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武汉大学学报（医学版） 2009年第2期30卷 205-208,I0001页

作者：王伟锋周福祥於海军黄成虎谢丛华周云峰武汉大学中南医院肿瘤放化疗科/肿瘤生物学行为湖北省重点实验室湖北武汉430071

目的:建立人喉鳞癌(Hep-2)裸鼠移植模型,比较两种建模方法成瘤效果。方法:将裸鼠随机分成两组,每组8只,两组分别于皮下接种人喉鳞癌细胞悬液和改良法皮下接种瘤块建立动物模型,观察接种成瘤率、肿块大小、生长速度;免疫组化检测人端粒... 详细信息

目的:建立人喉鳞癌(Hep-2)裸鼠移植模型,比较两种建模方法成瘤效果。方法:将裸鼠随机分成两组,每组8只,两组分别于皮下接种人喉鳞癌细胞悬液和改良法皮下接种瘤块建立动物模型,观察接种成瘤率、肿块大小、生长速度;免疫组化检测人端粒酶逆转录酶(hTERT)蛋白表达。结果:接种3d后,改良瘤块接种法组裸鼠可见皮下隆起瘤体,接种1周后,皮下接种瘤细胞法和改良瘤块接种法成瘤率分别为75%、87.5%,比较第1周瘤体体积,P<0.05,但成瘤后肿瘤生长方面无明显的差别(比较第3周瘤体体积,P>0.05),两种方法成瘤后的瘤块hTERT蛋白表达阳性率相同。结论:采用改良瘤块接种法成瘤率高,生长速度快,且裸鼠皮下肿瘤较好的继承了人喉鳞癌细胞的重要生物学特点,该法能较好建立了人喉鳞癌裸鼠移植模型,为后续以端粒酶为靶点的体内抗肿瘤研究奠定良好基础。

关键词：人喉鳞癌裸鼠移植瘤人端粒酶逆转录酶

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细胞减灭术加腹腔热灌注化疗治疗胃癌腹膜转移癌的临床研究

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中国肿瘤临床 2012年第22期29卷 1734-1740页

作者：李雁周云峰谢丛华彭春伟黄超群杨肖军程伏林熊斌杨国樑武汉大学中南医院肿瘤科.湖北省肿瘤医学临床研究中心.肿瘤生物学行为湖北省重点实验室武汉市430071

目的:分析细胞减灭术(Cytoreductive surgery,CRS)加腹腔热灌注化疗(Hyperthermic intraperitoneal chemotherapy,HIPEC)治疗胃癌腹膜癌(Peritoneal carcinomatosis,PC)的疗效和安全性。方法:对106例胃癌PC患者随机分为CRS组或CRS+HIPEC组,前者行常规手术治疗,后者行CRS+HIPEC,药物为羟基喜素碱(HTPC)20 mg加丝裂霉素(MMC)30 mg,或多西他赛120mg加顺铂120mg,溶于生理盐水12 L,温度(43±0.5)℃,时间60～90min。主要终点指标为总体生存期,次要终点指标为安全性。结果:入组患者106例,CRS组45例,CRS+HIPEC组61例,两组的主要临床病理指标平衡。至患者的中位随访期30个月时,胃癌PC相关死亡率在CRS组为93.3%(42/45),CRS+HIPEC组为77.0%(47/61,P<0.05)。两组患者的中位生存期在CRS组是7.0个月(95%CI:5.8～8.2个月),CRS+HIPEC组是11.1个月(95%CI:8.3～13.9个月,P=0.003)。治疗相关的严重不良事件在CRS组为6例,CRS+HIPEC组为8例(P>0.05)。多因素分析显示CRS+HIPEC治疗、胃癌同时性PC患者、肉眼可见完全肿瘤细胞减灭、不发生严重不良事件、系统性化疗6个周期以上为影响预后的独立参数。结论:对于胃癌同时性PC患者,CRS+HIPEC可延长生存期,并不明显增加严重不良事件。

关键词：胃癌腹膜转移癌细胞减灭术腹腔热灌注化疗

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Myosin X对肺癌H1975细胞系放射敏感性调节及机制探讨

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中华放射肿瘤学杂志 2021年第9期30卷 949-955页

作者：沈惠欧海斌邵晶江耀飞刘羽张俊红谢丛华武汉大学中南医院放化疗科湖北省肿瘤生物学行为重点实验室湖北省肿瘤医学临床研究中心湖北省肿瘤放疗质量控制中心 430071

目的探讨Myosin X对肺癌H1975细胞系放射敏感性调节及相关机制。方法蛋白免疫印迹法检测肺癌细胞系中Myosin X表达量以获取实验对象。运用CRISPR/Cas9技术建立敲除Myosin X的H1975细胞系(KO组)和感染对照病毒的H1975细胞系(NC组),并进... 详细信息

目的探讨Myosin X对肺癌H1975细胞系放射敏感性调节及相关机制。方法蛋白免疫印迹法检测肺癌细胞系中Myosin X表达量以获取实验对象。运用CRISPR/Cas9技术建立敲除Myosin X的H1975细胞系(KO组)和感染对照病毒的H1975细胞系(NC组),并进行敲除效率验证。克隆形成实验及多靶单击模型检测两组细胞对射线敏感性差异。γ-H_(2)AX焦点形成实验及RNAseq差异分析技术寻找可能参与Myonsin X介导的肺癌细胞系放射敏感性调节机制。结果Myosin X在H1975细胞中表达量明显高于其他细胞系(P<0.01)。经鉴定成功构建了Myosin X sgRNA-Lenti-CRISPR v2慢病毒载体,嘌呤霉素筛选后得到Myosin X完全敲除的H1975(KO组)及对照组(NC组)细胞系。克隆形成实验证明相较于NC组,KO组对射线的敏感性更强(D_(0)值从1.28 Gy下降至1.03 Gy,SF_(2)从0.29下降至0.21,放射敏感性比为1.24)。γ-H_(2)AX焦点形成实验显示照后1、6 h KO组形成的损伤焦点数均多于NC组(P<0.05),RNAseq差异分析技术结果显示KO组ISLR蛋白表达明显低于NC组(P<0.05)。结论敲除Myosin X可以增强肺癌H1975细胞的放射敏感性,其机制可能与干扰DNA双链损伤修复以及降低ISLR表达有关。

关键词：肌球蛋白X CRISPR/Cas9技术放射敏感性 H1975细胞系

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新型阿霉素前体药PDOX对人胃癌原位移植瘤模型的分子靶向治疗研究

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中国肿瘤临床 2012年第22期29卷 1710-1715页

作者：张珏邵丽华王群袁静萍唐利钟燕军刘少平李雁武汉大学中南医院肿瘤科肿瘤生物学行为湖北省重点实验室湖北省肿瘤医学临床研究中心武汉市430071

目的:比较PDOX与DOX对裸鼠人胃癌原位移植瘤模型的疗效和毒副作用方法:建立MGC-803人胃癌原位移植瘤模型35只,随机分为PDOX组(n=12)、DOX组(n=12)和Control组(n=11),接种后第10、17、24天按体质量给药,每周进行两次详细全面记录。末次... 详细信息

目的:比较PDOX与DOX对裸鼠人胃癌原位移植瘤模型的疗效和毒副作用方法:建立MGC-803人胃癌原位移植瘤模型35只,随机分为PDOX组(n=12)、DOX组(n=12)和Control组(n=11),接种后第10、17、24天按体质量给药,每周进行两次详细全面记录。末次给药后1周终止实验,取血行常规、生化检查;解剖裸鼠,详细记录胃部肿瘤及腹腔播散情况,对肿瘤进行称重,计算抑瘤率;进行组织病理学检查,分析肿瘤细胞增殖、凋亡,肿瘤血管生成、侵袭转移等指标,行统计学分析。结果:至研究终点时,Control组和PDOX组全部存活,DOX组6只死亡。在肿瘤局部控制指标中,PDOX组和DOX组的胃肿瘤质量、体积均显著低于Control组(P<0.05),PDOX组和DOX组抑瘤率分别为26.4%和24.9%,两组疗效相当(P>0.05)。在血常规指标中,PDOX组血小板计数高于Control组(P<0.05),淋巴细胞比例低于Control组(P<0.05),而红细胞计数和血红蛋白在三组间差异无统计学意义(P>0.05)。在心功能指标中,PDOX组CK-MB水平高于Control组(P<0.01)。CK、LDH、肝功能及肾功能指标三组间差异均无统计学意义(P>0.05)。PDOX组和DOX组淋巴管癌栓发生率显著低于Control组(P<0.05)。免疫组织化学结果显示PDOX组Ki-67水平显著低于DOX与Controll组,三组间两两比较差异均有统计学意义(P<0.01);Bcl-2、Bcl-6、Tunel、VEGF差异均无统计学意义(P>0.05),CD34、D2-40有明显下降趋势。结论:PDOX治疗人胃癌原位移植瘤模型的整体疗效优于DOX,毒副作用低于DOX。

关键词：分子靶向治疗PDOX前体药胃癌原位移植瘤模型

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177例Ⅱ期乳腺癌患者的规范性辅助治疗及影响预后的因素

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武汉大学学报（医学版） 2013年第3期34卷 377-380,384页

作者：杨笑曦杜丽蓓周福祥梁辰谢丛华张弓钟亚华邓涤周云峰武汉大学中南医院肿瘤放化疗科/湖北省肿瘤生物学行为重点实验室/湖北省肿瘤医学临床研究中心湖北武汉430071

目的:回顾性研究177例Ⅱ期乳腺癌患者术后辅助治疗是否规范对预后的影响。方法:纳入2000年1月至2005年12月在我院行术后辅助治疗且符合条件的177例乳腺癌患者的临床以及病理资料,探讨患者术后辅助治疗、年龄、绝经状况、淋巴结清扫、TN... 详细信息

目的:回顾性研究177例Ⅱ期乳腺癌患者术后辅助治疗是否规范对预后的影响。方法:纳入2000年1月至2005年12月在我院行术后辅助治疗且符合条件的177例乳腺癌患者的临床以及病理资料,探讨患者术后辅助治疗、年龄、绝经状况、淋巴结清扫、TNM分期、雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)、人表皮生长因子受体2(HER-2)、初发到治疗的时间、术式、病理类型、手术地点等与预后的相关性。结果:本组病例中位随访时间为62个月,随访率为82.49%,其中仅53例患者(29.94%)接受了规范辅助治疗。术后辅助治疗规范组与非规范组的5年总生存率分别为98.11%和93.58%,10年总生存率分别为80.66%和61.57%,两组之间存在统计学差异(P<0.05)。此外,与Ⅱ期乳腺癌患者预后有关的独立因素还包括绝经状况、HER-2状态(P<0.05),而年龄、淋巴结清扫个数、TNM分期、初发到治疗时间、病理类型不能成为影响患者预后的独立因素(P>0.05)。结论:术后规范辅助治疗、绝经状况及HER-2与Ⅱ期乳腺癌患者的预后密切相关。

关键词：乳腺癌术后辅助治疗预后

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辐射诱导启动子介导的腺病毒自杀基因联合照射的抗肿瘤效应

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中华放射医学与防护杂志 2011年第1期31卷 6-9页

作者：孙文洁於海军熊杰徐禹廖正凯周福祥谢从华周云峰武汉大学中南医院放化疗科肿瘤生物学行为湖北省重点实验室 430071

目的检测利用肿瘤特异性辐射诱导嵌合启动子介导的腺病毒自杀基因系统联合放射线对肝癌细胞裸鼠皮下移植瘤生长的抑制作用。方法构建含有6个串联放射反应元件的人端粒酶反转录酶基因嵌合启动子调控辣根过氧化物酶表达的复制缺陷型腺病... 详细信息

目的检测利用肿瘤特异性辐射诱导嵌合启动子介导的腺病毒自杀基因系统联合放射线对肝癌细胞裸鼠皮下移植瘤生长的抑制作用。方法构建含有6个串联放射反应元件的人端粒酶反转录酶基因嵌合启动子调控辣根过氧化物酶表达的复制缺陷型腺病毒，同时建立人肝癌细胞MHCC97裸鼠皮下移植瘤模型，瘤内注射重组腺病毒，腹腔注射吲哚乙酸，同时给予叮射线照射，观察肿瘤生长、裸鼠生存状态，以及肿瘤组织和正常器官的组织病理学改变。结果分组处理后第31天，阴性对照病毒组、单纯病毒组、单纯照射组及联合组裸鼠皮下移植瘤相对体积分别为49．23±4．55、27．71±7．74、28．53±10．48和．11．58±3．23，组间差异具有统计学意义（F=16．288，P〈0．01），其中联合组的肿瘤抑制作用最强，生长抑制率为76．5％；与对照组相比，非对照组均能延长裸鼠中位生存期（r=18．307，P〈0．01），其中联合组差异最显著（13d与43d）；光镜下各治疗组肿瘤组织均出现坏死，其中联合组肿瘤坏死较多，而正常器官组织病理学检查未发现治疗相关损伤改变。对照组裸鼠肝脏显示出密集的肝癌转移灶，单纯治疗组仅有少数转移灶，而联合组肝脏未见明显异常。结论复制缺陷型腺病毒介导的靶向自杀基因治疗联合放疗能有效抑制肝癌皮下移植瘤生长，延长裸鼠生存期，为肝癌的治疗提供了新的途径，具有良好的应用前景。

关键词：基因放射治疗肝癌腺病毒人端粒酶反转录酶嵌合启动子

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人喉癌细胞Hep2线粒体DNA缺失模型建立及放射生物学观察

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中华放射肿瘤学杂志 2014年第2期23卷 175-176页

作者：徐会周福祥何为江换钢胡柳谢丛华周云峰湖北省肿瘤生物学行为重点实验室湖北省肿瘤医学临床研究中心武汉大学中南医院放化疗科 430071

放疗主要机制是放射线直接或间接造成细胞DNA损伤，而线粒体DNA（mitochondrial DNA，mtDNA）比核DNA（nuclearDNA）缺少组蛋白保护，位于氧化呼吸链附近，更易受到损伤且损伤后缺乏有效修复。笔者通过构建Hep：mtDNA缺失的P。细胞模型... 详细信息

放疗主要机制是放射线直接或间接造成细胞DNA损伤，而线粒体DNA（mitochondrial DNA，mtDNA）比核DNA（nuclearDNA）缺少组蛋白保护，位于氧化呼吸链附近，更易受到损伤且损伤后缺乏有效修复。笔者通过构建Hep：mtDNA缺失的P。细胞模型，观察其放射敏感性、增殖、周期、ATP及活性氧族（reactiveoxygenspecies，ROS）变化，探讨mtDNA与放射敏感性的关系及可能机制。

关键词：线粒体DNA缺失细胞模型放射生物学人喉癌细胞细胞DNA损伤 mtDNA缺失放射敏感性氧化呼吸链

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代谢组学在结直肠癌诊断中的应用

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中华肿瘤杂志 2014年第8期36卷 561-564页

作者：赵红周福祥武汉大学中南医院放化疗科湖北省肿瘤医学临床研究中心 430071 肿瘤生物学行为湖北省重点实验室

代谢组学是继基因组学、转录组学和蛋白质组学之后的又一组学技术。主要研究生物体对病理生理刺激或基因修饰产生的代谢物质的质和量的动态变化，关注的对象是相对分子质量在1000000以下的小分子化合物。因为其样品的收集简单实用，数... 详细信息

代谢组学是继基因组学、转录组学和蛋白质组学之后的又一组学技术。主要研究生物体对病理生理刺激或基因修饰产生的代谢物质的质和量的动态变化，关注的对象是相对分子质量在1000000以下的小分子化合物。因为其样品的收集简单实用，数据分析结果的灵敏度和特异度高，

关键词：结直肠肿瘤代谢组学诊断

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结合术前C反应蛋白/白蛋白比值建立预测cN0胃癌患者淋巴结转移的列线图模型

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中华肿瘤杂志 2019年第8期41卷 599-603页

作者：柳麒彭晋江换钢王文博戴静周福祥武汉大学中南医院放化疗科湖北省肿瘤医学临床研究中心肿瘤生物学行为湖北省重点实验室 430071

目的探讨术前中性粒细胞/淋巴细胞比值(NLR)、C反应蛋白/白蛋白比值(CAR)等系统性炎症反应指标与cN0胃癌患者淋巴结转移的关系,并建立预测cN0胃癌患者淋巴结转移风险的列线图模型。方法回顾性分析134例cN0胃癌患者的术前系统性炎症指标... 详细信息

目的探讨术前中性粒细胞/淋巴细胞比值(NLR)、C反应蛋白/白蛋白比值(CAR)等系统性炎症反应指标与cN0胃癌患者淋巴结转移的关系,并建立预测cN0胃癌患者淋巴结转移风险的列线图模型。方法回顾性分析134例cN0胃癌患者的术前系统性炎症指标及临床病理资料,比较术后病理诊断无淋巴结转移(pN0)组和淋巴结转移阳性(pN+)组患者的术前系统性炎症指标。采用受试者工作特征(ROC)曲线评估术前系统性炎症指标对淋巴结转移的预测效能,采用单因素分析和多因素Logistic回归分析方法分析淋巴结转移的影响因素,应用R软件建立列线图预测模型,以Bootstrap法进行内部验证。结果pN+组与pN0组比较,中性粒细胞计数(P=0.022)、C反应蛋白(P<0.001)、NLR(P<0.001)、血小板/淋巴细胞比值(PLR, P=0.003)和CAR(P<0.001)增高,淋巴细胞计数(P=0.003)和Alb(P=0.042)降低。ROC曲线分析显示,NLR、PLR和CAR诊断cN0胃癌患者术后病理淋巴结转移的曲线下面积(AUC)分别为0.687、0.651和0.694,最佳界值分别为2.12、113.59和0.02,相应的灵敏度和特异度分别为62.9%和72.2%、77.4%和48.6%、74.2%和58.3%。单因素分析显示,肿瘤大小、浸润深度、NLR、PLR和CAR与cN0胃癌患者淋巴结转移有关(均P<0.05)。多因素分析显示,浸润深度、NLR和CAR是cN0胃癌患者淋巴结转移的独立影响因素,OR分别为8.084、3.540和3.092(均P<0.05)。列线图预测模型的C-index为0.847(95% CI:0.782~0.915),校准图中的校准预测曲线与理想曲线贴合良好。结论结合NLR、CAR构建的列线图模型符合度良好,可较准确预测cN0胃癌患者的淋巴结转移风险。

关键词：胃肿瘤淋巴结转移中性粒细胞与淋巴细胞比值 C反应蛋白与白蛋白比值列线图

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辐射诱导放射抗拒鳞癌细胞株的蛋白质组学差异分析

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中华放射医学与防护杂志 2011年第5期31卷 548-551页

作者：张喜梅周福祥胡柳张治国雷晗廖正凯周云峰武汉大学中南医院放化疗科肿瘤生物学行为湖北省重点实验室 430071

放射抗拒是肿瘤放射治疗失败的重要原因之一，寻找放射增敏靶点和放射敏感性预测因子具有重要意义。本实验室成功建立辐射诱导放射抗拒株的人喉鳞癌细胞株（Hep2R），以基因芯片初步分析出放射抗拒株基因表达谱的改变，并证实了在Hep-2... 详细信息

放射抗拒是肿瘤放射治疗失败的重要原因之一，寻找放射增敏靶点和放射敏感性预测因子具有重要意义。本实验室成功建立辐射诱导放射抗拒株的人喉鳞癌细胞株（Hep2R），以基因芯片初步分析出放射抗拒株基因表达谱的改变，并证实了在Hep-2R中高表达的人端粒保护蛋白之一的蛋白质hPOT1对放射敏感性的影响。基因芯片技术虽然能够反映基因表达的相关信息，但并不能够完全准确反映蛋白质合成的情况。本研究立足于蛋白质实际表达水平，运用双向电泳和质谱分析寻找与放射敏感性相关的蛋白质，为研究新的放射增敏靶点奠定基础。

关键词：蛋白质组学放射抗拒癌细胞株辐射诱导基因芯片技术放射敏感性人端粒保护蛋白基因表达谱

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