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中国中药杂志 2023年第1期48卷 265-272页

作者：刘紫璇付学森王玲刘湘丹周日宝湖南中医药大学药学院湖南长沙410208 湘产大宗道地药材种质资源及规范化种植重点研究室湖南长沙410208 湖南省普通高等学校中药现代化研究重点实验室湖南长沙410208

该研究主要进行枳壳中药材品质三维多组分分析探究其有效成分含量比例一致性规律,分析枳壳品质影响因素。采用三维多组分分析模式,分析65篇文献中839个枳壳样本,对其中符合2020年版《中国药典》枳壳含量标准的386个样本中黄酮类成分柚... 详细信息

该研究主要进行枳壳中药材品质三维多组分分析探究其有效成分含量比例一致性规律,分析枳壳品质影响因素。采用三维多组分分析模式,分析65篇文献中839个枳壳样本,对其中符合2020年版《中国药典》枳壳含量标准的386个样本中黄酮类成分柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷、芸香柚皮苷、川陈皮素,香豆素类成分橙皮内酯、葡萄内酯,生物碱类成分辛弗林的含量数据进行提取,统一调整为百分含量(质量分数),计算各个成分间的含量比值;研究文献分析枳壳中药材品质影响因素。研究结果表明新橙皮苷和柚皮苷含量比值为0.4~1.2,芸香柚皮苷和柚皮苷含量比值为0.02~0.16,橙皮苷和柚皮苷含量比值为0.01~0.3,川陈皮素和柚皮苷的含量比值为0.000 588 3~0.069 68,辛弗林和柚皮苷含量比值为0.02~0.042,葡萄内酯和柚皮苷含量比值为0.001~0.01,橙皮内酯和柚皮苷含量比值为0.000 4~0.035;枳壳品质与药材产地、品种、采收时间、炮制方法等密切相关,采收时间对枳壳药材品质影响较大,产地和品种影响药材成分累积及品质。该研究发现黄酮组分间、黄酮和香豆素组分间、黄酮和生物碱组分间比值均有波动性;生产基地应进行枳壳品种、采收期、加工方法优选,为高品质枳壳药材生产提供科学依据。

关键词：枳壳指标成分三维多组分品质评价

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经典名方物质基准研制的关键技术分析

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中国实验方剂学杂志 2019年第15期25卷 202-209页

作者：樊启猛贺鹏李海英刘润南贺玉婷梁慧慧刘文龙周逸群贺福元湖南中医药大学药学院中药成药性与制剂制备湖南省重点实验室现代中药制剂制备技术与评价实验室中医药超分子机理与数理特征化实验室长沙410208

中药经典名方开发已成为当下中医药界研究的热点之一,而其中经典名方物质基准的成功研制对于整个中药经典名方的申报极为关键。经典名方物质基准既是检测经典名方制剂质量的基准,同时又需反映整方的物质基础。中药成分众多而复杂,单成... 详细信息

中药经典名方开发已成为当下中医药界研究的热点之一,而其中经典名方物质基准的成功研制对于整个中药经典名方的申报极为关键。经典名方物质基准既是检测经典名方制剂质量的基准,同时又需反映整方的物质基础。中药成分众多而复杂,单成分的、化药式的研发与质量控制模式难以适用于整体药用的中药制剂的开发,亟需开辟一条中药专属的研发模式。以目前已有的现代科学技术,笔者建议将中药的遗传多态性、提取动力学、指纹图谱总量统计矩(相似度)法、超分子'印迹模板'等结合应用于经典名方物质基准的研制,探讨中药经典名方物质基准的质量控制技术,以期全面、准确地阐明药材-饮片-物质基准的成分群量值的传递规律,为推进中药经典名方的研制进程提供参考。

关键词：中药经典名方物质基准关键技术总量统计矩超分子“印迹模板” 指纹图谱

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淫藤骨痹康方有效部位群在正常大鼠与急性血瘀大鼠体内药物化学对比研究

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中药材 2013年第12期36卷 1973-1978页

作者：王元清严建业李顺祥罗堃彭买姣徐菲湖南中医药大学药学院中药现代化重点实验室湖南长沙410208 中南林业科技大学生命科学与技术学院生物技术与工程实验室湖南长沙410004

目的:研究淫藤骨痹康方有效部位群在正常大鼠与急性血瘀大鼠体内药物化学差异性,阐明其活血作用的药效物质基础。方法:采用HPLC法建立淫藤骨痹康方有效部位群在正常生理状态与急性血瘀病理状态下的药物化学特征指纹图谱,并对体内外色谱... 详细信息

目的:研究淫藤骨痹康方有效部位群在正常大鼠与急性血瘀大鼠体内药物化学差异性,阐明其活血作用的药效物质基础。方法:采用HPLC法建立淫藤骨痹康方有效部位群在正常生理状态与急性血瘀病理状态下的药物化学特征指纹图谱,并对体内外色谱峰进行对比分析。结果:在正常生理状态下,5个批次的含药血浆样品中有14个共有色谱峰,其中3个峰来自于空白血浆,9个峰为淫藤骨痹康方的原型成分,2个峰为其代谢产物峰或产生的新成分峰,经对照品对照,12 min处的峰为阿魏酸;在急性血瘀病理状态下,5个批次的含药血浆样品中有14个共有色谱峰,其中3个峰来自于空白血浆,9个峰为淫藤骨痹康方的原型成分,2个峰为其代谢产物峰或产生的新成分峰,经对照品对照,12 min处的峰为阿魏酸,32 min处的峰为淫羊藿苷;病理和正常生理状态下扣除空白血浆峰后的共有峰有10个,大多数共有峰峰面积病理状态下明显强于正常生理状态下,其中有3个共有峰峰面积具有显著性差异(P<0.05)。结论:血瘀影响淫藤骨痹康方有效部位群中大多数成分的吸收与代谢;其入血原型成分与代谢新成分可能为其活血作用的药效物质。

关键词：淫藤骨痹康方有效部位群正常生理急性血瘀药物化学指纹图谱

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中药羊踯躅治疗类风湿关节炎的研究进展

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中国中药杂志 2023年第21期48卷 5690-5700页

作者：梅文亚刘湘丹王志辉于俊保何佳蔚张惊宇周日宝刘笑蓉湖南中医药大学药学院湖南长沙410208 湘产大宗道地药材种质资源及规范化种植重点研究室湖南长沙410208 湖南省普通高等学校中药现代化研究重点实验室湖南长沙410208

类风湿关节炎(RA)作为一种慢性自身免疫性疾病,发病率和致残率极高,给患者造成了极大痛苦,因发病机制复杂,至今尚未完全阐明,其治疗仍是医学界亟待攻破的难题,采用西药治疗虽具有一定疗效,需长期使用且价格昂贵,并存在多发感染、恶性肿... 详细信息

类风湿关节炎(RA)作为一种慢性自身免疫性疾病,发病率和致残率极高,给患者造成了极大痛苦,因发病机制复杂,至今尚未完全阐明,其治疗仍是医学界亟待攻破的难题,采用西药治疗虽具有一定疗效,需长期使用且价格昂贵,并存在多发感染、恶性肿瘤等不良反应。中药羊踯躅是我国一味传统民间药材,具有祛风除湿、镇静止痛等药理作用,民间常用于治疗风湿骨病顽疾,近年来,现代临床及药理学研究表明羊踯躅二萜类成分为羊踯躅中的有效成分,具有免疫调节、抗炎、镇痛等作用,可有效治疗RA,具有广泛的应用前景,但羊踯躅具有一定的毒性,严重阻碍了其临床推广应用,造成羊踯躅资源浪费。该文从化学成分、抗炎、镇痛等角度综述了近年来羊踯躅防治RA作用机制的研究进展,并总结了羊踯躅的不良反应,以期为寻找抗类风湿关节炎天然药物及中药羊踯躅减毒增效的方法提供新思路,明确羊踯躅及其提取物的安全性和有效性,为其应用前景提供一定理论依据,进一步加强羊踯躅资源的开发利用。

关键词：羊踯躅类风湿关节炎 rhodojaponin-Ⅲ 二萜类化合物作用机制

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灰毡毛忍冬MYB转录因子家族成员的挖掘及鉴定

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中国中药杂志 2023年第8期48卷 2103-2115页

作者：曾娟龙雨青付学森王玲刘紫璇周日宝刘湘丹湖南中医药大学药学院湖南长沙410208 湘产大宗道地药材种质资源及规范化种植重点研究室湖南长沙410208 湖南省普通高等学校中药现代化研究重点实验室湖南长沙410208

MYB转录因子作为最大的转录因子家族之一,在调控花发育过程中起到重要作用。该文首次从灰毡毛忍冬转录组数据中鉴定出3条1R-MYB,47条R2R3-MYB,2条3R-MYB和1条4R-MYB转录因子,对其理化性质、保守结构域、家族进化关系及蛋白结构、功能信... 详细信息

MYB转录因子作为最大的转录因子家族之一,在调控花发育过程中起到重要作用。该文首次从灰毡毛忍冬转录组数据中鉴定出3条1R-MYB,47条R2R3-MYB,2条3R-MYB和1条4R-MYB转录因子,对其理化性质、保守结构域、家族进化关系及蛋白结构、功能信息及表达进行分析。结果表明,不同品种灰毡毛忍冬中53个MYB转录因子家族成员基因在保守基序、蛋白理化性质及结构、功能等各有不同,表明其在进化中具有保守性和多样性。表达分析表明LmMYB在品种间(野生型、湘蕾型)及器官间(花、叶)均存在转录水平上的显著差异,且部分基因特殊表达。在53条LmMYB中有43条在花、叶中均有表达,其中9个LmMYB成员在2个品种灰毡毛忍冬中在转录水平上存在显著差异,且在野生品种中上调表达。结合家族进化分析和表达分析推测LmMYB蛋白主要在生长发育、逆境胁迫、类黄酮次生代谢等方面发挥重要转录因子调控功能。该研究结果为后续研究灰毡毛忍冬MYB转录因子家族具体功能机制提供了理论基础和参考依据。

关键词：灰毡毛忍冬 MYB 生物信息学转录因子

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病理和正常生理状态下淫藤骨痹康方总萜体内指纹图谱差异性研究

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中草药 2013年第24期44卷 3444-3451页

目的研究病理和正常生理状态下淫藤骨痹康方总萜体内代谢指纹图谱差异,阐明其活血作用的药效物质基础。方法采用HPLC法建立藤骨痹康方总萜在正常生理状态与急性血瘀病理状态下的代谢特征指纹图谱,并对共有峰的数与量进行对比分析。结果... 详细信息

目的研究病理和正常生理状态下淫藤骨痹康方总萜体内代谢指纹图谱差异,阐明其活血作用的药效物质基础。方法采用HPLC法建立藤骨痹康方总萜在正常生理状态与急性血瘀病理状态下的代谢特征指纹图谱,并对共有峰的数与量进行对比分析。结果在正常生理状态下,5个批次的含药血浆样品中有21个共有峰,其中3个峰来自于空白血浆,4个峰为总萜的原型成分,14个峰为其代谢产物峰或产生的新成分峰;在急性血瘀病理状态下,含药血浆样品中有21个共有峰,其中6个峰来自于空白血浆,3个峰为总萜的原型成分,12个峰为其代谢产物峰或产生的新成分峰;经对照品对照,52min处的峰为丹参酮IIA。总萜在正常生理状态与病理状态下的色谱峰的数目、峰形及峰的大小存在一定的差异;病理状态下的色谱峰峰面积明显强于正常生理状态下的色谱峰峰面积,其中有7个共有峰的峰面积具有显著性差异(P<0.05)。结论淫藤骨痹康方总萜体内代谢指纹图谱的建立方法可行;不同生理状态下的大多数共有峰的峰面积存在显著性差异;其入血原型成分与代谢新成分可能为其活血作用的药效物质。

关键词：淫藤骨痹康方总萜代谢指纹图谱 HPLC 丹参酮ⅡA

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RP-HPLC法同时测定十种五加属植物叶中三萜Chiisanoside和Chiisanogenin(英文)

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天然产物研究与开发 2013年第1期25卷 71-75页

作者：刘向前戴玲戴秀珍湖南省中药现代化研究重点实验室湖南中医药大学药学院长沙410208 中南大学制药工程系长沙410083

建立反相高效液相色谱法(RP-HPLC)测定chiisanoside和chiisanogenin的定量分析方法,利用最优色谱条件对十种中韩五加属植物叶中的三萜chiisanoside和chiisanogenin进行定量分析。研究结果表明,最佳色谱条件为:ODS-C18色谱柱(250 mm×... 详细信息

建立反相高效液相色谱法(RP-HPLC)测定chiisanoside和chiisanogenin的定量分析方法,利用最优色谱条件对十种中韩五加属植物叶中的三萜chiisanoside和chiisanogenin进行定量分析。研究结果表明,最佳色谱条件为:ODS-C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:乙腈-水(55∶45);检测波长:205 nm;柱温:40℃;流速:1.0 mL/min。Chiisanoside和chiisanogenin线性范围和回归方程分别为16.5～181.5μg/mL,Y=5498356X-9738(r=0.9995)和4.88～78.0μg/mL,Y=5753131X-8289(r=0.9979),加样回收率分别为98.87%(标准偏差为1.14%)和98.83%(标准偏差为0.72%)。

关键词：五加属 chiisanoside chiisanogenin 反相高效液相色谱法

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灰毡毛忍冬CHI和CHS基因的克隆及功能研究

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中国中药杂志 2022年第9期47卷 2419-2429页

作者：曾娟龙雨青李灿曾梅杨敏周新茹刘湘丹周日宝湖南中医药大学药学院湖南长沙410208 湘产大宗道地药材种质资源及规范化种植重点研究室湖南长沙410208 湖南省普通高等学校中药现代化研究重点实验室湖南长沙410208

该研究基于灰毡毛忍冬常规品种和湘蕾品种转录组数据,筛选到黄酮生物合成关键限速酶基因CHI和CHS的Unigene序列并克隆全长cDNA序列,通过在线生物信息学分析软件和qRT-PCR分析编码蛋白特性和不同花期、不同部位下CHI、CHS基因的表达模式,... 详细信息

该研究基于灰毡毛忍冬常规品种和湘蕾品种转录组数据,筛选到黄酮生物合成关键限速酶基因CHI和CHS的Unigene序列并克隆全长cDNA序列,通过在线生物信息学分析软件和qRT-PCR分析编码蛋白特性和不同花期、不同部位下CHI、CHS基因的表达模式,HPLC测定木犀草苷含量并结合表达量做相关性分析。结果显示,灰毡毛忍冬2个品种中CHI、CHS基因,分别包含627、1170 bp的ORF区,且CHI蛋白和CHS蛋白均为稳定、带亲水性的非分泌型蛋白。qRT-PCR结果表明2个品种CHI、CHS基因在不同花发育阶段及茎、叶中均有差异表达,且在关键花期表达差异明显,结合HPLC数据,木犀草苷含量与基因相对表达量之间呈现负相关性。推测灰毡毛忍冬中CHI、CHS基因参与调控黄酮化合物的累积,可进一步进行其功能研究。该研究首次克隆了灰毡毛忍冬中CHI、CHS基因并进行表达分析,丰富了灰毡毛忍冬黄酮生物合成研究,为进一步探究灰毡毛忍冬中木犀草苷等黄酮类成分差异的分子机制以及良种选育提供研究基础。

关键词：灰毡毛忍冬查尔酮异构酶查尔酮合成酶基因克隆表达分析含量测定

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蕺菜植株间的蛋白质多样性研究

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中药材 2013年第12期36卷 1917-1921页

作者：张喜利贺福元王海琴杨岩涛石继连刘文龙李顺祥湖南中医药大学药学院/中药现代化教育厅重点实验室湖南长沙410208 中药药性与药效国家中医药管理局重点实验室湖南长沙410208 湖南师范大学生命科学学院湖南长沙410081 湖南省中医药研究院中药新药研究与开发省重点实验室湖南长沙410013

目的：揭示同一GAP产地同一批次的鲜蕺菜植株间的蛋白质多样性,为蕺菜＂节点代谢网络＂的构建奠定基础。方法：采用3种方法从3个角度对蕺菜植株间的蛋白质进行多样性研究,即采用Ramagli改进的Bradford法、SDS-PAGE凝胶电泳法和双波长薄... 详细信息

目的：揭示同一GAP产地同一批次的鲜蕺菜植株间的蛋白质多样性,为蕺菜＂节点代谢网络＂的构建奠定基础。方法：采用3种方法从3个角度对蕺菜植株间的蛋白质进行多样性研究,即采用Ramagli改进的Bradford法、SDS-PAGE凝胶电泳法和双波长薄层扫描法分别研究其总蛋白含量多样性、蛋白种类差异性及各种类的含量变异性。结果：53株蕺菜蛋白条带分子量大多集中在6.5~97.2 kDa范围内,蛋白种类差异性不明显,主要表现为条带颜色深浅不一;蛋白电泳条带扫描图的总量统计矩零阶矩（AUCT）、一阶矩（MCRTT）和二阶矩（VCRTT）的RSD分别为40.92%、6.01%和18.57%。结论：同一GAP产地不同植株鲜蕺菜个体间蛋白质具有丰富的多样性,为后续关键蛋白酶的寻找、＂节点代谢网络＂的构建奠定基础,也进一步拓展了中药质量的稳定性研究。

关键词：蕺菜蛋白质多样性 TLC 中药质量

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基于SCoT分子标记分析白术种质资源遗传多样性及DNA指纹图谱构建

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生物技术通报 2024年第11期40卷 142-151页

作者：李晴石雨荷朱珏李晓玲侯超文童巧珍湖南中医药大学药学院长沙410208 湘产大宗道地药材种质资源及规范化种植重点研究室长沙410208 湖南省普通高等学校中药现代化研究重点实验室长沙410208

【目的】采用SCoT分子标记技术对17份白术种质资源进行遗传多样性分析及DNA指纹图谱构建,为白术种质的鉴定、保存和新品种选育提供一定的理论依据。【方法】从92条SCoT引物中筛选得到13条核心引物用于白术分子标记,利用Popgene1.32软件... 详细信息

【目的】采用SCoT分子标记技术对17份白术种质资源进行遗传多样性分析及DNA指纹图谱构建,为白术种质的鉴定、保存和新品种选育提供一定的理论依据。【方法】从92条SCoT引物中筛选得到13条核心引物用于白术分子标记,利用Popgene1.32软件和NTSYS-pc 2.10e软件进行白术种质资源多样性分析和聚类分析,以核心引物SCoT-9、SCoT-12和SCoT-41组合构建白术DNA分子指纹图谱。【结果】13条SCoT核心引物扩增17份白术样品共得到192条条带,其中,多态性条带165条,平均百分率85.94%;遗传相似系数(GS)和遗传距离(GD)分别介于0.5781-0.8750和0.1335-0.5480,白术种质的观测等位基因数(Na)为1.8594,有效等位基因数(Ne)为1.4180,Nei's遗传多样性指数(He)为0.2563,Shannon信息指数(I)为0.3968,聚类分析得到白术栽培品一类,而大围山野生品被单独聚为一类;所构建的17份白术种质资源DNA指纹图谱,可以将样品区分并准确鉴定。【结论】白术种质资源具有较为丰富的遗传多样性,但不同产地白术栽培品之间遗传差异低,表明地理位置并不是判断白术亲缘关系远近的决定性因素。

关键词：白术 SCoT分子标记遗传多样性分析 DNA指纹图谱

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