检索结果-内蒙古大学图书馆

中草药 2019年第1期50卷 111-119页

作者：朱嘉欢黄小平邓常清湖南中医药大学分子病理实验室中西医结合心脑疾病防治湖南省重点实验室湖南长沙410208

目的探讨黄芪和当归的主要活性成分黄芪甲苷、芒柄花素、毛蕊异黄酮、毛蕊异黄酮苷和阿魏酸配伍对衰老造血干细胞(HSCs)增殖的影响,并从细胞周期调控研究其作用机制。方法以三丁基过氧化氢(T-BHP)构建小鼠HSCs衰老模型,研究不同质量浓度... 详细信息

目的探讨黄芪和当归的主要活性成分黄芪甲苷、芒柄花素、毛蕊异黄酮、毛蕊异黄酮苷和阿魏酸配伍对衰老造血干细胞(HSCs)增殖的影响,并从细胞周期调控研究其作用机制。方法以三丁基过氧化氢(T-BHP)构建小鼠HSCs衰老模型,研究不同质量浓度5种活性成分对HSCs衰老和增殖的影响,寻找可促进细胞增殖的主要活性成分。在此基础上,采用正交试验研究5种活性成分配伍对HSCs衰老和增殖的影响,寻找5种活性成分促进细胞增殖的合理配伍。最后,采用HSCs衰老模型,制备黄芪-当归1∶1配伍含药血浆,设立对照组、模型组、空白血浆组、阿魏酸组、黄芪甲苷组、芒柄花素组、毛蕊异黄酮组、毛蕊异黄酮苷组、活性成分配伍组、黄芪-当归1∶1含药血浆组,药物作用于衰老细胞,以SA-β-半乳糖苷酶(SA-β-Gal)染色法测定HSCs衰老率,CCK-8法测定细胞增殖率,流式细胞术检测细胞周期分布,Western blotting法检测Cyclin D1、细胞周期蛋白依赖性激酶4(CDK4)蛋白表达。结果阿魏酸、黄芪甲苷、芒柄花素均可显著促进衰老HSCs增殖和降低细胞衰老率,而毛蕊异黄酮、毛蕊异黄酮苷单独应用对HSCs增殖和细胞衰老率无显著影响。正交试验发现,以阿魏酸、芒柄花素和黄芪甲苷为基础因子,毛蕊异黄酮和毛蕊异黄酮苷为次要因子进行配伍的5种活性成分组合促细胞增殖和降低细胞衰老率的作用最强。阿魏酸、黄芪甲苷、芒柄花素、活性成分配伍、含药血浆均可降低细胞衰老率,使G0/G1期细胞减少,G2/M+S期细胞增加,并使Cyclin D1和CDK4蛋白表达增强。以上效应以活性成分配伍组和含药血浆组最强。结论黄芪和当归的主要活性成分阿魏酸、黄芪甲苷和芒柄花素对衰老HSCs具有促增殖和改善衰老作用,而毛蕊异黄酮和毛蕊异黄酮苷单用时并无明显的作用。当5种活性成分配伍后对衰老HSCs的促增殖作用最强,并可改善HSCs衰老,促进衰老HSCs由静止期向增殖期转换。黄芪和当归的主要活性成分及其配伍促HSCs增殖和抗HSCs衰老的作用可能与调节细胞周期相关蛋白表达及促进细胞周期转换有关。

关键词：造血干细胞阿魏酸黄芪甲苷芒柄花素毛蕊异黄酮毛蕊异黄酮苷黄芪当归细胞周期蛋白D1 细胞周期蛋白依赖性激酶

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补肾调肝周期疗法及组方通过miR-140-5P/VEGF通路改善多囊卵巢综合征大鼠“着床窗口期”子宫内膜容受性机制

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中国实验方剂学杂志 2024年

作者：刘泉何忆清张颖王茜杨硕湖南中医药大学湖南中医药大学中西医结合心脑疾病防治湖南省重点实验室

目的：观察补肾调肝周期疗法及组方调控多囊卵巢综合征（PCOS）大鼠“着床窗口期”子宫内膜容受性的作用机制。方法：从36只SPF级SD雌性大鼠中随机选取6只作为正常组，其余大鼠灌服来曲唑构建PCOS动物模型。采用随机数字表法分为正常组... 详细信息

目的：观察补肾调肝周期疗法及组方调控多囊卵巢综合征（PCOS）大鼠“着床窗口期”子宫内膜容受性的作用机制。方法：从36只SPF级SD雌性大鼠中随机选取6只作为正常组，其余大鼠灌服来曲唑构建PCOS动物模型。采用随机数字表法分为正常组、模型组、逍遥散组(11.97g·kg-1)、三子养膜汤组(28.35 g·kg-1)、周期疗法组(11.97/28.35 g·kg-1)和阿司匹林组(8×10-3mg·kg-1)，连续灌胃12 d，即3个动情周期，给药完成后将雌、雄鼠进行合笼。雌鼠妊娠第5天取材，计算各组大鼠胚泡着床数，苏木素-伊红（HE）染色观察大鼠子宫内膜组织病理形态，酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测大鼠血清中雌二醇(E2)、孕酮（P）水平，蛋白免疫印迹法（Western blot）检测大鼠子宫内膜血管内皮生长因子（VEGF）、孕酮受体（PR）、雌激素受体（ER）、雄激素受体（AR）、整合素αvβ3蛋白表达，实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测大鼠子宫内膜miR-140-5P、VEGF、血管内皮生长因子受体2（VEGFR-2）、PR、ER、AR、整合素αvβ3 mRNA表达。结果：与正常组比较，模型组大鼠动情周期持续处于动情间期且动情周期失去规律性变化，子宫内膜显著变薄、子宫腺体数量及血管数显著减少（P<0.01），妊娠率明显降低（P<0.05）；与模型组比较，各药物组均在不同程度上恢复了较规律的动情周期，子宫内膜厚度和血管数均有显著改善（P<0.01），各药物组妊娠率均增加，其中周期疗法组效果最为明显（P<0.05）。分子生物学实验结果显示，与正常组比较，模型组大鼠血清E2、P水平显著降低（P<0.01），VEGF、ER、PR、整合素αvβ3蛋白表达明显降低（P<0.05），AR蛋白表达显著升高（P<0.01），miR-140-5P、AR mRNA表达显著增加（P<0.01），VEGF、VEGFR-2、ER、PR、整合素αvβ3 mRNA表达显著下降（P<0.01）。与模型组比较，逍遥散组大鼠血清中E2水平显著升高（P<0.01），三子养膜汤组、周期疗法组和阿司匹林组大鼠血清中E2、P水平均显著升高（P<0.01）；各药物组大鼠AR蛋白表达均显著降低（P<0.01），各药物组大鼠AR表达均显著降低（P<0.01），逍遥散组大鼠VEGF、整合素αvβ3蛋白表达显著升高，差异有统计学意义（P<0.01），三子养膜汤组大鼠VEGF、ER、PR蛋白表达明显升高（P<0.05，P<0.01），周期疗法组和阿司匹林组大鼠VEGF、PR、ER、整合素αvβ3蛋白表达均有明显升高（P<0.05，P<0.01），各药物组大鼠miR-140-5P、AR mRNA表达均显著降低（P<0.01），各药物组大鼠VEGF、VEGFR-2、ER、PR、整合素αvβ3 mRNA表达均不同程度增加（P<0.01，P<0.05）。周期疗法组分别与逍遥散组和三子养膜汤组比较，miR-140-5P、VEGFR-2、ER、PR、AR、整合素αvβ3 mRNA表达均有差异（P<0.01，P<0.05）。结论：补肾调肝周期疗法可能通过降低miR-140-5P活性，靶向上调VEGF表达，介导血管新生，促进子宫内膜血管生成，从而发挥协同作用改善PCOS不孕子宫内膜容受性不良，其提高妊娠率优于单用逍遥散或三子养膜汤。

关键词：多囊卵巢综合征子宫内膜容受性 miR-140-5P 血管内皮生长因子周期疗法

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基于数据挖掘的益气活血类方防治脑缺血再灌注损伤用药规律及其作用机制研究

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中草药 2023年第10期54卷 3221-3236页

作者：陈祥宇张晶涵赖嘉豪张文丽梅志刚聂慧芳湖南中医药大学中西医结合学院湖南长沙410208 湖南中医药大学中西医结合心脑疾病防治湖南省重点实验室湖南长沙410208 湖南中医药大学药学院湖南长沙410208

目的探讨急性缺血性卒中溶栓治疗后使用益气活血类方剂干预的用药规律,预测核心药物防治脑缺血再灌注损伤的潜在作用机制。方法检索中国知网、万方、维普和PubMed数据库中急性缺血性卒中溶栓治疗后使用益气活血类方有效干预的文献,对... 详细信息

目的探讨急性缺血性卒中溶栓治疗后使用益气活血类方剂干预的用药规律,预测核心药物防治脑缺血再灌注损伤的潜在作用机制。方法检索中国知网、万方、维普和PubMed数据库中急性缺血性卒中溶栓治疗后使用益气活血类方有效干预的文献,对方中使用的药物进行频数、聚类及关联分析,依据关联规则选取置信度和支持度最高的核心药物,构建核心药物-活性成分-交集靶点网络图,并进行基因本体(gene ontology,GO)功能富集和京都基因与基因组百科全书(Kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)通路富集分析。结果共筛选纳入232篇文献,涉及中药处方177首,包含中药119味,累计使用频次1903,以黄芪为首的高频药物28味,所有药物按功效可分为16种,药味总频次191,归经总频次292。高频药物聚类分析得到5个聚类,关联规则分析得到20组支持度较高的中药组合,其中支持度与置信度最高的二联药物组合为“黄芪-川芎”,三联药物组合为“黄芪-川芎-地龙”。网络药理学分析收集黄芪、川芎、地龙的活性成分30个;筛选“黄芪-川芎”防治脑缺血再灌注损伤的靶点91个,“黄芪-川芎”-地龙防治脑缺血再灌注损伤的靶点34个;主要涉及癌症相关通路、丝裂原活化蛋白激酶(mitogen activated protein kinases,MAPK)信号通路、微小RNAs(microRNAs)、磷脂酰肌醇-3-羟激酶(phosphatidylinositol-3-hydroxykinase,PI3K)/蛋白激酶B(protein kinase B,Akt)信号通路、肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)信号通路。结论益气活血类方治疗急性缺血性卒中的核心药物为黄芪、川芎和地龙,KEGG通路富集分析表明核心药物防治脑缺血再灌注损伤涉及多条信号通路,为指导临床采用益气活血法防治缺血性卒中提供依据,并为研发相关创新药物提供数据参考。

关键词：缺血性卒中脑缺血再灌注损伤益气活血数据挖掘网络药理学配伍规律黄芪-川芎黄芪-川芎-地龙

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中草药 2022年第16期53卷 5205-5214页

作者：陈祥宇阳晶晶梅志刚张文丽湖南中医药大学中西医结合心脑疾病防治湖南省重点实验室湖南长沙410208 湖南中医药大学药学院湖南长沙410208

线粒体稳态失衡在脑缺血/再灌注损伤(cerebral ischemia/reperfusion injury,CI/RI)病理过程中扮演重要角色。线粒体分裂/融合的动态调节(线粒体动力学)作为线粒体质量控制(mitochondrial quality control,MQC)的关键环节,在CI/RI中维... 详细信息

线粒体稳态失衡在脑缺血/再灌注损伤(cerebral ischemia/reperfusion injury,CI/RI)病理过程中扮演重要角色。线粒体分裂/融合的动态调节(线粒体动力学)作为线粒体质量控制(mitochondrial quality control,MQC)的关键环节,在CI/RI中维持线粒体稳态发挥重要作用。小泛素相关修饰物(small ubiquitin-related modifier,SUMO)修饰是一类存在于细胞内动态可逆的蛋白质翻译后修饰形式,通过对底物蛋白进行多步酶促反应以完成对靶蛋白的SUMO修饰和去SUMO修饰过程,进而影响底物蛋白的亚细胞定位、蛋白互作和稳定性,其普遍参与了蛋白转运、信号传导、DNA修复、炎症反应及氧化应激等病理生理过程。线粒体动力学及相关蛋白通过SUMO化修饰调控线粒体融合和分裂,进而调节线粒体稳态,在CI/RI进展与转归中发挥着关键作用。中药在防治缺血性脑病方面具有明显优势,综述了线粒体分裂/融合过程中相关蛋白的SUMO化修饰的调节机制,以及靶向调节线粒体动力学及相关蛋白SUMO化修饰防治CI/RI的中医药研究进展,以期为缺血性脑病如卒中的康复治疗提供新的治疗策略与潜在药用靶点。

关键词：中药线粒体动力学线粒体分裂线粒体融合 SUMO化修饰脑缺血/再灌注损伤

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基于PI3K/Akt通路研究内皮祖细胞来源外泌体协同丹参酮Ⅱ_(A)对血管内皮细胞氧化损伤的保护作用

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中国中药杂志 2023年第23期48卷 6423-6433页

作者：马露杨雷邓常清张伟丁煌刘晓丹李菀榆文江谭维李艳玲张燕燕傅馨莹刘林券刘彩霞曾昭文湖南中医药大学中西医结合学院湖南长沙410208 中西医结合心脑疾病防治湖南省重点实验室湖南长沙410208 湖南中医药大学第一附属医院湖南长沙410007

探讨丹参酮Ⅱ_(A)(tanshinoneⅡ_(A),TaⅡ_(A))协同内皮祖细胞来源外泌体(endothelial progenitor cell-derived exosomes,EPCsexos)通过磷酸肌醇-3-激酶(phosphatidylinositol-3-kinase,PI3K)/蛋白激酶B(protein kinase B,Akt)通路对胸主动脉血管内皮细胞(aortic vascular endothelial cells,AVECs)氧化损伤的保护作用的分子机制。将1-棕榈酰基-2-(5′-氧-戊酰基)-sn-甘油-3-磷酸胆碱[1-palmitoyl-2-(5′-oxovaleroyl)-sn-glycero-3-phosphocholine,POVPC]诱导的AVECs随机分为模型组、TaⅡ_(A)组、EPCsexos组和TaⅡ_(A)+EPCs-exos组,另取正常细胞作为对照组,细胞活性检测试剂盒(cell counting kit-8,CCK-8)检测细胞增殖,乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)试剂盒检测LDH漏出率,Matrigel实验检测成管能力,DCFH-DA荧光探针检测细胞活性氧(activated oxygen,ROS)水平,激光共聚焦显微镜检测内皮细胞骨架形态,ELISA检测白细胞介素(IL)-1β、IL-6和肿瘤坏死因子(TNF)-α等炎性因子表达,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和蛋白免疫印记(Western blot)法检测PI3K和Akt的mRNA及磷酸化水平表达情况。结果显示,与对照组比较,模型组中细胞增殖及成管能力下降,LDH漏出率及ROS水平上升,细胞骨架破坏明显,IL-1β、IL-6和TNF-α炎症因子表达增加,PI3K和Akt mRNA及磷酸化水平下降;与模型组比较,单用TaⅡ_(A)或EPCsexos干预后,2组细胞增殖及成管能力上升,LDH漏出率及ROS水平下降,骨架破坏得到修复,IL-1β、IL-6和TNF-α炎症因子水平下降,PI3K和Akt mRNA及磷酸化水平上升;与单用TaⅡ_(A)或EPCs-exos组比较,TaⅡ_(A)+EPCs-exos组细胞增殖及成管能力进一步上升,LDH漏出率、ROS水平、IL-1β、IL-6和TNF-α炎症因子表达都进一步下降,细胞骨架得到更好的修复,PI3K和Akt mRNA及磷酸化水平显著上升。研究表明,TaⅡ_(A)和EPCs-exos均能对POVPC诱导的AVECs产生保护作用,其机制与激活PI3K/Akt通路相关,而将两者联合应用,可以对治疗效果起协同增效作用。

关键词：冠心病内皮祖细胞外泌体 PI3K/Akt通路血管内皮细胞丹参酮Ⅱ_(A)

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黄芪-当归配伍对家兔血管内膜增生、平滑肌细胞表型转化和增殖的影响

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中草药 2021年第15期52卷 4598-4606页

作者：李霞曹旺刘彩霞邓常清湖南中医药大学中西医结合心脑疾病防治湖南省重点实验室湖南长沙410028 湖南中医药大学血管生物学实验室湖南长沙410028

目的探讨黄芪-当归配伍对家兔血管内膜增生、平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMC)表型转化和增殖的影响及作用机制。方法新西兰兔随机分为对照组、模型组、黄芪(1 g/kg)组、当归(1 g/kg)组、黄芪-当归(1∶1)组、黄芪-当归(1... 详细信息

目的探讨黄芪-当归配伍对家兔血管内膜增生、平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMC)表型转化和增殖的影响及作用机制。方法新西兰兔随机分为对照组、模型组、黄芪(1 g/kg)组、当归(1 g/kg)组、黄芪-当归(1∶1)组、黄芪-当归(1∶5)组、黄芪-当归(5∶1)组和阿托伐他汀(5 mg/kg)组。除对照组外,其余各组按颈总动脉套管法改良制备颈总动脉血管内膜增生模型,自术后第1天起给予2%高胆固醇饲料。各给药组于术后第1天起ig相应药物,1次/d,连续28 d。采用ELISA法检测各组家兔血清中总胆固醇(total cholesterol,TC)、三酰甘油(triglycerides,TG)、低密度脂蛋白胆固醇(low density lipoprotein cholesterol,LDL-C)和高密度脂蛋白胆固醇(high density lipoprotein cholesterol,HDL-C)水平;采用Masson染色法观察各组家兔颈动脉病理变化及血管内膜增生程度;采用免疫组化法检测各组家兔颈动脉α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)、骨桥蛋白(osteopontin,OPN)和增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)表达情况;采用Western blotting法检测各组家兔颈动脉磷脂酰肌醇3-激酶(phosphatidylinositol-3-kinase,PI3K)/蛋白激酶B(proteinkinaseB,Akt)通路相关蛋白表达情况。结果与对照组比较,模型组家兔血清中TC、TG、LDL-C水平显著升高(P<0.01),HDL-C水平显著降低(P<0.01);颈动脉内膜增生明显,血管内膜面积(intimalarea,IA)、内膜厚度(intimal thickness,IT)、内膜面积增生率(hyperplasia ratio of intimal area,HRIA)和内膜厚度增生率(hyperplasia ratio ofintimalthickness,HRIT)均显著增加(P<0.01);颈动脉VSMC收缩表型α-SMA表达显著降低(P<0.05),合成表型OPN和细胞增殖标志物PCNA表达增加(P<0.01);颈总动脉p-PI3K和p-Akt蛋白表达水平显著升高(P<0.01)。与模型组比较,黄芪-当归(1∶1、5∶1)组家兔血清中TC、TG和LDL-C水平显著降低(P<0.05、0.01),HDL-C水平显著升高(P<0.01);当归组血清中TG和LDL-C水平显著降低(P<0.05、0.01);黄芪-当归(1∶1、5∶1)组家兔颈动脉IA、IT、HRIA、HRIT均显著降低(P<0.01),颈总动脉α-SMA表达显著升高(P<0.05、0.01),OPN和PCNA表达显著降低(P<0.01);黄芪-当归(1∶5)组颈总动脉PCNA表达显著降低(P<0.01);黄芪-当归(1∶1、1∶5、5∶1)组颈总动脉p-PI3K和p-Akt蛋白表达水平显著降低(P<0.05、0.01)。结论黄芪-当归(1∶1、5∶1)能够有效改善家兔血管内膜增生、调节血脂、调控VSMC表型转化和增殖,其作用机制与抑制PI3K/Akt信号通路有关。

关键词：黄芪当归血管内膜增生平滑肌细胞表型细胞增殖 PI3K/Akt信号通路

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当归芍药散基于TLR4/MyD88/NF-κB信号通路对阿尔茨海默病模型大鼠神经炎症的影响研究

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中药新药与临床药理 2023年第4期34卷 494-500页

作者：李平夏小芳于文静杨苗金怡杰贺春香成绍武邓思思宋祯彦中西医结合心脑疾病防治湖南省重点实验室湖南中医药大学湖南长沙410208

目的研究当归芍药散对β淀粉样蛋白1-42(Aβ1-42)诱导的阿尔茨海默症(Alzheimer’s Disease,AD)模型大鼠神经炎症及Toll样受体4(TLR4)/髓样分化因子(MyD88)/核因子-κB(NF-κB)信号通路的调控作用。方法SD大鼠大脑双侧侧脑室注射Aβ1-4... 详细信息

目的研究当归芍药散对β淀粉样蛋白1-42(Aβ1-42)诱导的阿尔茨海默症(Alzheimer’s Disease,AD)模型大鼠神经炎症及Toll样受体4(TLR4)/髓样分化因子(MyD88)/核因子-κB(NF-κB)信号通路的调控作用。方法SD大鼠大脑双侧侧脑室注射Aβ1-42构建AD动物模型。实验分为假手术组、模型组、当归芍药散组和阳性药物组。假手术组、模型组给予生理盐水灌胃,当归芍药散组给予当归芍药散24 g·kg^(-1)·d^(-1)灌胃,阳性药物组给予米诺环素36 mg·kg^(-1)·d^(-1)灌胃,连续灌胃14 d。Morris水迷宫实验测定大鼠的学习记忆能力。复制模型成功后取材,HE染色检测海马神经元组织病理形态学变化,免疫荧光法检测小胶质细胞和星形胶质细胞活化情况,实时荧光定量PCR(qPCR)检测炎症因子白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)的mRNA表达情况,免疫印迹法(Western Blot)检测TLR4、MyD88和p-NF-κB p65蛋白的表达水平,免疫组化法检测NF-κB p65核转位的情况。结果与假手术组比较,AD大鼠学习记忆能力明显下降(P<0.01),海马组织神经元形态受损,小胶质细胞和星形胶质细胞活化增加(P<0.01),炎症因子IL-1β、IL-6、TNF-αmRNA表达水平升高(P<0.01),TLR4、MyD88蛋白表达水平明显上升,p-NF-κB p65与NF-κB p65的比值明显增高(P<0.01),NF-κB p65在胞核的表达明显增加(P<0.01)。与模型组比较,当归芍药散组和阳性对照组AD大鼠学习记忆能力明显提高(P<0.01,P<0.05),大鼠海马组织神经元形态功能明显恢复,小胶质细胞和星形胶质细胞活化减少(P<0.01),炎症因子IL-1β、IL-6、TNF-αmRNA表达水平明显降低(P<0.01),TLR4、MyD88蛋白表达水平明显降低(P<0.01),p-NF-κB p65与NF-κB p65的比值明显降低(P<0.01),NF-κB p65在胞核的表达明显减少(P<0.01)。结论当归芍药散可能通过调控TLR4/MyD88/NF-κB信号通路抑制神经炎症反应,发挥神经保护作用。

关键词：当归芍药散阿尔兹海默病 β-淀粉样蛋白(Aβ) Toll样受体4(TLR4) 髓样分化因子88(MyD88) 核因子-κB(NF-κB) 神经炎症大鼠

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当归芍药散含药血清对Aβ1-42诱导的SH-SY5Y细胞周期和凋亡的影响

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中成药 2020年第11期42卷 2875-2882页

作者：贺春香余婧萍李富周贺旭李平成绍武宋祯彦湖南中医药大学中西医结合心脑疾病防治湖南省重点实验室湖南长沙410208

目的研究当归芍药散含药血清对Aβ1-42诱导的人神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y)细胞周期和细胞凋亡的调控作用。方法利用Aβ1-42(10μmol/L)处理SH-SY5Y细胞24 h构建AD细胞模型,给予不同浓度当归芍药散含药血清(2.5%、5%、10%)干预24 h。分... 详细信息

目的研究当归芍药散含药血清对Aβ1-42诱导的人神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y)细胞周期和细胞凋亡的调控作用。方法利用Aβ1-42(10μmol/L)处理SH-SY5Y细胞24 h构建AD细胞模型,给予不同浓度当归芍药散含药血清(2.5%、5%、10%)干预24 h。分别采用MTT、流式细胞术和免疫荧光分别检测细胞存活率、细胞周期和细胞凋亡;采用Western blot检测凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2和细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)表达。结果与空白对照组比较,Aβ1-42处理后SH-SY5Y细胞存活率下降,凋亡率增高,细胞周期S期细胞数增加,G2/M期细胞数量减少(P<0.01);与模型组比较,给予5%、10%当归芍药散含药血清干预后,细胞存活率上升(P<0.01),凋亡率降低(P<0.01),且促凋亡蛋白Bax表达下降,抑凋亡蛋白Bcl-2表达上升(P<0.01),S期细胞数量减少,G2/M期细胞数量增加,Cyclin D1蛋白表达降低(P<0.01)。结论当归芍药散可以有效改善Aβ1-42诱导的SH-SY5Y细胞存活率,抑制Aβ诱导的细胞周期再进入和细胞凋亡。

关键词：当归芍药散阿尔兹海默病 β-淀粉样蛋白细胞凋亡细胞周期

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黄芪-当归通过TGF-β_(1)/Smad2信号途径抑制兔血管内膜增生模型外膜成纤维细胞的活化作用

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中国实验方剂学杂志 2023年第3期29卷 61-69页

作者：李霞曹旺邓常清湖南中医药大学中西医结合心脑疾病防治湖南省重点实验室长沙410028 湖南省中医药研究院长沙410028

目的:探讨黄芪-当归配伍对兔血管内膜增生模型血管外膜成纤维细胞(VAF)活化的影响及其作用机制。方法:清洁级家兔,雌雄各半,随机分为假手术组、模型组、单用黄芪组(1 g·kg^(-1))、单用当归组(1 g·kg^(-1))、黄芪-当归1∶1组(... 详细信息

目的:探讨黄芪-当归配伍对兔血管内膜增生模型血管外膜成纤维细胞(VAF)活化的影响及其作用机制。方法:清洁级家兔,雌雄各半,随机分为假手术组、模型组、单用黄芪组(1 g·kg^(-1))、单用当归组(1 g·kg^(-1))、黄芪-当归1∶1组(黄芪1 g·kg^(-1)+当归1 g·kg^(-1))、黄芪-当归1∶5组(黄芪1 g·kg^(-1)+当归5 g·kg^(-1))、黄芪-当归5∶1组(黄芪5 g·kg^(-1)+当归1 g·kg^(-1))、阿托伐他汀钙组(5 mg·kg^(-1)),采用颈总动脉套管复合高胆固醇饮食制备家兔血管内膜增生模型,假手术组只进行分离操作,不进行套管。术后第1天开始假手术组喂饲普通饲料,其余各组喂饲高胆固醇饲料(2%胆固醇+3%橄榄油+95%普通饲料),同时各用药组给予相应药物灌胃,假手术组、模型组给予等体积蒸馏水灌胃,持续给药28 d。实验结束后腹主动脉采血,马松(Masson)染色观察血管外膜形态学变化,免疫组化法检测外膜局部促炎因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及白细胞介素-1β(IL-1β)的表达,免疫荧光双标法测定外膜成纤维细胞标记物波形蛋白(Vimentin)及肌成纤维细胞标记物α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达反映VAF活化;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测相关通路蛋白转化生长因子-β_(1)(TGF-β_(1))、Smad2、磷酸化(p)-Smad2表达。结果:与假手术组比较,模型组血管外膜增生明显,损伤血管局部TNF-α、IL-1β表达显著升高,受损段血管α-SMA、Vimentin、TGF-β_(1)、Smad2、p-Smad2表达均明显升高(P<0.05,P<0.01);与模型组比较,黄芪-当归1∶1、5∶1组可使血管外膜增生减轻,血管局部TNF-α、IL-1β表达降低,α-SMA、Vimentin表达下调,并且可降低TGF-β_(1)、Smad2、p-Smad2表达(P<0.05,P<0.01)。结论:黄芪当归配伍可抑制血管内膜增生模型的外膜增生,抑制外膜成纤维细胞向肌成纤维细胞转化,减轻血管局部炎症反应,以黄芪-当归1∶1、5∶1组的作用明显。其作用机制可能与黄芪当归配伍抑制TGF-β_(1)/Smad2信号通路激活有关。

关键词：黄芪当归血管外膜成纤维细胞肌成纤维细胞转化生长因子-β_(1)(TGF-β_(1))/Smad2信号通路

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大鼠主动脉血管内皮细胞原代培养方法改良及氧化损伤模型构建

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中国药理学通报 2023年第11期39卷 2192-2198页

作者：马露杨雷晏凡晨刘晓丹丁煌谭维李菀榆唐映红张伟邓常清湖南中医药大学中西医结合学院湖南中医药大学中西医结合心脑疾病防治湖南省重点实验室湖南长沙410208

目的改良大鼠原代主动脉血管内皮细胞(vascular endothelial cells,VECs)的提取和培养方法,并构建稳定的AVECs氧化损伤模型。方法采用六孔板植块联合胶原酶消化改良法建立大鼠原代AVECs提取和培养方法,倒置显微镜下观察细胞形态,免疫荧... 详细信息

目的改良大鼠原代主动脉血管内皮细胞(vascular endothelial cells,VECs)的提取和培养方法,并构建稳定的AVECs氧化损伤模型。方法采用六孔板植块联合胶原酶消化改良法建立大鼠原代AVECs提取和培养方法,倒置显微镜下观察细胞形态,免疫荧光染色法检测vW因子(vWF)进行细胞鉴定。选用2~4代的AVECs,用不同浓度的POVPC干预24 h,检测细胞增殖、细胞骨架、成管能力、细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS),构建POVPC诱导的AVECs氧化损伤模型。结果植块联合胶原酶消化法提取培养的内皮细胞具有典型的“铺路石”样特性,生长状态良好,vWF免疫荧光染色阳性,阳性率占0.95,鉴定为内皮细胞。该法可缩短细胞传代时间。采用4.375~70μmol·L^(-1)的POVPC干预培养AVECs,POVPC在17.5~70μmol·L^(-1)时可明显抑制AVECs增殖(P<0.05);POVPC在8.75~70μmol·L^(-1)时,可导致细胞骨架交叉断裂堆积、解聚、结构模糊,且细胞成管能力明显降低(P<0.01),细胞内ROS水平明显升高(P<0.05)。以上改变在POVPC浓度为35μmol·L^(-1)时尤为明显。结论采用六孔板植块联合胶原酶消化改良法可获得较多的内皮细胞,细胞生长状态良好,缩短了细胞的生长周期,是一种简便、可行的AVECs培养方法。17.5~705μmol·L^(-1)的POVPC可构建稳定AVECs氧化损伤模型。

关键词：血管内皮细胞主动脉 POVPC 模型活性氧氧化损伤

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