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动物医学进展 2024年第12期45卷 39-43页

作者：刘泽文袁芳艳刘威高婷杨克礼郭锐李畅吴琼朱佳佳田永祥周丹娜湖北省农业科学院畜牧兽医研究所/农业农村部畜禽细菌病防治制剂创制重点实验室/畜禽病原微生物学湖北省重点实验室武汉430064

为了研制仔猪大肠杆菌病三价(K88+K99+987P)灭活疫苗,以大肠埃希氏菌生产菌种C83549(k88)第2代和C83644(k99)、C83710(987p)第3代基础种子作为原始种子,建立了用于仔猪大肠杆菌病疫苗生产的大肠埃希氏菌基础种子批,分别对种子批的F1、F5... 详细信息

为了研制仔猪大肠杆菌病三价(K88+K99+987P)灭活疫苗,以大肠埃希氏菌生产菌种C83549(k88)第2代和C83644(k99)、C83710(987p)第3代基础种子作为原始种子,建立了用于仔猪大肠杆菌病疫苗生产的大肠埃希氏菌基础种子批,分别对种子批的F1、F5、F10、F13代进行了全面鉴定。结果表明,各代种子的培养特性、生化特性均符合大肠埃希氏菌特征,抗原结构分别为C83549(O149∶K88)、C83644(O68∶K99)和C83710(O9∶987P);各代次菌株的菌毛抗原RIHA单位≥800,菌种免疫原性鉴定合格;各菌株经口服途径灌服1.5×10^(10)CFU/头,可引起仔猪100%发病。因此,3个菌株均可用作仔猪大肠杆菌病三价(K88+K99+987P)灭活疫苗生产的菌种。

关键词：大肠埃希氏菌种子批建立鉴定

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鸡滑液囊支原体的分离鉴定及药敏试验

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动物医学进展 2024年第1期45卷 130-135页

作者：殷梦玉张腾飞张文婷胡巧卢琴郭云清罗青平湖北省农业科学院畜牧兽医研究所/农业农村部畜禽细菌病防治制剂创制重点实验室/畜禽病原微生物学湖北省重点实验室湖北武汉430064 湖北洪山实验室湖北武汉430064

为弄清湖北省某蛋鸡场180日龄鸡群出现呼吸道症状和产蛋率下降的病原,采集病料进行病原的分离鉴定与药敏试验,用形态学观察方法和分子生物学方法对分离株进行了形态学观察和16S rRNA基因鉴定,并用鸡胚感染试验对分离株进行致病性试验。... 详细信息

为弄清湖北省某蛋鸡场180日龄鸡群出现呼吸道症状和产蛋率下降的病原,采集病料进行病原的分离鉴定与药敏试验,用形态学观察方法和分子生物学方法对分离株进行了形态学观察和16S rRNA基因鉴定,并用鸡胚感染试验对分离株进行致病性试验。结果显示,病原分离鉴定结果仅滑液囊支原体阳性,镜检观察到典型的“煎蛋样”菌落;16S rRNA序列与已报道的滑液囊支原体的具有高度同源性;鸡胚感染试验显示,分离株导致鸡胚发育迟缓,胚体弱小,从弱小胚体内可再次分离出滑液囊支原体;药敏试验结果显示滑液囊支原体分离株对泰妙菌素、四环素和盐酸克林霉素敏感。结果表明,从产蛋下降的鸡群中成功分离到1株滑液囊支原体,为临床该病的防治提供了科学依据。

关键词：鸡滑液囊支原体分离鉴定药敏试验

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血清4型禽腺病毒抗体间接ELISA检测方法的建立与应用

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中国动物传染病学报 2024年

作者：杨宏春金梦云汪宏才冯贺龙姚伦曾哲张腾飞商雨罗青平欧长波温国元广西大学动物科学技术学院湖北省农业科学院畜牧兽医研究所农业农村部畜禽细菌病防治制剂创制重点实验室&畜禽病原微生物学湖北重点实验室湖北洪山实验室

自2015年以来，由血清4型禽腺病毒（Fowl Adenovirus serotype 4， FAdV-4）引起的鸡心包积液-肝炎综合征(HHS)给全球家禽业造成了巨大的经济损失。简便、快捷的抗体检测方法对于疾病的预防和疫苗的免疫评估至关重要。为了建立一种快速... 详细信息

自2015年以来，由血清4型禽腺病毒（Fowl Adenovirus serotype 4， FAdV-4）引起的鸡心包积液-肝炎综合征(HHS)给全球家禽业造成了巨大的经济损失。简便、快捷的抗体检测方法对于疾病的预防和疫苗的免疫评估至关重要。为了建立一种快速检测FAdV-4特异性抗体的方法，本研究利用原核表达系统表达了FAdV-4 HB1510株Fiber2蛋白的头节区(Knob)（847bp～1407bp）；以纯化的Konb蛋白作为包被抗原，经过对反应条件优化后，建立了一种快速检测FAdV-4抗体的间接ELISA方法。性能测试结果表明该间接ELISA方法具有敏感性高、特异性强和重复性优良的特点。用研究建立的方法与琼脂凝胶扩散试验（APG）分别检测200份湖北不同鸡场临床血清样品，间接ELISA检测阳性率为66.5%，APG检测阳性率为54%，两者符合率为87.5%。上述结果表明，本试验建立的间接ELISA检测方法可快速有效检测FAdV-4抗体水平，并且可以为FAdV-4血清流行病学调查以及疫苗的研发和免疫评估提供一定技术支撑。

关键词：血清4型禽腺病毒 Fiber2蛋白抗体检测间接ELISA

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恩施黄连醇提液主要成分的测定及其抑菌机制的研究

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动物医学进展 2025年第2期46卷 86-91页

作者：白若男郭云清张睿张腾飞张文婷卢琴胡巧邵华斌罗青平郭利伟长江大学动物科学技术学院湖北荆州444100 农业农村部畜禽细菌病防治制剂创制重点实验室畜禽病原微生物学湖北省重点实验室湖北省农业科学院畜牧兽医研究所湖北武汉430064 湖北洪山实验室湖北武汉430064

为了测定产地湖北恩施黄连醇提液的生物碱含量,研究其抑菌机制,用高效液相色谱法对湖北恩施5年生黄连醇提液主要成分进行测定,并测定了黄连醇提液对大肠埃希氏菌、鸡白痢沙门氏菌、禽多杀性巴氏杆菌和金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度、生... 详细信息

为了测定产地湖北恩施黄连醇提液的生物碱含量,研究其抑菌机制,用高效液相色谱法对湖北恩施5年生黄连醇提液主要成分进行测定,并测定了黄连醇提液对大肠埃希氏菌、鸡白痢沙门氏菌、禽多杀性巴氏杆菌和金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度、生长特性、胞外碱性磷酸酶含量、呼吸代谢相关酶类活性的影响。结果显示,醇提液主要成分为小檗碱、表小檗碱、巴马汀和黄连碱,含量分别为7.48%±0.27%、3.52%±0.12%、2.21%±0.07%、2.48%±0.08%,且黄连醇提液对大肠埃希氏菌、鸡白痢沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、禽多杀性巴氏杆菌的MIC值分别为0.125、0.5、0.5、0.125 mg/mL。MIC浓度的黄连醇提液可以抑制细菌生长。黄连醇提液还可增加胞外碱性磷酸酶的含量,降低琥珀酸脱氢酶、苹果酸脱氢酶活性。湖北恩施5年生黄连醇提液含量均高于药典规定含量,且具有广谱抑菌活性,可通过破坏细菌膜的通透性、抑制呼吸系统代谢等发挥抑菌效应。

关键词：黄连醇提液生物碱高效液相色谱抑菌机制

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鸡胚免疫新城疫疫苗后宿主法氏囊转录组学分析

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中国畜牧兽医 2024年第4期51卷 1632-1641页

作者：蒋立人冯贺龙姜鑫瑞王梓晨张高峰商雨曾哲姚伦汪宏才罗青平田光明温国元长江大学动物科学技术学院荆州434025 湖北省农业科学院畜牧兽医研究所农业农村部畜禽细菌病防治制剂创制重点实验室&畜禽病原微生物学湖北重点实验室武汉430064 湖北洪山实验室武汉430070

【目的】通过转录组学分析鸡胚免疫新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)TS09-C株后宿主法氏囊内免疫关键基因及信号通路分子转录差异,探究免疫后宿主法氏囊内免疫相关分子的调控反应。【方法】将60只18胚龄SPF鸡胚随机分为免疫组... 详细信息

【目的】通过转录组学分析鸡胚免疫新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)TS09-C株后宿主法氏囊内免疫关键基因及信号通路分子转录差异,探究免疫后宿主法氏囊内免疫相关分子的调控反应。【方法】将60只18胚龄SPF鸡胚随机分为免疫组和对照组,30枚/组,免疫组将NDV TS09-C株通过羊膜腔接种鸡胚,剂量为103.0 EID 50/枚,注射体积为0.1 mL,对照组以同样的方法接种等体积PBS。检测免疫后不同时间点肺脏、胸腺、脾脏和法氏囊组织的病毒载量。选取病毒载量最高的法氏囊组织进行转录组学测序后,筛选免疫相关差异表达基因并分析其参与的主要功能及通路。【结果】免疫后1 d法氏囊组织中即可监测到病毒,免疫后3 d病毒载量达到最高。将免疫后3 d的法氏囊进行转录组学分析,与对照组相比,免疫组有453个基因上调、98个基因下调,其中免疫相关基因有36个上调、10个下调。免疫相关差异表达基因主要富集于自噬和细胞因子-细胞因子受体相互作用的免疫相关通路。差异表达基因蛋白互作分析显示,自噬通路中富集的BCL2与其他免疫相关基因有较多互作关系,且在B细胞活化、分化、免疫系统发育等功能注释中均有参与。【结论】本研究结果揭示了鸡胚免疫NDV TS09-C株后法氏囊内调控B细胞活化、分化的潜在靶向基因及通路,为进一步研究该毒株鸡胚免疫后B淋巴细胞调控的分子机制提供新的信息。

关键词：新城疫病毒(NDV) TS09-C株鸡胚免疫法氏囊转录组分析

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蛋鸡输卵管内鸭源鸡杆菌的分离鉴定与生物学特性分析

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中国动物传染病学报 2024年

作者：张政钢金鑫鑫梁睿钦蔡梦雷赵东旭刘建钗罗青平崔国林河北工程大学生命科学与食品工程学院湖北省农业科学院畜牧兽医研究所农业农村部畜禽细菌病防治制剂创制重点实验室畜禽病原微生物学湖北省重点实验室湖北洪山实验室

2023年9月湖北省武汉市某鸡场23周龄开产初期海兰褐蛋种鸡出现产蛋率和产蛋质量下降的现象，并伴随鸡只持续死亡，对蛋鸡养殖户造成了较大的经济损失。为探究该病例发生原因，本研究采集发病蛋鸡输卵管，采用7%绵羊血琼脂培养基进行细... 详细信息

2023年9月湖北省武汉市某鸡场23周龄开产初期海兰褐蛋种鸡出现产蛋率和产蛋质量下降的现象，并伴随鸡只持续死亡，对蛋鸡养殖户造成了较大的经济损失。为探究该病例发生原因，本研究采集发病蛋鸡输卵管，采用7%绵羊血琼脂培养基进行细菌分离和纯化，挑选出强溶血性的分离菌株进行鸭源鸡杆菌（***）特异性PCR检测；对分离菌株进行16S rRNA基因测序，并进行系统进化分析；采用药敏纸片法检测分离菌株药敏性质，并采用PCR测定相应耐药基因；将分离菌株采用腹腔注射途径攻毒雏鸡，6×105-6×107CFU/只，测定分离株致病力。结果显示本研究共分离到1株强溶血性细菌，分离菌株与已报道的*** 16S rRNA基因核苷酸同源性均大于99%；且具有***特异性基因序列；分离菌株对四环素、阿米卡星和环丙沙星等13种抗生素耐药，与PCR检测到的耐药基因blaTEM、StrA、sul2等结果一致；动物感染试验结果表明，分离株对雏鸡的LD50为3.16×107，同居组雏鸡在同居2d后咽拭子检测到***，结果表明分离菌株为***，其具有多重耐药性和耐药基因，对雏鸡致病力较强，且具有较强的水平传播能力。

关键词：鸭源鸡杆菌 16S rRNA 耐药性致病性

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耐热选育对新城疫LaSota疫苗株热稳定性的影响

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动物医学进展 2025年第2期46卷 35-41页

作者：赵庆庆曾哲肖倩妮李丽冯贺龙姚伦罗青平温国元商雨武汉轻工大学动物科学与营养工程学院湖北武汉430048 湖北省农业科学院畜牧兽医研究所农业农村部畜禽细菌病防治制剂创制重点实验室&畜禽病原微生物学湖北重点实验室湖北武汉430064 湖北洪山实验室湖北武汉430070

为了探究新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)LaSota疫苗株热稳定性相关的潜在氨基酸位点,将其在SPF鸡胚中自然传代、间隔耐热选育和连续耐热选育至20代,监测血凝活性和细胞感染力的热稳定性;对不同代次的病毒进行全基因组测序,筛... 详细信息

为了探究新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)LaSota疫苗株热稳定性相关的潜在氨基酸位点,将其在SPF鸡胚中自然传代、间隔耐热选育和连续耐热选育至20代,监测血凝活性和细胞感染力的热稳定性;对不同代次的病毒进行全基因组测序,筛选传代过程中的突变位点,并利用蛋白结构生物学方法分析突变位点在病毒蛋白结构热稳定性中的作用。结果显示,经过间隔耐热选育和连续耐热选育的病毒血凝活性和细胞感染力热稳定性均有所提升。测序结果分析表明,与自然传代毒株相比,间隔耐热选育和连续耐热选育病毒分别共计有11和12个碱基突变,其中5个为错义突变(间隔耐热选育病毒为4个),NP蛋白Q169K(仅发生在连续耐热选育病毒)、HN蛋白G171S和V191I、M蛋白E170D以及L蛋白E1612K。蛋白结构分析结果显示,L蛋白E1612K的突变导蛋白二级结构改变;HN蛋白G171S的突变导致蛋白三级结构改变。通过耐热选育筛选出了5个可能与NDV LaSota疫苗株热稳定性相关的关键氨基酸位点,为NDV的耐热机理研究及ND耐热疫苗的研发提供理论支撑。

关键词：新城疫病毒 LaSota疫苗株耐热选育鸡胚传代热稳定性

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湖北省2个规模化蛋鸡养殖场环境细菌监测分析

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中国家禽 2024年第7期46卷 113-118页

作者：廖卫东张文婷刘廷江姜博达郭云清张腾飞卢琴汪最程伊洛罗青平姚敏长江大学动物科学学院湖北荆州434025 湖北省农业科学院畜牧兽医研究所农业农村部畜禽细菌病防治制剂创制重点实验室畜禽病原微生物学湖北省重点实验室湖北武汉430064 湖北洪山实验室湖北武汉430070

为了解蛋鸡养殖场环境中病原菌流行情况,试验采集湖北省不同地区2个规模化蛋鸡养殖场不同位置的空气、水线和饲料样品进行病原菌检测,并采用16S rDNA测序分析样品中的优势病原菌。结果显示:饲料样品中细菌总数符合《GB 13078—2017饲料... 详细信息

为了解蛋鸡养殖场环境中病原菌流行情况,试验采集湖北省不同地区2个规模化蛋鸡养殖场不同位置的空气、水线和饲料样品进行病原菌检测,并采用16S rDNA测序分析样品中的优势病原菌。结果显示:饲料样品中细菌总数符合《GB 13078—2017饲料卫生标准》,而鸡舍风机附近空气及水线中细菌总数均较高;空气中优势病原菌是芽孢杆菌和葡萄球菌,饲料和水线优势菌为芽孢杆菌。结果表明,规模化蛋鸡养殖场饲料中的芽孢杆菌易污染水线和空气,风机附近是细菌污染重点区域,应定期消毒。

关键词：规模化蛋鸡养殖场环境监测细菌总数优势病原菌

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新生仔猪大肠杆菌病的防治

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中国兽医杂志 2023年第6期59卷 83-86页

作者：刘泽文袁芳艳刘威高婷周丹娜杨克礼郭锐陈文杰田永祥湖北省农业科学院畜牧兽医研究所农业农村部畜禽细菌病防治制剂创制重点实验室畜禽病原微生物学湖北省重点实验室湖北武汉430064

为了更好地防治新生仔猪大肠杆菌病,本试验将已确诊为新生仔猪大肠杆菌病猪场的母猪随机分成疫苗免疫组、疫苗免疫联合药物防治组、药物防治组和对照组共4个组,进行新生仔猪大肠杆菌病防治试验,分别统计各组母猪的平均产仔数以及仔猪黄... 详细信息

为了更好地防治新生仔猪大肠杆菌病,本试验将已确诊为新生仔猪大肠杆菌病猪场的母猪随机分成疫苗免疫组、疫苗免疫联合药物防治组、药物防治组和对照组共4个组,进行新生仔猪大肠杆菌病防治试验,分别统计各组母猪的平均产仔数以及仔猪黄痢的发病率和死亡率。结果显示,药物防治组、疫苗免疫组和疫苗免疫联合药物防治组的母猪平均产仔数分别为11.7头、11.5头和11.4头,与对照组(11.4头)无明显差别;仔猪发病率分别为12.57%、7.51%和3.51%,死亡率分别为5.14%、2.31%和1.17%,与对照组相比均有较大程度的降低。结果表明,试验猪场除了加强饲养管理外,采用疫苗免疫和药物防治相结合的方法,可有效降低新生仔猪大肠杆菌病的发生。

关键词：新生仔猪大肠杆菌防治

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猪肺炎支原体脂蛋白LppB介导纤毛黏附功能域的鉴定

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动物医学进展 2025年第6期46卷 1-6页

作者：叶利颖刘威闫安周丹娜杨克礼高婷田永祥宋淇淇天津农学院动物科学与动物医学学院/天津市农业动物繁育与健康养殖重点实验室天津300392 湖北省农业科学院畜牧兽医研究所/农业农村部畜禽细菌病防治制剂创制重点实验室/畜禽病原微生物学湖北省重点实验室湖北武汉430064

猪肺炎支原体(Mhp)主要引起地方性肺炎,给全球养猪业造成了巨大的经济损失。LppB是猪肺炎支原体的毒力因子,与纤毛的黏附和呼吸道定植密切相关,然而其具体的功能域还未见报道。利用生物信息学方法,对LppB可能的串联重复区域、disorder... 详细信息

猪肺炎支原体(Mhp)主要引起地方性肺炎,给全球养猪业造成了巨大的经济损失。LppB是猪肺炎支原体的毒力因子,与纤毛的黏附和呼吸道定植密切相关,然而其具体的功能域还未见报道。利用生物信息学方法,对LppB可能的串联重复区域、disorder功能域、抗原表位和高级结构进行了预测;为了保留预测功能域的完整性,将LppB分成了3个截短片段,依次为ΔLppB 27-247、ΔLppB 248-424和ΔLppB 425-604;通过原核表达系统,表达3个截短片段,获得了表达的rΔLppB 27-247、rΔLppB 248-424和rΔLppB 425-604重组蛋白;借助纤毛黏附试验,测定了截短片段黏附纤毛的能力。结果显示,LppB黏附纤毛的功能域主要位于27-247 aa和425-604 aa区域。研究结果丰富了对猪肺炎支原体致病机制的理解。

关键词：猪肺炎支原体 LppB 纤毛黏附功能域

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