检索结果-内蒙古大学图书馆

微生物学通报 2009年第9期36卷 1356-1362页

作者：黄新凤江梦天邵小虎李小华李林华中农业大学农业微生物学国家重点实验室湖北武汉430070

以G+菌金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)作为指示菌,通过抑菌筛选法从生牛奶中初筛得到具有抑菌活性的14株细菌菌株,然后通过个体形态与培养特征观测、部分生理生化反应、G+C mol%测定、16S rDNA序列比对分析、PCR扩增特异性N-乙... 详细信息

以G+菌金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)作为指示菌,通过抑菌筛选法从生牛奶中初筛得到具有抑菌活性的14株细菌菌株,然后通过个体形态与培养特征观测、部分生理生化反应、G+C mol%测定、16S rDNA序列比对分析、PCR扩增特异性N-乙酰胞壁酸水解酶基因和序列对比分析等鉴定,确定其中的一株具有较高抑菌活性的分离株为乳酸乳球菌乳酸亚种(Lactococcus lactis ***)菌株,命名为MB191。对多种G+细菌、G-细菌、酵母菌和丝状真菌的对峙培养抗性测定结果表明,MB191除对供试G+细菌具有较高的抑菌活性以外,还对丁香假单胞菌(Pseudomonas syringae)、荧光假单胞菌(***)等G-细菌和汉逊德巴利酵母(Debaryomyces hansenii)等具有明显的抑菌活性。乳酸乳球菌的这一特性目前尚未见文献报道。

关键词：乳酸乳球菌鉴定抑菌活性革兰氏阴性菌酵母菌

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

日本脑炎病毒NS3蛋白酶活性检测及抑制剂高通量筛选方法的建立

引用

生物工程学报 2014年第2期30卷 194-202页

作者：周景云汪雪裴超宋云峰陈焕春华中农业大学农业微生物学国家重点实验室湖北武汉430070 华中农业大学动物医学院湖北武汉430070

日本脑炎病毒(Japanese encephalitis virus,JEV)是单股正链RNA病毒,全基因组仅含有一个开放阅读框,编码一条多聚蛋白前体,病毒编码的NS3蛋白酶在JEV多聚蛋白加工过程中起着重要作用,是重要的药物靶标。通过PCR扩增了NS2BH-NS3蛋白酶的... 详细信息

日本脑炎病毒(Japanese encephalitis virus,JEV)是单股正链RNA病毒,全基因组仅含有一个开放阅读框,编码一条多聚蛋白前体,病毒编码的NS3蛋白酶在JEV多聚蛋白加工过程中起着重要作用,是重要的药物靶标。通过PCR扩增了NS2BH-NS3蛋白酶的编码区,构建了原核表达质粒并转化到大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导得到可溶性的NS3蛋白酶,用镍亲和层析方法进行了纯化。建立了基于荧光共振能量转移的NS3蛋白酶活性检测方法,并确定了最佳的反应条件,对113个化合物进行了筛选,发现其中两个化合物对JEV NS3蛋白酶具有一定的抑制活性。本研究为JEV NS3蛋白酶的活性研究及抑制剂筛选提供了一种操作方便、成本低廉的方法。

关键词：日本脑炎病毒 NS3蛋白酶可溶性表达酶活性抑制剂高通量筛选

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

O型口蹄疫多基因重组腺病毒的构建及其免疫原性

引用

中国兽医学报 2009年第10期29卷 1286-1289页

作者：张克山向敏吴斌徐卓菲蔡利军王勤刚陈焕春华中农业大学动物医学院动物传染病实验室华中农业大学农业微生物学国家重点实验室华中农业大学农业微生物学国家重点实验室湖北武汉430070

根据GenBank公布的序列设计1对引物扩增O型口蹄疫病毒P12A3C基因并亚克隆至腺病毒穿梭质粒pShuttle-CMV内。含有目的基因的穿梭质粒(pShuttle-PAC)线性化后和腺病毒骨架载体pAdeasy-1共同电转化入大肠杆菌BJ5183感受态细菌。利用细菌内... 详细信息

根据GenBank公布的序列设计1对引物扩增O型口蹄疫病毒P12A3C基因并亚克隆至腺病毒穿梭质粒pShuttle-CMV内。含有目的基因的穿梭质粒(pShuttle-PAC)线性化后和腺病毒骨架载体pAdeasy-1共同电转化入大肠杆菌BJ5183感受态细菌。利用细菌内同源重组法得到重组腺病毒质粒(pAd-PAC)。在Lipofectamine 2000介导下重组腺病毒质粒转染HEK293细胞得到重组腺病毒(Ad-PAC)。半数组织培养感染剂量(TCID50)测定、免疫荧光试验(IFA)和连续传代后目的基因的PCR扩增,证实重组病毒滴度为105.5TCID50/0.1 mL,重组病毒HEK293细胞中得以表达且遗传稳定性良好;动物试验表明,该重组病毒能够诱导小鼠产生较高水平的针对口蹄疫病毒的特异性抗体;本试验为口蹄疫重组腺病毒活载体疫苗的进一步研究和应用奠定了基础。

关键词：口蹄疫病毒腺病毒重组病毒免疫原性

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

母猪卵泡发育质量的营养调控研究进展

引用

动物营养学报 2022年第10期34卷 6334-6342页

作者：徐保阳秦文峡晏向华华中农业大学动物科学技术学院农业微生物学国家重点实验室湖北洪山实验室武汉430070

卵泡发育质量是决定哺乳动物繁殖性能的关键因素之一。营养物质可直接或间接通过中间代谢产物影响哺乳动物卵泡发育质量。本文总结了母猪卵泡发育过程及其营养调控方法的研究进展,结合肠道微生物在这一过程中的作用,综述了“营养物质-... 详细信息

卵泡发育质量是决定哺乳动物繁殖性能的关键因素之一。营养物质可直接或间接通过中间代谢产物影响哺乳动物卵泡发育质量。本文总结了母猪卵泡发育过程及其营养调控方法的研究进展,结合肠道微生物在这一过程中的作用,综述了“营养物质-肠道微生物-卵巢轴”的可能作用机制,为通过营养措施靶向调控肠道微生物而改善母猪卵泡发育提供资料与参考。

关键词：母猪卵泡发育质量营养物质肠道微生物

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

高产纳豆激酶地衣芽孢杆菌工程菌全合成培养基优化

引用

食品科学 2016年第7期37卷 140-145页

作者：赵新宇陈杨阳陈敬帮蔡冬波魏雪团华中农业大学食品科学技术学院湖北武汉430070 华中农业大学农业微生物学国家重点实验室湖北武汉430070

以产纳豆激酶的地衣芽孢杆菌基因工程菌BL10(pP43SNT-SsacC)为出发菌株,开展其全合成培养基的发酵优化研究。通过单因素试验和正交试验优化了全合成培养基成分,获得了最优的培养基组成(g/L):葡萄糖30、NaNO_330、谷氨酸钠20、柠檬酸钠15... 详细信息

以产纳豆激酶的地衣芽孢杆菌基因工程菌BL10(pP43SNT-SsacC)为出发菌株,开展其全合成培养基的发酵优化研究。通过单因素试验和正交试验优化了全合成培养基成分,获得了最优的培养基组成(g/L):葡萄糖30、NaNO_330、谷氨酸钠20、柠檬酸钠15、MgSO_4·7H_2O0.5、K_2HPO_4·3H_2O1.5、CaCl_20.5,pH7.2。在优化的全合成培养基中,纳豆激酶最高酶活力达到25.59FU/mL,相比于初始培养基发酵活性(4.27FU/mL),提高了5倍。对比分析了全合成培养基和半合成培养基的发酵产物,结果表明,全合成培养基可显著提高纳豆激酶的纯度,与半合成培养基相比,纳豆激酶比活力提高了2倍。本研究获得了纳豆激酶的全合成培养基成分,显著提高了纳豆激酶发酵活性,并进一步提高了纳豆激酶发酵纯度。

关键词：纳豆激酶地衣芽孢杆菌工程菌全合成培养基发酵优化

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

百脉根结瘤因子受体NFR5及其相互作用蛋白的研究

引用

中国油料作物学报 2007年第4期29卷 372-376页

作者：陈春芬朱辉杨绮朱浩张忠明华中农业大学农业微生物学国家重点实验室湖北武汉430070

以豆科植物百脉根的mRNA为模板,利用RT-PCR方法,扩增到1.0kb结瘤因子受体5(nod factorreceptor NFR5)蛋白激酶结构域的DNA片段(nfr5-pk),并将该片段克隆到酵母双杂交BD载体pGBKT7上。通过酵母双杂交技术,筛选接种根瘤菌的百脉根AD-cDNA... 详细信息

以豆科植物百脉根的mRNA为模板,利用RT-PCR方法,扩增到1.0kb结瘤因子受体5(nod factorreceptor NFR5)蛋白激酶结构域的DNA片段(nfr5-pk),并将该片段克隆到酵母双杂交BD载体pGBKT7上。通过酵母双杂交技术,筛选接种根瘤菌的百脉根AD-cDNA酵母双杂交文库,从文库中分离到与nfr5-pk相互作用的221个阳性克隆。从这些阳性克隆酵母中分离AD质粒经反复验证,对26个确定阳性克隆的外源片段进行测序和同源性分析。通过NCBI数据库比对分析鉴定出小G蛋白Rop6等6个与NFR5-PK相互作用的不同蛋白,为进一步研究NFR5基因的功能和调控机制提供了材料。

关键词：酵母双杂交 NFR5 小G蛋白Rop6 百脉根

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

大豆多肽不良风味的紫外分光光度法检测

引用

食品科学 2010年第22期31卷 411-413页

作者：何珍雄梁运祥华中农业大学农业微生物学国家重点实验室湖北武汉430070

建立紫外分光光度法测定大豆多肽的不良风味。优化的实验条件为将样品pH值调至6.0,NaCl添加量为4g/60mL,于100mL的生理盐水瓶中装60mL的样品液并密封,50℃恒温水浴1h,然后吸取20mL气体用5mL0.2mol/L的NaOH溶液吸收,检测217nm处的吸光度(... 详细信息

建立紫外分光光度法测定大豆多肽的不良风味。优化的实验条件为将样品pH值调至6.0,NaCl添加量为4g/60mL,于100mL的生理盐水瓶中装60mL的样品液并密封,50℃恒温水浴1h,然后吸取20mL气体用5mL0.2mol/L的NaOH溶液吸收,检测217nm处的吸光度(A217nm)。该方法简便、快速,可用于大豆多肽不良风味的脱除工艺中的测定。

关键词：不良风味紫外分光光度法大豆多肽检测

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

桔青霉发酵制备核酸酶P1的发酵动力学研究

引用

食品工业科技 2012年第3期33卷 180-182,316页

作者：廖明义陈雯莉华中农业大学农业微生物学国家重点实验室湖北武汉430070

核酸酶P1是一种重要的工业酶制剂,可用于水解核酸制备5’-核苷酸。通过摇瓶发酵对桔青霉发酵产核酸酶P1的培养基进行了优化,并在30L的贝朗全自动发酵罐中对桔青霉发酵动力学进行了研究。基于Logistic方程和Luedeking-Piret方程分别建立... 详细信息

核酸酶P1是一种重要的工业酶制剂,可用于水解核酸制备5’-核苷酸。通过摇瓶发酵对桔青霉发酵产核酸酶P1的培养基进行了优化,并在30L的贝朗全自动发酵罐中对桔青霉发酵动力学进行了研究。基于Logistic方程和Luedeking-Piret方程分别建立了桔青霉发酵过程中的菌体生长、产物合成及底物消耗随时间变化的数学模型。模拟出的模型数据与实验值能较好的吻合,该模型能较好地反映桔青霉在30L的Bio-Statplus贝朗发酵罐中的发酵过程。该模型对指导工业生产中利用桔青霉大规模发酵有着重要的意义。

关键词：桔青霉核酸酶P1 发酵动力学模型

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒和乙型脑炎病毒多重RT-PCR检测方法的建立

引用

华中农业大学学报 2008年第1期27卷 12-18页

作者：刘辉熊金凤邹浩勇陈杨杨维红何启盖华中农业大学农业微生物学国家重点实验室/预防兽医学湖北省重点实验室武汉430070

根据猪瘟病毒(CSFV)的E2基因保守序列、猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒(PRRSV)的ORF7基因及部分ORF6和3-UTR基因序列和猪乙型脑炎病毒(JEV)的E基因保守序列,设计了3对引物,扩增大小分别为288 bp4、30 bp和1 015 bp目的片段。以纯培养病毒抽... 详细信息

根据猪瘟病毒(CSFV)的E2基因保守序列、猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒(PRRSV)的ORF7基因及部分ORF6和3-UTR基因序列和猪乙型脑炎病毒(JEV)的E基因保守序列,设计了3对引物,扩增大小分别为288 bp4、30 bp和1 015 bp目的片段。以纯培养病毒抽提RNA,制备cDNA模板,利用3对引物,通过条件的优化,建立了同时检测这3种病毒的多重RT-PCR。CSFV、PRRSV和JEV的RNA最小检出量分别为0.270 ng、0.049 ng、0.067 ng,其它的RNA病毒如TGEV以及DNA病毒如PPV、PrV、PCV-2检测结果为阴性。以-βactin为对照,利用本方法检测了174份临床样品(血清、肺脏和胎儿),其结果为:PRRSV、CSFV和JEV的阳性率分别为30.4%、4.6%和1.7%;CSFV和PRRSV混合感染阳性率为1.7%。同时对临床样品中CSFV、JEV和PRRSV阳性PCR产物进行测序分析,发现CSFV、PRRSV和JEV的PCR产物序列和NCBI数据库中目标基因的同源性分别为92%、90%和89%,这证实了多重PCR的阳性结果为上述3种病毒。结果证明,所建立的多重RT-PCR可用于临床检测。

关键词：多重RT-PCR 猪瘟病毒猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒乙型脑炎病毒

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

用多重PCR鉴别猪伪狂犬病野毒与疫苗毒的研究

引用

中国兽医科技 2005年第2期35卷 95-98页

作者：刘丽娜何启盖陈焕春刘正飞张松林汪招雄华中农业大学农业微生物学国家重点实验室湖北武汉430070

根据基因库中的猪伪狂犬病病毒(PRV)各基因的序列,设计了与PRV的 gB、gD、gE基因序列互补的3对引物。对样品中的PRV DNA模板进行了多重PCR扩增及反应条件的优化,结果同时得到与设计相符合的3条特异性条带,分别为549 bp(gB)、429 bp(gD)... 详细信息

根据基因库中的猪伪狂犬病病毒(PRV)各基因的序列,设计了与PRV的 gB、gD、gE基因序列互补的3对引物。对样品中的PRV DNA模板进行了多重PCR扩增及反应条件的优化,结果同时得到与设计相符合的3条特异性条带,分别为549 bp(gB)、429 bp(gD)、366 bp(gE)。用这3对引物对三基因缺失疫苗毒的样品DNA模板进行多次多重 PCR扩增,均能稳定得到与设计相符合的2条特异性条带。敏感性试验结果表明,多重 PCR可以检测到 106 pg三基因缺失疫苗毒或756 pg PRV野毒的核酸模板量。特异性试验结果表明,以正常对照细胞及猪圆环病毒和猪细小病毒DNA为模板进行多重PCR扩增,均无任何条带。

关键词：猪伪狂犬病基因缺失疫苗多重PCR PRV 引物 gE基因酸模扩增鉴别特异性

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：

通借通还

建议与咨询 留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案： 新增检索档案 确定 取消

请选择收藏分类： 新增自定义分类 确定 取消

通借通还

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：