检索结果-内蒙古大学图书馆

中国预防兽医学报 2012年第3期34卷 247-250页

作者：陈西申果张舒吴玉丛徐晓娟蔡旭旺华中农业大学动物医学院农业微生物学国家重点实验室湖北武汉430070

细胞致死膨胀毒素（Cytolethaldistendingtoxin，CDT）是细菌毒素家族最新发现的一员^[1]，它是目前发现的唯一能够引起真核细胞分裂前期和静止期DNA双链断裂的细菌毒素，可导致真核细胞周期的不可逆性阻滞或者靶细胞凋亡^[2-4]。该毒... 详细信息

细胞致死膨胀毒素（Cytolethaldistendingtoxin，CDT）是细菌毒素家族最新发现的一员^[1]，它是目前发现的唯一能够引起真核细胞分裂前期和静止期DNA双链断裂的细菌毒素，可导致真核细胞周期的不可逆性阻滞或者靶细胞凋亡^[2-4]。该毒素是由Johnson和Lior首先发现于大肠杆菌（Eschenchiacoli）的培养液上清，

关键词：细菌毒素细胞分裂膨胀 DNA双链断裂结构应用功能细胞凋亡

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胸膜肺炎放线杆菌地方分离株和参考菌株的生物被膜形成

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中国兽医学报 2009年第11期29卷 1411-1414,1428页

作者：达来宝力格谢启运刘璨颖陈焕春周锐华中农业大学动物医学院农业微生物学国家重点实验室湖北武汉430070

通过玻璃试管和聚苯乙烯微孔板结晶紫染色法分别对胸膜肺炎放线杆菌(APP)的15个血清型国际参考菌株和22个中国地方分离菌株在体外形成生物被膜的能力进行了定性和定量分析。在15个血清型(无14型)的参考菌株中,只有5b、6和11型能在聚苯... 详细信息

通过玻璃试管和聚苯乙烯微孔板结晶紫染色法分别对胸膜肺炎放线杆菌(APP)的15个血清型国际参考菌株和22个中国地方分离菌株在体外形成生物被膜的能力进行了定性和定量分析。在15个血清型(无14型)的参考菌株中,只有5b、6和11型能在聚苯乙烯微孔板上形成生物被膜;而59%的地方分离株(涵盖13种血清型,无14和15型)在聚苯乙烯微孔板上表现出产生生物被膜的能力。结果表明,大多数血清型的APP能在体外形成生物被膜,尤其在地方分离株中更普遍;与低毒力血清型的菌株相比,高毒力和中等毒力血清型的菌株更倾向于形成生物被膜。

关键词：胸膜肺炎放线杆菌生物被膜血清型毒力

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抗伪狂犬病毒Ea株单克隆抗体的制备及鉴定

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华中农业大学学报 2005年第3期24卷 222-225页

作者：汪招雄何启盖黄红亮刘正飞陈焕春华中农业大学动物医学院预防兽医学湖北省重点实验室农业微生物学国家重点实验室武汉430070

将伪狂犬病毒Ea株纯化后免疫雌性Balb/c小鼠,取其脾细胞与SP2/O的骨髓瘤细胞融合,用间接酶联免疫吸附试验(ELISA)进行筛选,获得了2株抗PRV的单克隆抗体的杂交瘤细胞,分别命名为3G7E3和4A6F5,其细胞培养上清及小鼠腹水效价(ELISA)分别为1... 详细信息

将伪狂犬病毒Ea株纯化后免疫雌性Balb/c小鼠,取其脾细胞与SP2/O的骨髓瘤细胞融合,用间接酶联免疫吸附试验(ELISA)进行筛选,获得了2株抗PRV的单克隆抗体的杂交瘤细胞,分别命名为3G7E3和4A6F5,其细胞培养上清及小鼠腹水效价(ELISA)分别为1:212、1:212及1:100×212、1:100×212。特异性试验和免疫荧光结果显示,3G7E3和4A6F5仅与PRV反应,而与PPV、PRRSV、JEV和HCV等病毒不发生交叉反应;用单抗建立的夹心ELISA试验能检出伪狂犬病毒。表明本研究所获得的2株单抗是PRV特异性的。这2株分泌抗PRV单抗的杂交瘤细胞株的获得为进一步建立准确快速的抗原检测方法奠定了基础。

关键词：伪狂犬病毒Ea株单克隆抗体间接免疫荧光试验

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慢病毒载体介导的西尼罗河病毒prME蛋白的表达

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中国兽医科学 2010年第8期40卷 778-782页

作者：徐敏杨晓红陈龙李么明叶静陈焕春毕丁仁曹胜波华中农业大学动物医学院农业微生物学国家重点实验室湖北武汉430070

将西尼罗河病毒(WNV)的主要免疫原性基因prME插入HIV-1慢病毒载体pHR中,构建了转移质粒pHR-WNV/prME。在脂质体介导下,将该质粒与p△8.2、pVSV/G共转染293T细胞,48h后收获细胞上清。将上清转导正常的293T细胞,通过报告基因荧光观察、间... 详细信息

将西尼罗河病毒(WNV)的主要免疫原性基因prME插入HIV-1慢病毒载体pHR中,构建了转移质粒pHR-WNV/prME。在脂质体介导下,将该质粒与p△8.2、pVSV/G共转染293T细胞,48h后收获细胞上清。将上清转导正常的293T细胞,通过报告基因荧光观察、间接免疫荧光检测。结果表明,利用HIV-1慢病毒载体系统包装得到了假型病毒,可以高效转导293T细胞,并实现了WNVprME基因在被转导细胞中的表达,从而为基于慢病毒载体的WNV新型疫苗的研制奠定基础。

关键词：西尼罗河病毒 prME蛋白慢病毒载体表达

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SPME-GC-MS法检测油炸藕夹挥发性风味物质

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食品科学 2012年第14期33卷 228-234页

作者：张文君何慧杨尔宁满媛马芝丽华中农业大学食品科学技术学院湖北武汉430070 华中农业大学农业微生物学国家重点实验室湖北武汉430070

为研究油炸藕夹中的挥发性风味物质,采用正交试验对固相微萃取条件进行优化,并利用气质联用技术对油炸藕夹的挥发性成分进行提取和分析。结果表明:其最适萃取条件为:40mL样品瓶中装入14.00g样品,CAR/PDMS萃取头90℃萃取70min。藕夹中共... 详细信息

为研究油炸藕夹中的挥发性风味物质,采用正交试验对固相微萃取条件进行优化,并利用气质联用技术对油炸藕夹的挥发性成分进行提取和分析。结果表明:其最适萃取条件为:40mL样品瓶中装入14.00g样品,CAR/PDMS萃取头90℃萃取70min。藕夹中共检出化合物53种,主要为醛类、含硫化合物、酯类、酮类以及呋喃类化合物;其中醛类等小分子化合物主要源于油脂氧化;含硫杂环化合物以及部分醛、酮、酯类化合物主要源于肉馅美拉德反应、Strecker降解反应,非杂环含硫化合物源于香葱;吡喃和吡嗪源于裹衣在高温下的焦糖化反应、Strecker降解反应等。固相微萃取-气质联用技术用于分析藕夹挥发性风味物可行,结果表明肉馅、调味品、裹衣及藕均对油炸藕夹风味有贡献。

关键词：固相微萃取气-质联用藕夹挥发性香气成分

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利用单抗免疫组化技术检测PCV-2 WH株在人工感染猪组织中的分布

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中国兽医学报 2010年第12期30卷 1576-1579页

作者：刘英玉刘晓丽廖荣斌郭海兵陈冬焕汪洋何启盖华中农业大学动物医学院湖北武汉430070 华中农业大学农业微生物学国家重点实验室湖北武汉430070

将猪圆环病毒2型(PCV-2)WH株通过颈部肌注和滴鼻感染26日龄PCV抗体阴性仔猪,于攻毒后28 d剖杀,采集相关的神经组织、消化器官及免疫器官进行免疫组化SABC法检测、病理学观察及PCR检测。免疫组化结果显示,在攻毒猪的大脑和小脑、胃、十... 详细信息

将猪圆环病毒2型(PCV-2)WH株通过颈部肌注和滴鼻感染26日龄PCV抗体阴性仔猪,于攻毒后28 d剖杀,采集相关的神经组织、消化器官及免疫器官进行免疫组化SABC法检测、病理学观察及PCR检测。免疫组化结果显示,在攻毒猪的大脑和小脑、胃、十二指肠、淋巴结、脾脏、扁桃体、肺、肾、肝存在阳性信号,心脏无阳性信号。阳性信号主要位于淋巴细胞和巨噬细胞的胞浆中,偶尔出现在细胞核内和上皮细胞中。免疫组化结果与病理学变化和PCR检测基本相符。结果表明,本试验建立的免疫组化SABC法,可用于定位PCV-2 WH株在体内不同组织器官中的分布情况。

关键词：猪圆环病毒2型免疫组化技术 HE染色 PCR技术

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鸡毒支原体HS株pMGA1.2重组蛋白的免疫保护性研究

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中国预防兽医学报 2015年第3期37卷 225-228页

作者：胡思顺王晓丽陆时娟张金娟李自力许青荣刘梅毕丁仁华中农业大学动物医学学院湖北武汉430070 华中农业大学农业微生物学国家重点实验室湖北武汉430070

为评价鸡毒支原体(MG)HS株p MGA1.2重组蛋白(rp MGA1.2)的免疫保护效果,本研究检测了rp MGA1.2对MG黏附体外培养的鸡胚气管环粘膜的抑制作用,同时以重组霍乱毒素B亚基(r CTB)作为粘膜免疫佐剂,对rp MGA1.2免疫的SPF鸡进行了攻毒试验。... 详细信息

为评价鸡毒支原体(MG)HS株p MGA1.2重组蛋白(rp MGA1.2)的免疫保护效果,本研究检测了rp MGA1.2对MG黏附体外培养的鸡胚气管环粘膜的抑制作用,同时以重组霍乱毒素B亚基(r CTB)作为粘膜免疫佐剂,对rp MGA1.2免疫的SPF鸡进行了攻毒试验。结果表明,rp MGA1.2能够有效的竞争性抑制MG定植于体外培养的鸡胚气管纤毛;而且rp MGA1.2经滴鼻点眼途径免疫SPF鸡能够诱导产生特异性体液免疫和呼吸道粘膜免疫,对2×109 ccu MG-HS攻击的保护率为67%。因此,rp MGA1.2具有较强的免疫原性,具有作为疫苗抗原的潜力。

关键词：鸡毒支原体 rpMGA1.2 rCTB 粘膜免疫

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小鼠抑制素α亚基在杆状病毒表达系统中的表达和纯化

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中国兽医科学 2015年第12期45卷 1295-1299页

作者：李悦陈伟贞陈建国胡长敏刘东明丁明星韩丽华中农业大学农业微生物学国家重点实验室湖北武汉430070 华中农业大学动物医学院湖北武汉430070

为利用杆状病毒表达系统表达小鼠的抑制素α亚基基因(INHα),将模板质粒pcDNA3.1(+)-INHα中的INHα基因克隆至载体质粒pFastBac1中,构建出重组转座质粒pFastBac1-INHα,转化至感受态DH10Bac细胞,形成重组穿梭质粒Bacmid-INHα,转染至Sf... 详细信息

为利用杆状病毒表达系统表达小鼠的抑制素α亚基基因(INHα),将模板质粒pcDNA3.1(+)-INHα中的INHα基因克隆至载体质粒pFastBac1中,构建出重组转座质粒pFastBac1-INHα,转化至感受态DH10Bac细胞,形成重组穿梭质粒Bacmid-INHα,转染至Sf9细胞,获得第一代重组杆状病毒(P1)。然后病毒连续传代2次,用RT-PCR鉴定重组的杆状病毒,用SDS-PAGE验证纯化后蛋白质的表达,并使用BCA蛋白质浓度检测试剂盒检测纯化后的蛋白质样品的质量浓度。结果表明,感染重组杆状病毒后的Sf9细胞能够明显看到细胞皱缩、碎裂等感染症状;RT-PCR能够扩增出1 272bp的条带,证明重组的杆状病毒构建正确;SDS-PAGE结果表明重组的杆状病毒能够表达出45ku的条带,与理论大小一致;利用BCA蛋白质浓度检测试剂盒测得纯化样品中蛋白质的质量浓度为(216.05±10.02)μg/mL。小鼠抑制素α亚基成功地在杆状病毒表达系统中被表达,为今后抑制素的广泛应用奠定了基础。

关键词：抑制素α亚基杆状病毒表达系统表达纯化

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两株哈茨木霉菌株防治水稻纹枯病及促进水稻生长的潜力研究

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植物病理学报 2018年第1期48卷 98-107页

作者：李松鹏崔琳琳程家森陈桃付艳苹谢甲涛华中农业大学农业微生物学国家重点实验室武汉430070 湖北省植物病害监测与安全控制重点实验室华中农业大学植物科学技术学院武汉430070

由茄丝核菌(Rhizoctonia solani)引起的纹枯病是水稻生产中的重要真菌病害,严重影响水稻产量及品质。本研究评估了两株哈茨木霉菌株3S1-13和4S2-46对纹枯病生防潜力及其对水稻种子萌发和幼苗生长的促生效果。研究表明两株哈茨木霉菌株... 详细信息

由茄丝核菌(Rhizoctonia solani)引起的纹枯病是水稻生产中的重要真菌病害,严重影响水稻产量及品质。本研究评估了两株哈茨木霉菌株3S1-13和4S2-46对纹枯病生防潜力及其对水稻种子萌发和幼苗生长的促生效果。研究表明两株哈茨木霉菌株在马铃薯葡萄糖琼脂培养基(PDA)上不产生分生孢子,但在含有1%酵母粉的PDA上能恢复产分生孢子的能力。菌株3S1-13和4S2-46发酵液对茄丝核菌的菌丝生长及菌核形成均有较强抑制作用,具有防治水稻纹枯病潜力,且发酵液防效显著高于孢子液的防效。菌株3S1-13和4S2-46发酵液处理后的水稻种子发芽率和幼苗的根系、鲜重均显著高于对照,显示出有利于促进种子发芽与生长的作用。研究结果表明两株哈茨木霉菌株发酵液不仅可以用于水稻纹枯病的生物防治,而且可以促进水稻种子发芽及生长,具有较好的应用潜力。

关键词：水稻纹枯病哈茨木霉防病促生

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猪伪狂犬病病毒HNX株在免疫猪群中水平传播能力的研究

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中国预防兽医学报 2015年第6期37卷 426-429页

作者：张明辉库旭钢凌云志杨子靖何启盖华中农业大学农业微生物学国家重点实验室湖北武汉430070 华中农业大学动物医学学院湖北武汉430070

为研究猪伪狂犬病病毒(PRV)HNX株水平传播的能力及PRV活疫苗的保护效力,本研究通过以颈部肌肉接种PRV HNX株(2 m L 107 TCID50)的未免疫猪作为病毒的传染源,同居感染未免疫猪和Bartha-K61株活疫苗免疫猪,通过检测抗PRV的g B和g E蛋白抗... 详细信息

为研究猪伪狂犬病病毒(PRV)HNX株水平传播的能力及PRV活疫苗的保护效力,本研究通过以颈部肌肉接种PRV HNX株(2 m L 107 TCID50)的未免疫猪作为病毒的传染源,同居感染未免疫猪和Bartha-K61株活疫苗免疫猪,通过检测抗PRV的g B和g E蛋白抗体、中和抗体及干扰素水平等评估疫苗保护力,并利用荧光定量PCR方法检测同居感染猪排毒情况。结果显示Bartha-K61株活疫苗能够快速诱导免疫猪产生抗g B蛋白的抗体,但疫苗诱导产生的交叉保护中和抗体水平较低。同居感染期间,免疫猪和未免疫猪均出现典型的临床症状,体温明显升高。荧光定量PCR方法结果显示,疫苗免疫能够减少免疫猪排毒,但不能阻止排毒,也不能阻止野毒感染。本研究结果表明Bartha-K61株活疫苗阻止PRV HNX株水平传播的效力是有限的,有必要更换疫苗病毒株。同居感染期间,每组感染猪均表现敏感,表明PRV HNX株病毒具有较强的水平传播能力。

关键词：猪伪狂犬病水平传播感染免疫阻止

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