率为(54.7±3.3)%,载药量为(4.3±0.2)%,粒径为(117.9±5.5)nm,Zeta电位为(-2.6±1.7)m V。48 h在pH 1.2和pH 6.8释放介质中的累积释放率均为86%。DMY脂质体在大鼠体内的t_(1/2z)和AUC0~∞分别是游离DMY的2.7倍和1.8倍。结论与游离DMY相比,DMY脂质体体外释放缓慢,体内消除减缓,口服生物利用度提高。

关键词：二氢杨梅素薄膜超声法长循环纳米脂质体累积释放率药动学 LC-MS/MS

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氢溴酸槟榔碱体内对大鼠肝肾转运体表达的影响

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中草药 2017年第13期48卷 2711-2716页

作者：翟婷黄祥涛王俊俊陈勇湖北大学中药生物技术省重点实验室湖北大学生物资源绿色转化协同创新中心湖北武汉430062

目的探究氢溴酸槟榔碱对大鼠肝肾转运体表达的影响。方法通过给雄性Wistar大鼠ig氢溴酸槟榔碱(0.8、4、20 mg/kg)21 d,应用荧光RT-PCR检测肝、肾组织中13种转运体m RNA的表达量,考察氢溴酸槟榔碱对大鼠肝、肾转运体m RNA表达的影响。结... 详细信息

目的探究氢溴酸槟榔碱对大鼠肝肾转运体表达的影响。方法通过给雄性Wistar大鼠ig氢溴酸槟榔碱(0.8、4、20 mg/kg)21 d,应用荧光RT-PCR检测肝、肾组织中13种转运体m RNA的表达量,考察氢溴酸槟榔碱对大鼠肝、肾转运体m RNA表达的影响。结果氢溴酸槟榔碱低剂量时显著抑制了肝脏MRP2和MDR1A m RNA表达,但显著诱导了肾脏MRP5 m RNA表达。氢溴酸槟榔碱高剂量时显著抑制了肝脏OCT2、OAT2、OCTN2、OATP1A1、OATP1A4、OATP2B1、MRP2和MDR1A,以及肾脏MRP2、BCRP、MDR1A的m RNA表达水平,但显著上调了肾脏OCTN2、OATP1A1、OATP1A4及MRP5的m RNA表达量,且对上述转运体m RNA表达的影响有一定剂量依赖性。结论由于肝肾转运体表达与功能的改变会引起药物相互作用,临床上应给予槟榔嗜好者更多关注,以避免发生不良药物相互作用。

关键词：氢溴酸槟榔碱药物转运体药物相互作用 MRP2 MDR1A OATP1A4 OCTN2

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氢溴酸槟榔碱体内对大鼠肝脏CYP2B表达的影响及其机制研究

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中草药 2016年第20期47卷 3668-3672页

作者：黄祥涛肖润梅吴银祥陈勇湖北大学中药生物技术省重点实验室湖北大学生物资源绿色转化协同创新中心湖北武汉430062

目的研究氢溴酸槟榔碱对大鼠肝脏细胞色素P450 2B(CYP2B)表达的影响及其调控机制。方法 Wistar雄性大鼠连续ig氢溴酸槟榔碱(4、20、100 mg/kg)7 d,LC-MS/MS法检测肝脏CYP2B活性,Western blotting法检测肝脏CYP2B1/2、组成型雄甾烷受体(C... 详细信息

目的研究氢溴酸槟榔碱对大鼠肝脏细胞色素P450 2B(CYP2B)表达的影响及其调控机制。方法 Wistar雄性大鼠连续ig氢溴酸槟榔碱(4、20、100 mg/kg)7 d,LC-MS/MS法检测肝脏CYP2B活性,Western blotting法检测肝脏CYP2B1/2、组成型雄甾烷受体(CAR)及核内CAR蛋白表达量,定量荧光PCR检测肝脏CYP2B1 mRNA表达量。结果氢溴酸槟榔碱对大鼠肝脏CYP2B蛋白的表达没有明显影响,但对肝脏CYP2B1 mRNA表达的诱导作用随剂量增加而增强,对CYP2B活性的诱导作用随剂量增加而减弱。此外,给药后肝细胞核内CAR蛋白量增加,但肝细胞总CAR蛋白的量无明显变化。结论氢溴酸槟榔碱体内通过促进CAR向核内转移,诱导了大鼠肝脏CYP2B活性,且对CYP2B的调控主要发生在转录水平,也可能存在翻译后修饰。

关键词：氢溴酸槟榔碱肝脏 CYP2B CAR蛋白药物代谢酶

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冰片对大鼠体内CYP2D诱导作用研究

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药学学报 2015年第4期50卷 459-463页

作者：陈静雅王俊俊孟沫然陈勇湖北大学中药生物技术省重点实验室湖北大学生物资源绿色转化协同创新中心湖北武汉430062

冰片是传统中药,近年来许多文献报道冰片能提高其他药物的生物利用度,促进其他药物进入血脑屏障,因而冰片与其他药物合用可能产生的药物相互作用受到高度重视,但冰片对肝脏细胞色素P450酶的影响却鲜有报道。本文研究了雄性Wistar大鼠连... 详细信息

冰片是传统中药,近年来许多文献报道冰片能提高其他药物的生物利用度,促进其他药物进入血脑屏障,因而冰片与其他药物合用可能产生的药物相互作用受到高度重视,但冰片对肝脏细胞色素P450酶的影响却鲜有报道。本文研究了雄性Wistar大鼠连续灌胃冰片一周对大鼠肝脏CYP2D表达与活性以及对CYP2D探针底物右美沙芬大鼠体内药代动力学的影响。结果表明,冰片(33、100和300 mg·kg-1·d-1)给药一周对大鼠肝脏CYP2D1 m RNA和蛋白表达无明显影响,但却显著诱导了CYP2D活性(P<0.05),分别达到1.71、1.97和2.89倍。此外,与对照组相比,冰片(300 mg·kg-1·d-1)预给药一周组右美沙芬的达峰浓度Cmax降低了10.6%(P>0.05),曲线下面积AUC0-∞减少了27.5%(P<0.01),清除率CL/F增大了41.1%(P<0.01),表观分布容积Vz/F增大了23.1%(P>0.05),表明冰片预给药一周能明显加速CYP2D探针底物右美沙芬的体内清除。由于冰片对大鼠肝脏CYP2D活性的诱导作用,提示当冰片与CYP2D底物药物共用时,可能存在发生代谢性相互作用的风险。

关键词：冰片 CYP450 肝微粒体 CYP2D

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