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植物保护学报 2024年第2期51卷 302-313页

作者：刘勇张宇宇付艳苹谢甲涛姜道宏程家森华中农业大学农业微生物学国家重点实验室武汉430070 华中农业大学植物科学技术学院湖北省作物病害监测和安全控制重点实验室武汉430070

为探究自噬在核盘菌Sclerotinia sclerotiorum致病过程中的作用,利用酵母Saccharomyces自噬相关基因(autophagy-related gene,ATG)编码的蛋白序列比对核盘菌基因组,获得核盘菌假定ATG,并以核盘菌1980菌株为出发菌株,基于同源重组的原理... 详细信息

为探究自噬在核盘菌Sclerotinia sclerotiorum致病过程中的作用,利用酵母Saccharomyces自噬相关基因(autophagy-related gene,ATG)编码的蛋白序列比对核盘菌基因组,获得核盘菌假定ATG,并以核盘菌1980菌株为出发菌株,基于同源重组的原理对假定ATG进行敲除和回补,并测定不同突变体的生长表型和致病能力。结果表明,从核盘菌基因组中比对到2个ATG,分别命名为SsATG5和SsATG8,两者在核盘菌致病过程中均上调表达。SsATG5和SsATG8敲除突变体在菌丝生长、产草酸和侵染垫形成方面与野生型菌株无明显差异,但SsATG5敲除突变体在离体拟南芥Arabidopsis thaliana叶片上的致病力显著下降了约40%,在活体拟南芥植株上的致病力显著下降了约80%,同时SsATG5回补突变体恢复了正常的致病力。表明SsATG5参与了核盘菌的致病过程,证实自噬在核盘菌致病过程中发挥着重要作用。

关键词：核盘菌 SsATG5 SsATG8 自噬致病力侵染垫

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柑橘黄龙病药物防治策略

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华中农业大学学报 2021年第1期40卷 49-57页

作者：韩鹤友程帅华宋智勇丁芳徐强农业微生物学国家重点实验室/华中农业大学生命科学与技术学院武汉430070 华中农业大学理学院武汉430070 湖北省作物病害检测和安全控制重点实验室/华中农业大学植物科学技术学院武汉430070 园艺植物生物学教育部重点实验室/华中农业大学园艺林学学院武汉430070

柑橘黄龙病(HLB)是世界范围内柑橘生产上的毁灭性病害,已在全球范围造成了巨大的经济损失。黄龙病由韧皮部限制性寄生菌Candidatus liberibacters spp.引起,主要通过柑橘木虱Diaphorina citri(Kuwayama)在田间传播。目前,黄龙病的主要... 详细信息

柑橘黄龙病(HLB)是世界范围内柑橘生产上的毁灭性病害,已在全球范围造成了巨大的经济损失。黄龙病由韧皮部限制性寄生菌Candidatus liberibacters spp.引起,主要通过柑橘木虱Diaphorina citri(Kuwayama)在田间传播。目前,黄龙病的主要防治方法有:一是传统的“三板斧”防治策略,即种植无病苗木、严防木虱(大面积连片统防统治)和挖净病树;二是药物防治,主要包括抗生素化学药物、窄谱靶向化学药物、免疫诱导物、纳米制剂等在内的多种抗菌剂。本文对近年来国内外柑橘黄龙病药物防治的相关研究进行了系统论述,以期为柑橘黄龙病菌新型防治药剂研发提供理论依据和参考。

关键词：柑橘黄龙病药物防治金属纳米药物免疫诱导物靶向药物纳米农药绿色农药

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盾壳霉对油菜长效专用配方肥料的敏感性评价

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中国生物防治学报 2020年第3期36卷 465-471页

作者：刘小凡谢甲涛付艳苹姜道宏程家森华中农业大学植物科学与技术学院/微生物学国家重点实验室/湖北省作物病害监测和安全控制重点实验室武汉430070

油菜菌核病是油菜生产中的重要病害,盾壳霉是核盘菌的重寄生真菌,在菌核病防治方面具有重要的生防潜力。为了明确盾壳霉与油菜长效专用配方肥料混合施用的可行性,本文研究了盾壳霉对油菜长效专用配方肥的敏感性。结果发现,低浓度的油菜... 详细信息

油菜菌核病是油菜生产中的重要病害,盾壳霉是核盘菌的重寄生真菌,在菌核病防治方面具有重要的生防潜力。为了明确盾壳霉与油菜长效专用配方肥料混合施用的可行性,本文研究了盾壳霉对油菜长效专用配方肥的敏感性。结果发现,低浓度的油菜长效专用配方肥(1.5和7.5 mg/mL)对盾壳霉菌丝生长、菌落及菌丝尖端形态和分生孢子萌发等无明显影响,高浓度的油菜长效专用配方肥对盾壳霉生长和孢子萌发有一定影响,在饱和浓度(560 mg/mL)条件下的油菜长效专用配方肥,24 h盾壳霉孢子的萌发率为0.83%,然而在96 h时萌发率可达到95%;油菜长效专用配方肥对盾壳霉产孢和寄生致腐菌核的能力无明显影响,寄生菌核30 d后,致腐指数均在50以上。研究结果表明,在田间生产中,盾壳霉可以与油菜长效专用配方肥料混合施用,达到轻简化栽培的目的。

关键词：盾壳霉核盘菌油菜菌核病油菜长效专用配方肥料敏感性

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梨果生刺盘孢子囊孢子单孢菌系的生物学特性及致病性研究

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植物病理学报 2019年第1期49卷 1-10页

作者：赵飞飞沈量傅敏洪霓王国平华中农业大学农业微生物学国家重点实验室武汉430070 华中农业大学植物科学技术学院湖北省作物病害检测与安全控制重点实验室武汉430070

梨果生刺盘孢的2种致病型菌株FJ-85(产生黑点症状)和菌株FJ-11-2(产生坏死斑症状)的子囊孢子单孢培养均可产生正、负2种类型的单孢菌系。正型单孢菌系菌落浅白色,其上形成的子囊孢子再培养,可形成正、负2种类型的单孢菌系;负型单孢菌系... 详细信息

梨果生刺盘孢的2种致病型菌株FJ-85(产生黑点症状)和菌株FJ-11-2(产生坏死斑症状)的子囊孢子单孢培养均可产生正、负2种类型的单孢菌系。正型单孢菌系菌落浅白色,其上形成的子囊孢子再培养,可形成正、负2种类型的单孢菌系;负型单孢菌系菌落深灰色,其上形成的子囊孢子再培养,只形成负型一种单孢菌系。2个菌株的单孢菌系中,负型的比例明显多于正型。2种类型的单孢菌系对峙培养,在菌落内及菌落交界处均可形成子囊壳,而同种类型的单孢菌系对峙培养仅在菌落内产生子囊壳。结果表明同种类型的单孢菌系可同宗配合,而正、负2种类型的单孢菌系还可异宗配合。正型单孢菌系的致病力与原始菌株相近,而负型单孢菌系较原始菌株弱。2个菌株的单孢菌系在翠冠梨上引起的症状差异与其原始菌株相同。研究结果为解析梨果生刺盘孢的有性生殖与致病的关系提供了新的有用信息。

关键词：果生刺盘孢子囊孢子同宗配合异宗配合

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苹果茎痘病毒编码的TGBp及CP蛋白互作和亚细胞定位分析

苹果茎痘病毒编码的TGBp及CP蛋白互作和亚细胞定位分析

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中国植物病理学会2019年学术年会

作者：李柳王国平洪霓华中农业大学植物科学技术学院湖北省作物病害监测与安全控制重点实验室华中农业大学农业微生物学国家重点实验室

苹果茎痘病毒(Apple stem pitting virus,ASPV)是一种正义单链RNA病毒,其基因组包含5个开放阅读框(Open reading frame,ORF),其中ORF2、ORF3和ORF4构成的三基因盒编码病毒运动蛋白(Triple gene block protein,TGBp),共同介导病毒的胞间运动及长距离运输;ORF5编码病毒的外壳蛋白(Coat protein,CP)。在编码TGBp的植物病毒中,根据TGBp在初级结构和功能上的差异,可分为大麦病毒属型(hordei-like)和马铃薯X病毒属型(potexlike)。在病毒的运动中,这两种类型之间的区别是CP是否参与病毒的胞间移动。目前对ASPV的TGBp和CP生物学功能尚缺乏研究,根据ASPV的TGBp的二级结构及分类地位,将该病毒归为potex-like型。本研究对ASPV分离物HB-HN6的TGBp和CP的亚细胞定位特点及蛋白间互作特点进行了研究。采用酵母双杂交核系统对ASPV分离物HB-HN6的3个TGBp及CP蛋白间互作进行了分析,结果显示TGBp1和CP有较强的自身互作,CP可与3个TGBp蛋白发生互作,TGBp1与TGBp3存在互作。该结果表明CP可能通过与3个TGBp互作而形成复合体,并在病毒的运动中行使功能。进一步通过农杆菌浸润接种本氏烟(Nicotiana benthamiana),在激光共聚焦显微镜下观察这些蛋白的亚细胞定位特点,发现该病毒的TGBp1在细胞膜及类似内质网处有明显的定位信号,该亚细胞定位特点与已报道的potex-like型病毒竹花叶病毒(Bamboo mosaic virus,BaMV)和马铃薯X病毒(Potato rirus X,PVX)的TGBp1的定位不同,这两种病毒的TGBp1主要定位在胞质与胞核;TGBp2定位于内质网,而TGBp3主要定位于周质内质网,偶有定位于核膜,该定位特点与BaMV与PVX的TGBp2和TGBp3的亚细胞定位相似;CP定位于核质和细胞膜。研究结果为进一步阐明这些蛋白在ASPV侵染及移动中的功能提供了参考信息。

关键词：苹果茎痘病毒运动蛋白外壳蛋白蛋白互作亚细胞定位

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两株哈茨木霉菌株防治水稻纹枯病及促进水稻生长的潜力研究

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植物病理学报 2018年第1期48卷 98-107页

作者：李松鹏崔琳琳程家森陈桃付艳苹谢甲涛华中农业大学农业微生物学国家重点实验室武汉430070 湖北省植物病害监测与安全控制重点实验室华中农业大学植物科学技术学院武汉430070

由茄丝核菌(Rhizoctonia solani)引起的纹枯病是水稻生产中的重要真菌病害,严重影响水稻产量及品质。本研究评估了两株哈茨木霉菌株3S1-13和4S2-46对纹枯病生防潜力及其对水稻种子萌发和幼苗生长的促生效果。研究表明两株哈茨木霉菌株... 详细信息

由茄丝核菌(Rhizoctonia solani)引起的纹枯病是水稻生产中的重要真菌病害,严重影响水稻产量及品质。本研究评估了两株哈茨木霉菌株3S1-13和4S2-46对纹枯病生防潜力及其对水稻种子萌发和幼苗生长的促生效果。研究表明两株哈茨木霉菌株在马铃薯葡萄糖琼脂培养基(PDA)上不产生分生孢子,但在含有1%酵母粉的PDA上能恢复产分生孢子的能力。菌株3S1-13和4S2-46发酵液对茄丝核菌的菌丝生长及菌核形成均有较强抑制作用,具有防治水稻纹枯病潜力,且发酵液防效显著高于孢子液的防效。菌株3S1-13和4S2-46发酵液处理后的水稻种子发芽率和幼苗的根系、鲜重均显著高于对照,显示出有利于促进种子发芽与生长的作用。研究结果表明两株哈茨木霉菌株发酵液不仅可以用于水稻纹枯病的生物防治,而且可以促进水稻种子发芽及生长,具有较好的应用潜力。

关键词：水稻纹枯病哈茨木霉防病促生

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基于RAPD标记分析葡萄孢属类似真菌Amphobotrys ricini的遗传多样性

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华中农业大学学报 2018年第5期37卷 32-39页

作者：张蕊于琳李国庆张静华中农业大学植物科学技术学院/湖北省作物病害监测和安全控制重点实验室/农业微生物学国家重点实验室武汉430070 广东省农业科学院植物保护研究所/广东省植物保护新技术重点实验室广州510640

采用RAPD分子标记对我国15个地区2种寄主植物(铁苋菜和蓖麻)上分离得到的葡萄孢属类似真菌Amphobotrys ricini的81个菌株以及来自美国的1个***菌株进行了遗传多样性分析。结果显示:筛选出的8条RAPD引物共扩增出63条DNA带,其中有49条DNA... 详细信息

采用RAPD分子标记对我国15个地区2种寄主植物(铁苋菜和蓖麻)上分离得到的葡萄孢属类似真菌Amphobotrys ricini的81个菌株以及来自美国的1个***菌株进行了遗传多样性分析。结果显示:筛选出的8条RAPD引物共扩增出63条DNA带,其中有49条DNA条带为多态性条带,多态性条带比率(PPB)为77.8%。多态性信息含量(PIC)值变化范围在0.47~0.84,平均值为0.72,观测等位基因数(Na)的均值为2.000 0、有效等位基因数(Ne)的均值为1.357 7、Nei’s基因多样性指数(H)的均值为0.227 5,Shannon信息指数(I)的均值为0.363 1。UPGMA聚类分析表明,遗传相似系数变化范围在0.55~1.00,以遗传相似系数0.70为阈值时,可分为5个类群(A、B、C、D、E),在遗传相似系数0.74处,B类群又可以分为B1和B2两个亚群。分析结果表明,***群体内遗传变异与菌株地理来源、寄主植物有一定相关。

关键词：葡萄孢属类似真菌 Amphobotrys ricini RAPD 遗传多样性 UPGMA

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基于RAPD标记分析葡萄孢属类似真菌Amphobotrysricini的遗传多样性

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华中师范大学学报（自然科学版） 2018年第5期37卷 32-39页

采用RAPD分子标记对我国15个地区2种寄主植物(铁苋菜和蓖麻)上分离得到的葡萄孢属类似真菌Amphobotrys ricini的81个菌株以及来自美国的1个***菌株进行了遗传多样性分析.结果显示:筛选出的8条RAPD引物共扩增出63条DNA带,其中有49条DNA... 详细信息

采用RAPD分子标记对我国15个地区2种寄主植物(铁苋菜和蓖麻)上分离得到的葡萄孢属类似真菌Amphobotrys ricini的81个菌株以及来自美国的1个***菌株进行了遗传多样性分析.结果显示:筛选出的8条RAPD引物共扩增出63条DNA带,其中有49条DNA条带为多态性条带,多态性条带比率(PPB)为77.8％.多态性信息含量(PIC)值变化范围在0.47～0.84,平均值为0.72,观测等位基因数(Na)的均值为2.0000、有效等位基因数(Ne)的均值为1.3577、Nei's基因多样性指数(H)的均值为0.2275,Shannon信息指数(I)的均值为***聚类分析表明,遗传相似系数变化范围在0.55～1.00,以遗传相似系数0.70为阈值时,可分为5个类群(A、B、C、D、E),在遗传相似系数0.74处,B类群又可以分为B1和B2两个亚群.分析结果表明,***群体内遗传变异与菌株地理来源、寄主植物有一定相关.

关键词：葡萄孢属类似真菌 Amphobotrysricini RAPD 遗传多样性 UPGMA

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DNA病毒介导的低毒核盘菌DT-8菌株田间应用研究

DNA病毒介导的低毒核盘菌DT-8菌株田间应用研究

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中国植物病理学会第十一届全国会员代表大会暨2018年学术年会

作者：曲正姜道宏谢甲涛付艳萍程家森李博湖北省作物病害监测和安全控制重点实验室/华中农业大学植物科学技术学院/华中农业大学农业微生物学国家重点实验室

由核盘菌(Sclerotinia sclerotiorum)引起的菌核病是油菜生产上的首要病害,严重影响了油菜产业的健康发展。由于环境友好、生态安全等原因,生物防治策略备受人们关注,而利用病毒性低毒力菌株防控真菌病害,是生物防治中的重要策略之一。... 详细信息

由核盘菌(Sclerotinia sclerotiorum)引起的菌核病是油菜生产上的首要病害,严重影响了油菜产业的健康发展。由于环境友好、生态安全等原因,生物防治策略备受人们关注,而利用病毒性低毒力菌株防控真菌病害,是生物防治中的重要策略之一。课题组前期从核盘菌DT-8菌株中分离和鉴定了一种核盘菌低毒衰退相关DNA病毒1(SsHADV-1)。该DNA病毒不仅可导致核盘菌毒力衰退,还可以突破核盘菌营养亲和型限制,使病毒进行有效传播,生防潜力巨大。研发可应用于生产实践的生防制剂是实践应用的前提。然而,货架期短是生防制剂实际应用的瓶颈,需要开发新的生防制剂应用方法,发挥其生防价值。种子引发是一种引动加回干的播前种子处理技术,将种子引发技术和生防菌相结合,进行油菜种子生物引发,可以发挥种子引发技术和生防菌两者的优势,延长生防制剂的货架期,增强植物抗病能力,具有广阔的应用前景。本研究在前期研究的基础上,利用微生物液体深层发酵方法,制得DT-8菌株菌丝悬浮液,用于油菜种子生物引发。通过单因素的筛选和基于响应面设计的多因素优化,得到的最佳的引发条件。通过在湖北省鄂州市长港镇峒山社区实验基地和武汉市华中农业大学实验基地的田间防效试验,调查发现在2016—2017年,经DT-8发酵菌丝悬浮液生物引发处理的油菜,菌核病发病率在两地分别降低31.22%和26.83%,而产量在两地分别增加15.82%和24.15%。在2017—2018,经DT-8发酵菌丝悬浮液生物引发处理的油菜,菌核病发病率在两地分别降低15.09%和24.05%,产量在两地分别增加19.61%和13.87%。且处理后对油菜籽的千粒重和含油量没有不良影响,防效和增产效果与油菜盛花期喷施一次15L/亩浓度为667μg/mL咪鲜胺的效果相当。

关键词：核盘菌生防制剂油菜种子生防菌引发处理 DNA 田间应用

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梨轮纹病菌株中真菌病毒间的水平传染测定及分析

梨轮纹病菌株中真菌病毒间的水平传染测定及分析

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中国植物病理学会第十一届全国会员代表大会暨2018年学术年会

作者：胡旺成罗慧洪霓王国平王利平华中农业大学植物科学技术学院/湖北省作物病害监测与安全控制重点实验室华中农业大学/农业微生物学国家重点实验室

梨轮纹病是由葡萄座腔菌[Botryosphaeria dothidea(Moug:Fr)Ces&De Not]引起的一种枝干真菌病害,除为害枝干外,叶片和果实也收到不同程度的感染及发病。近年来,轮纹病危害逐渐加重,造成重大损失,给果树产业带来严重的经济损失。研... 详细信息

梨轮纹病是由葡萄座腔菌[Botryosphaeria dothidea(Moug:Fr)Ces&De Not]引起的一种枝干真菌病害,除为害枝干外,叶片和果实也收到不同程度的感染及发病。近年来,轮纹病危害逐渐加重,造成重大损失,给果树产业带来严重的经济损失。研究发现,部分真菌病毒(Mycovirus)可以减弱寄主致病力,可对真菌引起的病害进行有效的防控。真菌病毒可通过感染菌株与未感染菌株的菌丝融合进行水平传播,然而菌株间的营养体不亲和性,诱导细胞发生程序性死亡是目前真菌病毒在应用中最主要的限制性因素。探索影响真菌病毒水平传播的因素及寻找传播率较高且能对致病菌株产生影响的真菌病毒显得尤为重要。本研究以分别感染产黄青霉病毒(BdCV1)LW-C、感染双分体病毒(BdPV1)LW-P、复合感染BdCV1和BdPV1的LW-1梨轮纹菌株以及无病毒感染的Mock菌株作为四组材料,在加入ZnCl2(0.75mM)的燕麦培养基上于25℃培养进行四组梨轮纹菌(LW-1/Mock、LW-C/Mock、LW-P/Mock和LW-C/LW-P)对峙培养的传毒测定,8d后选择后代衍生菌株进行dsRNA检测。结果显示,在LW-1/Mock,LW-C/Mock和LW-P/Mock对峙培养中,Mock衍生菌株的dsRNA检测表明,BdCV1+BdPV1,BdCV1,BdPV1分别传入Mock菌株中;在LW-C/LW-P对峙培养中,衍生菌株的dsRNA检测结果为LW-P衍生菌株中检测到BdPV1和BdCV1,而LW-C衍生菌株中仅检测到BdCV1,无BdPV1传入。采用RT-qPCR对LW-C/LW-P对峙培养获得的衍生菌株进行基因沉默相关基因组份进行定量分析,发现Dicer2、Argo、RdRp表达量在LW-P中均低于LW-C菌株中基因的表达量,推测BdCV1触发了LW-C寄主抗病毒的基因沉默反应,影响了病毒的水平传染效率,目前正采用基因敲除方法分析其基因沉默途径相关基因对病毒水平传播效率的影响,相关验证试验还在进一步研究中。以上结果也明确了携带BdCV1的LW-C可作为一种较好的真菌病毒供体,可为探究LW-C对其他菌株的传毒效率以及引起梨轮纹病菌致病力衰退的分子机制,为真菌病毒用于梨轮纹病害生物防治提供重要的参考依据和分子信息。

关键词：梨轮纹病害葡萄座腔菌水平传染 BdCV1 BdPV1 基因沉默途径

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